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器官移植患者的真菌感染
器官移植是治疗终末期器官衰竭的有效手段,随着新型强力免疫抑制剂及广谱抗生素的大量使用,移植患者中真菌感染的问题日益突出,已成为移植物丢失和患者死亡的重要原因之一.常见的致病菌是念珠菌,其次是曲霉菌,共占移植患者真菌感染的80%[1].在具有高危因素的移植患者中预防性使用抗真菌药物,能降低真菌感染的发生率.治疗仍以两性霉素和三唑类抗真菌药物为主,其中两性霉素脂质体的使用备受关注.以下就近年器官移植患者真菌感染的发病、预防、诊断及治疗进展作一综述.
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侵袭性肺曲霉菌病11例临床分析
目的 探讨侵袭性肺曲霉菌病(IPA)的危险因素、临床表现、诊断和治疗特点.方法 回顾性分析2006年1月至2010年10月收治的11例IPA的基础疾病、危险因素、临床表现、实验室及影像学特征、治疗和预后情况.结果 11例IPA患者确诊2例,临床诊断9例.3例患者无特殊病史,其余8例均有基础疾病.主要症状为发热、咳嗽、咯痰、咯血、胸闷和气喘.痰涂片3例、痰培养1例、肺泡灌洗液1例、胸水1例均查见曲霉菌.1,3-β-D-葡聚糖试验(G试验)及半乳甘露聚糖试验(GM试验)阳性6例.1例支气管镜活检、1例经皮肺活检病理形态学及特殊染色结果符合曲霉菌感染.影像学表现呈多样性.11例患者均接受抗真菌药物治疗,目前仍在治疗中2例,7例随诊,失访2例.6例选用伏立康唑、3例选用伊曲康唑、2例选用卡泊芬净作为初始治疗,均有疗效.结论 IPA与基础疾病及长期使用大剂量广谱抗生素、大剂量糖皮质激素等因素密切相关,主要临床表现不典型,病情进展迅速,病死率极高.诊断有赖于病理学及病原微生学结果,但随着高分辨率CT及C试验与GM实验在临床中的开展,使早期拟诊成为可能,早期予以经验性抗真菌治疗,可明显提高IPA的治愈率.
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实时荧光定量PCR检测血中曲霉菌基因的实验研究
目的 建立并评价从血标本中检测曲霉茵基因的real-time PCR方法.方法 用自行设计的高效率引物探针对标准茵株及临床疑似病人血标本进行检测,对方法的敏感性、特异性进行评价.结果 检测出曲霉菌基因敏感性达10拷贝ITS Ⅰ基因,相当于5-10 CFU/ml,与人类基因组、其他真菌及细菌无交叉反应.29例临床疑似标本阳性率为69%,与临床诊断符合率为86%.结论 real-time PCR检测血中曲霉菌基因有较高的敏感性、特异性,有一定的临床应用前景.
关键词： Real-time PCR 诊断 曲霉菌 -
纳米金探针液相杂交法检测核酸序列依赖扩增产物诊断侵袭性曲霉病
目的 建立纳米金探针液相杂交法检测核酸序列依赖扩增(nucleic acid sequence-based amplification,NASBA)产物,用于快速诊断侵袭性曲霉病(LA).方法 采用NASBA扩增曲霉菌属特异性18S rRNA保守序列,扩增产物与5'端经巯基化修饰的特异性纳米金探针进行液相杂交,用该法检测106例临床血液标本(14例确诊,32例拟诊,60例未感染IA),并与GM试验结果进行比较以评价该方法的准确性.结果 纳米金探针只与曲霉菌属菌株的NASBA产物出现阳性杂交反应,而其他非曲霉菌均为阴性.NASBA-纳米金液相杂交法检测106例临床标本的敏感性和特异性分别为82.61％ (38/46)、81.67％(49/60),ROC曲线下面积(AUCROC)为0.890.GM试验检测的敏感性和特异性分别为56.52％ (26/46)和83.33％ (50/60),AUCROC为0.723.结论 NASBA-纳米金液相杂交技术检测曲霉菌感染具有敏感性高、特异性强、操作简单的特点,适合实验室常规开展.
