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白细胞介素-1基因多态性与种植体周围炎
白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)是一种具有多种生物学活性的细胞因子,在炎症和免疫反应中发挥重要的调节作用.其合成和分泌在一定条件下受基因的调控,同一位点的基因多态性表现为该因子合成量的个体差异,影响相应局部水平的升高或降低,导致骨组织的吸收.许多研究表明白细胞介素-1基因家族的多态性可以用来评价牙周疾病的危险性.种植体周围炎,即慢性进展性边缘性炎症,被认为是一种炎症性反应,它导致种植体周围支撑骨组织的功能吸收而致使种植失败.由于种植体周围炎是一种病因、微生物学、组织病理学、临床表现方面都和牙周炎极其相似的疾病,并且种植体周围炎是导致种植体松动失败的主要原因.因此,本文就白细胞介素-1基因多态性与种植体周围炎的相关性研究进展作一综述.
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干扰素给药研究
干扰素是机体细胞在受到外源刺激后产生的一组细胞因子,具有广谱的抗病毒,免疫调节功能以及抗肿瘤作用等生物学活性.自上世纪60年代,人们就开始将干扰素应用于临床,但由于当时使用的干扰素是从人血中提取,来源非常困难,纯化工艺复杂,收率低,价格昂贵,因而干扰素的产量有限,并且这样产生的血源性干扰素容易被全血中的病毒污染,从而威胁使用者的健康;因此严重地限制了干扰素在临床上的使用价值.
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重组人甘露聚糖结合凝集素三肽链亚单位的制备及其活性分析
目的 制备具有生物学活性的重组人甘露聚糖结合凝集素三肽链亚单位(trhMBL).方法 我们先前已构建了N端缺失的重组人甘露聚糖结合凝集素(rhMBL△N)基因的原核表达载体并在大肠杆菌中高效表达rhMBL△N融合蛋白.本实验利用胶原蛋白的3条肽链依其自身性质而相互缠绕成三股螺旋、装配成三级结构的原理,首先以凝血酶酶切rhMBL融合蛋白,将获得的单链rhMBL蛋白在50 mmol/L PBS (pH7.2)和ddH2O中交替反复透析使之自动装配成trhMBL,后以配体结合试验和C4d沉淀试验对终产物trhMBL进行生物学活性分析.结果 rhMBL融合蛋白经凝血酶酶切,获得相对分子质量约20 000的rhMBL单链蛋白;将其反复透析后得到相对分子质量约50000的rhMBL三肽链亚单位trhMBL;活性分析表明,该MBL亚单位的配体结合活性比rhMBL△N肽链高,并获得了激活补体凝集素途径的活性,但这些活性比天然MBL低.结论 成功获得了具有生物学活性的重组人MBL三肽链亚单位;这种三肽链组织形式不仅是MBL的结构亚单位,而且是其功能亚单位.
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冻干重组人三突变型HIF-1α腺病毒生物学效应考察
目的 研究冻干对重组人三突变型HIF-1α病毒(Ad-HIF-1α-564/402/803)生物学效应的影响.方法 将前期构建的Ad-HIF-1α-564/402/803在HEK293A细胞中进行扩增,用氯化铯浓度梯度离心法进行腺病毒纯化,X-Gal染色法测定重组腺病毒转染效率,在适宜的条件下制成冻于剂.采用MTS试剂盒观察冻干前后Ad-HIF-1α-564/402/803对hMvECs增殖的影响.分别在冻干前、冻干后1 d、6月、12月四个时间点提取病毒DNA,进行PCR及PCR产物测序鉴定重组人三突变型HIF-1α腺病毒基因;并在4个时间点以Ad-HIF-1α-564/402/803转染hMVECs,提取蛋白进行western blot检测HIF-1α蛋白的表达.结果 X-gal染色显示MOI为100pfu/cell时,转染效率趋于稳定.冻干前后重组人三突变型HIF-1α腺病毒对hMVECs增殖影响无显著差异(P>0.05).经PCR及基因测序鉴定,在四个时间点,腺病毒所携带的目的 基因信息无丢失或突变,HIF-1α蛋白表达无差异(P>0.05).结论 冻干能够长期保持重组人三突变型HIF-1α腺病毒的高生物活性.
