首页 > 文献资料
-
利用BALB/c3T3细胞毒性预测急性经口毒性初试剂量的验证研究
目的 依据经济合作与发展组织(OECD)2010年7月正式发布的导则No.129来验证“利用BALB/c 3T3成纤维细胞预测急性经口毒性试验初始剂量”在国内实验室的可行性和适用性,并为建立细胞毒性试验预测急性经口毒性试验初始剂量试验的操作规程提供方法学上的依据.方法 将BALB/c 3T3细胞接种于96孔板中,培养ld后染毒.染毒2d后,用中性红染色3h后解吸,于540 nm下用酶标仪测定吸光度(A)值.将原始数据进行处理和拟合分析,得到IC50(抑制细胞活性50%的化学品浓度)后,代入预测模型计算,得到急性经口毒性的LD50推测值.试验所用受试物共8种,分别为二甲基亚砜,乙醇,氯化钠、葡萄糖以及4种本实验室用于大鼠急性经口毒性评价试验的样品.结果 根据国内现行的毒性分级标准可知,利用细胞毒性试验得出的受试物的LD50值与文献所报道的或本实验进行的急性经口试验得到LD50值的毒性分级基本一致.结论 利用BALB/c 3T3细胞毒性试验可以较为准确的判断急性经口毒性试验的初始剂量.
-
星座药理学与中药研究
星座药理学是一种基于细胞表型的高内涵药物筛选新方法,该方法主要根据关键信号蛋白、特定表型的细胞群,将多种药物在这些细胞上的作用情况整合成具有特定药理调节功能的药物组合和细胞星座,强调这些细胞之间能进行病理、生理功能上的有机组合与整体联系.基于不同分子靶点的药物组合,进行特定的药理调控,形成药理意义上的星座效应.星座药理学的运用可提高整体疗效、减少不良反应及药物的耐受性.星座药理学适合中药等复杂成分群在细胞水平进行活性筛选与功能评价,在中药新药研究方面具有较大的灵活性与创新活力,因而对于创新中药研究与开发具有积极的推动作用.
-
白藜芦醇对结肠癌SW480细胞增殖及MsrA、CXCR4和MMP-13表达的影响
在许多植物(例虎杖,葡萄等)中都发现有白藜芦醇(Resveratrol,Res),近对它抗癌作用的研究比较多[1].Res可以抑制癌细胞增殖,并抑制癌细胞转移与侵袭,这在以往的体外培养细胞实验已经得到证实[2],但有关Res抑制结肠癌SW480细胞增殖与转移的报道较少,其抗肿瘤的确切机制亦不清楚.本实验通过研究Res对结肠癌SW480细胞增殖及MsrA、CXCR4和MMP-13表达的影向,为Res今后在临床中的应用提供理论依据.
-
西地那非逆转大鼠肺动脉高压的机制研究
目的:探讨西地那非逆转野百合碱所诱导的大鼠肺动脉高压的机制。
方法:选取SD大鼠24只,计算右心室肥厚指数,通过肺组织HE染色计算大鼠肺微细动脉肌化程度,并计算相对中膜厚度,应用RT-PCR技术检测各组肺组织中Cx40、BMPR2、Id mRNA表达变化,应用Western blot技术检测各组肺组织中Cx40、p-Smad1/5、BMPR2蛋白表达变化,在细胞实验中通过CCK-8实验观察细胞增殖情况。 -
以高效能的蛋白质体学方式进行口腔鳞状上皮癌的标记蛋白质辩识及确认
口腔癌在亚洲地区属于高发生率的癌症疾病,而口腔鳞状上皮癌又是其中主要的癌症类型.临床上针对此癌症之治疗还是以手术为主.对于口腔鳞状上皮癌发生机制的研究有助于临床上新疗法的开发.以蛋白质二度空间电泳分析方式找出癌细胞的异常表现蛋白质,并以之作为标的进行细胞实验,以确认该异常蛋白质的表现与口腔鳞状上皮癌发生之相关性.据此结果进行SiRNA干扰实验,进而进行裸鼠动物实验以确认此方法对口腔鳞状上皮癌的治疗效果.结果显示,此治疗方式在动物实验上有明确疗效.
