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外源性肝再生增强因子重组质粒在大鼠肝组织中的表达研究
目的 研究外源性肝再生增强因子(ALR)重组质粒在免疫性肝纤维化大鼠肝组织中的表达情况.方法 猪血清腹腔注射制备免疫性肝纤维化大鼠模型,pcDNA3-ALR重组质粒静脉注射对其进行干预,通过免疫组化、Western bolting检测大鼠肝组织ALR蛋白质的表达情况,通过RT-PCR检测ALR mRNA的表达情况.结果 所有组的大鼠肝组织均有ALR蛋白的表达,其中,以正常组表达弱,ALR处理组表达强.图像分析细胞染色密度,正常对照组与模型组的结果分别为(0.109±0.01)和(0.159±0.02),二者相比差异有显著性(P＜0.01);ALR处理组为(0.198±0.04),与模型组相比差异也有显著性(P＜0.01).Western bloting测定肝组织ALR的表达的结果与免疫组化相似.ALR mRNA在各组大鼠肝组织的表达:pcDNA3-ALR处理组在约550bp处出现了用特定引物扩增的特异基因条带,此条带与直接从大肠杆菌中制备的pcDNA3-ALR重组质粒的扩增条带相同.正常对照组和模型组未出现用特定引物扩增的条带.结论 ALR在正常大鼠肝组织的表达较低,在免疫损伤后的肝组织的表达明显增强.ALR重组质粒可在免疫性肝纤维化大鼠肝组织中发生表达,pcDNA3-ALR重组质粒处理组ALR蛋白表达明显增强是由于外源性ALR与内源性ALR表达"叠加"的结果.
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锌缺乏及补锌对小鼠胚胎HOX3.5基因表达的影响
为研究锌缺乏及补锌对小鼠胚胎HOX3.5基因表达的影响,将昆明种雌性小鼠随机分为缺锌组(ZD)、缺锌后补锌组(ZR)和常锌对照组(ZN).ZD组及ZR组喂饲含锌量为(3.0±0.5)mg/kg的缺锌饲料,但ZR组小鼠从孕第7天开始改喂含锌量为30mg/kg 的常锌饲料.ZN组小鼠一直食用常锌饲料.经25天喂养后,与同系成年雄鼠交配.于妊娠第12天时处死动物,并立刻剖腹取出胎鼠.用地高辛标记的探针,采用原位杂交方法检测小鼠胚胎HOXC4(3.5)基因mRNA在鼠胚冰冻切片上的表达量.结果发现:ZD、ZR组HOX3.5基因阳性表达的面密度及其平均光密度明显低于ZN组(P<0.05).提示:锌缺乏时可导致HOX3.5基因表达量下降,这种调控作用乃发生在胚胎发育的早期,从孕早期(孕7天)开始补锌仍无法纠正.
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长期酒精摄入对大鼠骨骼肌组织IR、IRS-1和PI-3K基因表达的影响
目的 研究酒精长期作用下对大鼠骨骼肌胰岛素受体(IR)、胰岛素受体底物-1(IRS-1)、磷脂酰肌醇3-激酶p85亚单位(PI-3K)mRNA表达的影响,探讨酒精与胰岛素抵抗的关系及相关分子机制. 方法 清洁级Wistar大鼠80只(雌雄各半),按体重随机分为对照组和低、中、高剂量组,分别给予蒸馏水以及10%、20%和33%酒精溶液,灌胃剂量为每天10 ml/kg bw.第19周末,断头处死大鼠,测定空腹血糖和血胰岛素,计算HOMA胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).提取骨骼肌总RNA,通过RT-PCR测定IR、IRS-1、PI-3K(p85)mRNA表达水平. 结果 雄性大鼠,与对照组比较高剂量组空腹血糖,低、中剂量组空腹胰岛素水平升高,各酒精剂量组HOMA-IR指数均升高.IR mRNA的表达在中、高剂量组降低,而IRS-1、PI-3K(p85)mRNA表达水平表现为随着酒精剂量的增加先升高后降低,与对照组比较差异有显著性(P＜O.05);与对照组比较,雌性大鼠高剂量组空腹血糖升高、空腹血胰岛素下降,IR、IRS-1、PI-3K(p85)mRNA的表达在中、高剂量组降低(P＜0.05).各剂量组HOMA-IR指数与对照组比较差异无显著性. 结论 长期摄入过量酒精可以造成骨骼肌组织IR、IRS-1、PI-3K(p85)mRNA表达的降低,这可能是酒精降低胰岛素敏感性,引起胰岛素抵抗的分子机制.
