首页 > 文献资料
-
弥漫性脑损伤后SD大鼠内耳HO-1、iNOS蛋白与mRNA的表达
目的 利用Western Blot、RT- PCR技术,探讨SD大鼠弥漫性脑损伤后,耳蜗HO-1、iNOS蛋白与mRNA表达及对ABR的影响.方法 建立弥漫性脑损伤大鼠模型并随机分组,采用听性脑干反应测定、Western Blot、RT- PCR技术,观察各组动物听性脑干反应变化及耳蜗HO-1与iNOS的表达.结果 外伤后各组ABR阈值及各波潜伏期、波间期比较差异有统计学意义(P＜0.05).HO-1、iNOS蛋白与mRNA在外伤后各组耳蜗内表达变化明显,光密度值比较均有统计学意义(P＜0.05).结论 耳蜗功能的改变可能与HO-1与iNOS蛋白与mRNA表达升高有关,认为HO-1、iNOS基因与蛋白水平的改变,在内耳损伤与抗损伤机制中二者共同构成了重要调节机制.
-
中药何首乌饮对衰老大鼠睾丸组织NO和iNOS含量的影响
目的:观察何首乌饮对衰老雄性大鼠睾丸组织一氧化氮(NO)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)含量的影响.方法:D-半乳糖连续腹腔注射的方法建立亚急性衰老大鼠模型,并用补肾中药何首乌饮进行干预,分别检测各组大鼠睾丸组织NO和iNOS的含量.结果:与正常对照组大鼠比较,模型组大鼠睾丸组织NO和iNOS含量明显升高(P ＜0.01)；何首乌饮可抑制衰老模型大鼠睾丸组织NO和iNOS含量的升高,何首乌饮预防组和何首乌饮延缓衰老组与模型组比较差异有显著性(P＜0.01).结论:何首乌饮具有一定延缓睾丸衰老的作用,机制可能与降低衰老大鼠睾丸组织NO和iNOS的含量有关.
-
慢性胃炎、异型增生和胃癌组织中bax、iNOS表达与幽门螺杆菌感染的关系
目的:探讨不同胃粘膜病变组织中bax基因蛋白、诱导型NO合酶(iNOS)的表达及其与幽门螺杆菌(HP)感染相关性.方法:选取我院2002～2004年102例胃粘膜组织标本及患者血清.其中慢性胃炎15例,异型增生22例,胃癌65例.应用免疫组化检测上述组织的bax、iNOS表达,应用组织切片革兰染色和酶联免疫法分别检测组织中的HP及血清HP抗体.结果:在慢性胃炎、异型增生、胃癌组织中HP的检出率分别为:7/15(46.7%)、15/22(68.2%) 34/65(52.3%).且上述各组中bax、 iNOS 的表达与HP感染存在正相关性.不同胃粘膜病变组织中,HP阳性组bax、 iNOS阳性表达率显著高于HP阴性组.结论:bax、 iNOS的表达与HP感染密切相关,HP可能通过NO的诱导及bax调控使细胞增值加速和凋亡异常而参与胃癌的发生、发展过程.
-
慢性胃炎、异型增生、胃癌幽门螺杆菌感染与iNOS表达关系的研究
目的:探讨慢性胃炎、异型增生、胃癌幽门螺杆菌(HP)感染与诱导型NO合酶(iNOS)表达的关系.方法:选取我院2002～2005年胃粘膜组织标本124例,同时采集血清.其中慢性胃炎(Ⅰ组 )58例,异型增生(Ⅱ组) 41例,胃癌(Ⅲ组 )25例.各组均采用酶联免疫法及免疫组化法检测HP抗体和iNOS表达水平.结果:iNOS的表达随胃粘膜病变的进展逐级增高,且HP阳性者iNOS表达高于HP阴性者(P＜0.05).结论:iNOS可能参与了HP感染引起的胃粘膜癌变过程并发挥了重要作用.