-
血管紧张素1-7与2型糖尿病
血管紧张素1—7( Ang1—7)作为肾素—血管紧张素系统( RAs)的一个重要的终末活性产物,近年来倍受关注。多项细胞实验、动物实验及临床实验证实,Ang1—7通过与Mas受体结合发挥着改善胰岛素抵抗、保护胰岛β细胞功能、延缓2型糖尿病慢性并发症发生和发展的作用。其机制可能是影响血流动力学、胰岛素信号通路、氧化应激、纤维化以及β细胞增殖与凋亡。以往研究证实RAs中的主要活性成分血管紧张素Ⅱ具有损伤胰岛功能、增加胰岛素抵抗、促进糖尿病发生发展的作用。近研究发现Ang1—7通过与Mas受体结合,拮抗AngⅡ,起到延缓2型糖尿病及其并发症发生和发展的作用。本文就近国内外有关Ang1—7与2型糖尿病及其慢性并发症相关研究作一总结,综述如下。
-
α-硫辛酸与维生素C和维生素E的抗氧化作用比较
维生素C和维生素E以及α-硫辛酸是三种重要的维生素类物质,必须由食物供给[1-3].20世纪初,维生素C防治坏血病成为光辉的一页;20世纪中叶,维生素E又成为防癌抗衰老的新秀;近年来发现α-硫辛酸也具有许多重要生理作用[4-8];但它们三者的共同特点是都具有很强的抗氧化活性.虽然它们的抗氧化途径各不相同,抗氧化效果也有很大差别,却都能有效清除体内自由基对细胞的毒性作用,从而起到保护细胞的作用.本研究是从它们提高细胞抗氧化能力和协助细胞从氧化损伤状态下恢复这两个方面来研究,旨在为进一步探讨三种物质的抗氧化机制奠定基础,也为一些需要长时间暴露在环境空气中进行的细胞实验积累有益资料,并为需要在高氧环境下进行的临床治疗研究提供参考数据.
-
补肾健脾活血方含药血清提高过表达Sost转染成骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性
背景:有研究发现中药可以通过Wnt/β-catenin 信号通路影响成骨细胞,而Sost是Wnt信号通路的抑制因子和骨形成中的抑制蛋白,也是一种调控骨分化的拮抗因子,可调控成骨细胞的分化和增殖.补肾健脾活血方是广州中医药大学附属骨伤科医院临床防治骨质疏松症的经验方,对骨形成有促进作用,治疗骨质疏松症疗效显著.目的:应用补肾健脾活血方含药血清干预过表达骨硬化蛋白 Sclerostin(Sost)重组腺病毒转染的成骨细胞,观察其对细胞增殖、碱性磷酸酶活性和相关蛋白的影响.方法:将培养好的成骨细胞分为空白对照组、过表达Sost组(Ad-Sost组)2组,空白对照组给予空载腺病毒转染,Ad-Sost组予过表达Sost重组腺病毒转染,两组分别给予空白血清和含药血清干预,采用CCK-8检测细胞增殖、碱性磷酸酶试剂盒检测碱性磷酸酶活性,Western Blot检测骨调节蛋白表达情况.结果与结论:①与空白血清干预比较,两组含药血清在24,48,72 h均可以提高细胞活性(P均< 0.01);②与空白血清干预比较,两组含药血清均可以提高碱性磷酸酶活性(P < 0.01);③与空白血清干预比较,空白对照组含药血清可以降低低密度脂蛋白受体相关蛋白5、骨保护蛋白的表达(P均< 0.01),对骨桥蛋白、肿瘤坏死因子α蛋白的表达无明显影响,Ad-Sost组含药血清也可以降低低密度脂蛋白受体相关蛋白5、骨保护蛋白、骨桥蛋白蛋白的表达(P均< 0.01),提高肿瘤坏死因子α蛋白的表达(P < 0.01);④结果说明,补肾健脾活血方含药血清可以提高过表达Sost转染成骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性,影响低密度脂蛋白受体相关蛋白5、骨保护蛋白、骨桥蛋白和肿瘤坏死因子α蛋白的表达.
