首页 > 文献资料
-
高效液相色谱-质谱法联用测定人血浆中氟桂利嗪含量及其药代动力学研究
氟桂利嗪(flunarizine)是一种钙通道阻断剂,能防止因缺血等原因导致的细胞内病理性钙超载而造成的细胞损害.临床上用于脑供血不足、脑血栓形成后、耳鸣、头痛、头晕、偏头痛预防及癫痫辅助治疗等.研究多采用高效液相色谱(HPLC)法测定人血浆中氟桂利嗪的浓度[1-3],但这些方法的血浆样品预处理复杂,灵敏度较低.
-
液相色谱-串联质谱法测定人血浆瑞格列奈浓度及其生物等效性评价
瑞格列奈与胰岛β细胞膜上的特异性受体结合,促进与受体耦联的三磷酸腺苷(ATP)敏感性钾通道关闭,抑制钾离子从β细胞外流,细胞膜去极化,钙通道开放,钙离子内流,促进胰岛素分泌。其作用快于磺酰脲类,故餐后降血糖作用较快。为第一个进餐时服用的葡萄糖调节药。大的优点是可以模仿胰岛素的生理性分泌,由此有效的控制餐后高血糖。主要用于饮食控制、降低体质量及运动锻炼不能有效控制高血糖的2型糖尿病(非胰岛素依赖型)患者。本研究建立了液相色谱‐串联质谱(LC‐MS/MS)法测定瑞格列奈在人血浆中的药物浓度,该方法简单,低定量下限为0.2ng/mL,且具有血浆用量少,分析时间短等优点,并采用该法对中国健康受试者单次口服0.2 mg瑞格列奈片的药动学参数和生物等效性进行了研究,为临床用药提供依据。
-
双氯芬酸钠人血浆蛋白结合率的测定
双氯芬酸钠是一种常用的非甾体类抗炎药,具有疗效确切、不良反应小等特点,在临床上有很好的应用[1].本实验建立了双氯芬酸钠在人血浆及在透析液中的含量分析方法,结合平衡透析法[2]考察了双氯芬酸钠人血浆蛋白结合率,为临床上双氯芬酸钠的血药浓度监测和应用提供方法和依据.
-
高效液相色谱法测定人血浆中环丙沙星的血药浓度
盐酸环丙沙星为广谱杀菌剂,不良反应较多,为保证用药合理、安全,本研究建立了测定血浆中环丙沙星的方法.
-
液相色谱/质谱/质谱法测定人血浆中伏立康唑浓度及其药代动力学和等效性方法研究
伏立康唑(voriconazole)是三唑类抗真菌药物,其抗真菌谱广,活性高,胃肠道吸收好.其抗菌机制是抑制真菌细胞色素P450介导的14α-甾醇的去甲基作用,从而抑制真菌麦角甾醇的合成.而麦角甾醇好似真菌浆膜的必要组成部分.这样导致真菌细胞膜合成不足[1].研究结果显示伏立康唑对真菌细胞色素P450酶的选择性远高于对哺乳动物细胞色素P450的选择性.本品对念珠菌属(包括耐氟康唑的克柔念珠菌、光滑念珠菌和白色念珠菌耐药株)具有抗菌作用,对所有检测的曲菌属真菌有杀菌作用[2].此外,伏立康唑在体外对其他致病性真菌也有杀菌作用,包括对现有抗真菌药敏感性较低的菌属.
-
LC/MS/MS法测定人血浆及尿液中普卢利沙星活性代谢物NM394浓度及其药代动力学研究
普卢利沙星(prulifloxacin)是第四代氟喹诺酮类抗菌药.它在体内经酯酶水解,迅速地大量转化成为活性代谢产物NM394,而发挥广谱抗菌作用.因此,普卢利沙星体外的抗菌活性和体内的药代动力学研究就是通过研究NM394来实现的.
