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参芪扶正注射液对脐血CIK细胞体外增殖及杀瘤活性的影响
目的 观察参芪扶正注射液对脐血细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)体外增殖及杀瘤活性的影响.方法 用脐血单个核细胞,诱导分化CIK细胞,分为4组.细胞因子组加入γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素1α(IL-1α)、白细胞介素2(IL-2)、CD3单抗细胞因子;参芪扶正注射液组:加入参芪扶正注射液;细胞因子+参芪扶正注射液组:加入参芪扶正注射液、IFN-γ、IL-1α、IL-2、CD3单抗细胞因子;对照组只加培养液.培养12天后CIK细胞达到增殖高峰期,用流式细胞仪检测细胞表型和增殖能力,MTT法检测CIK细胞对K562细胞的杀伤作用,ELISA法检测CIK细胞分泌的细胞因子IL-2、IFN-γ、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平.结果 对脐血CIK细胞体外增殖的影响,在培养12天时,参芪扶正注射液组与细胞因子组比较差异无统计学意义(P>0.05),细胞因子+参芪扶正注射液组与细胞因子组相比差异有统计学意义(P<0.01);CIK细胞对K562细胞的杀伤作用,各实验组与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),参芪扶正注射液组CIK细胞在12、16天时分泌IL-2、IFN-γ、TNF-α因子水平优于对照组(P<0.01). 结论 参芪扶正注射液对脐血CIK细胞既有显著的增殖和杀瘤作用,又可促进脐血CIK细胞分泌IFN-γ、IL-2和TNF-α.
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CFSE/PI双标法检测CIK细胞对顺铂预处理肿瘤细胞的杀伤活性
细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer,CIK)是将人外周血单个核细胞在体外用多种细胞因子共同培养一段时间后获得的一群异质细胞,具有增殖速度快、杀瘤活性高、杀瘤谱广等优点.如何对CIK细胞的效应功能进行客观准确的评价,如何使CIK和化疗有机地结合在一起,对CIK的临床应用具有重要的意义.
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青春型双歧杆菌脂磷壁酸对巨噬细胞的免疫活性影响
双歧杆菌的脂磷壁酸(lipoteichoic acid, LTA)有较强的免疫活性作用,能激活巨噬细胞以及增强单核细胞的呼吸暴发.作者观察了青春型双歧杆菌的LTA刺激小鼠腹腔巨噬细胞后分泌的TNF-α活性以及IL-12、NO的含量,同时检测巨噬细胞的体外杀瘤活性,旨在探讨它对巨噬细胞的免疫调节作用.
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新城疫病毒诱导人巨噬细胞杀伤喉癌细胞株Hep-2的体外研究
目的 探讨新城疫病毒(NDV)和紫外线灭活的新城疫病毒(NDV-UV)在体外诱导人巨噬细胞(Mφ)对肿瘤细胞的杀伤作用.方法 用淋巴细胞分离液从外周血中分离单个核细胞,经贴壁黏附法得到Mφ细胞,用NDV和NDV-UV分别诱导Mφ细胞16h作为效应细胞,Hep-2细胞作为靶细胞,然后用MTT法测定Mφ细胞杀瘤活性,并进一步比较NDV和NDV-UV对Mφ细胞杀瘤活性的影响.结果 NDV和NDV-UV诱导的Mφ细胞对Hep-2细胞的杀伤率分别为(28.46±1.70)%、(22.65±2.76)%,均高于未诱导组的(6.31±0.96)5(P<0.01),而NDV诱导组的杀瘤率高于NDV-UV诱导组(P<0.01).结论 NDV和NDV-UV能在体外诱导人外周血Mφ细胞,使之杀瘤活性增强,NDV的诱导作用较NDV-UV强.
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LDH法检测新城疫病毒野生株与疫苗株对大肠癌的体外杀伤作用
目的 比较新分离的新城疫病毒野生株(NDV7793、NDVD817)与疫苗株La sota对大肠癌的体外杀伤作用.方法 3株病毒作用于大肠癌细胞株LS174T和LOVO,用乳酸脱氢酶微量释放法测定病毒的杀瘤活性并通过测定培养上清液的血凝效价来检测病毒的增殖能力.结果 3株新城疫病毒均可杀伤大肠癌细胞并可在其复制增殖,对正常大肠细胞无明显细胞毒性.而对正常大肠组织细胞未见明显影响(P<0.05);野生株对癌细胞的杀伤作用较强,72 h后对LOVO细胞株的杀伤效应>90%;LOVO大肠癌细胞对NDV敏感性强于LS174T大肠癌细胞.结论 3株NDV对大肠癌细胞均有选择性杀伤作用,野生株病毒的抑瘤效应强于疫苗株,对正常大肠组织无细胞毒性.
