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血液灌流过程中的观察及护理
血液灌流器(一次性使用炭肾)采用血液灌流活性炭、吸附树脂为吸附剂,运用现代的先进科学技术,精制而成.利用活性炭和吸附树脂作用,通过体外循环血液灌流的方法来清除血液透析无法清除的中大分子毒物、环状小分子或与血浆蛋白结合率高的物质,从而达到血液净化的目的.
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环孢菌素A在肾脏疾病中的临床应用进展
环孢菌素A(CsA)是土壤中一种真菌的代谢物,是一个由11个氨基酸组成的环状多肽,70年代作为一种强力免疫抑制剂应用于器官移植,1985年Tejani首先报道用于治疗小儿肾病综合征,以后开始用于难治性肾病综合征及自身免疫性疾病的治疗,国内90年代开始应用于抗排异反应及肾病综合征.现将CsA治疗肾脏疾病的状况作一综述.
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镉饱和法测定大鼠肝脏及血浆金属硫蛋白方法研究
金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是一类广泛存在于生物体内的低分子量(分子质量约为6 000～7 000 u)、富含半胱氨酸、缺少环状氨基酸的金属结合蛋白,每摩尔MT可以结合6～12个锌、镉、铜、汞、银等重金属[1,6].结合了2价金属镉离子的MT在250 nm处有特殊的光吸收峰[2].
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TT病毒分子生物学研究进展
TT病毒属圆环病毒科，其基因组为单链负股环状DNA，全长约3.8kb，由编码区和非编码区组成，前者至少含有6个公认的开放阅读框架。TT病毒以滚环复制方式主要在肝细胞和造血细胞中复制，其转录产物包括3.0、1.2、1.0kb等3种剪接mRNA。TT病毒的衣壳蛋白由3.0kbmRNA转译，而1.2kb、1.0kb mRNA表达产物为非结构蛋白，对转录过程起调节作用。近，有研究发现，TT病毒开放阅读框架表达一种可能对肾上皮细胞有损伤作用的类鱼精蛋白。
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美国微生物学会会讯摘要
1.近来在黄石公园的酸性温泉中分离到了可感染古细菌)Sulfolobus Sulgataricus)的一种病毒,其结构为在病毒表面有"塔楼样")turret-like)的附属体,形成地道样的通道.共发现了36种感染古细菌的病毒,选择了一种有20面体结构,并生长快、感染性强的病毒)STIV)进行研究发现,STIV有环状双链DNA,与其他已知DNA基因组同源性很低;STIV衣壳上有从五重体末端延伸"塔楼样"结构,并推测这一结构是传递DNA的一种通道.这一病毒衣壳很像腺病毒的结构,这一结构相似性提示病毒可能均从一个祖先来源,即感染一个古生物,从而进化延伸分化为不同病毒;但是也有学者持质疑态度.
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肌肉环状指基因1和肌肉萎缩盒F基因的研究进展
世界范围为攻克骨骼肌萎缩这一难题作了大量基础研究和临床实验,但收效甚微.Bodine等[1]报道2种基因可以造成肌肉的萎缩.敲除小鼠任何1个基因,都能有效地缓解肌肉的萎缩过程.其中1个基因名为肌肉环状指基因1 (muscle ring finger 1,MuRFl);另外1个名为肌肉萎缩盒F基因(muscle atrophy Fbox,MAFbx,atrogin-1).这2个基因都参与了泛素化-1种骨骼肌蛋白质降解过程.肌萎缩常常伴随许多疾病和条件,包括癌症恶病质、败血症、糖尿病、甲亢、肾衰、失神经支配、大面积创伤、失重、寄生虫感染等.这些情况的特征都归因于蛋白质降解增加与合成受阻.
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动物细胞在胞质分裂过程中外皮的刚度变化
细胞是生命的基本单位,细胞的繁殖和分化使生命由单细胞形成个体进而生长、发育,并伴随生命的整个历程.动物细胞的分裂包括两个不同但相关的过程:核分裂和胞质分裂.胞质分裂是指:细胞在核分裂完成后,母细胞在赤道板处形成一条环状的致密带-收缩环,在收缩环的缢束下,胞质和质膜一分为二的过程.
