人鼻型NK/T细胞淋巴瘤表达谱基因芯片的筛查研究

Ko等[1]对7例鼻型NK/T细胞淋巴瘤进行了比较基因组杂交和杂合性缺失分析,发现在染色体2q、3q、5q、10q、13q、17q和21q等处有DNA拷贝数增加;而在1p、17p、6q、12q和13q有基因缺失.Oka等[2]对NK/T细胞淋巴瘤细胞系NK-YS作了初步的基因芯片检测,发现蛋白酪氨酸蛋白磷酸酶SHP-1基因表达下调.本研究旨在初步筛选和观察部分肿瘤相关基因差异性表达的情况.

生物人工肝肝细胞培养研究进展

近年来,体外人工肝支持系统得到了极大的发展,先后出现了多种模式,Uchino 等[1]将人工肝分为生物型、非生物型、中间型及杂合生物型等四种类型.目前公认以杂合性生物人工肝效果好,是人工肝支持系统(BALSS)的主流模式.杂合性生物人工肝一般由三部分组成:①生物成份;②生物反应器;③血液灌流系统.在这三部分中,生物成份是BALSS的核心,主要为动物或人的肝细胞培养物,发挥肝细胞的合成、代谢、解毒、排泄以及免疫等功能.可以说,获得大量具有良好肝特异功能的细胞是关键,BALSS的效果主要取决于所用肝细胞的功能.本文对近来用于生物人工肝的肝细胞培养的进展作一综述.

Atlantis杂合性钢板在脊髓型颈椎病治疗的临床疗效分析

目的 探讨和研究Atlantis杂合性钢板在脊髓型颈椎病治疗中的临床疗效.方法 回顾性分析2005年1月至2006年1月收治的24例脊髓型颈椎病患者使用Atlantis杂合性钢板治疗,对术前与术后JOA评分、植骨融合率、椎体间高度以及颈椎曲度的改变进行临床疗效分析.结果 平均随访(48±1.43)个月,术后JOA评分较术前均有提高,末次随访时改变更加明显,差异有统计学意义(P<0.05);随访患者均获得骨性融合,融合率为100%;术后椎体间高度提高3.3mm(P<0.05);在颈椎曲度方面,术后颈椎前曲度改善2.77°(P<0.05).结论 Atlantis杂合性钢板在治疗脊髓型颈椎病方面能提高植骨融合率,改善颈椎生理曲度,防止假关节形成,具有良好的临床疗效.