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镉诱导LLC-PK1细胞凋亡与bcl-2、p53蛋白表达关系的研究
目的 探讨镉诱导LLC-PK1细胞凋亡及与bcl-2、p53(mtp53)蛋白表达的相互关系.方法采用透射电镜观察凋亡小体、流式细胞仪分析凋亡率、琼脂糖凝胶DNA 电泳方法确定镉对 LLC-PK1细胞诱导的凋亡作用,以及流式细胞仪分别测定bcl-2和p53基因表达产物bcl-2蛋白、mtp53蛋白.结果透射电镜观察发现40μmol/L CdCl2作用LLC-PK1细胞12h后,出现典型的凋亡小体;流式细胞仪分析其凋亡率为32.61%,并高于对照组(1.08%)(P<0.01);琼脂糖凝胶DNA电泳呈明显梯形条带.0、10、20、40μmol/L CdCl2作用LLC-PK1细胞4h、8h,8h后,bcl-2基因表达逐渐下降,并呈良好的剂量-反应关系(r=-0.910, P<0.05);作用4h、8h 后mtp53蛋白表达均明显下降,并有剂量-反应关系(r值分别为-0.716、-0.972, P值均<0.05).结论镉诱导LLC-PK1细胞凋亡可能与镉抑制bcl-2、mtp53蛋白表达有关.
关键词： 镉 LLC-PK1细胞凋亡 基因表达 bcl-2和mtp53蛋白 肾 -
邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯对大鼠睾丸发育及StAR、CYP19a1、CYPlla1基因表达的影响
目的 通过邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)28天短期重复暴露,探讨DEHP对雄性大鼠生殖系统发育的影响及其作用机制.方法 40只7-9周龄雄性Wistar大鼠分为对照组(灌胃玉米油)和低、中、高剂量染毒组(每天灌胃DEHP 10、100和1000mg/kg),每组10只,动态观察动物一般状况、体重变化.28天后断头处死大鼠,测定睾丸组织脏器系数;对睾丸和附睾进行病理学观察.提取睾丸组织的总RNA.逆转录合成Cdna,通过PCR扩增产物比较DEHP不同剂量染毒对StAR、CYP19a1和CYP11a1基因表达的影响.结果 随着DEHP剂量增加,大鼠体重增长受限(F=3.54,P<0.05);睾丸重量及其脏器系数降低,且高剂量组与对照组相比差异有显著性(F=105.545,P<0.05);DEHP可使大鼠睾丸和附睾组织结构发生病理性改变,在中、高剂量组尤为明显;RT-PCR检测表明,与对照组相比,CYP19a1及CYP11a1基因表达降低,而StAR基因表达在各组间差异无显著性.结论 DEHP对青春期雄性大鼠的生殖系统发育具有明显的毒性作用,导致睾丸重量降低,发育不全.DEHP及其代谢产物可能通过影响CYP19a1和CYP11a1等芳香化酶的基因表达,干扰内分泌平衡而使青春前期雄性大鼠产生生殖系统的发育障碍.
