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动物性海产品中砷形态分析方法的研究
目的 建立动物性海产品中砷甜菜碱(AsB)、亚砷酸盐(AsⅢ)、砷酸盐(AsⅤ)、二甲基砷酸(DMA)和一甲基砷酸(MMA)的液相色谱-在线紫外消解-氢化物发生-原子荧光光谱联用的测定方法(LC-UV-HG-AFS).方法 以90%甲醇为提取溶液,超声振荡提取后,提取液以N2浓缩至近干,加水溶解残渣后以正己烷萃取除去脂质成分,取下层清液,以超纯水定容至10 ml,过滤后进样分析;以0.2 mmol/L磷酸二氢铵(pH9.0)和20 mmol/L磷酸二氢铵(pH6.0)为流动相,梯度洗脱,以Hamilton PRPX-100柱分离,LC-UV-HG-AFS检测.结果 在给定的色谱条件下,AsB、AsⅢ、AsⅤ、DMA和MMA达到基线分离;各组分的检出限在0.0025～0.0032 mg/L之间,重复性和再现性＜10%,0.2 mg/kg添加水平的回收率＞85%;鱼、虾、贝样品中所含有的主要砷形态化合物为AsB,仅在某些贝类样品中检出微量AsⅢ和DMA;分别以定值参考物NBS 1566牡蛎组织和BCR 627金枪鱼考察总砷测定和砷形态分析的准确性,结果符合定值要求.结论 建立的LC-UV-HG-AFS方法适合于动物性海产品中砷形态化合物的特异性检测,测定结果准确可靠.
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血清和唾液中五种微量元素的电感耦合等离子体质谱测定法
人血清中微量元素测定较常用的分析方法有原子吸收分光光度法(AAS)、等离子体光谱法(ICP-AES)和电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)[1],人唾液中微量元素的测定有火焰法和阳极溶出伏安法(ASV)[2],用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)分析血清及唾液中多种微量元素的文献较少.我们对人血液和唾液进行取样,加入1%硝酸后,用ICP-MS法分析了锰(Mn)、铜(Cu)、锌(Zn)、镉(Cd)、铅(Pb),具有耗样少、速度快、灵敏度高、检出限低、能同时测多种元素等优点,分析结果准确可靠.
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光谱法的中医舌诊研究与应用概况
舌诊是中医独特的诊法之一,文字、语言及图画等主观性、经验性的描述虽沿用至今,但很难全面、客观表达舌象的完整信息;现代技术的发展为中医舌诊研究提供了新的思路和方法,如光谱法的应用,对还原舌象信息具有重要意义.本文简要介绍光谱法,归纳其在中医舌诊领域的研究与应用概况,并提出存在的问题及展望,为进一步研究提供参考.
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光谱法测定大鼠血浆中茯苓多糖硫酸酯及其药代动力学研究
目的:利用光谱探针天青A(AA)与硫酸化多糖之间产生变色反应的特性建立大鼠血浆中茯苓多糖硫酸M(PS)的光谱测定方法,测定大鼠腹腔注射和尾静脉注射PS后的血药浓度,并对这2种注射方法的药代动力学进行评价.方法:通过扫描和系列实验确定佳检测波长、反应体系血浆和AA浓度.大鼠腹腔和尾静脉分别注射60,20 mg·kg-1的PS后,测定血浆中不同时间点的PS质量浓度,并计算主要药动学参数.结果:佳检测波长为620 nm,反应体系血浆加人量大为1.25%,AA佳工作浓度为8.24x10-5 mol·L-1,血浆中PS质量浓度在.0-10 mg·L-1线性关系良好(R2=0.9959),平均回收率为100.55%,组内和组间差异RSD均小于5%.大鼠腹腔和尾静脉注射PS的消除相半衰期t1/2(ke)分别是319.09,204.85 min,血液PS的消除符合一房室、一级消除的开放模型,腹腔注射给药的生物利用度F为69.12%.结论:本光谱法灵敏度高,操作简便,重复性和稳定性好,尤其适合于药代动力学的分析研究.