-
LC/MS/MS法测定人血浆中阿莫西林克拉维酸浓度及其药物代谢动力学及人体生物等效性研究
阿莫西林(amoxicillin)为半合成广谱青霉素类抗菌药,具有杀菌活性强、生物利用度高、组织分布好等优点[1].克拉维酸(clavulanic acid)是竞争性广谱β-内酰胺酶的抑制剂,由阿莫西林和β-内酰胺酶抑制剂克拉维酸钾组成的复方制剂,在临床上的应用日趋普及.克拉维酸可以增强阿莫西林对产β-内酰胺酶菌种的抗菌活性,且对多数产β-内酰胺酶的细菌也有明显的抗菌活性,临床应用十分广泛[2].本研究建立了快速、灵敏、适用于测定高通量样品的液相色谱质谱联用(LC/MS/MS)分析方法,用于同时测定健康受试者血浆中阿莫西林和克拉维酸的浓度,评价受试制剂和参比制剂的人体生物等效性,希望能为临床安全合理用药提供科学依据.
-
LC/MS/MS法测定人血浆中阿莫西林克拉维酸浓度及其药物代谢动力学及人体生物等效性研究
阿莫西林(amoxicillin)为半合成广谱青霉素类抗菌药,具有杀菌活性强、生物利用度高、组织分布好等优点[1].克拉维酸(clavulanic acid)是竞争性广谱β-内酰胺酶的抑制剂,由阿莫西林和β-内酰胺酶抑制剂克拉维酸钾组成的复方制剂,在临床上的应用日趋普及.克拉维酸可以增强阿莫西林对产β-内酰胺酶菌种的抗菌活性,且对多数产β-内酰胺酶的细菌也有明显的抗菌活性,临床应用十分广泛[2].本研究建立了快速、灵敏、适用于测定高通量样品的液相色谱质谱联用(LC/MS/MS)分析方法,用于同时测定健康受试者血浆中阿莫西林和克拉维酸的浓度,评价受试制剂和参比制剂的人体生物等效性,希望能为临床安全合理用药提供科学依据.
-
高效液相色谱法测定人血浆中氯氮平血药浓度
氯氮平其化学名为:8-氯-11-(4-甲基-1-哌嗪基)-5H-二苯并[b,e][1,4]二氮杂 ,是一种非经典抗精神病药物,对精神病阳性和阴性症状均有良好的疗效.服用氯氮平较少引起椎体外系反应(EPS),但可引起粒细胞缺乏症等致命性不良反应[1,2].
-
人血浆中克拉霉素液相色谱-串联质谱法测定
克拉霉素是大环内酯类抗生素,适用于革兰阳性菌、部分革兰阴性菌、厌氧菌及支原体、衣原体等非典型病原体所引起的感染.目前克拉霉素血药浓度的测定主要采用微生物法[1]及液相色谱法[2,3],微生物法测定结果不够精确;而液相色谱法样品处理繁琐,血浆中内源性杂质常干扰测定,定量检测限较高.为此,我们建立了灵敏、简便、准确的液-液萃取,液相色谱-串联质谱(LC/MS/MS)法测定人血浆中克拉霉素的浓度.
-
反相高效液相色谱法测定人血浆中替米沙坦的浓度
替米沙坦是非肽类血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂,通过选择性阻断血管紧张素Ⅱ与多种组织中血管紧张素受体结合,因而阻断血管紧张素Ⅱ引起的血管收缩和醛固酮分泌作用,是一种长效、高效、低毒的新型受体阻滞剂,主要治疗原发性高血压[1,2].在替米沙坦的药代动力学研究中,常需要测定其在血浆中的浓度.本文采用反相高效液相色谱法,以建立替米沙坦的血药浓度分析方法,为其药代动力学及其相关研究提供一定的实验依据.
