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烫伤大鼠肠屏障功能损伤与肠粘膜细胞凋亡的关系
本研究采用大鼠30%烫伤模型,于伤后3、6、12、48h取血和回肠组织检测内毒素浓度,血和肠粘膜二胺氧化酶(DAO)活性,肠粘膜丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)水平、肠粘膜DNA片段百分率(ap%)、DNA电泳以及凋亡细胞数.观察烫伤大鼠肠粘膜细胞凋亡的规律与肠粘膜屏障功能变化的关系,探讨细胞凋亡在肠屏障损伤中的作用.实验结果显示,血浆DAO活性于伤后6h开始升高,伤后12h和24h为伤前值的2.5倍和3倍;肠粘膜DAO活性则呈反向变化,表现为活性降低,并与肠粘膜ap%呈高度负相关(P＜0.01);伤后3h血浆内毒素、肠粘膜MDA含量、NO活性及肠粘膜ap%均开始升高,其峰值在伤后12h;相关分析表明,各项指标与ap%均呈高度正相关(P＜0.01);肠粘膜DNA电泳和病理学结果显示,伤后12hDNA电泳出现明确的DNA梯度,肠粘膜顶端和肠腺中可见凋亡细胞.研究结果提示,大鼠烫伤后肠屏障功能损伤,肠源性内毒素血症的形成与肠粘膜上皮细胞的病理性凋亡密切相关,而烫伤后氧化应激可能是加速肠粘膜上皮调亡的重要原因.
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外源性bFGF对深Ⅱ度烫伤大鼠创面MMP-2、MMP-7和TIMP-2的影响
目的:观察大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合过程中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-7与金属蛋白酶组织抑制因子-2(tissueinhibitor of metalloproteinase-2,TIMP-2)的变化以及创面外用bFGF对两者的影响,认识基质金属蛋白酶与抑制因子对创面愈合的作用.方法:78只Wistar大鼠随机分为正常对照、单纯烫伤和bFGF治疗三组.利用大鼠30%深Ⅱ度烫伤模型,于伤后3h、6h、1d、3d、7d和14d采取创面皮肤标本,用免疫组织化学染色检测创面组织真皮内成纤维细胞MMP-2、MMP-7和TIMP-2的表达变化情况.结果:烫伤大鼠创面中细胞外基质活动影响皮肤的胶原沉积.伤后1d MMP-2/MMP-7表达增多,随后略有下降,7d时再次达到高峰.伤后TIMP-2的表达与前者的表达一致.局部外用bFGF后,创伤初期(3h～6h)组织中MMP-2/MMP-7的表达无显著变化,1d～14d,MMP-2/MMP-7和TIMP-2阳性表达强于对照组.结论:MMPs和TIMPs的表达变化是组织修复的重要步骤,bFGF加速创面愈合的过程与MMP-2/MMP-7和TIMP2的表达密切相关.
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深Ⅱ度烫伤大鼠创面血管内皮细胞增殖与凋亡变化的初步研究
目的:观察大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合过程中创基微小血管内皮细胞增殖与凋亡的变化特征,探讨血管的形成与退缩在创伤修复中的作用.方法:利用大鼠5%深Ⅱ度烫伤模型,将72只Wistar大鼠随机分为正常对照和单纯烫伤两组.于伤后0.5d、1d、3d、7d、14d和21d采取创面皮肤标本,HE病理学染色和免疫组织化学技术检测创面组织真皮内血管内皮细胞PCNA和TUNEL的表达变化规律.结果:深Ⅱ度烫伤的大鼠伤后3d,创面出现少量的肉芽组织,7d时肉芽组织已充满创面,再上皮化速率为30%,14d的再上皮化率达70%,至21d,创面完全闭合,真皮内小血管的数量减少.大鼠烫伤后3d,创面基底的真皮组织内出现PCNA阳性的血管内皮细胞,随后阳性表达逐渐增多,14d时达到高峰.至伤后21d,PCNA的阳性表达略有下降.而创伤愈合初期罕见TUNEL阳性的细胞,21d时,TUNEL标记阳性的细胞显著增多.结论:烫伤大鼠创面中血管内皮细胞的增殖与凋亡活动与创面的愈合进程有密切的关系.血管形成与退缩在时程上协调变化是组织正常修复的重要步骤.