-
诱生型一氧化氮合酶在肿瘤中表达的研究进展
肿瘤的病理分级及其发生发展受肿瘤周围微环境中多种调控因子的影响.近年来,人们对一氧化氮(NO)与肿瘤生物学行为的研究中发现,NO及其限速酶--一氧化氮合酶(NOS)尤其是诱生型一氧化氮合酶(iNOS)在肿瘤的发生发展过程中起着重要的作用.
-
大鼠肾脏缺血预处理中P38 MAPK、iNOS、COX2间信号转导关系的研究
目的:探讨大鼠肾脏缺血预处理中 P38 MAPK、iNOS与 COX2 间的信号转导关系. 方法:雄性 wistar 大鼠66只,随机分为6组,分别为:假手术( sham)组,缺血再灌注( IR)组,缺血预处理+缺血再灌注( IPC)组,SB203580药物干预(SB203580)组,AG药物干预(AG)组,NS398药物干预(NS398)组,在再灌注后24 h、48 h两个时间点取材,用苦味酸法测定血清肌酐反映肾功能变化情况;用Western blot法检测再灌注后48 h肾组织P38 MAPK、iNOS与COX2 蛋白的表达,进行半定量分析. 结果:血肌酐在IPC组较IR组低(P<0. 05)尤其在IPC后48 h明显(P<0. 01);P38MAPK、iNOS与COX2 在sham组,IR组,IPC组均有表达,尤在IPC组表达明显(P<0. 01);在SB203580组无P38MAPK蛋白的表达,iNOS、COX2 的表达均较IPC组低(P<0. 05);在AG组无iNOS蛋白的表达,COX2 蛋白的表达较IPC组低(P<0. 05);在NS398组无COX2 蛋白表达, P38MAPK、iNOS蛋白的表达与IPC组相差不明显(P>0. 05),在 AG与 NS398 组 P38 MAPK蛋白表达与 IPC组相差不明显(P>0.05). 结论:缺血预处理时P38MAPK、iNOS与COX2 蛋白均表达、活化,在其信号转导关系中,P38MAPK是iNOS的上游、并通过iNOS活化介导COX2 表达.
-
肝缺血再灌注损伤对大鼠肺组织HO-1和iNOS表达的影响
目的 探讨肝缺血再灌注损伤对大鼠肺组织血红素氧合酶-1(HO-1)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响.方法 选取健康SD大鼠40只,随机分为假手术组(sham组)和肝缺血再灌注组(IR组),每组20只.建立70％肝缺血再灌注损伤大鼠模型.使用图像分析系统测定肺组织免疫组化切片中HO-1、iNOS蛋白平均吸光度值,镜下观察HE染色肝肺组织病理改变,测量肺叶湿/干重比(W/D),检测丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)及超氧化物歧化酶(SOD)的活性.结果 HE染色肝肺组织病理改变,IR组肝肺损伤较sham组重.与sham组比较,IR组肺组织W/D、MDA和MPO表达明显升高(P＜0.05),肺组织SOD表达明显降低(P＜0.05),肺组织HO-1和iNOS蛋白表达明显升高(P＜0.05). 结论 肝缺血再灌注损伤能加重大鼠肺损伤,上调肺组织中的HO-1及iNOS表达.
