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一株麦氏弧菌引起O1 39霍乱弧菌诊断血清凝集反应的情况分析
[目的]对可疑菌落进行属性鉴定.[方法]对可疑菌落作O139、O22、O155诊断血清玻片凝集试验;对凝集菌落进一步作试管凝集和生化试验.[结果]初步鉴定为O139乱弧菌;再经生化鉴定并结合形态特征,确定为麦氏弧菌.[结论]对霍乱弧菌的实验室鉴定,应以血清学性状为主,并结合形态学和生化学性状作出判定.应采用单克隆抗体作后鉴定,以排除假阳性.
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副溶血性弧菌诊断血清的比较
目的 比较我国自主生产和进口的副溶血性弧菌诊断血清在检出率、反应强度和特异性等方面的差异.方法 使用进口和我国自主生产的诊断血清同时对35株副溶血性弧菌标准菌株和60株临床菌株进行玻片凝集,以检测其血清型.结果 对于参考菌株,两者的检出率均为100%,对于临床株,两者的一致率为95%;且两者的特异性均良好.结论 我国自主生产的副溶血性弧菌诊断血清性能良好,可以用于副溶血性弧菌分型鉴定.
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哈尔滨市社会福利院一起痢疾暴发的调查
2005年3月8日,哈尔滨市太平区卫生防疫站在网上接到哈尔滨市社会福利院暴发痢疾的报告,经现场调查核实A栋楼无腹泻病例,B栋楼110人中共39例在3月2-11日出现腹痛、腹泻等相似症状,年龄20～72岁,其中男性36例,女性3例,罹患率35.5%,3月9日采集腹泻患者39份肛拭标本进行细菌学检验.志贺菌属诊断血清为卫生部生物制品研究所产品;生化系列和试纸由法国生物梅里埃中国有限公司提供;药物敏感试验采用WHO(1979)推荐的Kirby-Baller法,药敏纸片购于北京天坛药物技术开发公司,批号200409.细菌的分离和鉴定按照"中华人民共和国卫生部传染病诊断标准及处理原则"进行检验[1],并参考"卫生防疫细菌检验"方法.将39份标本接种于沙门志贺菌属琼脂(SS)、麦康凯琼脂(Mac)培养基,于37℃培养24 h;将39份棉拭直接放GN增菌液中,于37℃18-24 h培养后分离于SS、Mac上.
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成都市新都区从甲鱼中检出O139霍乱弧菌
成都市新都区疾病预防控制中心在2004年5月开展的霍乱常规监测工作中,首次从甲鱼涂抹物标本中检出O139霍乱弧菌.甲鱼标本取自新都区市场和酒楼的甲鱼表面涂抹物16份,采样及检验方法按<霍乱防治手册>进行.试剂由杭州天和微生物试剂厂提供,霍乱弧菌诊断血清由卫生部兰州生物制品研究所提供,均在有效期内.
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鼠伤寒沙门氏菌引起足部感染一例
患者男性，65岁，有糖尿病史。因右足红肿及第四、五NFDE6根部溃烂伴发热，在当地医院治疗无效于1999年9月6日来我院就诊。(1)实验室检查：WBC 21.8×109/L、N 0.89、L 0.11，空腹血糖11.8 mmol/L、尿糖()。取脓性分泌物分别接种血平板及SS平板，35℃ 24 h培养。血平板可见中等大小、灰白色、光滑湿润的菌落，在SS平板上可形成无色透明、光滑、中心产H2S黑色菌落，涂片为革兰氏阴性杆菌。生化反应：在克氏双糖铁培养基斜面上反应阴性，下层产酸产气，产H2S。分解葡萄糖、甘露醇、阿拉伯糖、鼠李糖、液化明胶，赖氨酸、鸟氨酸均为阳性；苯丙氨酸、靛基质、尿素、枸橼酸盐均为阴性，符合沙门氏菌特征。(2)用沙门氏菌属诊断血清作凝集试验：A-F多价血清及O4、O6、Hi均为阳性，盐水对照为阴性，后诊断为鼠伤寒沙门氏菌。(3)药敏试验(K-B法)：本菌对先锋铋、丁胺卡那霉素敏感，对氟哌酸、环丙沙星中敏，对头孢唑啉、氧哌嗪青霉素、氨苄青霉素、庆大霉素、妥布霉素耐药。 病人入院后以敏感抗生素治疗，并用降血糖药治疗1个月，足NFDE6痊愈，糖尿病控制后出院。