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紫外线灭活新城疫病毒体外抗肿瘤作用的研究
目的 比较新城疫病毒(NDV)和紫外线灭活的新城疫病毒(NDV-UV)在体外对肿瘤细胞的直接杀伤作用.方法 用NDV和NDV-UV作用于喉癌细胞株Hep-2细胞,用MTT法测定病毒的杀瘤活性并测定培养上清液病毒的血凝效价.结果 NDV和NDV-UV对Hep-2细胞均有杀伤作用,且随着病毒与肿瘤细胞作用时间的延长,二者杀瘤率逐渐增强,病毒与细胞作用48h后,NDV对Hep-2细胞的杀伤作用较NDV-UV组强,NDV组可测出血凝效价,且随着病毒与细胞作用时间的延长,NDV组血凝效价逐渐升高,而NDV-UV组血凝效价始终未测出.结论 NDV和NDV-UV能直接杀伤肿瘤细胞,NDV能在肿瘤细胞内复制并杀伤肿瘤细胞,而NDV-UV不能在肿瘤细胞内复制亦能杀伤肿瘤细胞,提示NDV的杀瘤作用并不完全依赖于病毒的复制,NDV-UV可作为安全有效的生物调节剂用于肿瘤的生物治疗.
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DC-CIK细胞过继免疫治疗肿瘤患者的护理进展
DC-CIK生物免疫治疗是继手术、放射治疗、化疗之后肿瘤患者可选择的第四大治疗模式.DC-CIK是肿瘤免疫治疗的两个重要部分.前者DC细胞,又称树突状细胞(dendritic cells,DC),是体内摄取、加工,呈送抗原的重要的专职抗原呈递细胞,它呈递抗原的能力强,是巨噬细胞的10~100倍,且是唯一可以活化初始T细胞的抗原呈递细胞.CIK细胞,即细胞因子诱导的杀伤细胞,是外周淋巴细胞在体外经多种细胞因子组合诱导激活的对肿瘤细胞具有杀瘤能力的淋巴细胞.该类细胞具有增殖速度快、杀瘤活性高、杀瘤谱广、对正常细胞无毒副作用等优点[1,2].动物实验也表明[3],DC-CIK+化疗的抑瘤效果明显好于单纯化疗,可明显增强机体免疫功能,提高生存质量和生存率.因此,DC-CIK细胞过继免疫治疗是一种更先进、更有效的治疗手段.现将近年来护理综述如下.
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肿瘤病人自体CIK和ECTL细胞治疗的护理
CIK为细胞因子诱导的杀伤细胞,是一种新型、高效,具有广谱杀瘤活性的免疫效应细胞,ECTL为肿瘤抗原特异性杀伤T淋巴细胞,是通过树突状细胞(DC) 摄取、加工肿瘤抗原为抗原多肽提呈给 T细胞,使 T细胞被充分激活、增殖为 CTL,启动细胞免疫机制,特异性杀伤肿瘤细胞.CIK和ECTL治疗均为免疫细胞治疗,是肿瘤治疗的重要综合方法之一,并在临床上显示了一定的应用前景[1].
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DC-CIK细胞过继免疫细胞治疗的护理
DC-CIK细胞过继免疫效应细胞是将人体外周血单个核细胞在体外用多种细胞因子共同培养一段时间后获得的一群异质细胞.具有T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性和NK细胞的非MHC限制性杀瘤优点,增殖速度快,杀瘤活性高,杀瘤谱广,对多重耐药肿瘤细胞同样敏感,杀瘤活性不受常用免疫抑制剂的影响,对人体正常细胞无毒性,能抵抗肿瘤细胞引发的效应细胞凋亡.随着肿瘤免疫学研究的深入,过继免疫细胞治疗因具有高效低毒的杀瘤作用而受到重视.