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替米沙坦干预心房颤动模型猪的右心房心肌靶蛋白鉴定
目的 研究替米沙坦(TMST)对实验性心房颤动(AF)模型猪的影响,分离并鉴定右心房组织差异表达蛋白.方法 健康家猪18只完全随机法分为3组,每组6只:正常对照(NC)组右心房植入电极不起搏,房颤(AF)组右心房植入电极并快速起搏,替米沙坦(TMST)组右心房植入电极快速起搏并给予TMST干预.实验前及2周后测量各组实验猪心室收缩末期左、右心房面积(LAESA、RAESA).实验结束时进行右房组织Masson染色观察,双向蛋白质电泳分离各组右心房心肌差异表达蛋白质,采用基质辅助激光解吸电离-飞行时间-质谱技术鉴定靶蛋白.结果 AF组采用快速右心房起搏成功建立AF猪模型.与AF组比较,TMST干预可以减少AF诱发率和胶原纤维表达,并使LAESA和RAESA缩小[LAESA:(630.6±10.9)mm2比(744.3±29.9)mm2;RAESA:(553.4±13.7)mm2比(677.9±26.3)mm2,均P＜0.05].双向蛋白质电泳及质谱分析鉴定出翻译起始因子5A、热休克蛋白27、NADH脱氢酶铁硫蛋白8在TMST组表达减少.结论 翻译起始因子5A、热休克蛋白27、NADH脱氢酶铁硫蛋白8可能是与TMST减低实验猪AF诱发率、抑制心房重构相关的靶蛋白.
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荧光谱客观分析在膀胱癌光动力学诊断中的应用
目的 探讨紫外激光激发膀胱癌组织细胞荧光谱分析对改进膀胱癌光动力学诊断的意义.方法 以不含细胞培养液和血卟啉单甲醚混合液为对照,分别取浓度为0、10、100、200 mg/L的血卟啉单甲醚作为光敏剂,孵育膀胱癌组织细胞株T24 1～3 h,再以全固态紫外激光作为激发光源(波长355 nm)激发,检测膀胱癌组织细胞特征荧光光谱并分析药物峰位置.结果 在可见光区域390～780 nm,不含细胞的培养液和血卟啉单甲醚混合液未出现特征峰;无血卟啉单甲醚光敏剂的膀胱癌组织细胞的自体峰在445～490 nm处;不同时间不同浓度血卟啉单甲醚光敏剂孵育的膀胱癌组织细胞除在445～490 nm处有自体峰外,在628.65 nm处均出现药物峰,200 mg/L血卟啉单甲醚孵育2 h时膀胱癌组织细胞药物峰及自体峰荧光强度达到高,且药物峰的荧光强度超过了自体峰.结论 紫外激光激发的膀胱癌组织细胞荧光谱性质稳定、强度佳,对改进膀胱癌光动力学诊断具有确切价值.
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肝细胞癌患者血清蛋白质组成分的双向凝胶电泳-飞行时间质谱分析
目的分析肝细胞癌患者与正常人血清双向凝胶电泳的差异蛋白质,寻找肝癌早期血清学诊断的可能指标.方法固相pH梯度双向凝胶电泳分离肝细胞癌患者及正常人血清总蛋白.银染显色,PDQuest 2DE软件分析,对差异蛋白质点用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测定其胶内酶解后的肽质指纹图谱, 用PepIdent软件查询SWISS-PROT数据库.结果获得了重复性较好的双向电泳银染图谱.图像分析检测3块胶平均匹配的点数占平均蛋白点数的匹配率是70.2%.等电聚焦方向的平均偏差为(1.02±0.22) mm,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方向的平均偏差为(0.97±0.14) mm.将23个差异点进行胶内原位酶解-质谱指纹图分析,获得15张肽质指纹图,查询数据库进行了初步鉴定.结论固相pH梯度双向凝胶电泳分离人血清总蛋白获得重复性较好的结果,但仍需进一步探索如何去除高丰度已知蛋白及脂类等物质的方法,以便得到分辨率更高的双向电泳银染图谱.MALDI-TOF-MS肽质指纹图分析鉴定的结果为人肝细胞癌血清学诊断指标的筛选提供了依据.
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人胃癌组织标本的荧光光谱参数分析
目的探讨激光诱发自体荧光(LIF)诊断胃癌的可行性及重要光谱参数.方法采用激光诱发自体荧光技术对43例胃癌患者的手术标本进行了检测.结果癌组织荧光强度主峰为4695u±3063u,次峰为1453u±1537u,峰谷为1428u±1529u,而相应的对照组织荧光强度主峰为12259u±3547u,次峰为4385u±1967u,峰谷为3021u±2072u;主峰、次峰、峰谷对照组织/癌组织荧光强度比值分别为2.6:1、3.0:1、2.1:1.对照组织与癌组织比较,癌组织主峰波长略偏红光侧,次峰波长略偏紫光侧.主峰、次峰、峰谷三点综合比较,对照组织/癌组织荧光强度比值≥2的标本占83.7%(36/43).以此值作为判别标准,诊断胃癌敏感性达83.7%.结论对照组织与癌组织的LIF荧光强度有明显差异,LIF作为一种无创性恶性病变的筛检方法,应有良好的应用前景.