-
大鼠肾脏缺血预处理中COX-2和iNOS间信号转导关系的研究
目的 探讨大鼠肾脏缺血预处理中COX-2和iNOS的表达及其两者之间的信号转导关系,从而进一步探明肾脏缺血预处理的保护机制.方法 60只大鼠随机分为五组:假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、缺血预处理+缺血再灌注组(IPC组)、NS398干预组(NS398组)和AG干预组(AG组).在再灌注后24 h、48 h两个时间点取材,测定血清Scr;光镜观察形态学改变;采用Western blot法测定COX-2和iNOS的蛋白表达量,进行半定量分析.结果 与I/R组相比较,无论24 h、48 h,IPC组和两给药组的Scr值均明显降低,具有统计学差异(P＜0.05).HE染色形态学也表明IPC组损伤明显减轻,与I/R组相比差异显著.NS398组和AG组两个给药组的损伤程度介于I/R组和IPC组之间.IPC组中COX-2和iNOS均活化、表达,其表达量与sham组和I/R组相比明显增多,差异显著(P＜0.05),而且48 h的表达量多于24 h;AG组COX-2表达量明显少于IPC组(P＜0.05);NS398组和IPC组间iNOS表达量无显著差异(P＞0.05).结论 本实验证实了肾脏IPC对I/R损伤的保护效应;肾脏IPC时COX-2和iNOS均活化、表达,参与了其保护效应,而且主要参与其晚期保护作用;在其信号转导中,iNOS是COX-2的上游,iNOS介导COX-2活化表达.
-
大鼠急性羰基镍中毒脑组织氧化应激的研究
目的 通过观察大鼠急性羰基镍中毒脑组织中总一氧化氮合酶(T-NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和抗超氧阴离子含量的变化,探讨羰基镍的神经毒性机制.方法 采用健康SD大鼠静态吸入方式染毒,羰基镍染毒浓度分别为20、135和250 mg/m3,氯气染毒浓度为250mg/m3,染毒时间均为30 min,并设正常对照组,染毒后第1、2、3和7天取脑组织.采用化学显色法测定不同组大鼠脑组织中T-NOS、iNOS和抗超氧阴离子的含量.结果 T-NOS含量在羰基镍各染毒组均出现升高,与正常对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01); 20和250mg/m3羰基镍染毒组中T-NOS含量在第7天升高明显,与第1、2、3天之间比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).iNOS含量在羰基镍染毒组和正常对照组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05),135和250 mg/m3羰基镍染毒组间比较,差异有统计学意义(P＜0.05).抗超氧阴离子含量在羰基镍各染毒组均明显降低,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 羰基镍可能通过诱导氧化应激反应产生神经毒性.
-
感染血吸虫小鼠肝脏中一氧化氮合酶动态探讨
目的探讨感染血吸虫小鼠肝脏中一氧化氮合酶(iNOS)与热休克蛋白(HSP)-70表达的动态变化. 方法日本血吸虫尾蚴经皮肤感染小鼠后第0,21,28,38和45d分别取其肝脏,用RT-PCR半定量法检测iNOS表达的动态变化;用Western-blot方法检测HSP-70表达的动态变化.结果感染后第21d起能检测到iNOS的表达,感染后第38d达峰值,第45d时表达水平有所下降;HSP-70在未感染小鼠肝脏内有微弱的表达,在感染后21d的肝脏其表达显著增强,38d达峰值,45d后表达下降.结论血吸虫感染可诱导iNOS和HSP-70在肝脏的协同表达,且两者表达的动态变化趋势一致.
-
复方蜥蜴散对慢性萎缩性胃炎模型大鼠血清NO及iNOS水平影响的实验研究
目的:观察复方蜥蜴散对慢性萎缩性胃炎(Chronic atrophic gastritis,CAG)模型大鼠血清NO及iNOS水平的影响,探讨其治疗CAG的作用机制.方法:采取55℃热盐水、2%水杨酸、20mmol/L脱氧胆酸钠三个致萎缩因素配合饥饱失常造成CAG模型.将实验动物分为正常对照组,模型对照组,雏酶素组,复方蜥蜴散高、中、低剂量组.检测大鼠血液中NO和iNOS水平及观察胃黏膜组织学方面的改变.结果:模型组大鼠NO和iNOS水平明显高于正常组(P<0.01),病理组织学上也有较大改变,而经复方蜥蜴散治疗1个月后,NO和iNOS水平恢复正常,胃黏膜病理组织学改善明显.结论:复方蜥蜴散可以逆转萎缩胃黏膜的病理改变,发挥保护胃黏膜的作用.
