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脑钠素对充血性心力衰竭诊断的临床应用进展
充血性心力衰竭(CHF)是一种心脏综合症候群,以动脉系统供血不足,静脉系统郁血的临床表现为明显,是威胁人类生命的主要疾病之一,其发病率和死亡率较高.目前诊断CHF主要通过病理学检查,获取病史以及胸部X光检查、心向量超声诊断等重要手段,由于临床表现可由心衰以外的原因引起,常导致误诊.随着医学的发展,新的治疗手段对实验室提出更高的要求,寻找既敏感又特异的生物学标志物是学者们研究的热点.脑钠素(BNP)又称B型利钠肽,来源于心室,促进钠从尿排泄和血管扩张.研究发现血浆BNP水平有助于判定心衰、评估患者预后.本文对BNP的生物学活性、代谢途径、检测方法、临床进展几方面做一综述.
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Ghrelin对心血管系统作用的研究进展
本文主要就ghrelin的牛物学效应,特别是在心血管方面的作用作一综述.Ghrelin是新发现的一种胃肠多肽,作用于下丘脑和垂体,可刺激生长激素(GH)释放,增强食欲,促进脂肪堆积.Ghrelin依赖于第3位丝氨酸残基辛酰基化的特征性结构,与一种G蛋白偶联受体结合,发挥内分泌调节作用.值得注意的是,ghrelin具有独立于生长激素之外的心脏保护作用.
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猪毛乳头细胞条件培养基的生物学活性研究
目的:研究猪毛乳头细胞条件培养基的生物学活性.方法:通过体外培养低传代猪毛乳头细胞,收集其基础培养基的上清液配制成条件培养基,用于培养高传代人毛乳头细胞,观察细胞形态及细胞生长曲线的变化；同时观察高传代人毛乳头细胞与低传代猪毛乳头细胞共培养情况.结果:条件培养基使高传代人毛乳头细胞出现了凝集生长现象,其生长曲线显著优于基础培养基培养的高传代人毛乳头细胞(P＜0.05),其细胞的3H-TdR测定值亦显著升高(P＜0.05).高传代人毛乳头细胞与低传代猪毛乳头细胞共培养后出现凝集性生长趋势.结论:低传代猪毛乳头细胞在体外培养状态下可分泌具有明确生物学活性的物质.
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雌激素对皮肤黑素细胞和皮肤肿瘤作用影响的研究进展
40多年前,Jensen等研究发现17 β-雌二醇(E<,2>)在子宫特异性结合受体,认识到雌激素生物学活性是通过受体蛋白调节实现的.随后的20多年,针对该受体蛋白进行了深入的研究.随后的20多年,针对该受体蛋白进行了深入的研究.1986年,两个研究小组成功克隆了这一蛋白(ER),一直到1995年,人们普遍认为只有这一种受体参与了内源性和外源性雌激素以及抗雌激素作用.
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酸敏感离子通道基因重组质粒的构建、表达及其活性测定
为了构建含有小鼠酸敏感离子通道(ASIC1a、ASIC2a)基因全长eDNA的重组质粒,并表达有生物学活性的ASIC1a和ASIC2a融合蛋白,本研究通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别获得小鼠ASIC1a和ASIC2a全长cDNA,并将其克隆人真核表达载体pEGFP-N3中,构建含小鼠全长ASIC1a和ASIC2a基因的重组质粒pEGFP-ASIC1a和pEGFP-ASIC2a,经DNA测序鉴定序列正确.脂质体法分别将其转染至中国仓鼠卵巢细胞(CHO),荧光显微镜下观察小鼠ASIC1a和ASIC2a融合蛋白在细胞内的表达分布,Western blot检测其蛋白表达.酸性处理转染重组质粒细胞,并比较其细胞存活率及乳酸脱氢酶(LDH)的释放来评价融合蛋白的生物学活性.结果显示:本研究成功地分别将小鼠ASIC1a和ASIC2a全长eDNA克降入pEGFP-N3载体中,并将其转染至CHO细胞,荧光显微镜下观察到CHO细胞膜周围呈强绿色荧光条带,Western blot显示小鼠ASIC1a和ASIC2a融合蛋白分别在90 kD和88 kD处有表达.经酸性处理的转染ASIC1a和ASIC2a重组质粒的CHO细胞,分别较其在pH7.4条件下的细胞存活率明显降低,LDH释放量明显增高,且通道阻断剂可抑制该效应.上述结果提示,我们已成功构建出含小鼠ASIC1a和ASIC2a全长cDNA的重组质粒pEGFP-ASIC1a和pEGFP-ASIC2a,并使有生物学活性的ASIC1a和ASIC2a融合蛋白在CHO细胞中表达.