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大肠癌组织激光诱发自体荧光光谱规律及荧光产生机制
目的分析大肠癌组织的激光诱发自体荧光(LIAF)光谱规律及荧光产生机制. 方法以氮分子激光器和光学多通道分析仪(OMA)Ⅲ系统,自癌灶中心至正常组织分别连续检测19例大肠癌手术标本LIAF光谱,在激光共聚焦扫描显微镜下分别检测正常结肠组织及癌组织的荧光强度.结果 LIAF连续光谱主峰波长由正常组织经癌旁至癌组织逐渐向红光侧移动, 癌组织平均移动约5 nm,与正常组织比P＜0.001;主峰强度亦依次降低,癌组织与正常组织相比,平均减低7518.90,P＜0.0001.激光共聚焦扫描显微镜提示正常组织粘膜下层荧光(105.79)强,肌层荧光(85.32)次之,而粘膜层(47.74)与癌组织(44.21)的荧光弱.结论结肠组织LIAF主要来源于粘膜下组织,癌组织的低荧光与其粘膜厚度增加可能有关.该检测技术也有助于癌前病变的早期发现.
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表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术在大肠癌及其肝转移患者中肿瘤标记物应用研究
目的 进行大肠癌肝转移肿瘤标志物的早期检测,为大肠癌肝转移患者早期诊断提供依据.方法 应用飞行质谱技术检测53例大肠癌及27例大肠癌肝转移血清蛋白质谱,寻找差异蛋白.结果 大肠癌患者与肝转移患者检测到6个蛋白质M/Z峰值有统计学意义.获得分子量为5641.82 Da、8703.02 Da、6205.51 Da、3377.19 Da、5907.43 Da的5个峰在肝转移患者中表达均低表达,4353.81 Da在肝转移患者中高表达.联合6个M/Z峰区分大肠癌与肝转移的患者的准确率为88.75%(71/80);敏感度为85.19%(23/27);特异度为90.57%(48/53).结论 飞行质谱技术可用于大肠癌与大肠癌肝转移患者的早期预测.
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应用蛋白质组学方法筛选乳腺癌相关蛋白质
目的：筛选乳腺癌组织与癌旁正常乳腺组织之间的差异蛋白，寻找和鉴定与乳腺癌相关的蛋白质。方法选取新鲜乳腺浸润性导管癌组织及癌旁正常乳腺组织行双向凝胶电泳，得到的差异蛋白点进行图像分析，运用质谱分析对所筛选的差异蛋白点做质谱鉴定，根据检索软件Mascot计算得到蛋白的分值，输入NCBI数据库来获得蛋白质的信息。结果浸润性导管癌及癌旁正常乳腺组织分别获得（1040±15）个蛋白位点和（1003±17）个蛋白位点，差异在2倍以上共有28个蛋白位点，其中22个蛋白点表达上调，6个蛋白点表达下调，有23个蛋白点得到鉴定（蛋白得分大于70分），其中得分高的为热休克蛋白27、70、90。结论热休克蛋白27、70、90在乳腺浸润性导管癌组织中呈现高表达状态，提示它们与乳腺癌密切相关，有可能成为乳腺浸润性导管癌的联合特异性标记物。
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金黄色葡萄球菌 agr 和 sigB 调控系统的MALDI－TOF 质谱 m／z特征分析
目的：通过分析金黄色葡萄球菌的质谱图m／z特征，评估菌体的agr和sigB调节系统的表达情况以及菌体在宿主体内的感染状态。方法回顾性分析，选取天津市第一中心医院2013年6月至2014年2月保藏的基因分型特征明确的金黄色葡萄球菌50株，通过Vitek MS质谱的科研（ RUO）模式获取菌株的质谱图，分析代表agr和sigB系统的m／z表达强度，应用SARAMIS软件构建基于质谱峰特征的系统发育树。结果50株金黄色葡萄球菌分为急性感染和慢性持续、复发感染两种类型，前者的delta毒素表达强度99．2±4．1，后者为60．5±10．1，t＝16．83，P＜0．05；慢性持续、复发感染的sigB系统的调控增强，SAS030、SAS049和SA0772蛋白的表达强度分别为27．1±14．7、54．8±21．5和51．6±19．2，急性感染阶段相对应3种蛋白的表达强度分别是4．9±1．9、12．4±2．8和15．7±6．9，二者相比t值分别为－6．88、－8．98和－1．87，P值均小于0．05。生物膜形成相关的酚溶调制肽（ PSMs）表达强度不一，金黄色葡萄球菌小菌落变异型菌株的PSMα3相对强度为100％。结论通过agr和sigB调控系统的表达情况，可以评估金黄色葡萄球菌感染宿主的不同状态，MALDI－TOF质谱技术获取的m／z特征能够直观快捷地判断这一状态，该技术的深度应用有待进一步开发。（中华检验医学杂志，2016，39：438－441）