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5例变应性支气管肺曲菌病长期误诊临床分析
变应性支气管肺曲菌病(ABPA)是人体对曲霉菌(主要是烟曲霉)产生超敏反应引起的一种疾病.因该病较为少见、临床医师对其认识不足、大多医院缺少烟曲霉特异性检查手段等因素,病人往往被长期误诊误治,严重影响患者预后.本文将对江苏省人民医院呼吸科5例确诊ABPA患者进行临床分析,以提高对该病的认识,减少误诊.
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白念珠菌、烟曲霉及新生隐球菌感染的宿主特异性免疫应答研究进展
白念珠菌、烟曲霉及新生隐球菌是3种机会致病真菌.这些真菌一旦感染人体,即与机体免疫系统相互作用,激活机体的天然免疫,继而产生特异性细胞免疫及体液免疫应答,其中特异性细胞和体液免疫应答对宿主抵御感染和防止菌体免疫逃逸发挥重要作用.概述近几年有关白念珠菌、烟曲霉及新生隐球菌感染的特异性免疫应答的研究现状,并分析3种真菌免疫的异同点,以期为开展此类研究提供有益借鉴.
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我国不同地域烟曲霉临床分离株CSP基因型及对抗真菌药物的敏感性分析
目的 探讨我国不同地域致病烟曲霉临床分离株CSP基因型分布情况,以及不同地域、不同CSP基因型烟曲霉药物敏感性有无差异.方法 对福建、上海、河北及北京四地临床分离到的112株烟曲霉分别通过形态学、温度试验及β微管蛋白分子生物学测序鉴定,再对烟曲霉进行CSP基因分型,同时用M38-A方法测定伏立康唑、伊曲康唑及两性霉素B对不同型别烟曲霉的低抑菌浓度(MIC).结果 112株曲霉均鉴定为经典烟曲霉,共确定11个CSP基因型,其中t04A、t03、t01多见,分别为32株、17株、24株.福建分离株以tl0、t04A、t01常见,上海分离株以t04A、t01常见,河北分离株以t01、t03、t04A常见,北京分离株以t02、t04A、t01和t03常见,t25为1个新CSP基因分型,新基因型菌株的菌落形态、生长速度、适生长温度与其他菌株并无显著差别.不同CSP基因型烟曲霉对抗真菌药物敏感性差异无统计学意义,但福建地区分离株对伊曲康唑的MIC值低于其他三地的分离株.结论 烟曲霉临床株CSP基因型存在一定的地域特点,不同基因型的烟曲霉对抗真菌药物的敏感性差异无统计学意义,而不同地域来源烟曲霉对伊曲康唑敏感性存在差异.
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对唑类药物交叉耐药的烟曲霉临床分离株耐药机制的初步探讨
目的 研究对唑类药物交叉耐药的烟曲霉临床分离株的耐药机制.方法 自1例侵袭性曲霉病患者体内分离得到1株烟曲霉,分别利用美国临床实验室标准化研究所(CLSI)M38-A2中的微量液基稀释法和E-test法测定伊曲康唑、伏立康唑、两性霉素B、泊沙康唑和卡泊芬净对该烟曲霉的低抑菌浓度(MIC)/低有效浓度(MEC);并对该菌株中唑类药物靶酶基因cyp51A进行克隆和序列测定分析.结果 微量液基稀释法显示,该菌株伊曲康唑、伏立康唑、两性霉素B的MIC分别为≥16、8、1mg/L,卡泊芬净的MEC为0.5 mg/L.E-test法显示,伊曲康唑、伏立康唑、两性霉素B和泊沙康唑的MIC分别为≥32、≥32、12和≥32 mg/L,卡泊芬净的MIC为0.047 mg/L.对cyp51A基因进行测序并分析后发现,该菌株的cyp51A序列中存在启动子区-288到-322位间34 bp的串联序列的插入,以及该基因编码区364位碱基的点突变(T364A),导致了编码区98位亮氨酸的置换(L98H);该菌株的cyp51A基因编码区还存在137位碱基(A137T)、585位碱基(G585A)、814位碱基(C814A)、836位碱基(G836C)、991位碱基(T991C)、1350位碱基(A1350G)的突变,并分别导致编码区相应氨基酸的置换.结论 分离到对唑类药物交叉耐药的烟曲霉临床株,该菌株的cyp51A基因存在启动子区34 bp的串联序列插入和编码区364位的突变(T364A),这种变化参与了其对伊曲康唑、伏立康唑和泊沙康唑交叉耐药;该菌株cyp51A基因编码区还存在一些其他的点突变,并可导致相应部位的氨基酸置换.