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RetroNectin诱导的细胞因子诱导的杀伤细胞联合树突状细胞对肝癌细胞株杀伤的体外研究
细胞过继免疫治疗是肿瘤综合治疗的重要组成部分,树突状细胞(dendritic cell,DC)是目前发现的功能强的抗原递呈细胞,可有效激发T细胞应答,从而引发一系列的免疫应答.细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killercells,CIK)由斯坦福大学Schmidt Wolf首次发现,具有增殖快、杀瘤活性高、杀瘤谱广、且几乎无毒副作用等优点,在临床得到广泛应用[1-4].将DC与CIK细胞混合培养后制成D-CIK细胞可有效提高CIK的杀伤活力,但传统CIK细胞培养方案采用血细胞分离机分离外周血,繁琐耗时.现多采用抽取外周血60~100 ml进行培养,但对于多数患者长期接受放化疗,传统的培养方案所获得CIK细胞在数量及质量上并不能让人满意.如何提高CIK细胞在体外增殖效率和细胞毒活性是基础研究的一个热点问题.
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非小细胞肺癌组织细胞MICA/B分子表达及临床意义
主要组织相容性复合体Ⅰ相关分子A(MICA)在多种肿瘤细胞中如乳腺癌、肺癌、胃肠道肿瘤、前列腺癌等中均有表达[1],被认为与恶性转化相关.但在这些肿瘤中NKG2D配体信号并不能有效诱导抗肿瘤的免疫应答.肿瘤细胞表面表达MICA分子可能有助于机体自然杀伤(NK)细胞与其结合并产生杀瘤活性.我们采用流式细胞技术,分别测定非小细胞肺癌(NSCLC)肺癌组织与癌旁组织细胞表面MICA/B分子表达值,探讨肺癌细胞MICA/B分子表达及其临床意义.
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胃癌相关抗原与自身CTL细胞增殖及体外杀瘤活性关系
目的:探讨胃癌相关抗原与胃癌患者自身细胞毒T细胞(CTL)细胞增殖及体外杀瘤活性的关系.方法:用生化方法提取胃癌相关抗原,体外协同IL-2培养淋巴细胞,MTT法测定细胞增殖及杀瘤活性,流式细胞仪(FCM)检测细胞表型变化.结果:12例胃癌相关抗原阳性患者CTL细胞增殖快于9例阴性患者,统计比较,差异有极显著意义(P<0.001).E/T为80:1时,前者体外杀瘤活性均值也大于后者(P<0.01),FCM检测结果表明前者CD8+及CD25+表达率也显著高于后者(P<0.01).结论:本研究为解释胃癌等"不敏感群体"现象提供实验依据,提示该类抗原诱导的杀伤细胞可望用于胃癌临床免疫治疗;结合相关抗原筛查,可实施个体化免疫治疗.
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小鼠CTL体外非特异性扩增对其杀瘤活性的影响
目的在体外用抗CD3单抗、抗CD28单抗和白细胞介素2(IL-2)扩增肿瘤特异性CTL,为肿瘤过继治疗提供足够数量的、具有高度杀瘤活性的效应细胞.方法采用2种方案培养肿瘤细胞免疫的小鼠脾细胞.(1)抗CD3单抗刺激48 h后,加入抗CD3单抗和20 U/ml rIL-2(抗-CD3+IL-2组);(2)抗CD3单抗和抗CD28单抗同时刺激48 h后,加入抗CD3单抗、抗CD28单抗和20 U/ml rIL-2(抗-CD3+抗-CD28+IL-2组).分别检测2组效应细胞的增殖水平、杀瘤活性及表型.结果抗-CD3+IL-2组细胞的3H-TdR掺入量在第6、12、20天分别为22 126、5 426、2 072,抗-CD3+抗-CD28+IL-2组细胞的3H-TdR掺入量在第6、12、20天分别为32 168、12 922、3 265,后者明显高于前者.在培养12 d时,抗-CD3+IL-2组细胞对FBL-3的大杀伤活性的66.4%,抗-CD3+抗-CD28+IL-2组细胞对FBL-3的大杀伤活性为77.8%.细胞表型FACS分析结果表明,抗CD3+抗-CD28+IL-2组培养12 d后的细胞90%以上为Thy1.2+细胞,且CD25+细胞在抗-CD3+抗-CD28+IL-2组、抗-CD3+IL-组分别为23.00%、8.15%.结论抗CD3单抗、抗CD28单抗和低剂量IL-2同时非特异性刺激,可获得大量扩增的,具有高度杀瘤活性的肿瘤特异性C儿. [全文刊登于中华微生物学和免疫学杂志2001,21(2):143]
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IL-12单独或联合应用IL-2对脐血单个核细胞增殖及杀瘤活性的影响