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"中国病原分枝杆菌质谱数据库"构建及验证
目的 构建国产基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)仪的病原分枝杆菌鉴定数据库,评价其鉴定准确性并与国外同类产品比较.方法 "中国病原分枝杆菌质谱数据库"的构建:收集分枝杆菌国际标准菌株19种、19株及"资源化"分枝杆菌临床分离株42种、183株;采用改良研磨-超声裂解法提取菌体蛋白.以国产MALDI-TOF MS仪(microTyper MS)为基础进行谱图采集及数据库构建,每株菌提取物平行滴加于12个靶点,每个靶点采集2次,得到24张质谱图;后按标准精选20张优质谱图,设置大出峰数目、小出峰频率及质量容差,经分析软件生成主谱图(MSP).数据库验证:收集不同地区来源分枝杆菌305株,以16S rRNA基因、hsp65及rpoB测序为金标准,比较以本数据库为基础的microTyper MS与以Mycobacteria Library 3.0数据库为基础的进口MALDI-TOF MS仪(MALDI-TOF MS Microflex)鉴定分枝杆菌的准确性及谱图特征.结果 构建的"中国病原分枝杆菌质谱数据库"容量为42种、202株,平均每种纳入菌株4.8株,排在前10位的是堪萨斯分枝杆菌16株、胞内分枝杆菌16株、戈登分枝杆菌16株、偶发分枝杆菌16株、鸟分枝杆菌16株、脓肿分枝杆菌16株、结核分枝杆菌15株、马赛分枝杆菌11株、阿罗普研院分枝杆菌10株及yongongens分枝杆菌2株;305株验证菌株经测序确认为29种;基于本数据库,种水平鉴定准确率为99.67％(304/305),高于MALDI-TOF MS Microflex(97.38％,297/305),差异有统计学意义(χ2=4.06,P<0.05).结论 构建的"中国病原分枝杆菌质谱数据库"质量达到临床常规应用要求,就国内流行株而言,鉴定准确率优于国外同类产品.
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比较 Bruker Microflex MALDI-TOF MS和 Vitek 2 Compact 全自动分析系统对酵母菌的鉴定能力
目的：比较Bruker Microflex MALDI-TOF MS和Vitek 2 Compact全自动微生物分析系统对酵母菌的鉴定能力。方法回顾性研究。利用 Bruker Microflex MALDI-TOF MS 和 Vitek 2 Compact全自动微生物分析系统同时对2013年3月至2014年3月上海交通大学医学院附属新华医院临床标本分离得到的742株酵母菌进行鉴定，结果不符菌株用基因测序予以确证。结果 Bruker Microflex MALDI-TOF MS和Vitek 2 Compact全自动微生物分析系统对699株念珠菌的种鉴定符合率分别为100％（699／699）和99.6％（696／699），对43株酵母样菌的种鉴定符合率分别为90.7％（39／43）和79.1％（34／43）。这2种仪器均未鉴定出马尔尼菲青霉菌，但本研究利用MALDI-TOF MS技术建立了马尔尼菲青霉菌的蛋白质图谱。结论 Bruker Microflex MALDI-TOF MS对酵母菌的鉴定率高于Vitek 2 Compact全自动微生物分析系统，且操作快速简便，成本低廉，准确率高，可用于临床微生物实验室常见酵母菌的常规鉴定。（中华检验医学杂志，2015，38：382-386）
关键词： 酵母菌 念珠菌属 光谱法 质量 基质辅助激光解吸电离 -
应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定假丝酵母菌