-
通心络对低压低氧肺动脉高压大鼠的保护作用及其NO机制
目的:探讨通心络对低压低氧肺动脉高压大鼠的作用及其可能的NO作用机制.方法:30只健康雄性SD大鼠,随机分为随机分为低氧低压模型组(模型组)、低氧低压+通心络干预组(通心络干预组)、常氧常压对照组(对照组),每组10只,采用低压低氧舱,控制大气压50 Kp,浓度10％,模拟5000 m海拔的高原环境.模型组和通心络干预组大鼠平均每天入舱8h,其余时间为常压常氧环境.通心络干预组每天入舱前给予通心络1.2g生药/Kg灌胃1次,对照组在同一实验室的常压常氧环境中喂养.4周后取材,比较各组大鼠平均肺动脉压(mPAP),血管壁厚度百分比(WT％),小动脉平均血管壁面积与血管总面积的百分比(WA％).硝酸还原酶法检测血清NO的含量,比色法检测血清eNOS、iNOS、T-NOS的含量,荧光定量PCR(RT-PCR)检测大鼠eNOS,iNOS的含量.结果:4周后,与对照组相比,模型组肺动脉WT％和WA％均高于对照组和通心络干预组(P＜0.05).模型组iNOS含量水平均高于对照组和通心络干预组(P＜0.05).模型组血清NO、eNOS含量及组织中eNOS的mRNA表达量均低于对照组和通心络干预组(P＜0.05),差异具有统计学意义.结论:通心络对低压低氧肺动脉高压大鼠具有保护作用,该保护作用可能通过增加eNOS的含量,抑制iNOS的表达,从而增加NO净含量有关.
-
电针调节焦虑和抑郁障碍共病与iNOS的相关性研究
诱导性一氧化氮合酶(iNOS)在脑中主要分布于胶质细胞,生理水平时基本不表达,通常在炎症状态下诱导生成,iNOS为非钙离子依赖合酶,一旦被诱生可以持续产生大量NO.焦虑障碍和抑郁障碍是临床常见的两组综合征,两种障碍常常在同一个体共存,即称为焦虑和抑郁障碍共病(CAD).近年来研究表明,iNOS在抑郁和焦虑的发病与症状的调节中发挥着重要的作用.而研究表明电针治疗后,海马iNOS的表达量也发生了变化,显示电针对调节焦虑与抑郁双向表型存在一定的相关性.作者通过整理相关文献,分析三者关系,以期对临床针灸治疗抑郁症提供依据.
-
搜风祛痰中药对AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞NF-KBmRNA及iNOSmRNA 表达的影响
[目的]观察搜风祛痰法对血管紧张素II致体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)NF-KB mRNA及iNOSmRNA表达的影响,阐明搜风祛痰法的中药调控NF-KBmRNA与iNOSmRNA在AS过程中可能性的作用机理.[方法]制备兔活心汤含药血清.采用酶消化法培养HUVECs2-3代用于实验,采用RT-PCR法测定内皮细胞NF-KBmRNA及iNOS mRNA.随机分为5组:正常对照组,AngⅡ组,低浓度中药血清+AngⅡ组中浓度中药血清+AngⅡ组高浓度中药血清+AngⅡ组.[结果]活心汤可抑制AngⅡ导致的内皮细胞损伤,减少NF-KBmRNA及iNOSmRNA的表达.[结论]活心汤可抑制AngⅡ所致的HUVECs损伤,保护血管内皮功能.