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消化道内的NKA和NKB
神经激肽A(neurokinin A,NKA)又名神经介素L(neuromedine L)、K物质(substance K,SK),神经激肽B(neurokinin B,NKB)又名神经介素K(neuromedine K),是Kimuna等[1]于1983年首先从猪脊髓中分离出来的两种含10个氨基酸的神经肽,属于速激肽家族的成员.自发现以来,许多学者对它们的生物学活性、药理学特征、生物合成、释放和灭活、受体的结构和分布、拮抗剂及其分子生物学等方面的问题进行了研究,本文结合作者自己的研究工作,主要对消化道内的NKA和NKB的研究现状作一综述.
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槲皮素的生物学活性研究进展
槲皮素具有广泛的生物学作用,有抗氧化及清除氧自由基作用、抗纤维化作用、抗肿瘤作用、能降低血压,保护心肌缺血再灌注损伤、抗病毒、镇痛及止泻等作用.
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内皮抑制素蛋白质的制备及生物学活性测定
目的:探讨内皮抑制素蛋白质的制备及其对血管内皮细胞的生物学活性作用.方法:通过限制性内切酶酶切反应、聚合酶链式反应、DNA测序及用NCBIBLAST软件与基因库序列比较的方法进行鉴定,鉴定后在大肠杆菌中扩增,用质粒纯化试剂盒抽提纯化;将纯化的pBlast-hEndostatin转染人成纤维细胞,用超滤和亲和层析法初步提纯转基因成纤维细胞产生的内皮抑制素蛋白,用Rt-PCR、Western-Blot和免疫组化检测内皮抑制素的表达,用MTT法检测其对人脐静脉内皮细胞的抑制作用.结果:实验证实质粒pBlast-hEndostatin含有人内皮抑制素基因.转染的成纤维细胞可以产生内皮抑制素蛋白,内皮抑制素蛋白质对人脐静脉内皮细胞作用48h 2.5,5,10,20,40,80mg/L组抑制率分别为8.5%,13.1%,27.7%,38.1%,56.7%,63.8%,经曲线拟合后,内皮抑制素作用于人脐静脉内皮细胞48h IC50值为34.5mg/L.而内皮抑制素对人成纤维细胞则没有明显抑制作用.结论:转内皮抑制素基因的人成纤维细胞可以表达内皮抑制素蛋白,表达的内皮抑制素蛋白对人脐静脉内皮细胞有生长抑制作用,而对人成纤维细胞没有生长抑制作用.
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PcDNA3/sIL-1RⅠ重组载体体外表达产物生物学活性的检测
目的:检测构建的PcDNA3/sIL-1RⅠ真核表达载体在体外的表达产物是否具有生物学活性.方法:脂质体介导PcDNA3/sIL-1RⅠ体外转染CHO细胞,MTT法检测重组质粒转染的CHO细胞上清液能否阻断IL-1β生物学活性.结果:重组质粒转染的CHO细胞上清液中表达的sIL-1RⅠ能阻断不同浓度IL-1β抑制A375细胞生长的作用.结论:PcDNA3/sIL-1RⅠ重组质粒在体外导入哺乳动物细胞后能够表达具有相应生物学活性的目的产物.
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雷公藤多甙治疗复发性口疮的远期疗效与血清NO及NOS的变化
一氧化氮(nitric oxide,NO)是一种毒性极强、不稳定、易扩散、半衰期极短(3～5 s)、化学性质活泼的自由基,在体内由一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)催化,利用L-精氨酸(L-arginine,L-Arg)和分子氧,并在还原型尼克酰胺腺苷磷酸(NADPH)的参与下,由多种细胞产生,具有广泛的生物学活性,参与免疫、神经、消化、循环等多种系统的生理及病理过程.20 世纪80 年代以来,NO的基础和临床研究涉及到包括口腔医学在内的医学各个领域[1],作者的研究表明,对复发性口疮(recurrent aphthous ulcer,RAU)近期疗效与其血清NO、NOS降低有关.现将雷公藤多甙治疗RAU远期疗效与血清NO、NOS降低的关系报道如下.
