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应用蛋白质组学技术筛检肝癌血清差异蛋白质并分离鉴定阿朴脂蛋白AⅡ
目的 应用蛋白质组学技术筛选并鉴定肝癌患者血清中的差异蛋白质.方法 采用表面增强激光解析及电离飞行时间质谱技术,对33例肝癌患者和33例正常对照的血清蛋白质进行了检测分析,筛选肝癌的差异蛋白;用等电点沉淀法、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳及高效液相色谱串联质谱等一系列方法分离鉴定差异蛋白质.肝癌组与正常组蛋白质峰差异比较采用两样本t检验. 结果 肝癌组与正常人组血清蛋白质图谱在相对分子质量为2 000～10 000范围内,有65个蛋白质峰差异有统计学意义(P<0.05),由此组建的诊断模型灵敏度为100%,特异度为96.97%其中包括8706.5 M/Z和8579.2M/Z(t值分别为2.562和2.783,P值均<0.05),经分离鉴定其为阿朴脂蛋白AⅡ. 结论 阿朴脂蛋白AⅡ是肝癌的差异蛋白之一,可能与肝癌的发生有关.
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肝癌及癌旁肝组织的高尔基体差异蛋白质分析
目的 筛选并鉴定肝癌及癌旁肝组织高尔基体蛋白质组中差异表达的蛋白质,从高尔基体层面解释肝癌的发生和发展机制,为早期诊断和抗癌药物的研发提供线索.方法 应用亚细胞比较蛋白质组学研究方法,比较分析肝癌及癌旁肝组织高尔基体蛋白质组.收集肝癌患者手术切除的癌组织和癌旁肝组织标本,蔗糖密度梯度离心法分离高尔基体.建立并优化两种组织高尔基体的双向电泳方法,用PD-Quest软件分析差异表达的蛋白质点,然后用质谱仪获取相应蛋白点的肽质指纹图谱,联网到Swiss-Prot蛋白质组数据库鉴定获得的差异蛋白质点,后用Western blot验证双向电泳结果.蛋白质相对表达量的比较采用配对t检验.结果 获得了分辨率和重复性均较好的双向电泳银染图谱.与癌旁肝组织相比,肝癌高尔基体蛋白质组有包括膜联蛋白5在内的27个蛋白质位点表达上调,包括染色体修饰蛋白2b在内的20个蛋白质位点表达下调,初步鉴定出了其中17个蛋白质,并用Western blot从蛋白质水平上验证了双向凝胶电泳结果.结论 肝癌及癌旁肝组织高尔基体蛋白质组具有不同的蛋白质位点,这些差异表达的蛋白质涉及到细胞的能量代谢、肿瘤的侵袭和转移,细胞周期调控等方面,为进一步阐释高尔基体在肿瘤的发生和发展中所起的作用提供了有价值的信息.
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小鼠肝癌细胞H22膜蛋白组的双向电泳
目的 运用双向电泳及生物信息学技术,对小鼠肝癌细胞H22与正常肝细胞的膜蛋白进行比较和鉴定,以期为探索膜蛋白在肝癌发生,发展及侵袭转移过程中的作用提供实验依据.方法 运用顺序抽提法结合与双向电泳兼容的膜蛋白抽提试剂盒提取小鼠肝癌细胞H22和正常小鼠肝细胞膜蛋白,用考马斯亮蓝法定量,经双向凝胶电泳分离、银染,Image Master 2D Platinum软件分析,切取差异蛋白点,采用基质辅助激光解吸附飞行时间质谱技术检测,Aldente软件检索Swiss-Prot数据库进行匹配鉴定. 结果与正常小鼠肝细胞膜蛋白双向电泳图谱对比分析鉴定了8个在小鼠肝癌细胞H22中表达明显增强的膜蛋白,分别为硫酸酯酶修饰因子2,蛋白激酶C和肌酸激酶Ⅱ底物蛋白3,序列装配结构组件50同系物,巨噬细胞清道夫受体Ⅰ/Ⅱ,非特异蛋白C9或f135同系物,紧密结合蛋白ZO-2,3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶,空泡蛋白序列相关蛋白52同系物.结论 已鉴定的8个膜蛋白的生理功能涉及细胞代谢、细胞增殖、细胞信号转导、细胞骨架等,且在肝癌细胞H22中表达明显增强,提示小鼠肝癌细胞H22发生发展及侵袭转移可能涉及相关膜蛋白生理功能的改变.
