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氨基酸腹膜透析液与传统腹膜透析液对腹膜间皮细胞功能的影响
目的通过体外实验对照观察了含氨基酸腹膜透析液(1.1% Nutrineal)和传统葡萄糖腹膜透析液(1.5%Dianeal)对正常人腹膜间皮细胞(HPMC)的生物相容性及功能的影响.方法用1.1%Nutrineal和1.5%Dianeal进行腹膜透析,4 h后引流.观察两种不同透出液及不同时间对体外培养的HPMC功能的影响.采用四甲基偶氮多胍(MTr)和细胞直接计数法测定HPMC增殖程度,以测定乳酸脱氢酶(LDH)水平显示细胞损伤程度.采用ELISA法测定白细胞介素6(IL-6)水平.结果与5%葡萄糖对照组相比,1.5%Dianeal透出液可显著降低HPMC细胞增殖能力、细胞总蛋白合成、IL-6分泌水平和细胞黏附能力(P＜0.001、P＜0.001、P＜0.0001、P＜0.0001),而细胞培养液上清中的LDH分泌水平明显提高(P＜0.001).1.1%Nutrineal透出液可降低HPMC细胞增殖能力(P＜0.001)和明显增加IL-6的分泌水平(P＜0.0001),但对HPMC的LDH分泌水平,细胞黏附能力,蛋白总合成量无明显影响.结论与传统的葡萄糖腹膜透析液相比,氨基酸腹膜透析液能更好地维持HPMC在细胞存活能力、细胞黏附功能及蛋白合成等方面的功能.氨基酸腹膜透析液可诱导HPMC分泌IL-6水平显著升高,其机制有待进一步探讨.
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高糖对大鼠腹膜间皮细胞中P21WAF1基因表达的影响
目的研究细胞周期调控蛋白p21WAF1在高糖对腹膜间皮细胞增殖抑制中的作用.方法用流式细胞仪技术及半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定不同浓度的葡萄糖对体外培养的大鼠腹膜间皮细胞细胞周期分布和p21WAF1mRNA表达的影响.结果在高糖的培养条件下,大鼠腹膜间皮细胞出现细胞肥大,胞核增多,细胞分裂停止,且大多数间皮细胞的细胞周期停滞于G1期.在静止期的间皮细胞几乎无p21WAF1 mRNA的表达,在高浓度葡萄糖刺激下p21WAF1mRNA明显增加,且随着浓度增高而表达增高,且含糖浓度为3.86%时p21wAF1的表达比含糖为1.38%时明显增高(P＜0.05).在和含糖浓度为3.86%、1.38%组渗透压相同的甘露醇组也几乎无p21wAF1 mRNA的表达.结论 p21wAF1可能在高糖对间皮细胞的抑制作用及G1期阻滞中起重要的调节作用.
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腹膜间皮细胞过氧化物酶体增殖物活化受体γ的表达及其配体对CD40和细胞间黏附分子1的影响
目的观察过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPAR-γ)在大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs)中的表达以及脂多糖(LPS)的调节作用,并探讨PPAR-γ天然配体15d-PGJ2及人工合成配体ciglitazone对RPMCs表达CD40和ICAM-1的影响.方法分离及培养RPMCs,常规传代及鉴定,取第2代细胞用于实验研究.LPS不同浓度(0.1、1.0、10、50及100 μg/ml)、LPS(1μg/ml)处理后不同时间点及15d-PGJ2(3μmoμ/L)、ciglitazone(10 μmol/L)作用细胞36 h后收集细胞.RT-PCR检测PPAR-γ、CD40以及ICAM-1 mRNA表达.免疫细胞化学检测PPAR-γ在RPMCs中的分布.Western印迹检测PPAR-γ及ICAM-1蛋白表达.结果 (1)常规培养的RPMCs表达一定量PPAR-γ,表达部位主要分布于RPMCs细胞核内,在细胞浆微弱表达.(2)随着LPS浓度逐渐增大,PPAR-γ蛋白表达水平呈逐渐增高的趋势,LPS浓度为10 μg/ml时其表达为高峰.LPS(1μg/ml)作用12 h时PPAR-γ蛋白表达强,PPAR-γ1表达高于PPAR-γ2;之后显著降低,持续至72 h.(3)LPS刺激后RPMCs CD40mRNA表达显著增强;15d-PGJ2、ciglitazone显著降低CD40 mRNA表达(P均＜0.01).(4)LPS刺激后RPMCs ICAM-1蛋白表达显著增加;15d-PGJ2增加LPS介导的ICAM-1 mRNA表达(P＜0.01),但显著抑制ICAM-1蛋白表达(P＜0.05).ciglitazone对LPS介导的ICAM-1 mRNA和蛋白表达均有显著抑制作用(P均＜0.05).结论RPMCs结构性表达PPAR-γ.LPS调节PPAR-γ表达呈现先增强后抑制趋势.PPAR-γ配体可显著抑制LPS介导的CD40 mRNA和ICAM-1蛋白的表达.提示RPMCs功能性表达PPAR-γ,可能通过负性调节炎症介质分泌而参与腹腔局部防御.