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Rac1-GTPase慢病毒的构建及生物学活性鉴定
目的 构建携带绿色荧光蛋白的Rac1-GTPase显性负效突变体(Rac1N17)和组成型活性突变体(Rac1L61)的慢病毒.方法 构建Rac1N17和Rac1L61慢病毒表达质粒,并以酶切和测序等方法鉴定.利用ViraPower~(TM)慢病毒表达系统包装制备Rac1-GTPase突变体慢病毒上清,用其感染大鼠前皮质神经元,分别进行Rac1生物学活性检测、细胞转染效率鉴定与神经元形态学观察.结果 构建的Rac1N17和Rac1L61慢病毒表达质粒经酶切与测序鉴定正确,包装的慢病毒滴度为1×10~6TU/ml.用制备的慢病毒上清感染原代培养的前皮质神经元,Rac1生物学活性检测结果显示Rac1N17慢病毒显著抑制表皮生长因子诱导的Rac1活性的升高,而Rac1L61慢病毒感染神经元Rac1活性显著升高.感染效率鉴定显示病毒上清可感染80%以上的前皮质神经元.形态学观察显示经慢病毒感染后的神经元其胞体与树突分支清晰可见.结论成功制备了Rac1N17和Rac1L61慢病毒,并成功实现了慢病毒感染前皮质神经元.为进一步研究Rho蛋白家族信号通路提供了一个重要工具.
关键词: Rac1-GTPase 慢病毒 绿色荧光蛋白 生物学活性 -
蜘蛛毒素医学相关生物学活性的研究进展
蜘蛛种类繁多且多数蜘蛛能够分泌毒液.蜘蛛毒液中含有丰富的蛋白质多肽并具有复杂的生物学活性.近年来,由蜘蛛毒液分离纯化出的蛋白质多肽成分日益增多,且这些生物学活性成分具有极好的药物开发价值及应用前景.该文对蜘蛛毒素的生物学活性及其机制进行了综述.
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槲皮素单硫酸酯对重组人蛋白激酶CK2的影响
蛋白激酶CK2是一种多功能的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,是由α2 β2或αα′β2或α′2 β2结构组成的四亚基蛋白质.蛋白激酶CK 2在细胞的生长、增殖及信息传导中起重要作用.槲皮素是一种天然的黄酮类化合物,具有多种药理作用,但其水溶性很差.本文将槲皮素改造成水溶性槲皮素-槲皮素单硫酸酯(SQMS),并观察其对重组人蛋白激酶CK2的影响.结果表明,SQMS对蛋白激酶CK2有较强的抑制作用,IC50为1.37 μ mol/L.动力学研究发现,SQMS对蛋白激酶CK2的抑制作用与ATP呈竞争性抑制作用,与酪蛋白呈非竞争性抑制作用.这一结果与槲皮素抑制重组人蛋白激酶CK2的结果相近,提示半合成的水溶性槲皮素没有改变其原有的生物学活性.
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健康人和肿瘤患者CIK细胞的生物学特性比较及应用
目的 比较健康人和肿瘤患者外周血来源的CIK细胞的体外扩增速度、细胞表型和杀伤活性;观察健康人CIK细胞对裸鼠体内移植瘤的预防和治疗作用.方法 健康人和肿瘤患者外周血单个核细胞各10份,定向诱导成CIK细胞,直接活细胞计数法比较两者的扩增速度,流式细胞仪检测比较两者细胞表型,MTT法比较两者对K562和LOVO细胞株的杀伤活性.取30只裸鼠分为3个组,预防组:先尾静脉注射CIK细胞,后背部皮下接种A549细胞.治疗组:裸鼠于第1天接种A549细胞,第2天,根据注射方案不同,分为局部注射CIK细胞(局部注射组)、尾静脉注射CIK细胞(尾静脉注射组)、局部及尾静脉均注射CIK细胞(联合治疗组)3组,均连续治疗5 d.对照组:背部皮下接种A549细胞,注射生理盐水,连续5 d.4周后裸鼠,测量肿瘤大小,称重,计算肿瘤体积、抑瘤率,并做病理检查.结果 健康人CIK细胞的扩增速度显著高于肿瘤患者CIK细胞 (P<0.05),流式细胞仪检测显示健康人CIK细胞CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞百分比显著高于患者CIK细胞(P<0.05),健康人CIK细胞对K562、LOVO的杀伤活性强于患者CIK细胞(P<0.05).对照组各裸鼠背部皮下移植瘤出现较早,并且以相近速率快速生长,体积较大;CIK细胞预防组及治疗组中局部注射组和尾静脉注射组的移植瘤出现较晚,生长较慢,体积较小,联合治疗组治疗效果更佳(P<0.05).结论 体外实验中,健康人CIK细胞体外扩增快,CD3+CD8+、CD3+CD56+细胞比例高,对肿瘤细胞的杀伤活性强于肿瘤患者CIK细胞.动物实验中,健康人CIK细胞对裸鼠移植瘤有预防和治疗作用.
