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MLL1小分子抑制剂研究进展
组蛋白H3K4甲基转移酶MLL1在基因调控、细胞增殖、生长分化等正常生理功能中发挥着重要作用.染色体带11q23异位可导致MLL1基因与其他基因融合而产生多种N端与融合伙伴结合的MLL1融合蛋白,与急性白血病的发生发展密切相关.MLL1是目前肿瘤分子靶向治疗的热门靶标之一.综述了近年来MLL1抑制剂的研究进展.
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Foxp3+调节性T细胞分化发育及其功能稳定性研究进展
Foxp3+调节性T细胞(Foxp3+Treg)是一类能抑制免疫系统攻击机体自身组织的一类CD4+T细胞亚群,其关键性表型特征在于表达Forkhead家族转录因子Foxp3.Foxp3在CD4+调节性T细胞的分化、发育和功能稳定的过程中发挥着重要功能.Foxp3蛋白水平变化导致的调节性T细胞功能稳定性改变与人类多种重大免疫相关疾病如感染性疾病、自身免疫病、过敏性疾病、肿瘤发生与转移、移植排斥等密切相关.研究Foxp3+i节性T细胞分化发育和功能稳定性的分子机制,将为相关免疫疾病治疗提供新思路新靶点.
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microRNA-127抑制葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的表观遗传调控研究
目的:研究microRNA-127(miR-127)在人葡萄膜黑色素瘤细胞中的表达水平及其对细胞增殖的影响.方法:实验研究.通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测miR-127在葡萄膜黑色素瘤细胞M23和SP6.5与正常葡萄膜黑色素细胞UM95中的表达水平.细胞实验通过阳离子脂质体介导的方法将miR-127和阴性对照(NC)转染入M23和SP6.5中,并应用细胞增殖实验法(MTS法)和流式细胞技术分别检测细胞增殖能力和细胞周期,采用Western Blot法检测转染miR-127后细胞周期相关蛋白的表达.另外,通过RT-qPCR检测用表观药物5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-dC)和(或)曲古抑菌素A(TSA)处理后的M23和SP6.5细胞内miR-127的表达水平.MiR-127的表达量及细胞实验各参数在2组间比较采用独立样本t检验.结果:miR-127在M23和SP6.5中的表达水平低于UM95(t=72.2、591.5,P<0.001).MTS结果显示,在M23和SP6.5细胞中,转染miR-127组相对细胞数目较NC组的100％分别减少至(62.3±4.2)％和(65.4±2.3)％,差异具有统计学意义(t=12.7、21.6,P<0.001).流式细胞技术分析显示,转染miR-127组处于G0/G1期的M23和SP6.5细胞数量比例明显高于NC组(t=-6.7,P=0.003;t=-9.9,P<0.001),同时处于S期的M23和SP6.5细胞数量比例明显低于NC组(t=8.6,P=0.001;t=12.7,P<0.001).Western Blot结果表明miR-127可明显降低M23和SP6.5细胞内磷酸化Rb蛋白的表达水平(t=22.2、15.6,P<0.001).此外,miR-127在M23和SP6.5细胞中的表达可被5-Aza-dC和TSA诱导上调(P<0.05).结论:miR-127通过抑制细胞周期而抑制人葡萄膜黑色素瘤细胞的增殖,并可被DNA甲基化和组蛋白乙酰化表观遗传机制调控.
关键词： 葡萄膜黑色素瘤 microRNA-127 细胞周期 细胞增殖 表观遗传调控 -
靶向诱导DNA甲基化与肿瘤治疗研究进展
DNA甲基化是表观遗传调控的重要方式之一,它能在转录水平上抑制相关基因的表达,从而引起基因沉默.近年来的研究表明,DNA的甲基化不仅在生物体内自然发生,而且可通过特异的RNA、DNA等靶向诱导产生.肿瘤的细胞中存在癌基因的异常低甲基化,而且这种异常被认为是肿瘤的发病机制之一.因此,通过靶向诱导癌基因甲基化来抑制癌基因的表达、抑制肿瘤生长的方法,为肿瘤治疗提供了一种新的思路.本文就靶向诱导DNA甲基化与肿瘤治疗的临床前研究进展作一简述.