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盐酸纳美芬注射液药代动力学
目的:研究健康受试者接受单剂量和多剂量注射国产盐酸纳美芬后的人体药代动力学.方法:30名志愿者按照随机原则分为3组,每组分别静脉推注0.5、1、2mg盐酸纳美芬注射液,采用LC-MS/MS以纳络酮为内标测定其血浆和尿药物浓度.用3P87软件进行数据处理,求出药代动力学参数.结果:其Cmax分别为(1.74±0.48)μg/L、(4.17±1.08)μg/L、(7.88±2.89)μg/L,t1/2β分别为(12.83±3.98)h、(12.6±6.4)h、(10.58±3.74)h,V分别为(3.45±0.16)L/kg、(4.11±0.0716)L/kg)、( 4.25±0.56)L/kg;CL分别为(0.81±0.11)L/(h·kg)、(0.85±0.15)L/(h·kg)、(0.87±0.11)L/(h·kg);AUC0-∞分别0为(21.62±9.34)(ng/L)*h、(24.89±8.52)(ng/L)*h、(35±11.2)ng/L*h;尿药累计排泄率分别为(78±21)%、(71±29)%、(78±19)%.结论:国产注射用盐酸纳美芬在健康人体内的药代动力学符合二房室模型特征.在静脉推注0.5～2.0 mg剂量范围内药物体内过程呈线性动力学特征.
关键词： 盐酸纳美芬 药动学 液相色谱-串联质谱法 光谱法 电喷雾电离 -
一阶导数光谱法测定斑秃擦剂中米诺地尔的含量
目的建立斑秃擦剂中米诺地尔的含量测定方法.方法采用一阶导数光谱法直接测定斑秃擦剂中米诺地尔的含量,测定波长为298 nm.结果线性范围为6～14μg/ml,r=0.999 98,平均回收率为100.22%RSD=1.06%(n=9).结论本方法简便、快速、准确,可消除该制剂中其它组分的干扰,适用于医院制剂的质量控制.
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高效液相色谱荧光检测法测定辣椒制品中罗丹明B的含量
目的 建立辣椒制品中非法添加化工染料罗丹明B含量的测定方法.方法 采用高效液相色谱荧光检测(HPLC-FLD)器,色谱柱:Waters XBridgeTM苯基柱(5μm,4.6 mm×150 mm)；流动相:甲醇-含0.2％甲酸和0.03％三乙胺的永溶液梯度洗脱；检测波长:激发波长550 nm(Ex),发射波长580 nm(Em)；流速:1.0 mL/min.结果 罗丹明B进样量在0.050 74～1.268 50 μg范围内线性关系良好(r=0.999 7),平均回收率为97.2％,相对标准偏差(RSD)为1.7％.结论 该法简便、准确、重现性好,可用于辣椒制品中非法添加物罗丹明B含量的测定.
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凹叶厚朴中生物碱成分的研究
目的 研究凹11111叶厚朴Magnolia officinalis Rehder et Wils中的生物碱化学成分.方法 离子交换树脂法提取总碱,硅胶柱层析法分离纯化,波谱法鉴定结构.结果 从中分得9个异喹啉生物碱.分别为N-降荷叶碱(1)、lirinidine(2)、罗默碱(3)、番荔枝碱(4)、lysicamine(5)、鹅掌楸碱(6)、瑞枯灵(7)、isosalsoline(8)、N-methylisosalsoline(9).结论 生物碱2、3、5、8、9为首次从该植物中分离得到,应用光谱法鉴定了所有化合物的结构.