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Gremlin和BMP7在纤维化疾病中的作用
Gremlin是进化上高度保守的分泌型糖蛋白,属于骨形态蛋白拮抗剂家族成员,在个体胚胎发育过程中肺、肾等器官的形态形成过程中起重要作用,并参与成熟组织器官功能的维持.Gremlin通过与BMP直接结合,阻断BMP与受体结合,而拮抗BMP的生物学活性.TGF-β是目前已知的重要的促纤维形成因子,参与肾、肺、肝、眼、心等组织器官的纤维性病变.BMP7和TGF-β同属于TGF-β超家族成员,两者所介导的信号途径存在交联反应,共同参与调节正常生理活动及某些疾病的发生发展.迄今的研究证明Gremlin和BMP7均与纤维化病变的发生发展有关,且相互间可能存在调控与被调控的机制.
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泌乳素与免疫调节
泌乳素于1928年被发现,主要作用是刺激乳腺发育及哺乳.在20世纪80年代早期,人类泌乳素cDNA及基因结构被阐明.随后,泌乳素的研究增多,发现泌乳素不仅由垂体分泌,还可由多种组织和细胞分泌,其受体广泛分布于多种器官组织细胞,泌乳素大约有300多种不同的生物学活性,包括生殖、内分泌和代谢、水电解质的平衡、生长发育、智力和行为,以及免疫调节和防护作用[1].对于泌乳素和免疫系统之间的关系在近20年研究较多,泌乳素在固有免疫和适应性免疫方面都起着重要的作用,是神经、免疫、内分泌三大调节系统之间互相联系的信使之一.本文对泌乳素及其受体免疫调节作用的研究进展作一概述.
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新城疫病毒及其应用研究进展
新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)自1946年在我国首次分离至今已有60多年,非典型性的新城疫是威胁养殖户的禽类疾病之一.针对新城疫疫苗的广泛开发和使用,使新城疫发病率和病死率得到了较好的控制.研究发现,NDV在肿瘤细胞中的复制是正常细胞的10 000倍,NDV可使胃癌的转移受到抑制[1],NDV在肿瘤学上的应用引起人们的广泛关注.本文就NDV的生物学活性及其应用展开综述.
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黄酮类化合物抗白血病作用的研究进展
黄酮类化合物(flavonoids)又名生物类黄酮(bioflavonoids),可分为黄酮、黄酮醇、异黄酮、黄烷酮等及其甙类,其结构特点是具有C6-C3-C6的基本骨架,即两个芳香环由一个成环或不成环的C3单元联结起来.它们广泛存在于植物的各个部位,尤其是花、叶部位,主要存在于芸香科、唇形科、豆科、伞形科、银杏科与菊科中.黄酮类化合物如此广泛分布于植物界中,而且具有多种多样的生物学活性[1-4].近年来,许多黄酮类化合物被证实对多种肿瘤细胞尤其对白血病细胞有一定的细胞毒性及抗肿瘤活性,能够抑制白血病细胞的增殖、影响其细胞周期的分布或诱导白血病细胞的凋亡[5-7],而对正常人体细胞低毒或无毒.因此黄酮类化合物被认为是颇有应用前景的抗白血病药物.本文就黄酮类化合物抗白血病作用及其机制的研究进展作一综述.
