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小鼠成纤维细胞诱导为诱导性多能干细胞的研究
胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)由于具有无限增殖和多向分化的特性[1],因此在再生医学和药物发现与评价等领域极具应用价值[2].但是ESCs细胞在细胞来源、免疫排斥和法律等方面存在诸多限制.诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSC)技术的出现使人们从上述争论中解脱出来[3,4],由于iPSC在干细胞标志物表达、表观遗传学以及分化潜能方面与ESCs细胞极其相似,所以iPSC成为细胞治疗以及组织器官再生有前景的种子细胞.笔者采用慢病毒介导的Oct4、Sox2、c - Myc和Klf4基因诱导小鼠尾部成纤维细胞(TIF)为iPSC,成功诱导并鉴定1株iPSC,为组织工程和再生医学提供了种子细胞.
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表皮干细胞来源、分布及其在创面愈合中的作用
干细胞具有自我更新和高度增殖以及多向分化的潜能.局部特殊的位置或细胞的微环境决定了细胞分化方向的选择.因此,表皮干细胞在生理和病理状况下的分布特点就显得尤为重要.笔者就其一些特征做一综述,为以后的研究奠定基础.
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转化生长因子-β1对肌腱细胞DNA及胶原合成的影响
近年来的研究表明,转化生长因子-β1(TGF-β1)在肌腱的修复中起重要作用[1,2 ].而TGF-β1对细胞增殖分化作用的调节不仅与细胞来源、实验条件及其他生长因子有密切关系,亦与分化程度、细胞基质及其作用时间和剂量等密切相关[3].笔者通过同位素掺入及RT-PCR法观察TGF-β1不同作用剂量对人胚腱细胞DNA及胶原的合成效应,
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同种异体组织工程化软骨组织的免疫学差异
软骨损伤是临床常见疾病之一,需利用软骨或其他替代材料进行修复。目前可施行的多种治疗手段均不甚理想:新鲜异体软骨组织和人工合成组织代用品均存在着组织相容性问题;自体软骨组织移植则必须以牺牲人体正常组织为代价,且供体来源有限,小块移植物还有易变形的问题。20世纪80年代,随着生物材料和细胞生物学的发展,组织工程技术得到迅速发展。Wakitani等[1]于1989年用同种异体软骨细胞组织工程化技术成功修复了兔关节软骨表面缺损。组织工程技术为修复软骨病损提供了一个新思路,如何获取足够量的种子细胞是该技术的关键问题之一。目前可以从两个途径获得软骨细胞:一是自体软骨细胞,二是同种异体软骨细胞。自体软骨细胞在体外增殖、传代过程中易发生功能老化,难以通过少量取材获取大量的软骨细胞。而同种异体软骨细胞来源广泛,一次可获得大量细胞。
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干细胞的分化潜能及其在创伤修复中的应用
干细胞是一类具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的特殊细胞,根据其来源不同可分为胚胎干细胞和成体干细胞两大类.成体干细胞的移植已经在神经系统、造血系统等许多人类疾病的治疗中发挥了重要的作用[1,2].但是,成体干细胞的分化潜能差、细胞来源少以及移植存活率低等不足显著地影响了成体干细胞的临床应用.随着胚胎干细胞研究的深入,尤其是治疗性克隆干细胞技术的成熟,干细胞移植应用的研究将可能会得到新的发展,干细胞移植的应用也将从细胞水平走向器官水平.干细胞技术不仅为许多人类疾病的治疗开启了希望的大门,而且为各种严重创伤的修复开辟了广阔的前景.对于创伤研究工作者来说,关注胚胎干细胞移植的临床应用、重视干细胞定向分化的研究进展,将有可能对创伤修复的研究提供有益的帮助.
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软骨细胞的永生化及其生物学特性
软骨由软骨细胞、胞外基质(胶原纤维、蛋白多糖)及水组成。其中后两者所占比例较大,软骨细胞数量较少,所以从软骨中获得软骨细胞来源有限[1];并且软骨细胞增殖能力低,代谢缓慢,体外培养对密度高度依赖,且为有限增殖,传代到第9代左右,细胞出现老化现象,使传代难以为继。特别是软骨细胞在体外长期培养有去分化的趋势,表型(特别是Ⅱ型胶原)难以保持[2]。上述这些问题,都是软骨细胞库建立及软骨细胞工程必须解决的难题。因此,众多学者一直试图建立一种能够长期培养、表型稳定的永生化软骨细胞。 一、 永生化的定义及意义 所谓“永生化”(immortalization),就是指细胞处于连续的细胞周期而终止其发育进程,通俗一点说就是“使细胞获得了无限的增殖能力”[3]。建立永生化细胞至少具有以下几点优势:①可以在体外研究软骨细胞的分化与生长及增殖之间的关系。②永生化的软骨细胞可以考虑作为软骨细胞工程的细胞库或基因治疗的靶细胞,前者为软骨组织工程提供大量的经过预先处理和优化的软骨细胞,真正做到“组织工程化”;后者则使基因治疗应用于软骨细胞成为可能,因为正常软骨细胞传代、增殖有限的缺点妨碍了基因转染阳性靶细胞的挑选、鉴定及回输。③可以作为药理或毒理研究的标准细胞。④有利于对各项实验结果进行比较,因为各个实验室的软骨细胞来源不同,培养方法各异,传代千差万别,使得实验结果难以比较。
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脂肪间充质干细胞的研究进展及临床展望
1 引言目前干细胞的来源主要有两种,即胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)和成体干细胞(adultste cells,ASC).ESC由于涉及伦理道德及对其分化能力控制等各方面问题,目前各国对ESC研究普遍持谨慎态度;而ASC存在取材困难,获得率低(约1×105骨髓间质细胞方能获取一个间充质干细胞)[1]等不利因素其临床应用前景也明显受到限制.在此情况下,人们从人脂肪组织抽吸物中获得了一种成纤维细胞形态的细胞群[2],具有取材容易,获得率高,自我更新能力与多向分化潜能类似ASC等优势,因而有望成为组织工程和基因工程中新的干细胞来源,并且具有较好的临床应用前景.