-
电针百会对脊髓损伤大鼠脊髓组织3种亚型NOS表达及NO含量的影响
目的:研究电针百会对脊髓损伤后脊髓组织NO含量及3种亚型NOS表达的影响.方法:采用改良Allen法造成大鼠脊髓损伤模型,应用硝酸还原酶法测定NO含量及免疫组织化学技术检测脊髓灰质3种亚型NOS(nNOS、iNOS、eNOS)的表达 ,观察脊髓损伤后3种亚型NOS表达.结果:电针百会能减少脊髓损伤后脊髓组织中NO含量,与损伤组比较P＜0.01;电针百会组脊髓灰质nNOS、iNOS表达显著低于损伤组( P＜0.01),电针百会组脊髓灰质eNOS表达显著高于损伤组(P＜0.01).结论: 电针百会能上调脊髓灰质eNOS表达,同时下调脊髓损伤所致nNOS、iNOS的异常表达,从而减少总NO的生成量,降低损伤引起的毒性作用,对脊髓组织具有一定的保护作用.
-
小檗碱对非肥胖性糖尿病小鼠1型糖尿病的预防作用
目的 探讨小檗碱对非肥胖性糖尿病(NOD)小鼠1型糖尿病的影响及其可能的分子机制.方法 40只4周龄NOD雌性小鼠随机分为小檗碱干预组(Ber,20只)和生理盐水对照组(NS,20),监测血糖,记录糖尿病发病率,4蜩后处死小鼠,分别应用Western blot方法与real time PCR方法检测两组小鼠胰腺内Fas、iNOS、bcl-2、SOD蛋白与mRNA的表达水平.结果 小檗碱干预组NOD小鼠1型糖尿病发生率较对照组明显降低(4/20,20％;18/20,90％),平均发病时间也明显延缓.与对照组相比,小檗碱干预组NOD小鼠胰腺组织Fas、iNOS的蛋白与mRNA表达水平明显下调,Bcl-2、SOD的蛋白与mRNA表达水平明显上调,P＜0.05.结论 小檗碱预防NOD鼠糖尿病的发生可能与上调胰腺组织Fas、iNOS的蛋白表达,下调Bcl-2、SOD的蛋白表达相关.
-
尾静脉注射脂肪间充质干细胞修复大鼠脑缺血再灌注损伤
目的 探讨经尾静脉注射脂肪间充质干细胞是否对脑缺血再灌注损伤有一定的修复作用及相关机制.方法 45只SD大鼠随机均分为假手术组(sham),模型组(I/R)和治疗组(ADMSCs).I/R和ADMSCs组大鼠采用线栓法大脑中动脉脑缺血再灌模型(MCAO)建立局灶性脑缺血再灌动物模型.缺血2h后再灌注,ADMSCs组再灌注0和12h经尾静脉注射2.0×106个(0.5ml)脂肪间充质干细胞,I/R组注射等量的生理盐水.再灌注24h后处死大鼠并迅速取脑组织.通过TTC染色计算脑梗塞面积;TUNEL检测缺血部分脑组织中的细胞凋亡情况;Western blot检测缺血部分脑组织中iNOS和bcl-2/bax的表达水平.结果 ADMSCs组显著降低了脑梗塞体积,抑制神经细胞凋亡,减少Bax/bcl-2蛋白比,iNOS的表达水平明显下调.结论 尾静脉注射ADMSCs修复脑I/R损伤可能与抑制神经细胞凋亡和iNOS表达相关.
-
VEGF-C、VEGFR-3和iNOS在人乳腺癌淋巴管的表达
目的 检测乳腺癌组织血管内皮生长因子-C(VEGF-C)及其受体(VEGFR-3)、iNOS基因表达的相关性及这三个基因mRNA表达水平与淋巴管密度(LVD)的相关性,为阐明乳腺癌淋巴管生成的分子机理提供实验依据.方法 RT-PCR榆测乳腺癌组织及正常乳腺组织VEGF-C、VEGFR-3、iNOSmRNA的表达水平;免疫组织化学染色法检测淋巴管内皮细胞上VEGFR-3的表达,测定淋巴管密度.结果 乳腺癌LVD为20.35±4.23,显著高于正常对照组(P＜0.05);乳腺癌组织VEGF-C、VEGFR-3、iNOSmRNA三者的表达率分别为74.0%、84.0%、82.0%,显著高于正常对照组(P＜0.05);VEGF-C、VEGFR-3、iNOS阳性组中LVD分别为21.34±3.45、18.54±4.68、17.43±4.76,显著高于对照组(P＜0.05).结论 VEGF-C、VEGFR-3、iNOSmRNA表达与淋巴管密度之间呈正相关,并且3者之间的表达亦具有相关性,这些基因的表达增高可能在乳腺癌淋巴管生成过程中具有重要作用.