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肝脏神经内分泌癌1例
患者男性,48岁,无不适,体检B超发现肝内多发不均匀稍高回声,拟诊肝囊腺瘤.实验室检查无特殊发现.MR表现:肝脏内多枚类圆形异常信号影,边界尚清,以肝右叶后下段病灶大,囊实相间,灶内可见多房囊灶及液平;病灶前部实性成分T1W呈低信号,T2W呈稍高信号,信号不均;肝内另两灶较小,实性为主,T1W呈较低信号,T2W呈稍高信号,信号欠均.动态增强表现:肝右后叶病灶实性部分早期呈不均匀强化,囊性周围环状强化,延迟期造影剂有部分退出;肝内另两枚病灶早期呈结节状不均匀强化,延迟期造影剂部分廓清.
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超声诊断下腔静脉旁异位嗜铬细胞瘤1例
患者男性,31岁,因偶发头晕、乏力就诊.查体:血压150/90 mmHg,平素血压正常.超声所见:右肾盂分离约50mm,实质区回声未见异常,输尿管上段扩张,循扩张的输尿管向下探测,其旁见1大小约79 mm×63 mm×47 mm的不均匀低回声团(图1),边界清,团块内部见较宽大的管样无回声区呈树枝状伸入其中,其内充满丰富的血流信号(图2),RI:0.52,团块周边可见半环状血流环绕.团块下缘平脐,上缘平脐上四指,左缘紧帖下腔静脉.团块与右肾下极、下腔静脉、腹部深部肌肉及周围肠管间均可见明显的相对运动.
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超声诊断小肠蛔虫1例
患者男性,15岁,反复出现发热一年,伴畏寒,寒战2日入院.查体:一般情况可,心肺未见异常,腹部无压痛,肝脾肋下刚及.超声检查:肝,胆,胰,脾,两侧肾未见异常.高频探头扫查,于脐水平右侧腹部探及肠腔内多个环状回声结构,直径约6 mm×4 mm不等(图1),形态规则,边缘光整,回声稍高,环内回声稍低,内部点状高回声(图2).
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胃窦部声像图上呈环状排列多发性胃溃疡1例
患者,女,38岁,因反复中上腹胀痛6年,加重2天就诊.查体无阳性体征.CEA等肿瘤标记物阴性.超声检查:使用仪器:Sequoia512,探头频率:3.5MHz.声像图表现:空腹时贲门大小正常,胃窦部呈假肾征样改变,范围约5.2cm×3.4cm;饮显像液后,胃窦部胃壁弥漫性增厚,较厚处达1.5cm,范围约6.4-9.
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HBV基因组与变异
一、HBV基因组结构人HBV属于嗜肝DNA病毒的一种.完整的HBV长度在3 182～3 221个核苷酸,HBV是环状部分双链结构DNA.其中负链完整,末端有8～9个碱基的冗长序列,并形成该部分三链结构;正链不完整,有固定的5'端,但3'端位置不确定.
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乙型肝炎病毒cccDNA
目前慢性乙型肝炎已成为危害人类健康的主要疾病.分子生物学的研究表明,乙型肝炎病毒(HBV)的共价环状闭合DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)在病毒持续感染、抗病毒治疗后病毒的再度活跃复制以及药物耐受方面起关键作用.