4例单卵双胎中一患先天性法洛四联症另一正常

单卵双胎（monozygotical twins，MZ）同患单发(isolated)先天性法洛四联症及同患其他综合征并存法洛四联症病例，国内外报道较多。但其中一患先天性法洛四联症另一正常的单卵双胎病例，发生率极低〔1〕。我院自1992年以来据不完全统计共发现4对，3对中的病儿经手术证实，另1对中的病儿依据超声心动图诊断。所有单卵双胎中正常的1名儿童均经超声心动图检查未发现任何心脏畸形，现报告如下。　　临床资料　首先根据出生时胎盘的数目、胎儿性别、ABO血型及RH血型是否相同来初步判断是否为单卵双胎。然后利用微卫星标记法确定两者是单卵双胎〔2〕。　　4对单卵双胎中的病儿均为法洛四联症，其中男3对，女1对。例1：男，4岁；单卵双胎中病儿经超声心动图证实诊断，未做手术。例2：男，4岁。例3：女，3岁，联体双胎(胸腹连胎)，出生后1个月手术分离。例4：男，5岁。后3例中的病儿行法洛四联症根治术，涤纶片修补室间隔缺损，自体心包补片加宽右室流出道。术后恢复良好。　　讨论　杂合性分析的方法很多，使用微卫星标记是准确的判定杂合性的方法。仅依靠出生时胎盘数目、羊膜囊数目、胎儿性别等组成的问卷来判断单卵双生或双卵双生虽然简单，但精确度仅有60%。比较双胎皮纹的方法精确度更低。血清型、抗体鉴定单卵双生不仅昂贵而且精确度仍较低。使用同位素标记的5个高度多态性的微卫星标记引物，聚合酶链式反应扩增2个要鉴定的双胞胎基因组DNA，PCR产物聚丙烯凝胶电泳后放射自显影所见条带模式没有差异，说明两者是单卵双生的可能性为99.97%〔2〕。　　单卵双胎患先天性心脏病者据新生儿先心病发病率估算约十万分之一。单卵双胎来自同一个受精卵，发育成为2个遗传物质完全一致的个体，多同时发病，而且所患疾病的种类基本相同，因此单卵双胎中其一患先天性心脏病法洛氏四联症另一正常的几率更低〔1〕。　　单卵双胎，遗传背景相同，胚胎发育环境相似。利用单卵双胎的特点，进行其一患先天性心脏病另一正常单卵双胎的比较研究，可以得到许多先天性心脏病发病相关的信息。比较两者基因组DNA差异，有助于了解病儿存在的基因位点突变或染色体异常与先天性心脏病的关系。比较两者的mRNA之间的差异 ，可以了解特定时期、特定组织中基因表达的差异。结合cDNA文库技术，可以了解心脏发育特定时期的基因表达特点〔3〕。　　因此，临床上能发现的一人患先天性心脏病另一人正常的单卵双胎，是了解先天性心脏病发病机制的宝贵材料。

子宫内膜癌组织中抑癌基因PTEN的研究现状

抑癌基因PTEN,又称MMAC1基因,是迄今发现的第1个具有磷酸酶活性的抑癌基因,其突变和杂合性缺失常见于多种晚期原发性恶性肿瘤,如脑胶质母细胞瘤、前列腺癌、乳腺癌、肾癌和恶性黑色素瘤.目前的研究发现,PTEN基因在子宫内膜癌组织中的突变率较高,常发生在子宫内膜癌病变的早期阶段.现就PTEN结构、功能及其在子宫内膜癌组织中的突变情况,综述如下.

食管癌9号染色体多位点等位基因的杂合性缺失

目的 探讨食管鳞状细胞癌(ESCC)发生、发展过程中基因的变化及多位点之间的相关性,发现9号染色体上与ESCC密切相关的抑癌基因.方法 通过手工显微切割、PCR扩增、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、AgNO3染色等技术,对照正常组织,检测不典型增生及癌组织在9号染色体上6个微卫星位点的杂合性缺失(LOH)的情况,同时分析该6个位点之间的相关性.结果 在有信息的病例中,正常组织未发生LOH,不典型增生总LOH率为17.2%(25/145),ESCC总LOH率为24.9%(43/173);不典型增生和ESCC组织中,6个微卫星位点的LOH率依次分别为D9S162(20.8%、36.7%)、D9S171(33.3%、36%)、D9S753(34.8%、46.2%)、D9S1748(4.2%、13.8%)、D9S242(14.3%、21.2%)、D9S43(0、0).无论在不典型增生还是在癌组织中,其LOH在9号染色体的各位点之间差异有统计学意义(x2=17.26,P<0.005;X3=22.66,P<0.005).结论 从正常组织到不典型增生再到癌变的过程中,存在染色体改变的累积.D9S171、D9S162、D9S242、D9S753位点存在较高的等位基因LOH,均>20%,各位点或其附近可能存在与ESCC发展相关的抑癌基因.