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LSD1、NDRG1基因沉默对人卵巢癌SKOV3细胞迁移能力的影响及两者的关系
目的 观察赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)、N-myc下游调节基因1(NDRG1)基因沉默对人卵巢癌SKOV3细胞迁移能力的影响,并探讨两者的作用关系.方法 取人卵巢癌SKOV3细胞株,通过shRNA方法建立诱导型干扰LSD1的SKOV3细胞株(LSD1-shRNA-SKOV3),将其分为对照组、Dox组、转染组和联合组.对照组用水处理,Dox组用100 ng/mL Dox处理,转染组转染NDRG1 siRNA,联合组转染NDRG1 siRNA的同时加入100 ng/mL Dox处理.采用实时荧光定量PCR和Western blotting法分别检测4组LSD1、NDRG1基因mRNA和蛋白表达;染色质免疫沉淀ChIP法和实时荧光定量PCR法分析对照组和Dox组NDRG1基因启动子区组蛋白H3第4位赖氨酸的二甲基化(H3K4me2)程度;Transwell小室测算4组细胞迁移率.结果 Dox组、转染组、联合组、对照组LSD1 mRNA表达分别为0.407±0.029、0.936±0.024、0.413±0.018、0.941±0.035,蛋白表达分别为0.306±0.013、0.879±0.036、0.341±0.057、0.893±0.052,Dox组、联合组与对照组相比,P均<0.05.Dox组、转染组、联合组、对照组NDRG1 mRNA表达分别为0.791±0.045、0.107±0.016、0.165±0.021、0.239±0.027,蛋白表达分别为0.907±0.005、0.130±0.006、0.216±0.019、0.358±0.062,Dox组、转染组、联合组与对照组相比,联合组与Dox组、转染组相比,P均<0.05.Dox组、对照组细胞NDRG1基因启动子区H3K4me2水平分别为3.32±0.41、0.83±0.17,两组相比P<0.01.Dox组、转染组、联合组、对照组细胞迁移率分别为21.75%±1.816%、79.13%±2.561%、40.13%±2.039%、68.91%±3.167%,Dox组、转染组、联合组与对照组相比,联合组与Dox组、转染组相比,P均<0.05.结论 LSD1基因沉默人卵巢癌SKOV3细胞迁移能力降低,NDRG1基因沉默人卵巢癌SKOV3细胞迁移能力升高;LSD1通过降低NDRG1基因启动子区域H3K4me2水平,抑制NDRG1的表达,从而促进卵巢癌SKOV3细胞转移.
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表观遗传调控在新辅助化疗中作用的研究进展
新辅助化疗主要用于无法行手术治疗的晚期恶性肿瘤患者,以为其创造手术机会,缩小手术范围.但预测晚期恶性肿瘤患者对化疗方案的灵敏度是新辅助化疗急需解决的问题.表观遗传调控是指在基因组DNA序列不发生变化的条件下,通过DNA甲基化、染色质组蛋白翻译后修饰等方式调节基因表达的频率、速度或表达度,从而导致基因表型变化的过程.表观遗传调控与恶性肿瘤密切相关,可影响新辅助化疗的灵敏度及化疗药物耐药,进而影响化疗疗效及患者预后.本文就表观遗传调控在新辅助化疗中作用的研究进展作一综述.
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干细胞衰老的调控机制
干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞群体.干细胞在特定的微环境下可分化为骨、脂肪、神经、肝脏等组织细胞,同时分泌多种生长因子和活性物质,为维持机体稳态和损伤修复发挥重要作用.曾经,人们一度认为干细胞是永生的,随着年龄的增长或体外传代次数的增加,许多干细胞,如血液、大脑、骨骼肌、皮肤、间充质干细胞的自我更新能力下降,细胞发生衰老,终导致机体组织退化和功能障碍,产生衰老相关的疾病.随着研究的深入,干细胞衰老可能与DNA损伤、线粒体功能障碍、端粒长度、衰老相关基因表达和表观遗传调控等因素相关[1-2].本文主要讨论这些因素对干细胞衰老的影响,总结干细胞衰老的调控机制.