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碱性成纤维细胞生长因子对人牙髓细胞生物学活性的影响
目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对体外培养的人牙髓细胞(human dental pulp cells,HDPCs)生物学活性的影响.方法:常规组织块培养法获得HDPCs,采用四唑盐比色(MTT)法、ALP活性检测法观察不同浓度bFGF(0.1、1、10、100 μg/L)对体外培养的HDPC粘附性、伸展性以及ALP活性的影响.结果:不同浓度bFGF均可提高HDPCs粘附性和伸展性,与对照组相比P＜0.05;不同浓度bFGF与HDPCs共同培养一定时间后,均能显著抑制其ALP活性(P＜0.05);并且浓度越高,抑制作用出现的时间越早,100 μg/L组在培养第1天时与对照组相比P＜0.05.结论:0.1 ～ 100 μg/L范围内不同浓度bFGF均能促进HDPCs的粘附性和伸展性,并可抑制HDPCs的ALP活性.
关键词： 碱性成纤维细胞生长因子 人牙髓细胞 生物学活性 -
枫香成分及其生物学活性研究进展
目的 了解枫香的成分及其生物活性.方法 对相关的文献进行综述.结果 枫香的叶、果实、树皮中都含有特定的活性化学成分,具有很好的生物活性.结论 枫香在临床上和生产上有很好的应用价值和应用前景.
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广谱抗LPS mAb的生物学活性
目的鉴定抗LPS mAb对不同种属细菌及其LPS的交叉反应性和保护活性. 方法以间接ELISA,Western 印迹试验鉴定mAb对不同种属细菌及其LPS的交叉反应性;检测不同浓度mAb对LPS诱导的淋巴细胞分泌TNF-α和IL-6的抑制作用;以大肠埃希菌、铜绿色假单胞菌、鼠伤寒沙门菌建立小鼠菌血症模型,鉴定mAb的保护作用. 结果在ELISA试验中,抗LPS mAb C3A2 和H3D3可与鉴定所用的18株革兰阴性菌产生交叉反应;在Western印迹试验中可与鉴定所用的全部7个种属的LPS产生交叉反应;随mAb浓度的提高,LPS诱导淋巴细胞分泌TNF-α和IL-6的作用受到抑制;在动物保护试验中,相对于生理盐水对照组,存活率提高30%～60%. 结论抗LPS mAb C3A2 和H3D3不仅对众多革兰阴性菌LPS具有广泛交叉反应性,而且具有高保护活性.
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DC-CIK细胞的生物学活性及抗淋巴瘤细胞的作用
目的 研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)与树突状细胞(DC)共培养后DC-CIK细胞的体外增殖能力、免疫表型变化、分泌细胞因子水平以及抗淋巴瘤细胞活性.方法 正常人外周血单个核细胞诱导DC和CIK细胞,将DC与CIK共培养,以CIK细胞单独培养为对照.用台盼蓝活细胞计数计算细胞扩增倍数,MTT法测定杀伤活性,流式细胞术分析免疫表型,ELISA双抗体夹心法检测分泌干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-12(IL-12)的水平.结果 DC-CIK细胞增殖能力明显高于CIK细胞(P＜0.05);DC、CIK细胞共培养后,CD3+CD8+、CD3+CD56+双阳性细胞比率较同条件下CIK细胞组显著增多(P＜0.05);共培养3 d,DC-CIK细胞上清液中IL-12、INF-γ的分泌量均比CIK细胞单独培养的分泌量高(P＜0.01,P＜0.05);在5∶1-40∶1的效靶比范围内,DC-CIK细胞对淋巴瘤细胞的杀伤率显著高于CIK细胞(P＜0.05),且杀伤率与效靶比呈正相关.结论 DC-CIK细胞的增殖能力、分泌细胞因子水平、抗淋巴瘤细胞活性均高于CIK细胞,为DC-CIK细胞免疫治疗提供了实验和理论依据.
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甲胎蛋白产生机制的细胞病理学研究进展
1 甲胎蛋白的来源结构及生物学活性1.1 来 源 甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein,AFP)是一种胚胎内胚层衍生相关组织细胞的同源蛋白产物,主要由胎儿肝细胞、卵黄囊、胃肠道及生殖等器官组织的上皮产生,为胎儿主要血清蛋白.这类细胞广泛分布在消化、泌尿、生殖和呼吸等系统,如肝脏、胃肠道、胰腺、卵巢、睾丸、膀胱及肺等器官的上皮组织中.
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人体表皮生长因子受体3研究进展
研究发现人体表皮生长因子受体(HER)家族与正常细胞的增殖、分化有关,并且调控肿瘤发生、生长和侵袭.表皮生长因子受体家族包括:EGFR(又称erbB 1,HERl),HER2(erbB2),HER3(erbB 3)和HER4(erbB4) [1,2].随着研究的深入,HER3和HER4在肿瘤的发生、浸润和瘤细胞生物学活性判定方面逐步引起人们注意.现就HER3作一综述.