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恶性胸膜间皮瘤治疗现状和展望
肺癌是胸部肿瘤中发病率和死亡率高的恶性肿瘤,医护人员甚至许多普通百姓都对其耳熟能详,但另一类胸部肿瘤--恶性胸膜间皮瘤却"深藏闺中无人识".恶性间皮瘤是一种少见的高度侵袭性肿瘤,起源于胸膜、腹膜和心包腔的被覆间皮细胞,其中恶性胸膜间皮瘤常见,约占70%.有研究显示在我国由于临床医生对该病的认识不足,高达2/3的患者被误诊.
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恶性胸膜间皮瘤概述
恶性间皮瘤是罕见的高度侵袭性肿瘤,起源于胸膜、腹膜和心包腔的被覆间皮细胞.恶性胸膜间皮瘤为常见类型,约占所有恶性间皮瘤70%.恶性间皮瘤在全世界范围内发病率逐渐升高,因为致病因素石棉仍在广泛应用.这是医学界和公众都在关注的问题.
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己酮可可碱对TGF-β1诱导的腹膜间皮细胞胶原ⅠmRNA表达及细胞外信号调节激酶活性的影响
[目的]探讨己酮可可碱对转化生长因子-β1诱导的大鼠腹膜间皮细胞胶原Ⅰ mRNA表达及细胞外信号调节激酶活性的影响.[方法]用逆转录-聚合酶链反应检测腹膜间皮细胞胶原Ⅰ mRNA表达,用Western blot 检测磷酸化细胞外信号调节激酶.[结果]①0.3 mg/mL己酮可可碱与对照组相比,可下调胶原ⅠmRNA表达32%(P＜0.01),其抑制作用呈时间依赖性关系,作用16 h抑制作用达高峰(0.790vs 0.426,P＜0.001).②TGF-β1可诱导腹膜间皮细胞胶原Ⅰ mRNA表达上调(132.00vs 592.00,P＜0.001),以及磷酸化细胞外信号调节激酶表达增加(201.67vs 682.00,P＜0.001).③己酮可可碱可抑制TGF-β1诱导的腹膜间皮细胞胶原Ⅰ mRNA表达上调(0.945vs 0.594,P＜0.01),并可逆转TGF-β1诱导的磷酸化细胞外信号调节激酶表达增加(682.00vs 426.00,P＜0.001),其抑制作用呈剂量依赖关系.[结论]己酮可可碱可下调腹膜间皮细胞胶原ⅠmRNA的基础表达及TGF-β1诱导的过度表达,同时可逆转TGF-β1诱导的腹膜间皮细胞细胞外信号调节激酶活性增加.
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脂多糖对大鼠腹膜透析效能和腹膜结构的影响
目的 研究尿毒症大鼠腹膜透析过程中脂多糖对腹膜透析效能以及腹膜结构的影响.方法 将采用含腺嘌呤喂养制作尿毒症模型,随后采用自制腹透管行腹膜透析置管术制作腹膜透析模型,使用4.25%腹膜透析液进行腹膜透析.将20只尿毒症腹膜透析模型SD大鼠随机分为两组: 脂多糖组(LPS组),分别在33、35、37 d在腹腔内加入LPS 75 μg/(d*只);对照组(不加LPS);每组10只.45 d后行腹膜平衡试验,腹膜组织病理学检查,了解腹膜透析效能和结构的变化.结果 (1)LPS组的肌酐的透析液/血液浓度比值(D/P肌酐)和超滤量与对照组比较显著降低(P<0.01).(2)大鼠腹膜组织病理检查光镜下观察:LPS组可见腹膜间皮细胞肿胀、变形,部分皱缩,连续性不完整,间皮下基质大量积聚,伴有大量炎性细胞的浸润和毛细血管增生.对照组大鼠腹膜间皮细胞完整,细胞间连续性良好,间皮下基质无明显增多.结论 脂多糖能够导致腹膜透析时腹膜的受损和腹膜效能的下降.