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肺癌组织中CTGF和WISP-1基因表达的研究
目的 研究肺癌中CTGF和WISP-1基因表达与临床病理因素的关系.方法 采用RT-PCR和免疫组化染色法对60名肺癌患者的癌组织和癌旁正常肺组织中CTGF和WISP-1表达水平进行测定.结果 65%(39/60)的肺癌组织CTGF基因表达水平低于癌旁正常肺组织(t=-1.59,P=0.016);83%(50/60)的肺癌组织WISP-1基因表达水平高于癌旁正常肺组织(t=4.15,P=0.000),此结果得到免疫组化的证实.Pearson相关分析:WISP-1和CTGF基因的表达呈显著负相关(r=-0.299;P=0.020).多元线性回归分析:肿瘤位置和性别对癌组织CTGF基因表达有重要影响;病理类型、年龄和家族史对WISP-1基因表达有影响.结论 CTGF和WISP-1基因中单个基因或两个基因相互作用对肺癌的进展均起重要作用及其与临床病理因素的关系.
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铬对糖尿病大鼠骨骼肌组织基因表达的调控作用
目的研究铬对糖尿病大鼠代谢相关基因表达的调控作用.方法雄性Wistar大鼠随机分成3组:正常对照组、糖尿病对照组、糖尿病补铬组.糖尿病补铬组每日以200μg/kg bw的铬连续灌胃60天.采用mRNA差异显示技术、基因片段的克隆、测序、同源性分析等观察各组大鼠之间骨骼肌中基因表达的变化.结果分离到糖尿病补铬组与糖尿病对照组之间出现明显差异的400bp以上的cDNA片段11条,其中在糖尿病补铬组中高表达的cDNA片段4条;在糖尿病对照组中高表达的cDNA片段7条.同源性比较结果显示Cr-3与GLUT4(葡萄糖转运体4)的同源性为98%;Cr-5与IRS-1(胰岛素受体底物-1)的同源性为100%,RT-PCR验证结果显示GLUT4表达量在糖尿病补铬组高于糖尿病对照组.结论铬可诱导糖尿病大鼠骨骼肌中GLUT4 mRMA的表达,这可能是铬改善糖尿病糖、脂代谢紊乱的分子机制之一.
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硒和砷对HepG2细胞氧化应激和DNA氧化损伤及修复的作用
目的 研究硒和砷单独及联合作用对HepG2细胞氧化应激和DNA氧化损伤及修复的影响.方法 采用不同浓度的硒(2.5、5.0和10.0μmol/L亚硒酸钠)和砷(1.56、3.13、6.25、12.5和25.0μmol/L亚砷酸)为受试物单独或联合处理HepG2细胞.荧光法测定丙二醛(MDA)作为氧化应激的指标,高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-EC)测定8-羟基鸟苷(8-OHdG)作为DNA氧化损伤的指标,Western Blot检测hOGG1表达作为DNA氧化损伤修复的指标.结果 在硒和砷单独作用的条件下.可观察到:(1)5.0、10.0μmol/L的亚硒酸钠和6.25、12.5、25.0μmol/L的亚砷酸均引起HepG2细胞MDA含量增加、8-OHdG生成增多、hOGG1表达明显下降(P＜0.05,P＜0.01);(2)较低浓度的亚硒酸钠(2.5μmol/L)具有有限的抑制8-OHdG生成的作用(P＞0.05).在硒和砷联合作用的条件下,可观察到:(1)2.5μmol/L的亚硒酸钠和6.25μmol/L的亚砷酸同时染毒使MDA含量和8-OHdG的生成均较相应砷剂量组下降(P＜0.05);(2)2.5μmol/L的亚硒酸钠与6.25、12.5和25.0μmol/L的亚砷酸同时染毒,hOGG1表达与相应砷剂量组比较没有明显差异(P＞0.05).结论 5.0、10.0μmol/L的亚硒酸钠和6.25、12.5、25.0μmol/L的亚砷酸均可引起HepG2细胞氧化应激增强、8-OHdG生成增多、hOGG1表达明显下降;一定剂量的硒(2.5μmol/L的亚硒酸钠)对砷诱导的HepG2细胞氧化应激和DNA氧化损伤具有抑制作用,但对砷所致的DNA氧化损伤修复不产生明显影响.