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“α2-AR-Gi-AC-cAMP-PKA”信号转导通路与CGRP舒血管效应的机制分析
1 降钙素基因相关肽(Colcition gene-rolated pepthde,CGRP)其舒血管效应与病变的研究背景CGRP是在人和哺乳动物体内存在的一种含37个氨基酸残基的多肽[1].CGRP是由Amana和Rosenfold等[1,2]于1982年首先发现的,而且CGRP是第一个通过分子生物学技术发现其结构后逐步认识其分子生物学活性的物质.CGRP广泛分布于中枢和外周神经系统,以及心血管系统和胃肠道系统当中,特别是心血管系统及感觉神经元的胞体和传人神经纤维的末梢,以及胃肠道的壁内神经丛.CGRP具有广泛的生物学效应,特别是对心血管和消化系统.它具有较明显的强心扩血管作用[3],是迄今为止发现的强大的内源性血管舒张物质.同时Nozaki等[4 ]研究证明,CGRP血管舒张反应呈现不同程度的剂-效依赖性,其作用强于肠多肽(VIP)等其他血管扩张介质.
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牙龈卟啉菌菌毛的研究进展
牙龈卟啉菌(Porphyromonas gingivalis, Pg)是目前获得公认的一种牙周致病菌.Pg含有大量毒性因子,如蛋白酶、菌毛、脂多糖、血凝素等.其中菌毛(Pili,fimbriae)在牙周致病作用中占据了一个重要地位,而且与Pg在口腔的定植有关.因其广泛的生物学活性成为牙龈卟啉菌研究的一个热点.现就Pg菌毛的相关研究进展综述如下.
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激活补体试验检测静注人免疫球蛋白 Fc 段生物学活性的优化
优化激活补体试验的条件，完善静注人免疫球蛋白Fc段生物学活性的检测方法。方法采用补体活化经典途径的原理，分别探讨致敏红细胞密度和贮存时间对人免疫球蛋白 Fc段生物学活性检测结果的影响；比较手工法和微孔板分光光度法检测Fc段生物学活性的检测结果。结果在致敏红细胞A541 nm＝1．3和致敏红细胞贮存5 d时，检测结果较稳定。微孔板分光光度法检测优于手工法。结论完善了人免疫球蛋白Fc段生物学活性的检测方法，检测结果准确、重复性好。
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重组伴侣蛋白60外膜蛋白免疫诱导抗脑膜炎奈瑟菌的杀菌抗体应答
得自脑膜炎球菌定植个体的血清以及得自脑膜炎球菌性疾病患者的血清都含有针对奈瑟球菌热休克蛋白/伴侣蛋白60( Chp60)蛋白的特异性抗体。在这项研究中，作者用含在生理盐水中的重组Chp60、与氢氧化铝吸附的Chp60、含在脂质体中的Chp60以及含在去污剂微粒中的Chp60免疫小鼠，加或者不加单磷酰类脂A 佐剂。结果表明能够诱导高度而且水平类似的(P>0.05)的抗体，这种抗体能够识别外膜上的Chp60。 FACS分析和免疫荧光试验测定表明Chp60是在脑膜炎球菌表面表达的。免疫印迹测定证实小鼠抗Chp60血清能够识别脑膜炎球菌菌体裂解物中的相对分子质量为60000的蛋白，然而，用人热休克蛋白60进行的交叉反应也能观察到这种结果。通过比较菌株的翻译蛋白序列，发现在细菌性分离物基因组序列库中脑膜炎球菌有40种不同的等位基因，其中作者选择的得自定植个体和病人的13株分离物就有另外的5种新的等位基因。通过对所有菌株的非丰腴翻译氨基酸序列进行比较，显示出在脑膜炎球菌Chp60蛋白之间有≥97%的同一性，在作者测定的13株菌株中，这种蛋白以高度的和类似的水平进行表达。抗同源性菌株MC58的杀菌性抗体(平均交互滴度32~64)则由接种含在脂质体中的Chp60、含在去污剂微粒中的Chp60以及吸附于氢氧化铝的Chp60而诱导出来。杀伤活性也受到加入单磷酰类脂A 以及所采用的投递配方的影响。抗 Chp60抗血清的生物学活性不能明显地延伸到异源性脑膜炎球菌菌株。因此，为了提供广谱的覆盖率，基于Chp60的疫苗还需鉴定多种蛋白和特异性杀菌性表位。