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造血干细胞移植术后继发外生殖器黄曲霉感染一例
目的 报告一例外生殖器黄曲霉感染.方法 对患者的临床资料、真菌学检查、胸部CT检查结果进行分析.结果 患者男,33岁,5个月前确诊为急性髓性白血病M1型,经化疗诱导缓解后接受异基因造血干细胞移植术.术后7天患者出现发热,38～38.5 ℃,多种抗生素治疗无效.同时外生殖器部位出现多个圆形水肿性红斑,直径0.2～1 cm,中央覆盖黑色焦痂.龟头冠状沟可见糜烂及坏死性皮疹.取皮损渗出物及痂皮作常规真菌检查,分离出黄曲霉.静脉滴注伊曲康唑、局部外用碘伏溶液33天后皮疹治愈.移植术后第137天,胸部CT检查显示右上肺尖一薄壁空洞.结论 该患者为造血干细胞移植术后继发外生殖器黄曲霉感染,感染源可能与肺部病灶有关.
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耐伊曲康唑烟曲霉临床分离株对四种抗真菌药物的敏感性测定
目的 测定耐伊曲康唑烟曲霉临床株对4种抗真菌药物的敏感性.方法 自一例对伊曲康唑无效的肺曲霉球患者体内系列分离6株烟曲霉.利用美国临床实验室标准化研究所(CLSI)的微量液基稀释法M38-A方案和E-test法测定6株烟曲霉临床分离株对两性霉素B、卡泊芬净、米卡芬净、伏立康唑和伊曲康唑的敏感性.结果 6株烟曲霉中,2株对伊曲康唑的低抑菌浓度(MIC)为0.5 μg/mL,其他4株的MIC均＞16 μg/mL;两性霉素B和伏立康唑对6株烟曲霉的MIC分别为1μg/mL和0.25～1 μg/mL,卡泊芬净和米卡芬净对6株烟曲霉的低有效浓度均≤0.03μg/mL.E-test法测定结果也显示,卡泊芬净和伏立康唑对6株烟曲霉有良好的抑制活性.结论 耐伊曲康唑烟曲霉临床株对两性霉素B、卡泊芬净、米卡芬净和伏立康唑敏感.
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PCR检测深部致病真菌感染的研究
目的 探讨PCR在可疑深部真菌感染临床标本检测中的应用.方法 对60份临床标本分别进行传统真菌培养以及真菌通用引物PCR和三重PCR检测.结果 真菌培养阳性共19份,其中白念珠菌10份、烟曲霉2份、新生隐球菌2份、其他菌株5份(包括光滑念珠菌2份、热带念珠菌2份、克柔念珠菌1份);真菌通用PCR检测共有21份阳性,经三重PCR检测共有15份阳性,分别为白念珠菌10份、烟曲霉3份、新生隐球菌2份.PCR方法与传统培养方法相比,检出率差异无统计学意义.结论 PCR检测可疑深部真菌感染临床标本快速简便,稳定性好,敏感性和特异性均较理想,适合临床实验室常规使用.
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特比萘芬治疗甲真菌病的疗效观察
为了评价特比萘芬6周疗法治疗指甲真菌病、8周疗法治疗趾甲真菌病的疗效,我科于1999年5月至2000年5月采用诺华制药公司生产的特比萘芬对65例甲真菌病进行了治疗和2年的随访,得到了较为满意的结果,现报道如下.一、临床资料经KOH直接镜检阳性确诊的65例甲真菌病,28例指甲真菌病,37例趾甲真菌病;男18例,女47例;＜20岁4例,20～39岁34例,40～59岁23例,60岁4例;病程长22年,短1个月,不到1年13例,1～3年25例,3～5年11例,大于5年16例;受累指趾甲,1个甲7例,1～3个18例,3～5个10例,5～10个22例,多于10个8例.65例甲真菌病患者真菌培养30例阳性,阳性率46.2%,其中红色毛癣菌20株,念珠菌7株,曲霉菌2株,青霉菌1株.