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人羊膜生物敷料对鼠烫伤创面保护作用的疗效观察
目的:研究单层辐射人羊膜对模型鼠烫伤创面敷盖治疗的疗效及愈合各阶段创面的组织学变化.方法:观察了40只wistar鼠深11°烫伤创面.将单层辐射人羊膜和油纱对照贴敷创面进行观察,采用了活杀取材及电镜扫描检查法.结果:模型鼠创面用人羊膜贴敷侧比对照侧提前愈合.而且愈合创面外观是毛发规则丛生,皮肤具有弹性,表皮各层均为正常皮肤组织像.结论:经动物实验,此膜无免疫排斥现象,无毒、无菌、无刺性.而且能防止创面水份、电解质和蛋白质的丢失,增强模型鼠的抵抗能力,避免感染,加速愈合.是治疗鼠烫伤创面的良好敷料.
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严重烫伤大鼠胃黏膜一氧化氮合酶和环氧合酶-2表达变化及其与热休克蛋白70的关系
本研究通过检测严重烧伤大鼠胃黏膜一氧化氮合酶(NOS)、环氧合酶(COX-2)、热休克蛋白70(HSP70)表达变化,并通过热休克预处理诱导HSP70过量表达,探讨诱导型NOS(iNOs)、COX-2在烧伤大鼠急性胃黏膜病变(AGML)中的可能作用及其与热休克蛋白70的关系.
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滋阴活血润肠法对烫伤大鼠肠黏膜屏障的影响
目的:了解和揭示滋阴活血润肠法对SD大鼠曼伤后1用内血浆肿瘤坏死因子、内毒素、肠组织细胞凋亡的影响.探讨本法对肠黏膜屏障保护作用的机制.以期为临床探寻更有效的肠黏膜保护药物.方法:将SD大鼠70只随机分成三组,第一组为滋阴活血润肠中药治疗组(便可通组)30只,第二组为对照组(单纯烫伤组)30只,制备成烫伤模型,分别予以便可通、生理盐水灌胃;第三组为正常组10只.均检测血象肿瘤坏死因子、内毒素的含量.现察大鼠肠组织细胞凋亡的变化.结果:滋阴活血润肠法可明显抑制烫伤模型大鼠内毒素易位.减少肿瘤坏死因子的产生,抑制肠组织细胞凋亡.结论:中医滋阴活血润肠法有较理想的肠道屏障保护作用.是预防和治疗肠道屏障功能障碍引发的多器官、多系统功能衰竭的重要方法之一.
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紫草膜剂对烫伤大鼠创面皮肤的治疗作用
目的:建立大鼠烫伤模型,比较紫草膜剂与紫草膏对该模型大鼠烫伤创面的治疗作用.方法:清洁级健康SD大鼠30只,随机分成空白膜剂组、紫草膏组、紫草膜剂组等3组,并以3%戊巴比妥钠(30 mg·kg-1)腹腔注射麻醉,然后以沸水(100℃)中的一元钢币进行背部左右两侧皮肤烫伤.第2天分别在烫伤部按大鼠皮肤表面溃疡面积给予相应药物处理,每天1次,共处理7 d.并测定创面愈合率和愈合时间.结果:处理后第5天,紫草膜剂显示明显的促进创面愈合作用,优于空白膜剂和紫草膏组(P<0.01);在第10天和15天时,紫草膜剂和紫草膏促进创面愈合作用相同,且对创面愈合后的脱痂无明显影响.结论:紫草膜剂与紫草膏均对大鼠烫伤后的创面有促进愈合作用,紫草膜剂作用优于紫草膏.