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乙型肝炎患者外周血单个核细胞中共价闭合环状DNA的检测及其临床意义
目的 分析HBV感染者PBMC中HBV cccDNA与血清HBV DNA、HBsAg、HBeAg、肝组织学的相关性,并探讨其临床意义.方法 选取108例HBV感染者,密度梯度离心法提取PBMC,实时荧光定量PCR检测PBMC中HBV cccDNA和血清HBV DNA,化学发光定量检测血清中HBsAg和HBeAg,其中59例慢性HBV感染者行肝活组织检查.计数资料比较采用x2检验,计量资料比较采用相关性分析,计量资料不符合正态分布的采用非参数检验.结果 108例HBV感染者PBMC中HBV cccDNA阳性59例,占54.6％,其中15例肝功能衰竭患者HBV cccDNA阳性11例,明显高于8例急性乙型肝炎中2例阳性(x2 =4.960,P＜0.05).根据患者血清HBV DNA载量分为＞5 lg、3～5 lg和＜3 lg拷贝/mL组,其PBMC中HBV cccDNA阳性率分别为76.1％(51/67)、5/18和13.0％(3/23),HBV DNA高载量组与中、低载量组比较,差异有统计学意义(x2值分别为14.751、28.384,均P＜0.05).PBMC中HBVcccDNA与血清HBV DNA载量和HBsAg呈正相关(r值分别为0.554、0.497,均P＜0.05).PBMC中HBV cccDNA在肝组织学≥G2和(或)S2组检出率明显高于＜G2/S2组(x2=9.159,P＜0.05).结论 HBV感染者PBMC中存在HBV cccDNA,且与血清HBV DNA和HBsAg呈正相关,也与肝组织学损伤相关.
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肝功能正常的乙型肝炎病毒感染者肝组织共价闭合环状DNA的研究
目的 探讨肝功能正常的HBV感染者肝组织HBV共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)与血清HBV DNA、肝组织总HBV DNA之间的相关性.方法 实时荧光定量PCR检测125例肝功能正常的HBV感染者的血清、肝组织总HBV DNA和肝组织HBV cccDNA定量.正态分布数据采用直线相关分析,非正态分布数据采用非参数统计.结果 HBV感染者血清HBVDNA为(5.87±1.47) lg IU/mL,肝组织总HBV DNA为(6.63±1.27) lg拷贝/106细胞；HBV cccDNA为(5.66±0.95) lg拷贝/106细胞.血清HBV DNA与肝组织总HBV DNA呈正相关(r=0.743,P＜0.01),血清HBV DNA与肝组织HBV cccDNA呈正相关(r=0.417,P＜0.01),肝组织总HBV DNA与肝组织HBV cccDNA呈正相关(r=0.443,P＜0.01).肝组织HBV cccDNA在31～40岁年龄段高,血清HBV DNA和肝组织总HBV DNA则在20～30岁年龄段高.64例(51.2％)HBV感染者肝组织病理学提示为＜G2S2,HBV cccDNA水平与肝组织炎症活动度分级和纤维化分期无关(x2 =0.048,P＞0.05).结论 肝功能正常的HBV感染者肝组织HBV cccDNA与肝内总HBV DNA、血清HBV DNA呈正相关,不同年龄HBV感染者血清和肝组织内HBV复制水平存在差异,HBV cccDNA水平与肝组织病理学无关.
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阿德福韦酯序贯聚乙二醇干扰素α-2a治疗HBeAg低效价慢性乙型肝炎患者的疗效
目的 探讨阿德福韦酯长期单药治疗后仍处于HBeAg低效价的慢性乙型肝炎患者,加用聚乙二醇干扰素α-2a治疗48周的疗效.方法 本研究为随机、开放、前瞻性的临床试验.将阿德福韦酯单药治疗72～144周仍处于低HBeAg效价(5 S/CO＜ HBeAg＜ 50 S/CO),且血清HBsAg定量＜5000 IU/mL的患者按随机数字表法分为单药组和加药组,单药组继续阿德福韦酯单药治疗48周,加药组加用聚乙二醇干扰素α-2a治疗48周,比较两组治疗前后血清HBeAg效价下降程度、阴转率、血清学转换率和肝组织HBV DNA、HBV共价闭合环状脱氧核糖核酸(cccDNA)载量的下降程度,对两种治疗方案进行疗效评估.患者治疗前后比较采用配对样本t检验,组间比较采用独立样本t检验,组间率的比较采用x2检验.