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北京昌平地区1990～1999年腹泻病原菌监测
为了解北京昌平地区腹泻病原菌分布及构成特点，探讨其流行规律，制定可行的防治措施，于1990～1999年6～8月采集昌平区医院肠道门诊腹泻病人大便标本2 226份进行病原菌检测及细菌耐药性调查，结果总结如下。 1.材料和方法： (1)标本来源：昌平区医院肠道门诊1990～1999年6～8月就诊腹泻病人大便。 (2)检测内容：所有标本均检测霍乱弧菌、沙门菌、志贺菌、病原性大肠杆菌(EPEC、EIEC、ETEC)，部分标本还检测了肠出血性大肠杆菌(EHEC)及其他引起腹泻的细菌。 (3)分离和鉴定方法：粪便标本直接接种SS、Mac、SIB、弧菌琼脂分离，按常规方法进行鉴定，1998年后用API细菌鉴定系统鉴定。 (4)诊断血清：沙门菌、志贺菌、病原性大肠杆菌血清购自成都生物制品研究所，API试条及配套试剂购自法国梅里埃公司，药敏试验培基及纸片购自中国药品生物制品检定所，标准菌株由北京市卫生防疫站提供。以上全部诊断试剂及培基均在有效期内使用。
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自腹泻患者标本中检出产硫化氢志贺1型菌
1998年6月，我们由肠道门诊腹泻患者粪便中分离到1株产硫化氢(H2S)的革兰阴性杆菌，生化反应符合志贺菌属。 1.材料与方法：营养肉汤、GN增菌液、克氏双糖铁琼脂(KI)、伊红美兰琼脂(EMB)、SS琼脂等由杭州微生物试剂厂生产；肠杆菌科细菌生化编码鉴定管GYZ-15e由杭州微生物试剂厂产品，批号980112，其余自制；志贺菌属诊断血清21种由卫生部成都生物制品研究所生产，批号980101，有效期2000年1月；庆大霉素等10种药敏纸片由杭州微生物试剂厂产品，在有效期内使用；鲎试剂由中国湛江海洋生物制品厂生产，灵敏度0.5 EU/ml，批号980424。 标本的分离、培养和鉴定按北京市卫生防疫站编《卫生防疫检验手册》程序进行。药敏试验采用Kirby-Bauer法。鲎试验按中华人民共和国药典中细菌内毒素检查法进行。豚鼠角膜试验执行《卫生防疫检验手册》程序。 2.结果： (1) 粪便标本接种GN增菌液，37 ℃4 h增菌培养的同时，直接划线SS和EMB琼脂做分离培养。次日在SS和EMB琼脂上呈现纯培养，无色、透明、较小的菌落。挑取可疑菌落。接种KI上，做初步生化反应， 37 ℃培养过夜，生长菌无动力，分解葡萄糖产酸不产气、不发酵乳糖，但产生H2S。涂片染色为革兰阴性杆菌, 生化编码鉴定排除沙门菌、变形杆菌、枸椽酸杆菌等。用志贺菌属群、型诊断血清作凝集反应，初步鉴定为产H2S志贺1型菌，也是引起腹泻病的唯一病原菌。 (2) 产H2S志贺1型菌的微生物学性状：为革兰阴性短小杆菌，长约2～3 μm，宽0.5～0.7 μm，无动力，无芽胞，无荚膜，无鞭毛。37 ℃ 24 h培养后，在营养肉汤和GN增菌液中均匀混浊，无沉淀、无荚膜。在SS琼脂上，为无色、半透明、圆形、光滑、湿润、边缘整齐，稍有凸起的较小菌落，直径0.5～0.8 mm；在EMB琼脂上，菌落无色半透明，边缘整齐，圆形，光滑，湿润，直径1.2～1.6 mm。该菌分解葡萄糖产酸不产气，不分解乳糖、蔗糖、甘露醇、卫矛醇、肌醇、侧金盏花醇、棉子糖、纤维二糖、木糖、鼠李糖和水杨素等。甲基红试验和硝酸盐还原试验阳性，靛基质、 VP 试验阴性，不分解尿素，不利用枸橼酸盐、赖氨酸脱羧酶，鸟氨酸脱羧酶和精氨酸双水解酶均阴性，在醋酸盐中不生长。除产H2S外，生化反应符合志贺菌属。与志贺菌属4种多价和志贺1型诊断血清呈现凝集，与生理盐水和其他群型血清无自凝和交叉凝集现象。经安徽省卫生防疫站鉴定，确认为产H2S志贺1型菌。
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ipaH基因扩增诊断志贺菌和肠侵袭性大肠埃希菌