杂合性急性白血病9例分析

目的:分析杂合性急性白血病(hybrid acute leukemia, HAL)的临床、细胞形态、细胞化学、免疫学及细胞遗传学特征,以了解其临床意义.方法:选择1991年10月至1996年8月间我院治疗的成人急性白血病患者145例,采用瑞特染色、常规细胞化学染色、间接免疫荧光、G显带方法,按Catovsky标准,凡淋巴和髓系积分均≥2分者诊为HAL.结果:9例(9/145)患者诊为HAL,临床表现无特征性异常,细胞形态及细胞化学染色多显示淋巴或髓系特征,免疫学表型多同时显示两系标志,5例核型异常,完全缓解(complete remission, CR)者3例(3/9),与其余136例急性白血病患者CR率(69.85%)相比,有明显统计学差异(P＜0.05).结论:免疫分型技术在HAL诊断中可发挥重要作用.

遗传性纤溶酶原激活剂抑制物-1缺乏症的诊断及分子生物学研究

纤溶酶原激活剂抑制物-1(PAI-1)是纤溶系统的重要负调控因子,它与组织型或尿激酶型纤溶酶原激活剂形成1:1的复合物,抑制纤溶酶的产生.遗传性PAI-1缺乏症是一种罕见的常染色体隐性遗传的出血性疾病,国际上仅美国与日本有10余例报道.有关该病的分子机制研究目前仅有1例报道[1].我们曾报道1例遗传性PAI-1缺乏症患者,PAI-1基因第4497位有G→A的杂合性改变,导致信号肽的-9位丙氨酸突变为苏氨酸[2],为探讨该突变在本病发病中的作用,进行了下述研究.

燃煤型砷中毒患者皮损PTCH基因D9S287和D9S180位点微卫星不稳定性的观察

目的观察燃煤型砷中毒患者皮损组织中PTCH基因微卫星DNA不稳定性及杂合性丢失与临床病理、临床分度之间的关系.方法选取D9S287、D9S180两个微卫星多态性标记,采用PCR扩增-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染法检测不同病理类型的燃煤型砷中毒患者的微卫星的改变.结果34例患者皮损组织PTCH基因微卫星不稳定性的发生率为29.41%(10/34),杂合性丢失的发生率为14.7%(5/34),微卫星的改变与病理分型相关(P＜0.01),与临床分度无关(P＞0.05).结论PTCH基因微卫星不稳定性和杂合性丢失可能在砷中毒患者皮损癌变的发生发展中起重要作用.

应用基因组扫描对胃癌19号染色体进行杂合性缺失分析

原发性胃癌中19p部分微卫星多态位点杂合性缺失分析

洛阳地区汉族人群RHD基因杂合性检测及其临床意义

目的 调查洛阳地区汉族人群RHD基因的杂合情况.方法 收集RhD阳性、弱D、RhDel及RhD阴性表型样本共387例,检测RHD基因的Up Box、Down Box及Hybrid Box,并判定个体的合子型.结果 在所有387例样本中,94例(24.29％)为RHD+/RHD-杂合子,246例(63.57％)为RHD+/RHD+纯合子,47例(12.14％)为RHD-/RHD-纯合子.300例表型为RhD阳性样本中,RHD+/RHD+纯合子有236例(78.67％),其余64例(21.33％)为RHD+/RHD-杂合子;12例弱D样本中,RHD +/RHD+纯合子有5例(41.67％),其余7例(58.33％)为RHD+/RHD-杂合子;19例表型为RhDel样本中,RHD+/RHD+纯合子有6例(31.58％),其余13例(68.42％)为RHD+/RHD-杂合子;56例表型为RhD阴性样本中,47例(83.93％)为RHD-/RHD-纯合子,其余9例(16.07％)为RHD+/RHD-杂合子.结论 RHD基因合子型在不同RhD表型(RhD阳性、弱D、RhDel及RhD阴性)个体中的分布频率差异有统计学意义;研究本地区人群RHD基因杂合性,对产前预防RhD-HDN及临床输血具有重要的指导意义.

微卫星DNA在寄生虫学研究中的应用

微卫星DNA(Microsatellite DNA),又称为短小串联重复(Short Tandem Repeats,STR)或简单重复序列(simple repeat sequence,SRS或SSR),是近年来飞速发展起来的一种新型的DNA高度多态性遗传标记系统,具有种类多分布广泛、高度多态性、杂合性高、重组率低的特点,在群体中变异范围大,构成了丰富的长度多态性,有高度的个体特异性,并遵循孟德尔共显性遗传规律,提供了众多有高度遗传信息的新的多态性标记[1].