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胸腹水转移癌与间皮细胞的鉴别诊断
目的探讨胸腹水中转移癌细胞与间皮细胞的形态特征,排除增生性间皮细胞的干扰.方法对839例找癌细胞的胸腹水标本,经离心沉淀后取沉积物作传统涂片744例,用拭镜纸包裹做常规石蜡包埋切片43例,行膜式超薄液基细胞(TCT)制片52例.均用苏木素-伊红(HE)染色法染色,部分用组织化学,免疫细胞化学染色.结果检出恶性肿瘤细胞251例,其中腺癌228例,鳞癌10例,恶性间皮瘤7例,其他恶性肿瘤6例.结论中-低分化癌均具有较明显的异型性,凭镜下形态特征可确定诊断,间皮细胞异型增生和恶性间皮瘤与转移性腺癌的鉴别,需辅以组织化学、免疫细胞化学染色确定.
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肺孤立性纤维瘤合并胸腔积液1例
患者男，53岁，教师，以“左侧胸痛3 d”于2010年2月22日入院，胸痛为针刺样疼痛，深呼吸及用力时加重，伴有胸闷、气喘、盗汗，无咳嗽及咳痰，无咯血及痰中带血。查体：T：36．5℃，P：84次／ min，R：20次／ min，BP：120／75 mmHg （1 mmHg ＝0．133 kPa），语音震颤左下肺减弱，听诊呼吸音左侧减弱，叩诊呈浊音，未闻及明显干湿啰音，双下肢无水肿。入院诊断：左侧胸腔积液：肺癌。于2010年2月22日和3月3日行超声引导下胸腔穿刺术，抽出血性胸水1300 mL，胸水检查：总蛋白53．9 g ／ L，LDH：1646 U ／ L，ADA：1 U ／ L，间皮细胞：中等量。3月1日胸部 CT：左肺门旁见一直径约6．0 cm ×5．0 cm软组织肿快影，呈不均匀中度强化，左肺下叶支气管稍狭窄，左叶间裂及左胸腔大量积液，部分呈包裹状，邻近肺组织膨胀不全。3月9日胸腔镜术，术中见左下肺胸膜明显肥厚，脏层胸膜呈灰白色，左上肺可见一儿拳头大肿块，周围脏层胸膜可见结节样突起。镜下诊断：肺癌并恶性胸腔积液。3月15日CT引导下经皮肺穿刺病理检查示：镜检示梭型细胞增生形成小块结节装物，细胞密度分布不均，细胞核卵圆形或梭形，分界不清，胞浆丰富、红染椭圆形。免疫组织化学：CD34：（＋＋）、CK：（＋＋）、CR：（＋＋）、CD99：（＋／-）、SMA：（-）、DES（-），MC：（＋／-）、MOC31：（＋／-）、TTF-1：（-）、CD68：（-）、CEA：（-）。考虑左上肺孤立性纤维瘤。于2010年4月行左胸探查术、左肺上叶切除手术治疗，术后病理诊断为肺孤立性纤维瘤，随访至今，无胸痛及胸腔积液、胸膜增厚等表现，目前患者病情稳定，无复发。
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浆膜腔积液的细胞学检查研究进展
浆膜腔积液的细胞检查,突出的特点是简单、安全,对设备要求不高,费用低,而且对患者很少造成痛苦,诊断迅速,准确性高,能够反复检查.因此在医院已将浆膜腔积液的细胞检查推向临床诊断的前沿,而浆膜腔积液的细胞检查已不再是单纯的诊断方法,目前已扩大到许多非肿瘤疾病的诊断.特别是一些具有特殊细胞改变的特异性炎症,以及癌前病变的演变,癌变过程的研究和药物阻断或干预试验的随访观察的主要指标.
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腺苷脱氨酶和间皮细胞检测对结核性和肿瘤性胸腔积液的诊断价值
目的 探讨腺苷脱氨酶(ADA)和间皮细胞检测对结核性和肿瘤性胸腔积液的诊断价值.方法 对57例结核性胸腔积液患者(结核组)分别进行腺苷脱氨酶和间皮细胞检测,并与63例肿瘤性胸腔积液作对照.结果 结核组ADA水平为(49.22±9.62)U/L,明显高于肿瘤组的(14.66±5.78)U/L(P＜0.05),结核组间皮细胞数明显低于肿瘤组(P＜0.05);诊断结核性胸腔积液,ADA敏感性为84.21%,特异性为92.06%,间皮细胞敏感性为89.47%,特异性为100%.结论 检测胸腔积液中的ADA和间皮细胞对鉴别结核性和肿瘤性胸积液有一定价值,值得临床推广应用.