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灰树花多糖生物活性的研究进展
灰树花( Grifola frondosa )属担子菌亚门,层菌纲,同担子菌亚纲,非褶菌目,多孔菌科中的一类真菌,又俗称舞茸(Maitake),在民间有较长的食、药用历史[1-3]。早期的研究证实,从灰树花中萃取的灰树花多糖,核心成分由具有β-(1-3)侧链的β-(1-6)葡聚糖和具有β-(1-6)侧链的β-(1-3)葡聚糖组成,是包含有葡聚糖、葡萄糖、木糖、岩藻糖、甘露糖、丰乳糖及少量蛋白质的异聚糖复合物,是灰树花的有效生物活性成分[1-5]。随着研究的深入,国内外学者[1-4,6]发现,灰树花多糖在降血糖、调节血脂、降血压、抗氧化、抗肝炎病毒、抗HIV、改善免疫系统功能以及抵抗肿瘤等方面具有显著的生物学活性。因此,本文结合近年来相关文献,就灰树花多糖的生物学活性作一综述,以期为灰树花多糖进一步的开发利用提供参考。
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P120连环蛋白与 Kaiso 信号调控血管内皮细胞功能的研究进展
内皮细胞形态学与功能上的改变在血管疾病的发生中发挥了非常重要的作用,其中 P120钙黏蛋白(P120ctn)和Kaiso 对血管内皮的影响正受到日益广泛的关注。 P120ctn是犰狳蛋白(armadillo)的原型蛋白体之一,可表达在细胞间的连接处和细胞核中,其在调节钙黏蛋白转归、Rho 信号转导、调控细胞核转录、维持细胞极性中发挥着重要作用,并对脊椎动物胚胎发育和肿瘤生成有重要的影响[1]。 Kaiso 是BTB -POZ -zine finger 蛋白家族的一员,依据其结构及功能上的特点,Kaiso 蛋白存在着核浆穿梭现象,参与细胞内许多重要生物学活性的调节[2]。 现就 P120ctn、Kaiso 对血管内皮细胞功能的影响、调节方式及其与脑血管病关系的研究进展进行综述。
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凋亡抑制蛋白在胶质瘤治疗中的应用研究进展
作为细胞内细胞凋亡抑制作用强的蛋白质家族之一,凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis proteins,IAPs)被认为参与了肿瘤的发生发展,并在肿瘤抵抗放化疗过程中扮演重要角色.因此,在肿瘤的联合治疗策略中,抑制IAPs基因表达或IAPs在细胞中的生物学活性将具有广阔的应用前景.本文就IAPs在胶质瘤治疗中的应用研究进展作一综述.
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转化生长因子β的活化调节
转化生长因子β(TGF-βs)是一类具有双向调节功能的生长因子,参与了多种疾病的发生与发展,在调节细胞的生长和分化中起重要作用.TGF-β以无活性pro-TGF-β形式产生,需活化才具生物学活性.其活化主要涉及两步.第一步:pro-TGF-β经过一系列复杂的加工形成latent TGF-β,此过程主要涉及到弗林蛋白酶(Furin)对pro-TGF-β的加工催化,以及Emilinl的负向调节.第二步:latent TGF-β在血小板反应素-1(TSP-1)等蛋白作用下裂解释放活性TGF-β二聚体,此过程受到HSP90β负向调节.进一步了解TGF-β的活化机制有利于从分子水平上开辟新的研究方向及TGF-β的生物学应用.
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细胞实验检测蓖麻蚕蛹生物反应器表达的重组人表皮生长因子的生物学活性
目的 探讨蓖麻蚕蛹生物反应器中分离纯化获得的重组人表皮生长因子(rhEGF)蛋白质的生物学活性.方法 采用Tricine-SDS-PAGE和免疫印迹法(Western blot)鉴定rhEGF,通过MTT和台盼蓝法检测rhEGF的细胞活性.结果 Tricine-SDS-PAGE、Western blot结果显示,蓖麻蚕蛹中分离纯化获得的rhEGF具有正确的分子量和免疫原性;MTT法显示,纯化的rhEGF具有酶促活性,且酶促活性优于rhEGF标准蛋白(P<0.05),其高活性浓度为1.0 μg/L,在0.0625~1.0 μg/L浓度范围内具有剂量依赖性;rhEGF能够促进Balb/c3T3细胞的分裂增殖,效果优于rhEGF标准蛋白(P<0.05).结论 AnpehEGF感染的蓖麻蚕蛹中分离纯化获得的rhEGF,具有类似天然hEGF的生物学活性,且效果优于rhEGF标准蛋白;rhEGF的细胞实验为进一步的动物实验提供了基础.
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一氧化氮及其合酶在鼻组织中的表达
一氧化氮(nitric oxide,NO)是一种复杂的生物学活性的小分子物质,是生物体内重要的信使分子和效应分子,参与体内众多的生理病理过程.游离的NO主要产生于鼻腔[1],鼻腔NO有多种调节功能.
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一氧化氮与男性不育关系的研究进展
前言:一氧化氮(Nitric Oxide,NO)是一种具有广泛生物学活性的信使分子和毒性分子.在生殖的不同阶段进行调节.
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低分子肝素钙在心血管疾病中的临床应用概况
低分子肝素钙(LMWH)是由普通肝素通过解聚和分离所得的低分子肝素片段,具有肝素的特点,其抗凝作用强.目前已广泛应用于心血管疾病中的临床使用,本文就低分子肝素钙的生物学活性以及在心血管疾病中的作用机制及临床应用综述如下.