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三七总甙对大鼠烧伤后心肌细胞膜离子泵活性的影响
心肌细胞膜Na+-K+泵、Ca2+-Mg2+泵通过消耗ATP, 调节离子转运,直接参与心肌舒缩过程的调控;红细胞膜上的Na+-K+泵与左心室收缩功能之间有高度相关性,而Ca2+-Mg2+泵则与心脏舒张及收缩功能均显著相关.本室既往研究发现大鼠在严重烧伤后心功能下降,三七总皂苷(PNS)能有效改善烧伤后心功能.为观察PNS对烫伤大鼠红细胞及心肌细胞膜Na+-K+泵、Ca 2+-Mg2+泵活性的影响,进一步探讨PNS改善烧伤后心功能的机制,本研究通过30%体表面积背部皮肤Ⅲ度烫伤大鼠模型,应用溶血法制备红细胞膜,蔗糖密度梯度离心法分离心肌细胞膜,用哇巴因抑制Na+-K+泵活性,采用生化方法同步测定红细胞膜与心肌细胞膜中Ca2+-Mg2+泵及Na+-K+泵活性, 以单位时间内分解ATP产生Pi量表示酶活性.用硫代巴比妥酸比色法测定心肌MDA产量.结果发现:大鼠烫伤后心率加快,心电图T波低平,心肌细胞与红细胞膜Ca2+-Mg 2+泵和Na+-K+泵活性均显著下降(P<0.01),Ca2+-Mg 2+泵活性在心肌细胞膜与红细胞膜之间呈显著相关性(r=0.951,P<0.01).100mg/kg的PN S可使心率及T波恢复、离子泵活性明显增加(心肌细胞膜两种离子泵活性分别升高48%、102% ;红细胞膜两泵活性分别升高98%、33%).烫伤后心肌组织MDA含量显著增加(P<0.05),PNS 可剂量依赖性抑制这种变化,PNS剂量与MDA产量显著负相关(r=-0.973,P<0.01).提示三七总皂甙改善烫伤大鼠心功能与其提高心肌细胞膜Na+-K+泵、Ca2+-M g2+泵活性,减少烫伤后心肌脂质过氧化有关.
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烫伤大鼠血淋巴细胞bcl-2、bcl-x和bax的表达及作用
目的:研究大鼠烫伤后外周血淋巴细胞的凋亡及其bcl-2家族基因的表达,以探讨烫伤后bcl-2家族基因的表达对细胞凋亡的调控.方法:复制30%体表面积Ⅲ度烫伤大鼠模型;分离外周血淋巴细胞,TUNEL荧光标记,流式细胞仪分析细胞凋亡;提取总RNA,采用RT-PCR分析bcl-2家族调控基因的表达.结果:外周血淋巴细胞凋亡在健康大鼠比例较低(3.99±1.72%),但伤后各组(3、6、12、24、48h依次分别为8.58±1.53%、8.38±1.81%、20.77±3.94%、23.90±3.92%和11.21±1.35%)均明显增加(P<0.01),以伤后12和24h显著;伤前淋巴细胞bcl-2高水平表达,bax和 Bcl-Xs仅有极低水平表达;伤后各组bcl-2的表达呈持续缓慢地下降,bax和Bcl-Xs表达均出现上调,仅在伤后3h观察到Bcl-Xl的表达.结论:严重烫伤可致大鼠外周血淋巴细胞大量凋亡,其机制可能为伤后细胞中促凋亡蛋白Bcl-Xs、Bax等mRNA表达持续上调,同时抗凋亡蛋白Bcl-2mRNA的表达持续缓慢地下调.
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美乐涂膜剂对实验性烫伤大鼠皮肤修复及小鼠痛反应的影响
目的 观察美乐涂膜剂对实验性深Ⅱ度烫伤皮肤修复及镇痛作用,为其进一步研究和开发提供依据.方法 采用高温水烫伤复制深Ⅱ度烫伤模型、醋酸致小鼠扭体复制疼痛模型,观察美乐涂膜剂对创面的愈合率和扭体次数的影响.结果 美乐涂膜剂高、中、低剂量组能够明显使给药后5d、10d、15d、20d的烫伤面积愈合,与赋形剂组相比有显著性差异(P<0.05);高、中剂量组均能明显抑制醋酸所致小鼠扭体次数,与赋形剂组比较具有显著性差异(P<0.05).结论 美乐涂膜剂具有促进烫伤皮肤的修复及镇痛作用.
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严重烧伤休克期切痂对巨噬细胞活化及吞噬功能的影响
巨噬细胞（MΦ）是一个异质性多功能的细胞群体，通过其本身及其产生的各种介质，在机体免疫防御系统中发挥其始动和调节作用。以往研究结果表明，严重烧伤后MΦ很快被激活，并释放大量的炎症介质，可能是伤后血浆中介质含量增多的重要来源［1］。烧伤后MΦ吞噬功能降低，则可能是导致严重感染、多器官功能紊乱乃至死亡的主要因素之一［2］。休克期切痂植皮可明显降低全身性炎症反应综合征（SIRS）和多器官功能不全综合征（MODS）的发生率，提高大面积深度烧伤的治愈率［3］。笔者以30%Ⅲ度烫伤大鼠为模型。伤后3 h切除全部焦痂，探讨早期切痂后腹腔巨噬细胞（PMΦ）产生一氧化氮（NO）、前列腺素E2（PGE2）、肿瘤坏死因子（TNF）的情况及对吞噬功能的影响。
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中药膳食防治严重烫伤大鼠肠道细菌移位研究
脓毒症是引起严重烧伤患者死亡的主要原因之一,其发生与肠道细菌移位及肠源性LPS的侵袭有关[1-2].因此,减少肠道细菌移位对预防脓毒症发生有重要意义.笔者应用药膳饮食喂饲烫伤大鼠,观察其对大鼠肠道细菌移位及LPS入侵的影响,探索防治肠道细菌移位的方法.