-
人血浆作为真皮支架对自体皮肤增殖的影响:组织学和免疫组织化学试验
背景:组织工程是一个多学科研究的交叉学科,其目标是使人体损伤的组织和器官再生,通过这种假设,几乎所有的动物组织都可以在实验室进行培养.一般的方法是从需要移植的患者身上提取干细胞,在一定的支持条件下允许其生长、增殖、生产为可替换的组织.另一方面,寻找细胞能够互相联结并形成分层结构的合适的支持条件,如基质或支架等非常必要.目前用于烧烫伤治疗的材料有很多种.如胶原,透明质酸、纤维蛋白和聚乳酸及其共聚物.目的:讨论以新型的生物材料自体血浆为支架对自体成纤维细胞和角质化细胞生长、扩张、增殖的影响.设计:建立一种真皮再生的方法,将自体成纤维细胞浸于人血浆基质中,排除各种影响样本安全性和排斥反应的问题,应用同样的方法在新的真皮上获取角质化细胞.时间及地点:实验于2008年在意大利曼多瓦C.Poma医院动物工厂完成.材料:人角质化细胞和成纤维细胞取自1例58岁乳房切除患者的皮肤碎片.实验得到C.Poma医院独立伦理委员会批准,患者知情同意.方法:从自体活组织皮肤样本中分离人角质化细胞和成纤维细胞,置于培养瓶中增殖,随后将自体血浆作为皮肤移植形成构造的支架,免疫和免疫组织化学特征显示与正常皮肤相似.主要观察指标:将血浆样本用甲醛固定,埋入石蜡,苏木精一伊红染色,用显微镜进行细胞计数.所有样本均经免疫组织化学评估.结果:在血浆基质上获得了多层规则形状的角质化细胞和成纤维细胞,基底膜的形成说明自体血浆是角质化细胞和成纤维细胞的生长、分化、扩展的良好支架,真皮和表皮细胞联结重建皮肤移植与正常皮肤无异.结论:血浆作为角质化细胞和成纤维细胞分化、扩展的支架表现出良好的性能,同时实验还特别发现成纤维细胞浓缩血浆可以暂时替代皮肤,也是角质化细胞生长的强有力的支架.此外血浆还具有廉价,易于制各等优点.自体角质化细胞和成纤维细胞及自体血浆的应用,可以避免血种类型的免疫排斥反应.这种治疗方法给有慢性缺损并且需要连续移植的患者带来了希望.
-
HPLC-MS/MS法同时测定人血浆中依那普利和依那普利拉的浓度
目的 建立人血浆中依那普利和依那普利拉含量测定的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)方法.方法 血浆样品加入内标(贝那普利拉),以含0.1%甲酸的甲醇沉淀蛋白后,进行HPLC-MS/MS分析.色谱柱为Hedera ODS-2 C18(150 mm×2.1 mm,5μm),流动相为甲醇-0.5%甲酸水溶液梯度洗脱,流速为0.4 mL/min,柱温为30℃,采用多反应监测(MRM)方式进行定量分析,用于监测的离子质荷比分别为m/z377.2→m/z 234.3(依那普利)、m/z 349.3→m/z 206.2(依那普利拉)和m/z 397.4→m/z 351.4(内标,贝那普利拉).结果 人血浆中依那普利和依那普利拉的线性范围分别为0.2 ~200 ng/mL(r =0.999 9)、0.5~120 ng/mL(r =0.999 3);批内、批间精密度均<11.3%.结论 该方法快速、灵敏、专属性强,可用于人血浆中依那普利和依那普利拉浓度的测定.
关键词: 依那普利 依那普利拉 高效液相色谱-串联质谱法 人血浆 -
反相HPLC法测定人血浆中尼美舒利的浓度
尼美舒利(Nimesulide)是一种新型非甾体抗炎药,具有抗炎、镇痛、解热作用,毒副作用小,临床常用于风湿性关节炎、软组织损伤、泌尿系统炎症、术后疼痛及各种发烧等疾病[1].
-
两种方法对溶栓治疗病人血浆Fib含量测定结果比较
我们于2001年4月份开始,应用德国BE公司Compaet-X全自动血凝仪对临床溶栓治疗后病人用Clauss法和PT-der法进行血浆Fib含量治疗监测测定.