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金雀异黄素诱导人乳腺癌细胞凋亡作用机制研究
目的探讨金雀异黄素对体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响及作用机制.方法采用MMT法、凋亡细胞的荧光显微镜、电镜观察和流式细胞仪的检测,观察了不同剂量的金雀异黄素诱导细胞凋亡.同时采用免疫组化法检测凋亡相关基因Bax和癌基因erbB-2蛋白的表达.结果通过荧光显微镜和电镜技术观察到凋亡的MCF-7细胞.流式细胞仪也检测到了金雀异黄素诱导MCF-7细胞产生凋亡,并随着金雀异黄素浓度的增加,细胞凋亡率显著增加.蛋白水平检测表明金雀异黄素促进MCF-7细胞Bax表达升高,抑制erbB-2表达.结论金雀异黄素可诱导MCF-7细胞凋亡,并主要是通过调节Bax和erbB-2蛋白表达实现的.
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苯乙基异硫氰酸盐对小鼠胚胎干细胞分化为神经细胞过程中基因表达影响的研究
目的 探讨苯乙基异硫氰酸盐(PEITC)对小鼠胚胎干细胞(mESCs)体外定向诱导分化为神经样细胞中PKCα及其相关发育基因(pax-6、netrin-1)表达的影响.方法 mESCs经RA法诱导后,第7天用RT-PCR法检测nestin、glutminase、Brn-3基因等神经细胞特异性标志物.不同浓度PEITC作用条件下,分别取诱导后1、3、5、7及14天后的细胞,用RT-PCR方法曩4定细胞的PKCα及其相关发育基因pax-6争netrin-1的mRNA表达情况.结果 诱导后第7天,分化的神经样细胞中nestin、glutaminase、Bin-3基因均高表达.正常诱导1天后,PKCα、pax-6和netrin-1基因的mRNA表达急剧下降,3、5、7天逐渐升高,至14天恢复至正常水平.PEITC作用下,PKCα、pax-6、netrin-1的mRNA在诱导后细胞中各阶段的表达水平与正常诱导条件下相比均下降,且随着作用浓度和作用时间的增加,下降趋势明显.结论 PEITc对mESCs定向分化为神经样细胞过程中相关发育基因(pax-6、netrin-1)的表达的干扰作用可能与抑制PKCα的表达有关.
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维生素A对小鼠胚胎Hox3.5基因表达的影响
为观察维生素A(VA)缺乏及再补充对小鼠胚胎HoxC4(3.5)基因表达的影响,将初断乳的60只昆明种雌鼠随机分为4组:正常对照组(N)饲含VA 4 000IU/kg饲料,其他3组(A、B、C组)在交配前饲缺乏VA饲料,B和C组分别在妊娠的第0和7天饲含VA 10 000IU/kg的饲料,A组饲料不变.30只雄鼠饲以普通饲料,在饲养的第16周按雌:雄=2:1合笼交配.在妊娠第12天脱颈椎处死雌鼠,立即剖腹取出胎鼠,置于液氮中速冻后于-70℃冰箱保存.用地高辛标记的探针,采用原位杂交方法探测小鼠胚胎HoxC4(3.5)基因mRNA含量.结果显示,A组mRNA的含量明显减少;B组mRNA含量与N组无差异;C组mRNA含量虽比A组增加,但仍低于N组.结果提示,VA可能通过调控Hox基因的表达来影响胚胎发育.
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饮食诱导肥胖易感和肥胖抵抗大鼠HSL和LPL基因表达的研究
目的 探讨高脂饮食诱导肥胖易感(OP)大鼠和肥胖抵抗(OR)大鼠,激素敏感性脂肪酶(HSL)和脂蛋白脂肪酶(LPL)基因表达的差别.方法 健康雄性SD大鼠80只,高脂饲料喂饲5周后,筛选出OP大鼠和OR大鼠,再将所有大鼠转为基础饲料喂饲10周后,处死动物,收集血清和白色脂肪组织,应用RT-PCR方法比较白色脂肪组织HSL和LPL基因的表达.结果 高脂饲料喂饲5周后,OP大鼠白色脂肪组织HSL基因表达显著低于OR大鼠,而LPL基因表达显著高于OR大鼠;而转成基础饲料喂饲10后,OP大鼠HSL基因表达与OR大鼠无显著差异,但LPL基因表达仍显著高于OR大鼠.结论 HSL基因表达水平下降和LPL基因表达水平升高,通过抑制脂肪分解促进脂肪合成,导致高脂饮食诱导肥胖易感大鼠的形成.HSL基因高表达更多是由高脂饮食诱导产生的,而LPL基因表达升高才是肥胖大鼠的特征性基因表达改变.