我们应用聚合酶链反应(PCR) 直接检测189份腹泻患者粪便标本的ipaH基因。 一、材料和方法 1.菌株来源:取自我院腹泻患者的粪便标本189份。标准菌株:福氏志贺菌(卫生部质控菌株),大肠埃希菌(EICE),小肠结肠炎耶尔森菌(中国药品生物制品检定所)；阴沟肠杆菌、奇异变形杆菌、伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、不凝集弧菌、绿脓假单胞菌为本室保存菌株。 2.培养基及诊断血清:中国蓝蔷薇色酸琼脂培养基;志贺菌属诊断血清,肠侵袭性大肠埃希菌诊断血清(11种)。
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实验动物细菌鉴别用血清的制备及标化
目的 制备并标化16种实验动物相关病原菌鉴别诊断血清.方法 将16种标准菌株灭活,制成适宜浓度的免疫用细菌菌液,分别经耳缘静脉和背部皮下多点注射32只SPF家兔,获得相应抗血清,经吸收去除非特异性凝集,制成特异性诊断血清.结果 以玻片法和定量凝集法进行敏感性及特异性试验,结果显示抗血清只与相应的免疫用细菌形成特异性的凝集颗粒,抗血清凝集效价≥1:1 280.结论 所制备的抗血清特异性强、效价高,为实验动物细菌学检测提供了有效的血清学鉴别诊断试剂.
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1993～1999年德州市供管水人员菌痢粪检结果分析
供管水人员是与饮用水接触密切的特殊人群。笔者对德州市1993～1999年供管水人员粪便痢疾杆菌检测资料进行整理分析，为进一步加强饮用水卫生监督提供科学依据。 调查对象为德州市区直接从事供管水的人员，包括从事净水、取样、化验、二次供水卫生管理及水池、水箱清洗人员。 检测方法：用无菌棉拭子采集供管水人员粪便标本，接种于GN增菌液内，37℃培养6～8h，用SS平板分离，按志贺氏菌属常规方法进行鉴定。志贺氏菌属诊断血清为成都生物制品研究所生产，在有效期内使用。肠肝菌科分属诊断噬菌体由江西省卫生防疫站提供。所用培养基均为山东省卫生防疫站生产半成品，按说明配制使用。
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O139霍乱弧菌的鉴定及药敏分析
O139霍乱弧菌是引起急性肠道传染病的病原菌.自1992年10月,印度、孟加拉国相继发生霍乱样腹泻的爆发流行,临床表现与流行病学都与O1群霍乱弧菌基本相似,而且从病人分离的菌株与O1～O138群霍乱弧菌诊断血清均不发生凝集.因而被WHO确定为引起霍乱弧菌的又一病原体.1993年5月,我国新疆首次出现O139霍乱爆发性流行,随后内地一些地区及东南沿海地区相继出现流行或散发.1997年我省也发现了首例病例.2000年我市出现首例病人(2002年无病人)至今5年了.为了解本市O139霍乱弧菌的药敏情况,帮助防治工作合理选用抗生素而提供科学依据.我们选用14种具有代表性的抗生素对当地2005年分离的O139霍乱弧菌进行鉴定及药敏测试.
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从食物中毒腹泻便中分离出类志贺邻单胞菌的报告
2003年9月,我市一家庭食物中毒,4人腹泻4～6次/日,无发烧呕吐症状.来我站便检,从3人便中检出类志贺邻单胞菌,鉴定结果如下:菌样鉴定1培养基及其它培养基系北京陆桥生物制品有限公司产.诊断血清系成都生物制品所产.生化试剂由杭州天和微生物试剂有限公司产.药敏片由北京天坛药物技术开发公司产.
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微生物实验室菌种的保管与保存
在微生物实验室中,常需保存一些实验中常用的标准菌种及菌株,如金黄色葡萄球菌,致病性大肠杆菌,几种常见的沙门氏菌,痢疾杆菌等,以供学生进行细菌涂片染色检查、细菌接种培养、制备凝集抗原、免疫动物制备诊断血清及测定诊断血清效价等.在做抗菌药物敏感试验时,也需常备一套对各种抗菌药物"敏感"的对照菌株,使学生学会判断细菌对药物的敏感性.对这些菌种的妥善保管和保存,是良好的实验室管理和实验质量的重要保证.