-
高效毛细管电泳法测定血浆中兰索拉唑对映体浓度
目的 建立测定血浆中兰索拉唑对映体浓度的高效毛细管电泳分析方法,并用于兰索拉唑在人体内立体选择性药代动力学研究.方法 用乙醚作提取溶剂提取血浆中兰索拉唑.采用高效毛细管电泳法测定6名健康男性受试者经口给予兰索拉唑片后不同时刻血浆中药物对映体浓度,绘制血药浓度时间曲线,并计算主要药动学参数.结果 S—与R—兰索拉唑对映体的主要药动学参数如下:ρmax分别为(0.538±0.039) mg·L-1和(1.050±0.250) mg·L -,tmax为(1.8±0.7)h和 (1.8±0.7)h,t1/2分别为(1.6±0.7)h和(2.7±1.0)h,用梯形法计算,AUC0-(f)分别为(1.49±0.36) mg·h·L-1和(4.35±1.52)mg·h·L-1.结论 兰索拉唑两对映体在人体内的代谢过程具有立体选择性.
-
LC-MS/MS法测定人血浆中索利那新的浓度
目的 建立一种通过与质谱联用的液相色谱法测定人血浆中索利那新的浓度,并且用于琥珀酸索利那新片在健康人体内的药物动力学行为的评价和研究.方法 使用甲醇对人血浆进行蛋白沉淀的方法制备样品;采用C18色谱柱(50 mm ×2.0 mm,5岬)进行分离;洗脱方式为梯度洗脱,流动相:A为甲醇(含体积分数0.1%甲酸),B为5 mmol· L-1醋酸铵缓冲溶液(含体积分数0.1%甲酸);采用的质谱扫描方式为多反应离子监测(multiple reaction monitoring,MRM)的正离子检测方式.结果 人血浆中索利那新的质量浓度线性范围为0.313 ~20.0 μg·L-1,r=0.9987;方法准确度为98.4%~101.6%;日内与日间精密度(CV)都在11.4%以下;人血浆样品中索利那新的提取回收率在88.5%~90.1%范围内,基质效应在97.9%~99.2%范围内.结论 所建立的分析方法适合用于人体内索利那新的药物动力学研究.
-
异常凝血酶原单克隆抗体的制备与鉴定
凝血酶原是由肝脏合成的依赖维生素K的凝血因子.异常凝血酶原(Abnormal Prothrombin,APT)和凝血酶原的化学结构极其相似,区别在于:APT分子氨基端的特定位置上的谷氨酸残基未经羧基化,因而缺乏结合钙离子的结构基础,在一般凝血试验中无凝血活性.自从1984年Liebman等观察到原发性肝癌患者血浆APT水平显著升高,APT与肝癌的关系受到关注,其临床应用价值受到重视,测定方法不断改进.由于单克隆抗体建立的酶联法受外界因素影响小,可直接测出酶蛋白的含量,特异性强,灵敏度高,操作简便,是一种理想的检测方法.本试验旨在研制出抗APT的单克隆抗体,以检测出人血浆中APT的水平,建立灵敏、特异的检测方法.
-
脾内免疫法制备抗α2-抗纤溶酶单克隆抗体
α2-抗纤溶酶(α2-Antiplasmin, α2-AP)是由肝脏合成分泌的,含有452个氨基酸的单链糖蛋白,分子量为70 000.α2-AP属于丝氨酸酶抑制物家族成员之一,在人血浆中α2-AP是主要的纤溶酶抑制物,在控制纤溶中起关键作用[1].为此制备α2-AP单克隆抗体,建立ELISA方法用于纤溶系统的监测,为进一步提高抗原的免疫原性,减少抗原用量,延长抗原释放时间,用大分子惰性物质如硝酸纤维素膜(NC膜)作为抗原载体进行脾内包埋免疫.
-
荧光定量PCR检测 HBV-DNA、HCV-RNA室内质控物的制备及评估
荧光定量 PCR 法检测人血浆中乙肝 HBV-DNA、HCV-RNA具有较高的灵敏度和较强的特异性[1],但是检测的结果易受很多因素影响,因此严格的室内质量控制才能预防和控制检验误差,保证结果的准确性。目前,PCR检测试剂盒并未提供定值的室内质控品,且商用质控品的价格昂贵、不易获得,给常规 PCR 检测过程中室内质量控制带来不便。根据卫生部临检中心对质控品的相关规定,结合近年来临床PCR工作的基础,我们应用混合血清自制单一模式的混合血清实验室室内质控品,并根据《体外诊断试剂注册管理办法》(试行)等相关文件要求对其准确性、稳定性进行了初步评价,报告如下。