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三价砷甲基转移酶mRNA相对表达与砷甲基化关系的研究
目的 观察三价砷甲基转移酶[As(Ⅲ)MT]mRNA在砷中毒患者、病区对照和非病区对照人群中的表达及其与尿砷甲基化水平的关系.方法 选取饮水型砷中毒中重度患者、轻度患者、病区对照和非病区对照各6例.采用实时定量RT-PCR技术测定研究对象的淋巴细胞中三价砷甲基转移酶AB(Ⅲ)MTmRNA表达,采用原子荧光AFS-9130、形态分析SAP-10检测尿无机砷(iAs)、一甲基肿酸(MMA)、二甲基砷酸(DMA)、总砷(TAs)含量.按PMI=(MMA+DMA)/TAs,SMI=DMA,(MMA+DMA)分别计算一甲基化指数和二甲基化指数.结果 中重度组,轻度组、病区对照组人群iAs、MMA、DMA、Tas、PMI、As(Ⅲ)MT mRNA均显著高于非病区对照人群(P＜0.05);As(Ⅲ)MT mRNA分别与MMA%(r=0.485,P=0.041)和PMI(r=0.476,P=0.046)呈显著正相关.结论 砷暴露可能促进As(Ⅲ)MT mRNA高表达进而引起PMI水平增高导致MMA产生过多.
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灵芝孢子油对免疫低下小鼠免疫调节机制的初步研究
目的 采用免疫功能低下小鼠模型探讨灵芝孢子油免疫调节作用机制.方法 将昆明小鼠随机分成模型对照组、灵芝孢子油组、正常对照组,每组10只；模型对照组、灵芝孢子油组分别腹腔注射40mg·kg-1·-1)环磷酰胺建立免疫功能低下小鼠模型,正常对照组腹腔注射生理盐水(0.9％)0.1ml/10g BW;同时灵芝孢子油组150mg/kg,正常和模型对照组灌胃玉米油0.1ml/10g BW,灌胃1次/A,连续30d;用ELISA试剂盒检测小鼠血清TNF-α、IFN-γ水平,半定量PCR检测小鼠脾脏、胸腺IL-2、IL-10、IL-12、IL-4、IFN-γ、TNF-α基因表达量,初步探讨灵芝孢子油的免疫调节机制.结果 灵芝孢子油明显提高环磷酰胺免疫低下模型小鼠血清中TNF-α、IFN-γ的含量,脾脏和胸腺中IL-2、IL-10、IL-12、IL-4、TNF-α和IFN-γmRNA的表达量,与模型对照组间差异显著(P≤0.05).结论 灵芝孢子油通过增强细胞因子的分泌、表达进行免疫调节.