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芥子碱的研究进展
芥子碱是油菜籽中重要的简单酚类物质,其在菜籽饼中的含量约1.2％ ～2.3％,具有重要药理作用.现参考相关文献,综述了近年来芥子碱的提取纯化工艺、鉴定方法及生物活性等方面的研究进展,可为菜籽饼中芥子碱的研究开发提供新的途径和思路.
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微波消解—塞曼石墨炉原子吸收光谱法测定皮蛋中铅的质量控制探讨
目的:通过对微波消解—塞曼石墨炉原子吸收光谱法测定皮蛋中铅实施分析质量控制和进行分析误差预测,提高实验室铅检测能力和质量控制能力,确保检测数据的准确性和可靠性.方法:按微量元素分析中精密度和准确度的AQC工作程序进行,用塞曼石墨炉原子吸收光谱法GB5009.12 - 2010对空白溶液(3％硝酸溶液)、2种铅标准溶液(0.1C、0.9C,C为分析方法测定范围的上限,本实验C为100.0μg/kg)、皮蛋、加标质量控制样品(0.5μg/g)进行测定.结果:5种试样的批内、批间变异分析,差异无统计学意义(F＜F0.05,P＞ 0.05),每种试样的总标准差(st)小于其测定浓度的5％,总平均回收率可信限R/d=1.02,质控考核结果为满意.结论:采用精密度—偏性和准确度的工作程序对微波消解—塞曼石墨炉原子吸收光谱法测定皮蛋中铅进行分析质量控制,保证实验结果误差在可控制的范国内,获得高度可信的分析结果.
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286名学龄前儿童血铅测定结果分析
目的：探讨儿童受低浓度铅污染情况。方法：采用无火焰原子吸收光谱法。结果：儿童血铅范围在0.168～1.46μmol/L内，平均血铅浓度为0.485μmol/L，大于0.483μmol/L的128人，占44.7％。结论：随着现代化和都市化进程的加速，铅损伤已是日常生活中的常见的危险因素，应引起人们的广泛重视。
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荧光分光光度法测定血清潘生丁浓度
潘生丁是临床上较常使用的抗血栓药物,有报道其半衰期为(11.6±2.2) h,且在体内有一定的蓄积作用[1].因此,要合理给药获取佳治疗效果,就必须通过测定血药浓度,调整给药剂量来完成.过去多采用液相色谱法测定血浆中的潘生丁含量,但操作较复杂.本文探讨用荧光分光法测定血清潘生丁浓度,该法操作简便,适用于临床血药浓度监测.
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氢化物原子荧光法测定生姜中的硒
目的:探讨原子荧光光度计测量生姜中硒含量的可行性.方法:采用自动进样器,用氢化物原子荧光法测定普通生姜和富硒生姜中的硒含量.结果:普通生姜中硒含量平均为0.50×10-2mg/kg,而富硒生姜中硒的平均含量可达到1.16×10-2mg/kg；线性范围0～10 μg/L,检出限为0.019 μg/L,精密度为1.2％,回收率95.3％～100.7％.结论:氢化物原子荧光法测定生姜中的硒具有操作简单、快速准确、灵敏度高、成本低、样品用量少、线性范围宽等优点,适用性广泛.
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四苯基卟啉类化合物荧光光谱的性质
目的:将四苯基卟啉(H 2TPP)及其衍生物作为研究对象,测定其荧光光谱和荧光量子产率,从而筛选出较好的光敏剂.方法:采用荧光分析法测定不同条件下的荧光光谱,采用参比法测定样品的荧光量子产率.结果:实验表明不同的取代基对四苯基卟啉及其衍生物荧光强度和荧光峰位移影响较小,但在非极性溶剂中荧光峰略有红移,并且溶剂影响光敏剂的量子产率,在CHCl 3,DMSO中量子产率较高.结论:通过以上实验,可以从样品中选择出光敏性能较好的光敏剂.
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常见中药材的吸试法及荧光鉴别法
目的:为探讨中药材的常规鉴别方法,根据中药材水浸后产生各种特殊的变化,利用中药材所含有的某些成分可在紫外光或常光下产生一定颜色的荧光,用以确定中药材的真伪优劣.