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组蛋白赖氨酸甲基化在表观遗传调控中的作用
组蛋白赖氨酸的甲基化在真核基因表观遗传调控中起着关键作用.迄今已知,在组蛋白H3中有5个赖氨酸(K4、K9、K27、K36、K79)和组蛋白H4中的1个赖氨酸(K20)可被特异的组蛋白赖氨酸甲基转移酶甲基化.这不同位点的甲基化效应是不同的,H3-K9、H3-K27、H4-K20甲基化具有抑制效应;H3-K4、H3-K36、H3-K79甲基化具有激活效应,而且组蛋白甲基化与其它组蛋白共价修饰之间以及DNA甲基化之间存在对话.
关键词： 组蛋白赖氨酸甲基化 组蛋白赖氨酸甲基转移酶 表观遗传调控 阻遏 激活 -
表观遗传调控联合内分泌治疗降低女性肺腺癌细胞株NCI-H1975的增殖能力
目的 观察通过表观遗传调控手段联合内分泌治疗对于女性肺腺癌细胞株NCI-H1975增殖能力的影响.方法 采用组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂曲古抑菌素A(TSA)联合DNA甲基转移酶(DNMT1)抑制剂5-杂氮-2'-脱氧胞嘧啶(5-AZA-CdR,AZA)作用于雌激素受体α(Erα)阴性的NCI-H1975.以聚合酶链反应(PCR)法检测细胞Erα及其下游的产物的mRNA水平改变.结果 经过药物诱导后NCI-H1975 出现Erα下游基因产物PR表达上调.4-羟基三苯氧胺(4-OHT)能抑制经过诱导处理的NCI-H1975细胞株的增殖.以AZA 2.5μmol/L、TSA 100μg/L浓度能诱导NCI-H1975使之PR表达上调程度强(P＜0.01).同时在该浓度下诱导后,经4-OHT抑制后增殖能力下降(P＜0.01).结论 HDAC抑制剂以及DNMT1抑制剂联合内分泌治疗对于NCI-H1975具有抑制增殖的能力.
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骨再生与表观遗传调控研究进展
骨再生是骨组织受外力作用部分丢失后,重新形成形态与功能相同的骨组织的过程.骨再生旨在激发骨组织内在的再生能力,是一种治疗骨缺损或骨质疏松症极有前景的治疗手段.研究显示,许多表观遗传学机制均参与了骨再生的调控,包括DNA甲基化、组蛋白修饰和非编码RNA.这些表观遗传学机制可以通过不改变基因序列的方式而调节基因的表达,而且越来越多的研究证实了其在骨再生的重要性.本文将对近些年表观遗传学在骨再生领域的研究进展作一综述.
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喉鳞状细胞癌的表观遗传调控研究进展
喉癌是头颈部常见的恶性肿瘤之一,其主要病理类型为喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC).尽管诊断和治疗方式有所改善,但在过去20年里喉癌患者的生存率仍然较低.深入揭示LSCC发病的分子机制有利于其早期诊断及开发有效的治疗方法.表观遗传学调控在喉癌发生发展中发挥了重要的作用,通过表观遗传学的相关研究,有望为喉癌的诊断和治疗提供新的策略,从而改善患者的生存率.表观遗传(epigenet-ics)是指在基因组DNA序列不发生改变的情况下,基因的表达发生改变,且这种改变可以遗传,并可以逆转[1].表观遗传涉及DNA甲基化,组蛋白修饰,核小体定位,及非编码RNA (ncRNA)如microRNA和长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)调控等[1].这些变化或引起染色质结构重塑,或引起信使RNA稳定性变化,或引起活性蛋白的重新定位,从而改变基因表达[1-2].