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内皮素1与烫伤大鼠脑基底动脉血管重构的关系
关于烧伤后内皮素对内脏组织的损伤已有较多研究[1-2].但对脑组织尤其是脑血管的影响鲜见报道.深入观察脑血管内皮素水平的变化以及对脑血管作用的影响,对于预防和治疗烧伤诱发的脑血管痉挛和脑血液循环障碍,有一定临床意义.
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替普瑞酮对严重烫伤大鼠胃黏膜细胞线粒体损害的保护作用
烧伤后应激性溃疡是常见并发症之一,可直接威胁患者生命[1].目前临床主要使用H2受体阻滞剂进行预防,但存在一定局限性和不良反应[2].替普瑞酮是萜烯类新型胃黏膜保护剂,在烧伤临床鲜见应用报道.笔者曾观察到,替普瑞酮能诱导热休克蛋白70(HSP70)表达并保护大鼠抵抗严重烧伤导致的急性胃黏膜损伤[3].
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腹内高压对严重烫伤大鼠血清炎性因子的影响
严重烫伤后或腹内压增高初期机体内炎性因子即显著增多,以激发自身的免疫反应.当炎性因子释放失控时又会造成自身组织被广泛破坏并终导致多器官功能衰竭[1].严重烫伤合并腹内高压(IAH)时,关于机体内炎性因子浓度的变化国内外报道较少.本研究以烫伤大鼠为模型,观察合并IAH大鼠血清炎性因子的浓度变化,初步探讨IAH对烫伤后机体炎性反应的影响.
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休克期大面积切痂对严重烫伤大鼠淋巴细胞亚群的影响
感染是大面积烧伤患者常见的并发症之一,其发生、发展及结局与机体的免疫状态密切相关[1].因此,严重烧伤后机体的免疫问题备受关注,许多学者在这方面做了大量的研究,但其确切的发生机制尚不清楚[2].为探讨烧伤后早期创面处理与机体免疫功能的关系,笔者观察了休克期切痂对烫伤大鼠淋巴细胞亚群的影响.
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大鼠烫伤后肾脏组织p38丝裂原活化蛋白激酶的活化及肿瘤坏死因子α含量的变化
严重烧伤后早期常出现肾脏器质性损伤和功能不全[1],大量的炎性介质是引起烧伤后肾脏损伤的主要原因.p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的激活在介导炎性介质的产生和释放过程中起着十分重要的作用[2].被活化的p38MAPK引起组织肿瘤坏死因子(TNF)α的大量产生[3],而TNF-α又是细胞因子网络中心之一,可导致多种细胞因子的释放.本研究观察了严重烫伤大鼠伤后早期肾脏组织p38MAPK的活化及血浆、肾脏组织TNF-α含量的变化,旨在进一步探讨三者之间的关系.
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肠内免疫营养对烫伤大鼠血清内毒素/脂多糖肿瘤坏死因子α及其mRNA和肝脏CD14 mRNA表达的影响
疾病条件下,特殊营养物质能防治营养缺乏,刺激免疫细胞增强应答功能,维护肠黏膜屏障功能等[1].本研究观察肠内免疫营养剂Stresson对烫伤大鼠血清内毒素/脂多糖(LPS)、肿瘤坏死因子(TNF)α及其mRNA、肝组织CD14 mRNA表达的影响,并探讨其作用机制.
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不同海拔严重烫伤大鼠延迟复苏血浆降钙素基因相关肽含量的变化
本实验以海拔3 800 m(甘肃马晗山)和1 517 m(甘肃兰州)为背景,建立大鼠严重烫伤后即时复苏与延迟复苏模型,比较不同海拔下两种大鼠血浆降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)含量的动态变化.
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神经生长因子对深Ⅱ度烫伤大鼠创面愈合的调控作用
创面愈合的调控一直是烧伤治疗的研究重点,目前有关神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对烧伤创面愈合的影响及其机制研究较少.笔者采用不同给药途径观察NGF对创面愈合时间的调控作用,寻求其佳给药方式,以期为临床应用提供理论依据.
