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生长抑素与肝纤维化研究进展
肝纤维化是慢性肝病的重要病理特征,肝星状细胞(hepatic stellate cell, HSC)是肝纤维化时细胞外基质(extracellular matrix, ECM)的主要的细胞来源,HSC的活化是肝纤维化发生发展的关键环节[1].针对以HSC为靶标的干预成为抗肝纤维化的重要措施及研究热点.目前有研究表明生长抑素可通过抑制HSC的激活,促进活化HSC的凋亡,并能减少ECM分泌,保护肝细胞及影响细胞因子等途径发挥抗肝纤维化作用,故以生长抑素与肝纤维化的研究进展予以综述如下.
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软骨组织工程种子细胞研究进展
自1907年HARISON开创组织培养技术以来,商品化细胞营养成份和酶的出现,使组织细胞体外培养技术取得了迅猛发展.组织工程研究的发展为组织器官损伤和缺损的治疗提供了新的手段.较其它组织而言,由于软骨特殊的组织学和生物学特性,软骨的组织工程研究开展较早,相对较为成熟,但有效合理的种子细胞来源限制使其成为限制临床应用的瓶颈.软骨细胞和间充质干细胞是目前研究的主要细胞类型,下面主要针对这两种细胞类型对近年来软骨组织工程种子细胞的研究进行总结.
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树突状细胞与移植免疫耐受
自 1973年 Steinman首次报道树突状细胞以来,树突状细胞的研究一直受到免疫学界的关注.由于树突状细胞在组织中的含量极微,细胞来源的困难限制了对树突状细胞的生物学特性等方面的研究.1992年Steinman实验室首次建立了用重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)从小鼠的骨髓中大规模培养制备树突状细胞的方法.此后很快成功的用GM-CSF加TNF-a从CD34+造血干细胞中扩增到大量的树突状细胞,使树突状细胞的研究获得突飞猛进的进展,成为当今免疫学及相关学科的一大热点.下面就树突状细与移植免疫耐受的关系介绍如下.
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外周血干细胞移植的临床应用
根据造血干细胞来源不同分为骨髓干细胞移植、外周血干细胞移植及脐血干细胞移植.近年来的研究和临床试验表明,化疗加细胞因子(G-CSF,GM-CSF等)可使更多的干细胞进入外周血,从而不用通过采集骨髓就可以采集到足够的造血干/祖细胞用于移植,并使其移植后粒细胞和血小板恢复速度明显快于骨髓移植,因此外周血干细胞移植已成为造血干细胞移植的主要干细胞来源.
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非血缘脐血移植治疗恶性血液病的研究进展
尽管靶向药物的发展迅速, 目前治愈恶性血液系统疾病仍需要依靠异基因造血干细胞移植. 首选的造血干细胞供者为人类白细胞抗原(HLA)全相合同胞供者,但仅30%的患者能找到[1];其次,在亚洲地区,约 20%患者能找到HLA相合的非血缘供者,仍有一部分患者缺乏合适的供者.脐带血作为造血干细胞来源之一, 脐血造血干细胞移植(CBT)近年来越来越多地应用于儿童及成人恶性及非恶性血液病的治疗. 在没有HLA相合同胞供者的情况下,非血缘脐血移植(UCBT)成为安全可靠的治疗选择之一.
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UF-100尿沉渣分析仪对尿液红细胞的分型及其临床意义
日本Sysmex UF-100全自动尿沉渣分析仪,既能对尿液有形成分进行定量分析,又可将尿液中红细胞分为均一型(红细胞形态正常)、非均一型(红细胞形态异常、多样不规则)和混合型(部分红细胞形态异常),对鉴别红细胞来源(肾小球、肾小管或下泌尿道)有参考价值[1].
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肝脏少见恶性肿瘤的CT诊断与鉴别诊断
肝脏原发恶性肿瘤以肝细胞性为主,其他来源的恶性肿瘤相对少见或罕见,本文收集19例非肝细胞来源的恶性肿瘤,结合文献分析如下.
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羊膜移植治疗眼表疾病的研究
10多年前眼科界认识了正常表型的角膜上皮及结膜上皮是来源于各自的干细胞.位于角膜缘的角膜干细胞,是正常表型角膜上皮化的细胞来源.
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肝星状细胞与肝纤维化
近年来已获公认,肝星状细胞是肝纤维化时细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)过多产生和沉积的主要细胞来源.1876年德国von Kupffer首次描述呈状细胞(Sternzellen),后来的文献中又称之为Ito细胞、脂细胞、贮脂细胞、窦周细胞等等.1996年Hepatology发表了98位著名国际肝病学家的建议,认为仍以盱星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)命名为宜.此建议已日益被采纳应用.近年关于星状细胞的研究日多,本文只涉及几个问题:细胞的相互关系,纤维化时细胞内的信息传导,与门静脉高压的关系,血窦毛细血管化以及纤维化的可逆性.