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角膜清创、羊膜移植、氟康唑三联治疗真菌性角膜溃疡
真菌性角膜炎是一种难治性感染性眼病.常见的致病菌株为曲霉菌、镰刀菌、念珠菌.农村多见,植物性损伤常为其诱因.目前尚无强有效的抗真菌药物,一旦发生真菌在角膜组织繁殖,蛋白溶解酶及真菌可溶性抗原等引起强烈的炎症反应,组织坏死,溃疡形成,极难控制，在短时间内可造成视力丧失甚至毁掉眼球.2002年1月～2004年2月,我们应用病灶清除联合羊膜移植治疗真菌性角膜溃疡11例,现报道如下.
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原位肝移植术后曲霉菌感染的观察和护理
曲霉菌是广泛存在于自然界的腐生菌,是人体皮肤和粘膜的常驻真菌,是条件致病菌.肝移植病人手术创伤大且术后使用大剂量免疫抑制剂和广谱抗生素,使曲霉菌感染的潜在性增加.本院自1993年4月～2002年6月施行原位肝移植105例(包括2例活体肝移植),6例发生肺部曲霉菌感染.现将护理体会报告如下.
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急性重症胰腺炎合并脑曲霉菌脓肿1例的护理
急性重症胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)是由胰腺局部病变引起的全身炎性反应,早期爆发炎性反应导致炎性因子过度消耗,出现免疫抑制反应综合征[1],并发多部位严重感染,增加抗菌药物的使用量和使用时间[2],易引发机体条件致病菌感染.曲霉菌是一种少见的内源性条件致病菌,易感人群主要为免疫抑制、长期使用广谱抗生素、恶性肿瘤患者,感染部位以皮肤黏膜和肺部感染为主,颅内感染罕见,病死率高达90％[3].
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卡泊芬净治疗耐药念珠菌血症伴肾衰2例报告
入住ICU的患者由于各种慢性基础疾病合并急性并发症致免疫抑制,以及高危的腹部外科手术、高龄、各种导管的留置、广谱抗菌药和糖皮质激素的广泛应用等危险因素的存在,侵袭性真菌感染(IFI)患病率逐年增加并严重威胁患者的生命[1].以念珠菌为主的酵母样真菌和以曲霉菌为主的丝状真菌是IFI常见的病原菌,分别占91.4%和5.9%[2].
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颅内曲霉菌感染1例治疗体会
目的 探讨颅内曲霉菌的综合治疗.方法 通过本院收治的1例颅内曲霉菌感染患者的综合诊治:采用开颅病灶切除,囊肿穿刺引流,同时予以口服抗真菌药物.结果患者取得非常满意治疗效果.结论 曲霉菌颅内感染治疗效果较差,死亡率较高.单纯用药物或手术疗效有限.如果手术与抗真菌药物联合治疗,则疗效明显提高.
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肺曲霉病36例临床分析
曲霉菌(aspergillus)广泛存在于自然界中,因机体免疫状态和基础肺疾病的不同,导致一组临床表现各异的肺曲霉病(pulmonary aspergillosis,PA).
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COPD继发曲霉菌感染危险因素分析
目的 分析慢性阻塞性肺病继发曲霉菌感染的危险因素.方法 采用回顾性病例对照分析方法,收集我院呼吸内科住院期间慢性阻塞性肺病继发曲霉菌感染36例作为感染组,随机抽取同期呼吸内科住院的无曲霉菌感染慢性阻塞性肺病患者36例作为对照组,对比分析两组患者的临床资料.结果 血清白蛋白水平、机械通气、侵入性操作及使用激素是引起曲霉菌感染的主要诱因,两组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 血清白蛋白水平、机械通气、侵入性操作及使用激素是慢性阻塞性肺病继发曲霉菌感染的危险因素.
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两性霉素B治疗侵袭性肺部真菌感染的安全性分析
目的 探讨两性霉素B治疗侵袭性肺部真菌感染的疗效及其安全性.方法分析我院应用两性霉素B治疗确诊或拟诊为侵袭性肺部真菌感染者的临床资料.结果 两性霉素B治疗34例侵袭性肺部真菌感染,疗效满意,有效率91.2%.不良反应发生率47%,畏寒、寒颤5.8%;消化道反应(恶心、呕吐、胸闷)23.5%;肾功能受损2.9%;肝损害,5.8%;低钾血症23.5%.结论两性霉素B治疗肺部侵袭性真菌感染,疗效高,是有效治疗曲霉菌和非白色念珠菌感染的首选之一.