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镧系离子荧光光谱法测定外周血DNA在肿瘤早期诊断中的应用
目的:探讨镧系离子荧光光谱法测定外周血DNA在肿瘤早期诊断中的应用.方法:各提取50例恶性实体瘤、良性肿瘤、骨髓异常综合征、正常人外周血DNA,应用镧系离子荧光光谱分析法检测其荧光强度.结果:恶性实体瘤、MDS、良性肿瘤、正常人外周血DNA荧光强度分别为:346±28,308±34,280±34,276±29.恶性疾病和良性疾病之间荧光强度有统计学差异(P<0.01),且恶性疾病外周血DNA荧光强度均明显高于正常人及良性肿瘤患者.荧光强度282作为诊断恶性肿瘤的临界值,则其检测灵敏度和特异度分别为80%和72%.结论:镧系离子荧光光谱法测定外周血DNA在良、恶性肿瘤早期诊断中具有重要价值,是一种安全、简便、经济的诊断方法,并且具有较高的灵敏度和特异性.
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学龄前84名儿童血铅测定结果分析
目的:探讨儿童受低浓度铅污染情况.方法:采用无火焰原子吸收光谱法.结果:儿童血铅范围在0.168-1.46μmol/L内,平均血铅浓度为0.485μmol/L,>0.483μmol/L的38人,占44.7%.结论:随着现代化和都市化进程的加速铅损伤已是日常生活中的常见的危险因素,应引起人们的广泛重视.
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药材中微量元素测定方法的研究进展
微量元素包含人体必需与可能必需的,随着现代分析技术的不断发展,进行微量元素分析和测定的方法也层出不穷.查阅近几年国内外相关文献,通过对目前的药材中微量元素含量测定方法的研究进展进行综述,包括原子吸收分光光度法、电感耦合等离子体质谱法、荧光光谱法、激光诱导击穿光谱法等,对比分析了各种微量元素含量测定方法的优缺点,以期为提升元素检测标准提供借鉴,不断提高药材质量标准.
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硫磺熏蒸前后中药菊花中金属元素及微量元素的ICP-AES检测
目的:对硫磺熏蒸前后中药菊花中金属元素和微量元素的含量进行分析研究.方法:采用微波消解法进行前处理,应用电感耦合等离子体发射光谱(ICP-AEs)法测定含量.结果:中药菊花中Al、Fe、Mn、Zn等金属元素含量丰富,硫磺熏蒸前后S元素和Cu元素的含量有显著性差异.结论:实验室自制硫磺熏蒸菊花药材,测试结果显示含有较多的S元素,推测中药菊花中S元素含量的增加可能与加工过程中使用硫磺熏蒸工艺有关,测定中药菊花中金属元素及微量元素的含量对于全面和客观评价其质量具有重要意义.
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巴氯芬及β-环糊精的包结物与牛血清白蛋白的相互作用研究
目的:研究巴氯芬及β-环糊精的包结作用和巴氯芬及β-环糊精包结物与牛血清白蛋白的相互作用.方法:用紫外可见分光光度法与核磁共振法研究了β-环糊精对巴氯芬的包结行为;用摩尔比法确定了包结物的化学计量比;用公式计算了不同温度下巴氯芬与β-环糊精的包结常数;用荧光光谱法研究了巴氯芬与包结物对牛血清白蛋白牛血清白蛋白的相互作用.结果:巴氯芬与β-环糊精的包结过程是自发的,主要驱动力为疏水作用力;巴氯芬及包结物都会对牛血清白蛋白产生静态猝灭.结论:巴氯芬与β-环糊精的包结比为1:1;巴氯芬与牛血清白蛋白的主要作用为疏水作用,而包结物与牛血清白蛋白主要为静电作用,这是由于β-环糊精将巴氯芬分子中疏水部分包结的结果.
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假冒抗生素检测方法研究进展
假冒抗生素是世界各国所共同面临的一个重要问题.它不仅影响了治疗,而且引起了细菌抗药性的产生.本文就假冒抗生素检测方法的研究现状进行了综述,主要包括显色法、色谱法、光谱法、质谱法及核磁共振法等.