-
姜黄素联合热疗对Hep-2细胞凋亡及细胞周期的影响
近年来,生命科学家把发现新型低毒高效和高特异性抗肿瘤药物做为研究的重要方向,尤其是调节细胞增殖周期和诱导肿瘤细胞凋亡倍受关注[1],新近的细胞实验和动物实验均证明姜黄素具有确切的抗肿瘤活性,且抗癌谱较广.本研究以Hep-2细胞为靶点,观察姜黄素联合热疗对Hep-2细胞周期进程及凋亡率变化.旨在为人喉癌治疗提供理论依据.
-
采用PCR-SSP方法对1例cisAB血型的鉴定
ABO血型系统的准确定型是输血安全的重要保障,在临床输血治疗的实践中,会遇到ABO血型系统的血型血清学细胞实验和血清实验结果不一致的情况,造成这种正反定型不符的原因之一是ABO血型系统的亚型,虽然ABO血型系统的亚型比较少见,但它确能严重影响输血的安全性和有效性,给临床输血的血型鉴定和交叉配血工作带来困难.
-
根管封闭剂生物安全性评价方法及其应用的研究进展
根管封闭剂临床应用前应进行生物安全性评价,客观检验和评价根管封闭剂的生物安全性、选择生物相容性高的材料应用于临床一直是牙体牙髓病学领域的研究热点。本文对根管封闭剂生物安全评价的必要性及其常用实验细胞和实验方法进行综述。
-
柴胡解毒汤对人肝星状细胞LX-2增殖及凋亡的影响
目的:观察柴胡解毒汤含药血清对人肝星状细胞LX-2增殖、凋亡情况的影响,探究其抗肝纤维化作用的可能机制.方法:将Wistar大鼠分为实验组与对照组,分别以柴胡解毒汤、生理盐水灌胃5天后取血制备大鼠含药血清与正常血清.同时复苏人肝星状细胞LX-2后进行细胞培养和细胞传代.当肝星状细胞数量达到预定值时,将肝星状细胞分为对照组和药物组.观察LX-2细胞在与含药血清孵育24 h、36h、48 h、72 h后,用CCK-8比色法测定细胞的增殖抑制率.用流式细胞术(Annexin V-FITC,PI染色法)检测细胞凋亡的概况.结果:柴胡解毒汤含药血清在给药24h后可抑制LX-2细胞的增殖,36h、48h、72 h的增殖抑制率分别为0.37%、0.46%、0.44%,并可诱导LX-2细胞发生凋亡,48 h、72 h凋亡概率分别为(9.80±0.95)%、(36.40±5.09)%,差异具有统计学意义(P<0.05).结论:柴胡解毒汤具有抑制LX-2细胞增殖、诱导LX-2细胞发生凋亡的能力,这可能是柴胡解毒汤抗纤维化作用的机制之一.
-
培养细胞电镜样品制备方法
随着细胞生物学的发展,大量培养细胞实验取代了动物实验.由于培养细胞体积小而且数量少,给电镜样品制备带来一定的难度.细胞培养的方法一般分悬液式和贴壁式两种.根据观察目的及细胞培养方式的不同,培养细胞的电镜样品制备也可分成不同的几种方法.
-
叶黄素在眼科疾病中作用和机制的实验性研究进展
叶黄素可清除单氧基团和过氧化自由基,对视网膜的保护机制主要体现为滤过蓝光和抗氧化损伤.叶黄素在多种眼科疾病中的预防及治疗作用虽被临床证明有效,但其机制尚未完全明确,有待临床与基础研究探索.文章对叶黄素在眼科疾病中作用和机制的实验性研究进展进行综述,主要介绍常见眼科疾病动物模型中和眼科相关细胞中叶黄素的研究.