目的观察白细胞介素12(IL0-12)和/或白细胞介素2(IL-2)对脐血单个核细胞(CBMC)增殖和抗肿瘤活性的影响.方法分别以3H-TdR掺人法和3H-TdR释放法测定增殖作用及抗瘤活性.结果 IL-12单独不能促进CBMC增殖,但能与IL~2协同增强CBMC的增殖作用;10IU/mlIL-12和同浓度IL-2合用能使CBMC产生较强的抗肿瘤作用,对K562及Raji细胞的杀伤率分别是(47.60±4.60)%和(38.67±4.86)%;CBMC的NK活性和LAK活性均明显高于肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC).结论 CBMC经10IU/mlIL-12和IL-2刺激后能发挥强而持久的增殖效应和大的抗瘤活性,本实验为脐血替代外周血在过继免疫疗法中的应用提供重要的实验依据.[关键司]IL-12 IL-2脐血单个核细胞过继免疫疗法
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TIL抗肿瘤治疗的进展
肿瘤浸润性淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)增殖速度快、免疫活性强,比淋巴因子激活的杀伤细胞(lymphokine activated killer cells,LAK)具有更强的持异杀瘤活性,与化学治疗及中医中药联用疗效更好
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恶性肿瘤患者放疗期间CIK细胞治疗的护理
细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokines-induced killer cell, CIK)是一种新型的免疫活性细胞,又称为NK细胞样T淋巴细胞[1],具有增殖速度快、杀瘤活性高、杀瘤谱广等优点,可以与化疗、放疗手术同时进行[2].本院自2010年3月~2012年6月放疗期间予CIK细胞治疗恶性肿瘤患者,效果满意,现将护理体会报告如下.
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CIK细胞免疫治疗恶性淋巴瘤31例护理
细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine induced killer cells,CIK)是近年来发现的一种新型抗肿瘤细胞,其抗肿瘤作用具有增殖速度快,杀瘤活性高,抗瘤谱广,毒副反应小等特点,目前已逐渐被人们所认识,并应用于临床[1],为恶性淋巴瘤治疗提供新的领域.
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阿昔替尼联合 DC-CIK 细胞治疗晚期难治性肾癌的疗效
晚期肾癌(advanced renal cell carcinoma,aRCC)预后差,中位总生存期(OS)<12个月,5年生存率<10%[1]。因此,寻找一种有效且不良反应小的疗法显得尤为重要。2015年美国国立综合癌症网络将阿昔替尼作为既往接受过一种酪氨酸激酶抑制剂或细胞因子治疗失败的进展期肾癌患者的Ⅰ类推荐,因此对于晚期难治性肾癌首选阿昔替尼治疗。树突状细胞(dendritic cell,DC)对肿瘤细胞抑制有重要作用,aRCC 患者血液中 DC 和 CD28+、CD8+、T 淋巴细胞数量低,通过静脉滴注 DC 可抑制肿瘤细胞生长[2]。细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞是一类杀瘤活性和杀瘤谱更强的新型抗肿瘤效应细胞,DC 与 CIK 联合应用治疗肾癌能调节和增强机体的免疫功能,提高间接杀瘤作用[3]。本研究采用阿昔替尼联合 DC-CIK 细胞细胞治疗31例晚期难治性肾癌患者,报告如下。
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CIK细胞对S180荷瘤小鼠的抑瘤作用及机制
目前,细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK Cell)作为新一代抗肿瘤过继细胞免疫治疗的首选方案,正成为人们研究的热点.CIK细胞是人外周血单个核细胞(PBMC)在体外经多种细胞因子刺激后获得的一种异质细胞,具有增殖速度快、杀瘤活性高、杀瘤谱广、对正常骨髓造血影响轻微等优点[1].近年来,关于CIK细胞的生物学特性及其用于胃癌细胞、肝癌细胞的体外研究报道较多,为了研究CIK细胞体内抗肿瘤活性,2003年12月,我们观察了CIK细胞对昆明鼠皮下接种S180肉瘤细胞的抑瘤作用,并做了病理学切片观察,以探讨其作用机制.现报告如下.
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沙培林增强人外周血淋巴细胞抗瘤效应的探讨
为了研究沙培林对人PBL杀瘤活性的影响,探讨沙培林增强人PBL杀瘤产应的适浓度和时间,使用不同浓度沙培林分别诱导正常人和肺癌患者PBL于不同时间杀伤K562和Raji细胞,并以MTT法测定其对肿瘤细胞的杀伤率.结果显示,不同浓度的沙培林增强PBL杀瘤作用的效应不同,在0.02KE/ml、72小时时杀瘤率高,浓度过度或过低免疫活化作用均不理想.