目的 评价应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)的假丝酵母菌鉴定的准确性.方法 应用分子方法包括PCR基因扩增和测序分析鉴定WC的假丝酵母菌,应用MALDI-TOF-MS鉴定分子方法确认的假丝酵母菌,建立白假丝酵母菌复合体鉴定数据库.结果 从VVC标本中应用分子方法鉴定出包括白假丝酵母菌、非洲假丝酵母菌、都柏林假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌、C.bracarensis、C.nivariensis、季也蒙假丝酵母菌、葡萄牙假丝酵母菌、克柔假丝酵母菌、乳酒假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌、C.metapsilosis、热带假丝酵母菌、奥默柯达菌、费比恩毕赤酵母菌、胶红酵母菌、酿酒酵母菌、阿萨希丝孢酵母等在内的假丝酵母菌324株,应用MALDI-TOF-MS能够正确鉴定株314株,正确鉴定率为96.91%,3株白假丝酵母菌、1株非洲假丝酵母菌、1株光滑假丝酵母菌、2株C.metapsilosis、1株季也蒙假丝酵母菌和1株酿酒酵母菌鉴定错误.1株Torulaspora pretoriensis未能鉴定.应用自建白假丝酵母菌复合体数据库可正确鉴定白假丝酵母菌153株(98.08%)、非洲假丝酵母菌37株(97.37%)和都柏林假丝酵母菌1株(100%),总正确鉴定率为97.95%(191/195).结论 MALDI-TOF-MS可用于快速和准确鉴定假丝酵母菌,对假丝酵母菌复合体的鉴定有优势.(中华检验医学杂志,2018,41:296-299)
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无锡地区新生儿耳聋基因的MALDI-TOF-MS筛查分析
目的 分析无锡地区耳聋致病基因突变热点及携带频率,建立无锡地区新生儿听力及耳聋基因联合筛查的临床推广标准.方法 根据中国人群常见耳聋相关基因热点突变设计,利用MALDI-TOF-MS飞行时间质谱检测技术,以2013至2014年期间无锡市妇幼保健院2 796例新生儿为研究对象,采集足跟血并提取基因组DNA,针对中国人群特点,进行4个基因(GJB2,GJB3,SLC26A4和12s rRNA)20个突变位点的基因突变检测,结合OAE及AABR听力筛查,并对结果进行t检验分析.结果 检出耳聋基因突变新生儿158例,携带率为5.65％,其中单位点突变152例(5.44％),复合突变6例(0.21％).在阳性检出样本中,GJB2及SLC26A4基因突变占总阳性样本的88.61％(140/158).阳性突变位点数多的是GJB2基因235delC位点,共检出73例(46.20％),其次是SLC26A4基因IVS7-2A＞G位点(30/158,18.99％).此次检测中还发现了3例纯合突变样本,均是12s rRNA基因1555A＞G突变.通过耳聋基因筛查结合听力筛查,共确诊4例中度及重度耳聋新生儿.结论 MALDI-TOF-MS对非综合征型耳聋患者的突变检出率较高,与传统常用基因检测方法相比,具有检测位点多、覆盖率高、高通量等特点,能够满足临床对常见耳聋基因检测的要求,为耳聋基因突变携带儿未来的婚育、用药及提早干预提供了积极有效的遗传指导意义.
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基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪在醋酸钙鲍曼不动杆菌复合群鉴定中的应用研究
目的 评价基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对醋酸钙鲍曼不动杆菌复合群的鉴定价值,了解浙江大学医学院附属第二医院醋酸钙鲍曼不动杆菌复合群的菌种分布情况.方法 回顾性选取2012年1至7月我院临床分离的502株醋酸钙鲍曼不动杆菌复合群非重复菌株,用MALDI-TOF MS进行再鉴定,同时用16S-23S rRNA基因间隔区序列分析来确定所有菌株的菌种,比较二者鉴定结果的差异.结果 502株醋酸钙鲍曼不动杆菌复合群用MALDI-TOF MS再鉴定,包括鲍曼不动杆菌431株(85.9％),皮特不动杆菌68株(13.5％),醋酸钙不动杆菌3株(0.6％);对502株醋酸钙鲍曼不动杆菌复合群16S-23S rRNA基因间隔区序列分析结果显示:403株为鲍曼不动杆菌(80.3％),68株为皮特不动杆菌(13.5％),28株为医院不动杆菌(5.6％),3株为醋酸钙不动杆菌(0.6％).与16S-23S rRNA基因间隔区序列分析相比较,MALDI-TOF MS错误地将所有28株医院不动杆菌鉴定为鲍曼不动杆菌,其余菌株的鉴定结果完全一致.结论 MALDI-TOF MS可将醋酸钙鲍曼不动杆菌复合群菌株准确鉴定到种,具有操作简便、快速、成本低,重复性好的优点.MALDI-TOF MS有望在未来成为日常临床微生物鉴定的理想工具.