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ADA、LDH、CEA和间皮细胞计数对渗出性胸腔积液的鉴别价值
目的 探讨渗出性胸腔积液常见的病因及腺苷脱氨酶(ADA)、乳酸脱氢酶(LDH)、癌胚抗原(CEA)和间皮细胞计数对渗出性胸腔积液常见病因的鉴别价值.方法 回顾性分析107例渗出性胸腔积液患者的临床资料,患者胸水及血清ADA、LDH水平采用全自动生化分析仪测定,血清及胸水CEA水平采用化学发光法测定,同时进行胸水间皮细胞计数.结果 结核性胸膜炎52例(结核组),恶性胸腔积液33例(恶性组),类肺炎性胸腔积液8例(感染组),其他原因的14例.结核组中胸水的ADA、LDH含量和间皮细胞计数与感染组和恶性组相比差异均有统计学意义(P<0.05或0.01);恶性组中LDH含量低于感染组(P<0.05);恶性组血清CEA值及胸水CEA/血清CEA比值较感染组及结核组显著升高(P<0.01).结论 结核、恶性肿瘤、感染仍然是渗出性胸腔积液的三大主要病因;ADA、LDH、CEA和间皮细胞计数等检查,对渗出性胸腔积液的病因有较大的鉴别价值.
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甲状腺转录因子和间皮细胞在肺癌胸腔积液诊断及鉴别诊断中的应用
目的 探讨甲状腺转录因子-1(TTF-1)和间皮细胞(mesothelial cell,MC)在胸腔积液中的表达及意义.方法 应用免疫组织化学S-P法检测35例原发性肺癌和10例继发性肺癌胸腔积液中的癌细胞及20例肺良性疾病胸腔积液中反应性间皮细胞的表达.结果 TTF-1在原发性肺癌胸腔积液中的阳性率74.2%(26/35),而在继发性肺癌患者和肺良性疾病患者的胸腔积液中未见阳性表达.MC在肺良性疾病胸腔积液中的阳性率95.0%(19/20),明显高于原发性肺癌胸腔积液中的22.8% (8/35)和继发性肺癌胸腔积液的阳性率20.0%(2/10).在不同病理类型原发性肺癌胸腔积液中,TTF-1的阳性率在腺癌组95.7%(22/23),明显高于鳞癌组12.5%(1/8).当TTF-1和MC联合应用时为佳选择,其检测肺癌患者胸腔积液的敏感性和特异性分别高达96.7% 和95.5%.结论 胸腔积液中TTF-1和MC联合检测对诊断和鉴别诊断原发性肺癌、继发性肺癌有重要意义,同时对肺癌临床分期的判断有较高的应用价值.
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病案讨论(一)
病史报告:徐丽医师患者女,52岁.因尿频、尿急、尿痛半月,腹胀8d于8月24日以"腹水原因待查”入院.查体:营养差,慢性病容,皮肤、巩膜无黄染,锁骨上、腋窝、腹股沟区淋巴结未扪及.心肺无异常,腹部稍膨隆,肝脾触诊不满意,移动性浊音阳性.腹水生化示:黄色微浊、自凝,雷瓦他试验阴性,细胞计数1900×106/L分叶核细胞0.13,淋巴细胞0.42,间皮细胞0.45.细胞学检查:未见癌细胞.
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支气管肺癌误诊为肺脓肿2例
1病例介绍例1,患者女,65岁,因左侧胸痛1月入院.入院前1月无明显诱因出现左侧胸痛,持续性胀痛,不伴畏寒、发热、咳嗽、咯脓痰在外院就诊.CT示:左上肺慢性肺脓肿,经皮肺穿刺涂片示;脓性、未见癌细胞;病理示:左上肺穿刺送检物为血块及炎性坏死物,未见癌细胞.胸水示:大量炎性细胞、嗜中性粒细胞为主,见少许间皮细胞,未见肿瘤细胞.诊断:肺脓肿.予先锋必,氧氟沙星抗感染治疗及置管引流7天无效,故来我院就诊.既往史:无特殊,无阳性家族史.查体:一般情况好,浅表淋巴结无肿大,气管居中,左上肺语颤增强,叩诊浊音,呼吸音消失,余系统查体无明显异常.实验室检查:血常规:WBC25.2×109/L,N0.795,L0.205;大小便常规、肝肾功、血糖正常.CT示:左上肺巨大软组织块影约12cm×10cm×12cm大小,部份边界欠清.左侧胸腔积液,行纤支镜检查,各级支气管无狭窄及阻塞,于左上叶刷片查见腺癌细胞.