结果 共纳入55例慢性乙型肝炎患者,单药组27例,加药组28例,两组患者年龄分布、性别比例、ALT、AST、TBil、血清HBeAg和HBsAg、肝组织HBV DNA和HBV cccDNA载量在基线水平比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).治疗48周后,单药组完成试验25例,加药组26例.加药组HBeAg阴转率、血清转换率均高于单药组(x2值分别为5.38、4.69,均P＜0.05).两组HBeAg效价均较基线值下降(t值分别为8.43和8.50,均P＜0.01)；加药组HBeAg效价低于单药组(t＝5.60,P＜0.01).加药组治疗48周HBV DNA和HBV cccDNA载量分别为(6.93±0.52) lg IU/mg和(5.63±0.54)1g IU/mg,与基线值比较差异均有统计学意义(t值分别=7.12和6.67,均P＜0.01).单药组治疗48周HBV DNA载量为(7.09±0.43)1g IU/mg,与基线值比较差异有统计学意义(t=2.67,P＝0.02)；治疗后48周,加药组与单药组HBV cccDNA载量比较差异有统计学意义(t=2.87,P＝0.00).结论 经阿德福韦酯长期治疗后仍处于HBeAg低效价的慢性乙型肝炎患者,加用聚乙二醇干扰素α-2a,有利于提高血清HBeAg的阴转率和血清学转换率,并加速肝组织HBV DNA、HBV cccDNA的清除.
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乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA与松弛环状DNA对核苷(酸)类药物耐药变异的比较
目的 了解肝细胞内HBV共价闭合环状DNA( HBV cccDNA)核苷(酸)类药物耐药变异的情况,并比较其与松弛环状DNA(rcDNA)耐药变异的异同.方法 取40例慢性HBV感染肝移植患者的部分肝组织,采用十二烷基硫酸钠-蛋白质沉淀法结合DNA提取试剂盒分离提取肝内的HBV cccDNA和rcDNA.将抽提产物用不降解质粒的ATP依赖DNA酶酶切纯化后,用跨HBV基因组双链缺口并涵盖常见核苷类耐药位点(rt169～rt250)的引物行单轮PCR或套式PCR选择性扩增cccDNA.另用不跨双缺口的引物PCR扩增肝组织内的HBV rcDNA和患者肝移植术前的血清HBV rcDNA.用直接测序法对上述扩增产物进行基因测序并分析核苷(酸)类药物耐药位点的检出情况.结果 40例患者中,31例肝组织内检测到HBV cccDNA,35例肝组织检测到HBV rcDNA,21例肝移植术前血清中检测到HBV rcDNA.测序结果显示,2例肝组织内cccDNA、rcDNA和血清rcDNA均检测到rtM204Ⅰ变异；有2例患者肝内cccDNA、rcDNA分别存在rtM204Ⅰ、rtQ215H变异,而血清rcDNA未检测到相应变异；3例血清中分别存在rtM204V、rtM204V、rtV173L+ rtL180M+rtM204V变异,而肝内cccDNA和rcDNA未检测到相应变异.结论 慢性HBV感染者肝细胞内cccDNA可出现核苷(酸)类药物耐药变异,且肝组织内的cccDNA、rcDNA耐药变异株与血清中的rcDNA耐药变异株不完全一致.
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上海地区2009年至2010年婴儿呼吸道感染病毒谱系的特征
目的 使用Seeplex(R)RV15 ACE检测试剂盒检测上海地区婴儿呼吸道感染病毒的病原谱系.方法 征集新华医院儿科呼吸道发热门诊0～1岁组患儿62例,以咽拭子对呼吸道分泌物采样,提取样本中病毒核酸,反转录合成cDNA,使用Seeplex(R)RV15 ACE检测试剂盒扩增15种呼吸道病毒的目的 基因,以琼脂糖凝胶电泳检测特异性产物条带,判定感染病毒.并以检出病毒与检出季节和临床特征进行比较.数据采用Fisher's精确检验和卡方检验.结果 62例呼吸道感染患儿从咽拭子中检出病毒阳性36例,占58.1%,其中呼吸道合胞病毒B型(RSV-B)、鼻病毒、腺病毒、肠道病毒(hEV)、冠状病毒229E-NL63、A型流感病毒、副流感病毒1型和3型、博卡病毒、偏肺病毒、B型流感病毒的检出率分别为12.9%、11.3%、11.3%、8.0%、6.5%、6.5%、4.8%、4.8%、1.6%、1.6%和1.6%.检出双重感染6例,三重感染1例,多重感染占阳性病例的19.4%(7/36).冬季RSV-B检出率,高于其他三季(Fisher's精确检验,P=0.001),夏季检出hEV高于其他三季(Fisher's精确检验,P=0.01).结论 RSV-B、鼻病毒和腺病毒是上海地区婴儿呼吸道感染的前三位病毒病原体,多重病毒感染常见.