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假基因PTENP1通过调控PTEN蛋白的表达影响胃癌进展的研究
目的：长链非编码RNA(long non-coding RNAs，lncRNAs)是一类转录本长度超过200nt的RNA分子，它们缺乏蛋白编码的潜能。近年来,大量证据表明lncRNAs能以RNA的形式在多种层面上(表观遗传调控、转录调控以及转录后调控等)调控基因的表达，从而在细胞增殖、细胞周期、分化和凋亡等多种生物学进程中发挥重要的作用。假基因转录得到的RNA也属于lncRNA的一类，以前被认为没有生物学功能，然而近一些假基因被证实在肿瘤的发生中发挥着关键的作用。PTENP1被发现在几种肿瘤细胞中发挥着抑癌作用，然而它在胃癌中的表达和生物学功能仍不清楚。本文主要研究胃癌组织和细胞系中PTENP1的表达水平及其与临床病理资料的关系，并探索PTENP1在胃癌细胞中发挥的生物学功能及相关机制。方法：通过实时定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测68例胃癌组织及4个胃癌细胞系中PTENP1的表达水平；通过去甲基化药物处理，研究PTENP1启动子异常甲基化与其表达的关系；分别转染pLJM-3'UTR或pLJM空质粒进入胃癌细胞系MGC-803及SGC-7901，通过CCK-8及平板克隆实验研究PTENP1对胃癌细胞增殖能力的影响，通过流式细胞分析及Hoechst staining实验研究PTENP1对细胞凋亡的影响，通过细胞划痕实验和transwell研究PTENP1对细胞迁移和侵袭能力的影响；通过qRT-PCR及Western blot分析质粒转染后PTEN的表达变化。结果：qRT-PCR检测结果显示PTENP1表达在胃癌组织和细胞系中显著下调，其表达下调可能部分与DNA超甲基化有关。而且，PTENP1的低表达与肿瘤的大小、胃癌病人临床分期、胃癌浸润深度及淋巴结转移有关。另外，结果显示PTENP1能够调节胃癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭。并且，PTENP13'UTR的表达升高能够提高PTEN蛋白的表达水平。结论：PTENP1在胃癌中表达显著下调，并能通过调节PTEN蛋白的表达发挥抑癌作用。
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lncRNAs参与基因表达调控机制的研究进展
长链非编码RNAs (long non-coding RNAs,lncRNAs)是一组内源性、长度超过200 nt、缺少特异完整的开放阅读框(open reading frame,ORF)、无或很少有蛋白编码功能的RNAs分子.近年来的研究发现,IncRNAs与许多重要的生物学过程相关,如基因组印记、细胞分化、免疫反应等.lncRNAs在表观遗传水平、转录水平和转录后水平等多个层面调节基因的表达,通过介导染色质重塑和组蛋白修饰、干扰转录、调节选择性剪接模式、生成小RNAs、调节蛋白质活性、改变蛋白质定位等方式,参与机体生长、发育、衰老及死亡等重要生命活动的调控.关于lncRNAs参与基因表达调控的机制有待进一步研究,这将有助于深入理解疾病的发病机制,为寻找疾病分子标记物、药物靶点提供新的方向.
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AF9促进心脏祖细胞的生成及机制研究
目的：组蛋白乙酰化修饰是表观遗传调控中重要的调控方式之一，组蛋白乙酰化与基因活化关系密切，其中一个重要环节是被特定阅读器结构域所识别，从而招募染色质调控因子到特定区域，协同完成基因表达调控。 AF9是这类阅读器之一，其
是否参与心脏发育分化还未清楚。因此本研究探讨心脏转录因子联合AF9是否对心脏祖细胞的产生具有促进作用。方法：采用蛋白重组表达方式获得心脏转录因子GATA4、NKX2．5、TBX5（GNT）及AF9，结合纳米转导技术高效转导到目的细胞BM－SCs细胞核内，检测细胞毒性，CPCs的生成效率，组蛋白H3K9乙酰化情况，ChIP－PCR技术检测H3K9ac的作用靶点。结果：心脏转录因子GNT联合AF9能提高BMSCs重编程生成CPCs的效率，在200μg／L／蛋白的工作浓度下，细胞生长良好，与GNT组相比，联合AF9组的H3K9ac表达明显增加，ChIP－PCR的结果显示H3K9ac富集在MEF2C的启动子区域。结论：心脏转录因子组合GNT联合表观遗传调控因子AF9通过纳米－蛋白转导方式，能高效重编程BMSCs得到CPCs，AF9通过上调H3K9ac来促进重编程过程。 -
人类与小鼠同源lncRNA基因及其表观遗传调控靶基因分析
目的 分析人类与小鼠lncRNA中的同源与种系特异性lncRNA,揭示人类与小鼠表观遗传调控的种系差异.方法 根据同源lncRNA序列搜索和人类/小鼠全基因组双序列比对确定GENCODE项目首期报道的13562个人类lncRNA和10481个小鼠lncRNA中的同源lncRNA基因,用lncRNA/DNA结合分析软件LongTarget预测lncRNA的DNA结合位点和表观遗传调控靶基因,根据Gene Ontology数据库分析靶基因的功能.结果 仅158对人类和小鼠lncRNA被识别为同源lncRNA,这些同源lncRNA在人类与小鼠基因组有种系特异性的DNA结合位点和靶基因,Gene Ontology分析提示这些同源lncRNA对靶基因的种系特异性调控可能对人类和小鼠的表型差异有重要影响.结论 仅极少数人类和小鼠lncRNA是同源的,这些同源lncRNA有种系特异性的表观遗传调控靶基因,lncRNA和表观遗传调控的种系特异性对人类和小鼠的差异(包括疾病模型的差异)有重要影响.