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叶酸靶向肿瘤免疫治疗研究进展
叶酸受体(FR)是一种通过聚糖磷脂酰肌醇(GPI)锚着于膜上的糖蛋白,对叶酸具有高度亲和力,在正常组织分布较少,而在90%以上的卵巢癌和许多上皮细胞及髓细胞来源的恶性肿瘤有过度表达.FR对叶酸偶联的药物同样具有高度亲和力,因此FR被开发为治疗肿瘤的叶酸偶联药物的选择性靶向受体[1].在众多有关FR靶向疗法中,FR阳性肿瘤通过免疫调节的疗法取得了显著效果.
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干扰素a-1b治疗尖锐湿疣疗效观察
基因工程干扰素a-1b注射剂,是世界上首例采用中国健康人白细胞来源的干扰素基因克隆和表达的基因工程药物。商品名赛若金,由中美合资深圳科兴生物制品有限公司生产。
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周围血造血干细胞的采集效率
周围血干细胞(PBSC)是自体移植和部分异体移植的主要干细胞来源,周围血干细胞移植(PBSCT)在临床应用广泛,成功的移植或造血恢复要求5×106/kg的CD34+细胞的输入,因此干细胞的采集量及采集效率是临床应用的一个重要问题.化疗和细胞因子单用的动员方案都能增加外周血CD34+细胞的数量,对于接受化疗方案动员的病人,外周血CD34+细胞出现的高峰时期很难确定,通常需要1~8次的采集,给临床工作带来很大的困难.
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日新月异的临床技术——造血干细胞移植
造血干细胞移植(HSCT)是血液学发展的必然.HSCT以其广泛的适应证和良好的疗效完全有可能成为医院新的亮点.HSCT的迅猛发展显示了其强大的生命力.数十年来随着对HSCT研究的深入,人们对其原理有了更为理性的认识,HSCT在造血干细胞来源、移植应用范围、移植策略及方法、检测体系及免疫治疗等诸多方面都取得了重要而深刻的发展.
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人原始生殖细胞的研究现状
迄今为止干细胞有三种生殖细胞来源:(一)胚胎生殖细胞(EGs):来自原始生殖细胞(PGC);(二)胚胎癌性细胞(EGCs):可由成人睾丸肿瘤得到;(三)多能生殖干细胞(GSCs):已由小鼠精原干细胞的培养得到[1].
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人脐带血间充质干细胞的分离培养研究与展望
问充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一种多潜能干细胞.目前,MSCs主要取自骨髓,但由于骨髓源性MSCs存在高度病毒污染或其他污染的可能,且随着年龄的不断增长其细胞数量和扩增、分化能力出现明显下降趋势,因此,寻找一种能替代骨髓MSCs,并可弥补其缺陷的间充质干细胞来源,已越来越受到各国学者的关注.
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昆明小鼠胰腺导管上皮样细胞的培养方法研究
1型糖尿病是由于自身免疫或者其他特殊原因引起的胰岛B细胞破坏,造成胰岛素的绝对不足,从而引起以高血糖为特征的代谢紊乱[1].患者为了生存必须接受外源性胰岛素治疗.尽管外源性胰岛素可以降低血糖,改善症状.但是其疗效是暂时的,患者必须终生使用.因而胰岛移植是一个有希望完全治愈糖尿病的治疗手段,但是由于当前移植用胰岛细胞主要来源于尸体,这个来源的胰岛细胞根本不能满足1型糖尿病患者的需要.如何寻找一个稳定的胰岛细胞来源成为当今的热点问题[2].干细胞作为具有全能分化潜能的细胞可以向内、中、外三个胚层的任何细胞分化.那么在理论上从干细胞可以衍生出任何一种细胞.而且干细胞在体外培养时只要保持在未分化状态就可以无限传代,并且反复传代以后也并不影响其分化能力,这一特性使干细胞有希望成为一个非常稳定的细胞库[3].干细胞主要包括胚胎干细胞、生殖干细胞和成体干细胞[4].通过对胚胎发育的研究,发现胰岛是由一组ck-19阳性的胰腺导管上皮细胞在一定发育阶段向外分泌组织中移行形成的.据此,提出胰腺的成体干细胞存在于胰腺导管上皮细胞之中,研究者称其为胰腺导管上皮样细胞[5,6].相对于体外培养胚胎干细胞的严格要求、繁琐步骤和高额花费,成体干细胞无论是提取还是培养都要容易进行得多.作为一种更经济的方法,成体干细胞迅速受到各国研究者的关注.本文将对正常昆明小鼠的胰腺导管上皮样细胞的分离、培养、纯化、传代以及鉴定技术做一研究.