-
检测肿瘤增殖的显像剂18 F-FLT
用放射性核素标记胸腺嘧啶脱氧核苷(TdR)来检测细胞增殖常用于生命科学各个领域.3H-TdR已应用了40多年,但其半衰期太长(t1/2=12.4年),仅用于细胞实验而不能用于人活体检查.1972年人们尝试用11 C标记TdR[1,2],但其合成困难,在体内不稳定,给药后5~10min,80%以上的11 C-TdR在血液中分解;11C半衰期短(t1/2=20min),在体内衰减太快,一直无法用于临床.目前,用18 F标记的氟胸腺嘧啶核苷(FLT)取代了11 C_TdR[3,4].18 F的半衰期为110 min,不会迅速衰减,用于患者的PET显像可一次完成,且18 F-FLT化学性质稳定,在体内不会很快分解,能用于检测细胞增殖.另外,10年前人们发现FLT具有抗病毒作用,建议用于治疗人类免疫缺陷病毒(HIV)阳性患者[5].
-
CAY10404靶向干预Wnt/β-catenin信号通路对多发性骨髓瘤干细胞清除作用的研究
Wnt信号被认为是多发性骨髓瘤(MM)致癌作用的一个重要角色.为了观察Wnt/β-catenin信号通路在多发性骨髓瘤特别是多发性骨髓瘤干细胞中的表达及Wnt/β-catenin信号通路抑制剂CAY10404对多发性骨髓瘤的治疗作用,对13个多发性骨髓瘤患者的骨髓样本和多发性骨髓瘤细胞株中的Wnt/β-catenin相关基因的表达情况进行分析和运用Western-blot方法分析β-catenin蛋白在多发性骨髓瘤不同细胞亚群中的表达及COX2抑制剂CAY10404对β-catenin蛋白表达的抑制,通过体内外试验观察CAY1040对多发性骨髓瘤不同细胞亚群的增殖抑制作用.结果显示Wnt/β-catenin信号通路在多发性骨髓瘤病人样本CD138-/CD19+干细胞亚群中比CD138+细胞亚群表达显著增高(P<0.05);体内外试验显示CAY10404明显抑制多发性骨髓瘤干细胞亚群的增殖(P<0.05).该研究通过靶向干预Wnt/β-catenin信号通路,对治疗多发性骨髓瘤尤其是多发性骨髓瘤干细胞进行了探索.
-
厉有名教授团队发现脂肪肝防治新靶点
2015年6月,肝脏病领域国际权威期刊《肝病学杂志》( Journal of Hepatology)正式发表了浙江大学医学院附属第一医院厉有名教授团队的新研究论文“Xanthine oxidase in nonalcoholic fatty liver disease and hyperuricemia:One stone hits two birds”(http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0168827815000501)。该论文在阐明脂肪肝与高尿酸血症相互关系的基础上,进一步通过细胞实验和小鼠实验,首次证实了尿酸合成限速酶--黄嘌呤氧化酶( xanthine oxidase )是调节脂肪肝的关键分子,揭示了脂肪肝发病新机制。
-
菌尿对IQ-200尿液分析仪测定尿红细胞的影响
尿红细胞检测是诊断泌尿系统疾病、特别是肾脏疾病的重要实验指标之一.随着IQ-200全自动尿液分析仪的问世,给尿常规检测带来了方便,但是临床常见的菌尿是否会造成尿红细胞实验结果的偏偏差,不同的菌种具体的影响情况如何,本实验对此进行了研究.
-
Nacl溶液、平衡盐溶液和磷酸盐缓冲液的细胞毒性研究
药物进入临床前在进行毒理学研究时需要通过细胞实验和动物实验找到药物低有效浓度和药物高安全浓度,因此,需要一种液体对药物进行浓度梯度稀释,而稀释液的成分将直接影响实验结果.同时,针对用药方式和用药部位的不同应选取不同的稀释液,当研究一种用于眼部直接给药的新药时,需要根据眼部特殊的生理需求进行实验设计,只有这样才能得到切实有效的结果.
-
单一食物不抗癌
我们经常会看到各种关于食物抗癌的说法,如大蒜抗癌、蓝莓抗癌、菜花抗癌、绿茶抗癌等,真的存在能抗癌的食物吗?想要验证某种食物是否可能抗癌,直接的实验方法就是用该食物或者它所含的某种成分对癌细胞进行处理,观察癌细胞的反应,科学家将其称为“细胞实验”.目前,有不少研究表明,很多所谓的抗癌食物的确含有一些特殊的、有益健康的成分,比如,蔬菜及水果中的维生素、矿物质、花青素、类黄酮等抗氧化成分.