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间充质干细胞的表观遗传调控研究进展
间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是成体干细胞的一种,由于具有多向分化、修复损伤、免疫调节、抗衰老等诸多生理功能,MSCs在多种疾病的基础和临床治疗研究中被寄予厚望,是细胞治疗领域重要的种子细胞.近年来的研究发现,表观遗传调控的多种机制,如:DNA甲基化、组蛋白修饰、微小RNA等,对MSCs的自我更新、定向分化以及免疫调节等各项生理功能都有着重要的调节作用.本文就近年来MSCs表观遗传调控领域的研究进展进行综述,以期为以提高MSCs移植疗效为目的的细胞修饰或改造提供资料参考.
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靶向乳腺癌干细胞治疗的研究进展
乳腺癌干细胞理论的确立为解释乳腺癌的表型和功能异质性提供理论基础.这些乳腺癌干细胞促始和驱动肿瘤生长,并与乳腺癌内在性耐药密切相关.因此,乳腺癌干细胞的靶向治疗已成为基础研究及临床研究的热点.越来越多的证据显示,纳米粒子能通过靶向乳腺癌干细胞从而杀伤肿瘤,如靶向肿瘤干细胞特异或高表达表面标记(ALDH1,CD44和CD90),靶向肿瘤干细胞功能和干性维持相关的NOTCH,Hedgehog及TGF-β信号通路.本文概述了乳腺癌干细胞的特点,总结乳腺癌干细胞研究的现状,并对乳腺癌治疗中纳米技术的应用进行综述.另外,我们还对旨在通过抑制乳腺癌肿瘤细胞表观遗传重编程药物的研究进行总结.
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神经系统中组蛋白修饰调控的研究进展
神经系统表达了占整个基因组80%的基因,但这些基因都受严格调控,参与了神经系统的正常功能执行、适应性调节及神经退行性疾病的发生.组蛋白存在多种化学修饰,除乙酰化和甲基化外,其他还有磷酸化、SUMO化、泛素化、ADP-核糖基化等修饰形式.组蛋白修饰包括乙酰化、甲基化、磷酸化等,由不同的组蛋白修饰酶催化,在基因组表观遗传调控中发挥不同的作用.组蛋白修饰在神经元的分化、学习记忆、压力应激、药物成瘾以及神经退行性疾病等方面都发挥重要作用.本文就神经系统调控中组蛋白修饰的研究进展作一综述.
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Tip30基因甲基化与肝细胞癌临床预后的关系
肿瘤细胞DNA甲基化紊乱常表现为癌基因去甲基化和抑癌基因高甲基化,即抑癌基因功能失活是通过表观遗传调控抑制,而不是通过基因缺失或突变.既往研究在肝细胞癌中p16、SOCS-1、TFPI-2、E-cadherin、RASSFIA和NOREIB等抑癌基因常常表现为高甲基化状态,这些基因的高甲基化状态与肝细胞癌的发生、发展关系密切.
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Pax5对B细胞分化发育调控作用的研究进展
转录因子Pax5在B细胞定向分化发育过程中发挥重要调控作用.B细胞定向分化发育相关的转录因子如PU.1、干扰素调节因子4(Interferon regulatory factor4,IRF4)、IRF8和NF-κB结合在Pax5基因5’上游增强子区,转录因子EBF 、STAT5结合在Pax5基因5’上游启动子区,从而共同促进Pax5基因的表达.表达的Pax5蛋白不仅通过IgH的V(D)J片段染色质的甲基化和乙酰化修饰来调节IgH V(D)J重排,并且通过B细胞特异性基因(mb-l、VpreB、λ5、CD19、BLNK等)表达调控B细胞的定向分化发育.若Pax5基因缺失,影响组蛋白H3-K9的修饰,导致B细胞向非B细胞分化.总之,Pax5在B细胞定向分化发育中起到重要调控作用.