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铅致原代培养海马神经元凋亡及Bcl-2、Bax、p53和NOS1基因表达的影响
目的 观察铅对原代培养海马神经元的致凋亡作用并初步探讨其机制.方法 原代培养乳大鼠海马神经元,不同浓度的醋酸铅(50、100和200μg/ml)染毒后,Giemsa染色观察铅诱导海马细胞凋亡的形态学改变,流式细胞仪检测铅诱导海马神经元的凋亡率,免疫细胞化学染色观察各浓度组细胞Bcl-2、Bax和p53表达,激光扫描共聚焦显微镜定量分析各浓度组神经元胞浆中游离Ca2+ 的平均荧光强度.结果 Giesma染色观察发现一定浓度醋酸铅作用于海马神经元后出现凋亡的形态学改变,且与剂量相关;流式细胞术检测结果铅浓度分别为50、100、200μg/ml作用细胞24h后,可致海马神经元凋亡率增加,与对照组相比均有统计学意义(P<0.01);免疫细胞化学染色结果表明Bcl-2蛋白表达随染铅剂量增大而减少.染色强度逐渐降低,Bax、p53表达随染铅剂量增大而上调,与对照组相比,细胞积分光密度(IOD)值有统计学意义(P<0.01);激光共聚焦显微镜检测结果显示随着醋酸铅剂量的增大,细胞内液Ca2+浓度也随着增大,醋酸铅3个浓度组的平均荧光强度均显著高于正常对照(P<0.01),并有剂量反应关系.结论 铅可诱导海马神经元不同程度的凋亡,提示细胞内Ca2+ 浓度升高可能与铅致海马神经元损伤和诱导其凋亡有重要关系.推测铅在一定浓度范围内可能影响海马神经元在学习记忆等功能的正常发挥.
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苯中毒患者中抑癌基因p16高甲基化及其表达下调
目的 研究苯是否通过引起DNA甲基化使抑癌基因p16转录失活.方法 应用病例-对照研究对11名苯中毒患者和8名与苯中毒患者年龄(±5岁)、性别匹配,并且同工种同工龄的接苯但无苯中毒的对照进行检测.分别用实时荧光定量PCR及焦磷酸测序检测基因表达及甲基化水平.结果 p16的表达水平在苯中毒组(0.53)低于对照组(2.06) (P =0.064).p16启动子区CpG位点甲基化平均水平苯中毒组(12.4％)高于对照组(1 1.3％)(P＞0.05).甲基化与基因表达水平相关分析发现,p16 CpG位点平均甲基化水平与基因表达水平负相关(pearson相关系数r=-0.64,P＞0.05),其中p16启动子区第4个CpG位点位于嗅神经元转录因子共有结合序列内,其甲基化水平与基因表达水平显著负相关(pearson相关系数r=-0.88,P＜0.05).结论 在苯中毒患者中p16的表达水平显著降低,基因启动子区CpG岛的高甲基化可能与该基因的低表达有关.需要进一步扩大样本量深入研究苯相关疾病抑癌基因表达异常的分子机制.
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冠心病患者血清miRNA表达与糖代谢异常的相关性分析
目的 探讨冠心病患者血清miRNA表达与糖代谢异常的相关性.方法 选取我院心内科收治的45例患者为研究对象,分为对照组、冠心病组和合并组(糖尿病并冠心病),各15例.采用实时定量PCR技术对不同分组患者血清中miR-126及miR-146进行检测,比较三组患者的miR-126及miR-146表达水平.结果 冠心病组及合并组患者较对照组miR-126在体内的表达水平明显较高(P<0.05),miR-146表达水平三组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 冠心病患者血清miRNA表达水平与糖代谢异常的存在一定的相关性,血清miRNA检测可在临床中作为指导糖尿病大血管病变诊断的参考依据.
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大豆异黄酮抑制人乳腺癌细胞生长及作用机制研究
采用体外细胞培养的方法,探讨大豆异黄酮对体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞生长的作用及作用机制.结果表明,大豆异黄酮抑制MCF-7细胞生长,诱导MCF-7细胞凋亡.蛋白水平检测表明大豆异黄酮可使MCF-7细胞iNOS表达升高.结果提示大豆异黄酮抑制MCF-7细胞生长,诱导细胞凋亡,并主要是通过调节iNOS基因表达实现的.