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肿瘤性胸腹水细胞染色体畸变的观察
胸腹水中检出肿瘤细胞是一个可靠的诊断手段,但阳性率只有28%～60%[1].由于积液是一种良好培养基,良性积液中一定数量的间皮细胞和组织细胞在其中增殖,同时发生退化变性,会引起形态上改变,胞体增大,核肿胀,染色质变粗,有时与恶性细胞不易鉴别.我们观察了良性及恶性肿瘤胸腹水细胞染色体,对比两者的差异,总结其特点,以指导临床诊断.
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人正常腹膜间皮细胞原代培养方法
目的 探讨人正常腹膜间皮细胞原代培养方法.方法 以胰酶和乙二胺四乙酸磁性搅拌分离人正常腹膜间皮细胞,倒置相差显微镜观察细胞形态结构和大体生长过程, Calretinin免疫荧光染色鉴定间皮细胞,初步观察传代细胞的贴壁生长情况.结果 培养第4天细胞贴壁良好,第15天呈铺路石状、生长良好,1个月时细胞密集铺满皿壁;腹膜间皮细胞Calretinin表达都呈阳性;传代腹膜间皮细胞数量显著减少.结论 磁性搅拌酶分离培养可得到数量多、纯度高的原代人正常腹膜间皮细胞,能够满足一般实验要求.
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牛心包片在心血管外科的应用
始于1953年的现代体外循环技术开创了心血管外科的新纪元,各种材料的心血管代用品也应运而生.初的心血管补片材料为塑料海绵(Ivalon),但因柔软性差,易致术后出血,临床上已基本弃用.60年代,研究[1]发现经戊二醛处理的牛心包,组织强度和植入体内寿命均明显增加,拉伸力明显优于自身心包组织,且来源广泛,易于塑形和缝合.牛心包片逐渐被单独或与涤纶片等材料合用于治疗各种先天性或后天性心血管疾病,也作为心包替代物关闭心包腔[2].1 牛心包的组织结构和特性[3,4]牛心包的厚度约0.1～0.8mm,随位置不同而变化.不同牛心包的组织结构基本相同,主要由胶原纤维、弹性纤维和多种结缔组织成份组成,切面可分为浆膜层、纤维层和外结缔组织层,约分别占整个心包厚度的0.2%,74.8%和25%.浆膜层包含间皮细胞和间皮下基底层.纤维层以波纹状为主的胶原纤维和细而长的弹性朊纤维为基本骨架,由若干与心包表面并排的层板样结构组成.层内胶原纤维束的排列方向大体一致,层与层之间按30°或90°的角度交叉叠置,胶原束分支将上下两层连接在一起.弹性纤维分布于胶原纤维之间并相互交织.根据各层之间的定向不同,大致分为20层以上,每层厚度约25～100μm不等.外结缔组织层包含小血管,神经元及多种结缔组织细胞如成纤维细胞、巨噬细胞和脂肪细胞等,并深入心包全层.临床使用的经戊二醛固定的牛心包片厚度约0.25～0.34mm,浆膜层的间皮细胞已基本脱落,仅剩间皮细胞下层.外结缔组织层中成丛状的脂肪细胞全部丢失.纤维层中胶原纤维及弹力纤维结构完整,胶原蛋白分子间形成牢固的交联结构,机械强度明显提高,断裂强度可达到2.45kg/mm2.牛心包经生化及戊二醛处理后,去除了大量的可溶性蛋白、粘多糖和糖蛋白;胶原纤维的交联,掩盖和封锁了抗原性基团,使其抗原性大大降低.
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恶性胸膜间皮瘤早期血行转移13例误诊为粟粒型肺结核分析
恶性胸膜间皮瘤是起源于间皮细胞的原发性胸膜肿瘤,是一种较少见的进展性致命性胸部恶性肿瘤.早期血行转移极为少见,易误诊为粟粒型肺结核.现将我院1990～2000年13例恶性胸膜间皮瘤早期血行转移误诊为粟粒型肺结核,报告如下.
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UF-100尿液分析仪与传统方法检测浆膜积液的比较及意义
目的 为探讨UF-100尿液分析仪检测浆膜积液的临床价值.方法 运用传统手工法和UF-100全自动尿液分析仪同时检测患者浆膜积液.结果 两种方法中白细胞数(WBC)无显著性差异(P＞0.05),漏出液与渗出液间白细胞数、间皮细胞、细菌数均有显著性差异(P＜0.05),非化脓性与化脓性细菌感染性积液中WBC数、细菌数均有显著性差异(P＜0.05),间皮细胞数无显著性差异(P＞0.05).结论 用UF-100尿液分析仪检测脑脊液、胸腹水标本简单、易行,检测结果