胶质瘤的分子生物学和遗传学研究进展

分子生物学和遗传学研究表明,多种癌基因的扩增与表达和抑癌基因的突变不同程度地影响着胶质瘤的发生和发展;染色体上多个位点的杂合性或纯合性丢失也与胶质瘤的发生密切相关.此外,在不同类型的胶质瘤中存在着不同的分子改变,这一系列改变与患者的预后存在着某些相关性.

儿童胚胎性肿瘤微卫星不稳定性和杂合性缺失的研究

目的 探讨二种儿童胚胎性肿瘤--肾母细胞瘤和神经母细胞瘤中微卫星不稳定性(microsatellite instability,MSI)与杂合性缺失(loss of heterozygosity,LOH)的状态.方法 提取30例肿瘤组织及15例外周血DNA,选取14个微卫星位点(BAT125、BAT26、D2S119、D2s123、D2S136、D2S288、D2S367、D2S391、D3S1029、D3S1076、D3S1277、D3S1561、133S1611及D3S1612),用PCR扩增及变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法 检测微卫星不稳定性和杂合性缺失.结果 30例肿瘤标本中8例出现MSI,包括5例肾母细胞瘤和3例神经母细胞瘤.1例神经母细胞瘤出现LOH;队T25、D2S119、132S123、I)2S136、D2S288、132S391、D3S1076、D3S1277及D3S1611 9个位点的MSI阳性率分别为16.7%(5/30),14.3%(1/7),14.3%(1/7),14.3%(1/7).28.6%(2/7),28.6%(1/7),14.3%A(1/7),14.3%(1/7)和14.3%(1/7);D2S119、133S1029、D2S367、及D3S1611 4个位点的LOH阳性率均为14.3%(1/7).结论微卫星不稳定性和杂合性缺失现象存在于部分儿童胚胎性肿瘤中,提示此类肿瘤具有基因组不稳定性,DNA错配修复系统异常可能与其发生有关.

中国人阿耳茨海默病早老素-1基因测序一例

阿耳茨海默病(Alzheimer's disease, AD)可分为早发性、晚发性家族性AD(familial Alzheimer's disease, FAD)和散发性AD(sporadic Alzheimer's disease, SAD).国外研究发现,70%～80%的早发性FAD与Presenilin-1(PS-1)基因突变有关[1].我们在一个FAD家系患者中发现了外显子46519nt T→A杂合性点突变,报告如下.

洛阳地区回族人群RHD基因Rhesus boxes研究

目的 探讨洛阳地区回族人群RHD基因Rhesus boxes特征,并判定RHD杂合性.方法 收集洛阳地区不同RhD表型的回族献血者血液492例,应用PCR-SSP技术检测RHD基因Rhesus boxes.结果 在425例D阳性标本中,同时检出Up box和Down box标本有352例(82.82％),为RHD +/RHD+纯合子;同时检出Hybrid、Up及Down box标本有73例(17.18％),为RHD +/RHD-杂合子.在弱D和Del标本中,同时检出Up box和Down box标本数分别为4例(44.44％)和4例(25.00％),同对检测到Hybrid、Up及Down box标本数分别为5例(55.56％)和12例(75.00％),未能单独检测出杂交Rhesus box.在42例RhD阴性标本中,同时检测到Hybrid、Up及Down box标本有3例(7.14％),仅检出Hybrid box标本有39例(92.86％),未能同时检测出Up box和Down box.结论 洛阳地区回族人群中RHD基因Rhesus boxes具有独特的分布特征,应用Rhesus boxes来确定RHD基因杂合性在临床输血和产前预防RhD新生儿溶血病有重要意义.