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成体干细胞在神经组织工程中的研究及应用
组织工程学的基本原理是应用细胞生物学和工程学的原理,将体外培养扩增后具有生物学活力及特定功能的细胞与支架材料复合,用以修复或改善损伤组织或器官的结构与功能,终形成有活力的正常组织或器官,达到真正意义上的生物学重建[1].干细胞是机体存在的一类特殊细胞,他们的显著的生物学特性是既有自我更新的能力又具有多向分化的潜能,在适当条件下可被诱导分化为不同的细胞和组织.干细胞按其发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞两大类.虽然胚胎干细胞更具有全能性,理论上可生成任何组织,但胚胎干细胞诱导分化的细胞和组织若用于病人的细胞和组织替代性治疗,相当于异体移植,存在免疫排斥的问题,而且胚胎干细胞能否分化为肿瘤样的组织,尚是个未知数[2].而成体干细胞来源广泛,而且不涉及伦理问题,成体干细胞与胚胎干细胞相比更具有优势.本文结合近年来国内外对成体干细胞即骨髓间充质干细胞、神经干细胞等在神经组织工程中的研究,着重对研究的现状及面临的问题和未来发展趋势进行综述.
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人源干细胞分化的肝细胞移植应用于急性肝衰竭动物模型
背景:对于急性肝脏功能衰竭患者来说,肝细胞移植是挽救生命的一种治疗方法.然而,早期供肝细胞来源不足限制了人源肝细胞移植.本研究评估了干细胞分化的肝细胞样细胞在异种移植的急性肝衰动物模型中的疗效.
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20例结外淋巴瘤临床分析
1资料与方法我院自1994年1月-1997年12月共收治淋巴瘤170例,均经病理证实.其中结外淋巴瘤20例,占11.76%.发病年龄为33岁~73岁,中位年龄43.4岁,发病部位:原发于肠道10例(50%),胃3例(15%),乳腺2例(10%),扁桃体、肺、睾丸、腮腺、鼻咽部各1例(5%).20例均为非霍奇金淋巴瘤,其中大无裂B细胞型5例,组织细胞型6例,淋巴细胞消减型5例,T细胞来源2例,淋巴细胞为主型2例.根据体检,辅助检查,剖腹探查证实分型.Ⅰ期8例(40%).Ⅱ期4例(20%).Ⅲ期5例(30%).Ⅳ期3例(10%).并发症:ⅣA2例并发胸腔积液,Ⅲ期3例并发肠梗阻,ⅣB期1例并发白血病.20例中手术切除加化疗或放疗为16例.单纯化疗4例.化疗方案为COP、COPP、CEAP.20例中18例经1~2疗程化疗后均获完全缓解.其中1例3年后再次复发.2例因全身衰竭死亡.
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重组人干扰素在儿科的临床应用观察及体会
重组人干扰素是一种采用健康人白细胞来源的干扰素基因克隆和表达的基因工程干扰素,由于其疗效显著、副作用品低、不易产生中和抗体等优点,近年来已逐渐在临床上得到了应用。本文就重组人干扰素α-1b 在儿科疾病的临床应用进展作一简要综述。
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灰区淋巴瘤2例
灰区淋巴瘤在临床上较为罕见,是一种特殊的淋巴瘤,在生物学行为上介于经典霍奇金淋巴瘤与 B 细胞来源的非霍奇金淋巴瘤之间。其诊断依赖于病理学,主要特点为形态学、免疫组织化学特征介于经典霍奇金淋巴瘤和原发纵膈的大B细胞淋巴瘤之间。治疗按照弥漫性大B细胞淋巴瘤治疗[1]。
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尿中红细胞形态的变化对疾病的诊断
近几年来,随着科学技术的进步,国内外许多专家学者报道采用相差显微镜观察尿标本中红细胞的形态,以鉴别尿中红细胞的来源.但对于博乐市妇幼保健站来说,由于条件差,设备简陋,不可能达到相应的条件要求,我们只好以普通显微镜来观察尿中红细胞的形态变化.2009年-2011年经过对妇幼保健站门诊和维吾尔医院住院部200人份尿中红细胞的形态观察,认为本法对肾小球肾炎鉴别诊断具有特异性和敏感性,是一种操作简单而有效筛选尿中红细胞来源的方法,对疾病诊断提供了客观依据.