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潘氏细胞固定和染色法探讨
潘氏细胞位于小肠腺基底部,细胞呈锥形,核园或卵园,细胞内有粗大嗜酸性颗粒,细胞常三、五成群的存在于细胞底部. 经电镜观察,细胞有胞膜,粗面内质网较多,高尔基复合体较大.分泌颗粒内含有糖蛋白、粘多糖(PAS阳性)、精氨酸、锌及溶菌酶.潘氏细胞来源尚不清楚,未见细胞分裂相,也有学者认为细胞分泌多肽酶.根据我们多次实验观察,当动物饥饿时潘氏细胞颗粒明显集聚 ,摄取食物后细胞颗粒释放而消失.潘氏细胞易被酸性染料着色,如:伊红、藻红、酸性复红、丽春红、荧光桃红-酒石黄、焰红、玫瑰红、PAS、Best卡红等,颜色美丽鲜艳.技术书上有一种Lendrum氏荧光桃红-酒石黄染色方法,我们不用酒石黄,染出的潘氏细胞同样鲜艳,具体方法为:①取材:人十二指肠,福尔马林盐固定,常规石蜡切片.②切片移至水洗.③淡染苏木素.④流水洗至变蓝.⑤用0.5%荧光桃红氯化钙液在染色杯内染30min(配方:0.5g荧光桃红溶于100ml 0.5%的氯化钙中).⑥水洗,置室温下几乎将干.⑦用95%酒精浸洗.⑧脱水透明,常规封固.镜下观察,潘氏细胞又鲜又艳.体会:几十年来我们曾经看到过人、猴、小鼠小肠腺底部的潘氏细胞,而未发现狗、猫、荷兰猪及其它动物内存在较完整的潘氏细胞.是固定液的因素还是动物种属原因有待进一步的探讨.经多种固定液选择,经中性甲醛盐固定的效果佳,含有重铬酸钾的固定液效果较好 ,而Bouin氏固定液、AAF、Carnoy等固定液细胞易被破坏,不含醋酸固定液保存细胞颗粒良好.我们将进一步采取不同动物、不同固定液以及饥饿状态下和饱食状态下对潘氏细胞进行进一步的探讨.
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用组织块法培养成年、老年鼠神经干细胞
体外组织块培养成年、老年哺乳动物室管膜下区(SVZ)神经干细胞的研究甚少.本研究的目的是探索体外培养神经干细胞的实用方法及扩充神经干细胞作为移植或基因转移的供体细胞来源.取8、14及 24月龄SD大鼠(雌雄不拘)SVZ组织块作体外培养,在DMEM/F12+B27培养液中加入bFGF(20ng/ml),促进其组织块形成神经小球,刺激神经干细胞增殖 ,并用Nestin免疫组化鉴定.结果显示,培养7~10d产生的神经小球数量多,细胞生长状态佳,绝大多数细胞为Nestin阳性的神经干细胞,此期的神经干细胞较适宜于作细胞移植或基因转移.此法尚有取材方便、组织细胞损伤小、细胞易存活及经济等优点 ,不失为一种具有实用价值的通过体外培养扩增神经干细胞的方法.
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46,X,t(Y;9)一例
患者 男,32岁。结婚6年,婚后性生活正常,因不育就诊。既往无腮腺炎病史。患者为足月第3胎,两兄均已生育正常后代。查体:智力正常,身高170 cm,体重80 kg,有胡须,喉结明显,阴毛、腋毛及阴茎、睾丸正常。精液检查:精子数量少,活动力差。其妻表型正常,妇科检查无异常。细胞遗传学检查:外周血淋巴细胞培养,常规制备染色体,G显带分析16个中期分裂相,C显带分析10个中期分裂相,患者核型为:46,X,t(Y;9)(Ypter→Yq11∷→9q31→9qter;9pter→9q31∷Yq11→Yqter),无嵌合现象。其妻核型正常。 讨论 控制精子发育的基因(AZF)位于染色体Yq11远端,此区域断裂可能会在断裂的位点上造成“基因损伤”,使精子发生受阻。该患者Y染色体与常染色体断裂重接点正好发生在Yq11远端,可能使其精子发生受阻。但另据报道:相互易位虽然引起染色体片段位置的改变,但仍保留了基因的总数,通常不引起明显的遗传效应,故患者表型可正常。 染色体相互易位其来源有两个方面:一是由父母传递而来,一是在配子形成或合子卵裂过程中受各种因素的影响而发生畸变。考虑本例患者的细胞来源可能为突变型。
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免疫组织化学技术的临床应用概况
免疫组织化学是免疫学原理和技术在细胞和组织研究及诊断中的应用.该项技术利用抗原抗体反应的原理,用已知的抗体检测组织和细胞中待测的抗原(蛋白表达水平),以确定病变组织的某些属性(细胞来源、细胞分化、细胞增殖活性、激素受体存在状况、组织细胞内的病原体等).在诸多外科病理学的特殊技术中,免疫组化技术的发展日趋完善,已经成为各大中型医院临床病理诊断的必检项目.免疫组化与常规病理技术的结合,已取代并废弃了某些传统的特殊染色,并在某种程度上代替了电镜在诊断中的多种应用.该项技术所涉及的常用抗体标记的意义已逐渐被病理工作者了解、熟悉和掌握.但该项技术受益的相关科室的临床医师,尤其是中小医院的临床医师对病理报告中所涉及的各项免疫组化指标的意义不太了解,因此本文就临床病理工作中常用的免疫组化标记进行简单的归纳介绍.