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从业体检中检出1株少见C群沙门菌报告
2002年8月,本室自一名从业人员健康体检便样中检出1株C群沙门菌,该菌与沙门菌诊断血清A-F-0多价、O:7、H:r发生凝集,经诱导后与H:2因子血清凝集,但同时又与lv血清凝集.现将结果报告如下.
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流脑病人血液中检出C群脑膜炎奈瑟菌
2002年1～3月份,广西壮族自治区来宾县良塘乡发生流脑流行,共发现流脑病人15例,死亡3例.从暴发点患者血液中分离出一株病原菌,经鉴定为革兰染色阴性双球菌,其菌落形态、生长试验及生化反应均符合奈瑟菌特征.采用原中国预防医科院流研所和兰州生物制品研究所生产的诊断血清进行玻片凝集试验,鉴定为C群脑膜炎奈瑟菌.
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沙门菌O9诊断血清鞭毛变异分析
青海省疾病预防控制中心组织开展的全省各级实验室微生物检验质量控制考核中.于2000年及2002年2次发现O9沙门菌诊断血清与B群沙门菌发生凝集现象,经兰州生物制品研究所鉴定为O9血清免疫菌种50096变异,已带有"H"相抗原.报告如下.
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益肾康对慢性肾孟肾炎小鼠尿液IL-2的影响
1实验材料1.1实验动物昆明种雄性小鼠,体重20g±2g,鼠龄8W(黑龙江中医药大学实验动物中心);菌种:选用大肠杆菌O111-B4标准菌株(黑龙江省防疫站);试剂:致病性大肠杆菌O111-B4诊断血清(卫生部兰州生物制品厂);兔抗鼠IL-2及羊抗兔IgG,辣根过氧化物酶标记(北京天象人公司).
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64株与沙门菌、志贺菌血清凝集的肠杆菌鉴定
我县每年一次的从业人员健康体检粪便检测标本中,经常发现有符合沙门菌、志贺菌三糖铁反应的可疑菌落与沙门、志贺菌诊断血清发生凝集,而系统生化鉴定又不符合的交叉凝集现象. 因为工作量大,血清凝集很费时间,我们采用可疑菌落-三糖铁-多价血清凝集-系统生化-血清分型的操作流程. 一经多价血清凝集先做系统生化,生化确证后再血清分型. 在检测中我们发现有64株与沙门菌、志贺菌多价血清凝集的菌株,经系统生化鉴定,血清学分型,与沙门菌AF-O多价血清凝集的菌株有37株,其中5株确诊为沙门菌;与志贺菌多价血清凝集的菌株有27株,其中2株确诊为宋氏志贺菌. 检测结果显示,与肠道主要致病菌交叉凝集的常见肠道杆菌,第一是蜂房哈夫尼亚菌,其次是大肠埃希菌. 现将64株菌株鉴定过程分析如下.
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致泻性大肠埃希菌检测及耐药性分析
目前国际上将致泻性大肠埃希菌分为五类:产毒性大肠埃希菌(ETEC)、致泻性大肠埃希菌(EPEC)、侵入性大肠埃希菌(EIEC)、出血性大肠埃希菌(EHEC)和粘附聚集性大肠埃希菌(EAEC)[1,2].为了解致泻性大肠埃希菌检测率及耐药性,对本院1998年6月至2001年6月就诊的腹泻病人采集大便标本进行细菌学检测及药敏分析,现报道如下.材料与方法1 标本来源本院1998年6月至2001年6月就诊腹泻病人1848例大便.2 试剂及诊断血清培养基及药敏纸片购自浙江省军区后勤部卫生防疫所;志贺菌、沙门菌及致泻性大肠埃希菌诊断血清购自成都生物制品研究所,菌种鉴定板购自威自达医疗有限公司,以上试剂均在有效期内使用.
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一株类志贺邻单胞菌与霍乱弧菌诊断血清发生凝集的报告
类志贺邻单胞菌引起的急性感染性腹泻,是近年来新认识的一种急性肠道传染病,已引起国内外学者的关注,现已成为世界部分地区尤以发展中国家和热带国家、散发性或暴发性感染性腹泻病因之一[1].类志贺邻单胞菌与宋内氏菌中的0抗原有共同抗原[2],但与霍乱弧苗存在共同抗原,报道尚较少见.本文报道在霍乱弧菌检测中发现一株不仅与宋内氏志贺氏菌诊断血清发生凝集,而且与霍乱弧菌诊断血清也发生凝集,现将结果报告如下