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以含锰超氧化物歧化酶基因表达评价肉鸡对不同形态锰源的生物学利用率
目的 通过两个试验研究确定心肌细胞线粒体中MnSOD的基因表达指标是否能更快、更敏感、更恒定地监测出肉仔鸡对不同形态锰源间生物学利用性的差异.方法试验(一)将546只商品代1日龄AA肉公鸡按4×4两因子安排的完全随机设计分为13个处理组,每组6个重复笼,分别饲喂不添加锰的食用玉米-豆粕型基础饲粮(对照组)或以无机硫酸锰、弱络合强度的蛋氨酸锰E、中等络合强度的复合氨基酸锰B及强络合强度的复合氨基酸锰C形式添加0、60、120、180mg/kg锰的试验饲粮,试验期21天.21日龄每个重复笼选取3只与平均体重相近的鸡屠宰,立即取出心脏、左侧腿跖骨,分析组织锰浓度、心肌细胞线粒体中MnSOD活性及其基因表达.试验(二)将270只商品代1日龄AA肉公鸡随机分为5个处理组,每组6个重复笼,分别饲喂不添加锰的食用玉米-豆粕型基础饲粮(对照组)及分别在对照组饲粮中添加120mg/kg锰的4种锰源试验饲粮.分别于第7、14、21日龄用与试验一相同的方法进行屠宰、组织样品的采集与制备及分析.结果试验(一)中21日龄肉鸡的跖骨灰锰含量、心肌锰含量和心肌细胞线粒体中MnSOD活性均受到饲粮添加锰水平的显著影响(P=0.0001),根据这三项指标与饲粮添加锰进食量的多元线性回归斜率比法进行计算,不同络合强度有机锰源间及有机锰源与无机锰源间均无显著差异,而21日龄肉鸡心肌细胞线粒体中MnSOD mRNA水平受到添加锰源(P<0.10)和锰水平(P=0.0001)的显著影响,以心肌细胞线粒体中MnSOD mRNA水平为评价指标,弱、中等和强络合强度有机锰源相对于硫酸锰(如设为100%)的生物学利用率分别为99%、133%和113%.其中中等络合强度Mn-AA B的相对生物学利用率明显高于硫酸锰和弱、强络合强度有机锰源(P<0.05).试验(二)中饲粮添加中等络合强度Mn-AA B组鸡7日龄时心肌细胞线粒体中MnSOD mRNA水平就明显高于添加硫酸锰组和弱络合强度的Mn-Met E组(P<0.02),且在14日及21日龄恒定高于其它添加锰源组(P<0.05),而跖骨灰锰含量和心肌细胞线粒体中MnSOD活性等指标则明显不如MnSOD基因表达指标敏感.结论饲粮锰在转录水平上显著影响心肌细胞线粒体中MnSOD的基因表达;心肌细胞线粒体中MnSOD mRNA水平早在雏鸡出壳后7天即可比其酶活性等所有其它指标更快、更敏感、更恒定地监测出肉鸡对不同形态锰源间生物学利用性的差异;有机锰源的络合强度与其对肉鸡的生物学利用率间有密切相关,中等络合强度有机锰源的相对生物学利用率明显高;采用基因表达这一功能性指标,可以大大缩短试验期,减少试验动物数量,因而是未来研究锰源对鸡生物学活性的新方法.
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女性宫颈病变组织P16、P53和Ki67的表达与高危HPV感染相关性研究
目的 比较P16、P53和Ki67在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌低年龄和高年龄患者中的表达,并探讨其与高危HPV感染的关系.方法 采用免疫组化染色检测P16、P53和Ki67在低年龄组(18～35岁)94例和高年龄组(36～68岁)200例的基因表达情况,荧光定量检测HPV-DNA.结果 低年龄组和高年龄组中高危HPV感染率比较有显著性差异,有统计学意义(P＜0.05),两组患者中P16、P53和Ki67在高级别鳞状上皮内病变(HSIL)和宫颈癌中的表达无差异,不具有统计学意义(P＞0.05),但在低级别鳞状上皮内病变(LSIL)中的表达差异显著,有统计学意义(P＜0.05);高危HPV患者P16、P53和Ki67的表达随着病变的进展,表达程度有增高的趋势.在高级别鳞状上皮内病变和宫颈癌患者中,随着P16、P53和Ki67的表达强度增加,高危HPV阳性检出率增加(P＜0.05).结论 宫颈病变高危HPV感染患者,P16、P53和Ki67可能对促进宫颈病变发生发展具有协同作用.