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MALDI-TOF MS用于碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌同源性分析的初步研究
目的 评价基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术对碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(CRKPN)同源性分析的能力.方法 收集山东大学附属省立医院儿科病房及心外科病房2011年4月至2013年10月分离的21株CRKPN菌株,分别采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点序列分型(MLST)及MALDI-TOF MS技术进行回顾性同源性分析.结果 MALDI-TOF MS将21株CRKPN菌株根据亲缘关系远近分为三群,其中17例菌株为II群,同源性高于75%,从获得的17株菌的蛋白质谱图结果分析,其蛋白峰大致一致,由此推断其亲缘关系比较接近,与PFGE和MLST结果基本一致.而同源性较低(<60%)的H13与上述菌株存在差异,尤其在分子量4365、5381及6289处蛋白峰有显著差异,PFGE分析显示H13与其他菌株的同源性为61.0%,MLST分型为ST54.结论 MALDI-TOF MS技术能够准确对碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌进行同源性分析,较之其他同源性分析方法,快速方便,可满足医院感染工作的需求,及时防止耐药菌株在医院感染的爆发与流行.
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基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术对非结核分枝杆菌的鉴定与分型
目的 以CLSI-MM18A(病原菌DNA测序鉴定的解释指南)推荐的RPOB(利福平耐药)基因为参考标准,评价基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术对非结核分枝杆菌的鉴定和分型的水平的能力.方法 收集2012年至2016年从临床分离的不同感染部位的55株NTM菌株,利用 RPOB 进行管家基因测序,并对测序结果进行系统发育进化分析;同时利用MALDI-TOF MS技术对菌株进行鉴定,并对蛋白指纹图谱进行聚类分析;评价两种方法对NTM鉴定和分型的一致性.结果 RPOB基因对55株NTM显示了很好的鉴定(测序结果TM值均大于99%)和分型(可区分到复合群内的种或亚种)能力;法国BioMerieux MALDI-TOF MS技术对55株NTM的鉴定到属的水平为89.1%,鉴定到种的水平为78.2%,鉴定水平良好;利用SARAMS Premium软件对蛋白指纹图谱的聚类分析也显示出了良好的分型能力.结论 MALDI-TOF MS技术可以有效的对非结核分枝杆菌进行鉴定和分型,其检测周期短,操作简便,在实验室中与RPOB基因联合应用有着很好的互补性.
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国产基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统 Clin-TOF-ⅡMS与 Bruker Biotyper质谱系统在革兰阴性菌的鉴定效能评估
目的：评估国产基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱系统Clin-TOF-Ⅱ型仪器及其搭载的BioExplorer V2.3鉴定数据库（简称Clin-TOF质谱系统）对革兰阴性菌的鉴定效能。方法方法学评价研究。共纳入1999至2000年及2014至2016年北京协和医院革兰阴性菌1025株，分属32个属，56个种或种复合体。对照方法为Bruker Biotyper质谱系统：Bruker Autoflex Speed型号仪器及其搭载的Biotyper v3.1数据库（简称Bruker质谱系统）。采用直接涂抹法平行使用2套质谱系统对研究纳入菌株进行菌种鉴定。当某一种或两种质谱鉴定结果为“不可信结果”或两种质谱鉴定结果不一致时，采用16S rDNA扩增测序进行结果验证。结果 Clin-TOF质谱系统准确鉴定率为98.05％（1005／1025）。Bruker质谱系统准确鉴定率为99.22％（1017／1025）。 Clin-TOF质谱系统有17株仅鉴定至属水平，2株无鉴定结果。另外将1株蒙氏假单胞菌错误鉴定为恶臭假单胞菌。 Bruker质谱系统有2株菌仅鉴定至属水平，3株无鉴定结果。但是将3株嗜水气单胞菌中的2株错误鉴定为豚鼠气单胞菌，1株错误鉴定为中间气单胞菌。对于本研究纳入的1株黏金黄杆菌和1株伯氏金黄杆菌，两个质谱系统都仅鉴定到属水平。结论国产Clin-TOF质谱系统在鉴定革兰阴性菌方面有临床效能。（中华检验医学杂志，2017，40：41-45）
关键词： 革兰氏阴性菌 光谱法 质量 基质辅助激光解吸电离