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慢性乙型肝炎患者树突状细胞功能与单个核细胞乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的关系
目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单个核细胞(PBMC)及树突状细胞(DC)内HBV共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)的存在状况,DC成熟度及功能状态与DC或PBMC中HBV cccDNA载量的关系.方法 分离29例CHB患者和10例健康对照者的PBMC,用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和重组人IL-4诱导分化DC.实时定量PCR检测PBMC和培养第7天所得DC中HBV cccDNA载量,流式细胞仪分别检测其表面CD209、CD80、CD86、人类白细胞抗原(HLA)-DR和CD1a的表达,混合淋巴细胞反应检测DC诱导同种异体T淋巴细胞增殖能力,ELISA检测DC培养上清液中IL-12水平.数据行t检验和方差检验.结果 所有29例CHB患者的DC内检测不出HBV cccDNA,其中16例CHB患者PBMC内检测出HBV cccDNA.PBMC中HBV cccDNA阳性患者DC表面分子CD209(r＝0.793,P＜0.01)、CD80(r＝0.581,P＜0.05)、CD86(r＝-0.698,P＜0.01)、HLA-DR(r＝-0.817,P＜0.01)、CD1a(r＝-0.734,P＜0.01)表达、IL-12水平(r＝-0.632,P＜0.05)和诱导同种异体T淋巴细胞增殖的能力(r＝-0.617,P＜0.05)与HBV cccDNA载量呈负相关.29例CHB患者DC表面分子(CD209、CD80、CD86、HLA-DR、CD1a)表达水平、DC培养上清液中IL-12分泌水平、DC刺激同种异体T淋巴细胞能力均显著低于健康对照,其中PBMC中HBV cccDNA阳性组较阴性组下降更为明显(P＜0.05,P＜0.01).结论 CHB患者DC功能和成熟度较低,其PBMC中可检测到HBV cccDNA;且PBMC中载量越高,DC功能和成熟度越低.
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乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的检测
目的 检测不同肝脏病变程度的乙型肝炎患者外周血中的HBV共价闭合环状DNA(HBV cccDNA),评价其相关的影响因素和临床意义.方法 共观察57例乙型肝炎患者,其中轻度慢性乙型肝炎患者26例,重型乙型肝炎患者31例.患者入院后行PT、肝功能、肝炎病毒血清标志物等常规检测,并进行总HBV DNA和HBV cccDNA检测.Logistic逐步回归分析影响血清HBVcecDNA检出率的相关因素.结果重型乙型肝炎组13份血清标本HBV cccDNA为阳性,轻度慢性乙型肝炎组仅1份血清标本HBV cccDNA为阳性,血清HBV cccDNA的含量为1.25×103～4.88×104拷贝/mL,两组患者血清HBV cccDNA检出率差异有统计学意义(P=0.0014).血清HBV cccDNA检测诊断重型乙型肝炎患者的灵敏度和特异度分别为41.94%和96.15%.Logistic逐步回归分析显示,血清HBV ccvDNA的检出率与PT有关(X<'2>=7.2192,P=0.0072),而与患者的年龄、性别、血清总HBV DNA、TBil和ALT水平无相关性.结论 部分乙型肝炎患者特别是重型肝炎患者外周血中可以检测出HBV cccDNA,血清HBV cccDNA的检出可作为支持重型乙型肝炎诊断的指标之一.