关键词： 血管内皮生长因子-C 血管内皮生长因子受体-3 iNOS 乳腺癌 -
大黄素对骨髓间充质干细胞移植治疗缺血性再灌注肾损伤的影响
背景：已有研究表明大黄素通过抑制炎症因子释放对肠缺血再灌注损伤具有保护作用。目的：探讨大黄素对骨髓间充质干细胞移植治疗缺血性再灌注肾损伤的作用。
方法：40只SD大鼠随机分为5组(n=8)：假手术组、缺血再灌注组、骨髓间充质干细胞组、大黄素低剂量干预组、大黄素高剂量干预组。除假手术组外，其余4组建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型。造模后骨髓间充质干细胞组下腔静脉注射1 mL骨髓间充质干细胞悬液，大黄素低剂量干预组与高剂量干预组术前7 d内每天灌胃大黄素30 mg/kg和60 mg/kg，后续处理与骨髓间充质干细胞组一致。再灌注6 h后，苏木精-伊红染色法检测肾组织病理改变，实时荧光定量PCR检测肿瘤坏死因子α，白细胞介素6和白细胞介素18以及TLR2和TLR4 mRNA表达水平，免疫印迹法检测COX-2，ICAM-1，iNOS蛋白表达水平。结果与结论：①缺血再灌注后可见大量小管上皮脱落，间质有炎性细胞浸润；骨髓间充质干细胞组可见部分小管上皮细胞脱落，部分间质有炎细胞浸润；药物低剂量干预组与高剂量干预组肾小管管腔几乎完整，少量间质有炎细胞浸润；②与假手术组相比，缺血再灌注组肿瘤坏死因子α，白细胞介素6，白细胞介素18以及TLR2，TLR4 mRNA表达水平显著升高(P<0.05)，COX-2，ICAM-1，iNOS蛋白表达水平也显著升高(P<0.05)；骨髓间充质干细胞组上述各因子表达明显低于缺血再灌注组(P<0.05)；大黄素低剂量干预组与高剂量干预组的降低程度更为显著，且与大黄素剂量相关；③结果表明，大黄素具有促进骨髓间充质干细胞改善大鼠缺血性再灌注肾损伤的作用。 -
L-NAME对急性高眼压状态下大鼠视网膜的影响
目的 通过对大鼠实验前给予左旋-硝基精氨酸甲脂(L-NAME,NO前体左旋精氨酸类似物)后,观察急性高眼压后大鼠视网膜电图(ERG)b波幅的变化,iNOSmRNA的表达情况.探讨L-NAME和iNOS在高眼压视网膜损伤中的作用.方法 Wister大鼠48只随机分为6组,前房加压灌注成高眼压模型,6组分别为高眼压30min,90min组,高眼压90min后12h组;注射L-NAME+高眼压30min,90min组,注射L-NAME+高眼压90min后12h组.Alnplaldamk15型视电生理仪检测FERG-b波波幅变化.RT-PCR法检测iNOSmRNA的表达.结果 注射L-NAME组的ERG-b波波幅与未用药高眼压组相比,前者明显恢复(P＜0.01).高眼压30min,90min,高眼压90min后12hiNOSmRNA的表达逐渐增强,但L-NAME组iNOSmRNA的表达明显低于对应的高眼压未用药组(P＜0.01).结论 L-NAME做为一氧化氮合酶的抑制剂,通过抑制iNOS合成,有助于缺血后的视网膜功能的恢复,对视网膜起到保护作用.
