首页 > 文献资料
-
体外冲击波对兔膝关节炎软骨细胞丝裂原活化蛋白激酶表达的影响
目的 研究体外冲击波对兔膝骨关节炎对丝裂原活化蛋白激酶MAPK s(p38、JNK、ERK1/2)信号通路蛋白表达的影响,探讨体外冲击波促进膝关节软骨损伤修复和延缓退行性改变的分子机制.方法 采用数字随机法将15只普通新西兰兔分为治疗组、模型组和对照组,每组5只.其中治疗组、模型组新西兰兔采用hunt法切断膝前交叉韧带和切除内侧半月板制作OA模型,对照组为正常兔子.治疗组于造模第7天开始给予体外冲击波治疗,能流密度1.5bar,冲击次数2 000次,每周一次,总疗程共4次.模型组和对照组不做任何治疗.各组兔于治疗后4周处死,,取股骨关节软骨,采用甲苯胺蓝染色进行关节软骨的组织学观察,并进行Mankin评分;Western blot法测定p38、JNK、ERK1/2磷酸化状态蛋白的表达.结果 治疗组和模型组软骨组织Mankin评分较对照组明显增高(P＜0.01),治疗结束后治疗组软骨组织Mankin评分较模型组下降(P＜0.05).治疗组和模型组磷酸化蛋白p38、JNK、ERK1/2的表达较对照组明显增高(P＜0.01),而治疗后治疗组的磷酸化蛋白较模型组下降(P＜0.05).结论 体外冲击波可以通过影响关节软骨中丝裂原活化蛋白激酶p38、JNK、ERKL/2信号通路蛋白表达,进而调控下游相关因子,延缓关节软骨的退变.
-
P38MAPK对变应性鼻炎患者外周血单核细胞IL-6及TNF-α的表达调控
目的 探讨p38MAPK信号转导通路对变应性鼻炎(allergic rhinitis, AR)中细胞因子白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-α)表达的调控作用及p38MAPK与IL-6、TNF-α之间的相关性.方法 变应性鼻炎(AR组)及正常者(正常组)各20例,分别从每位受试者的外周血中分离出单核细胞并分成3组培养.第1组为空白对照,第2组加入P38MAPK激动剂12-肉豆蔻酰-13-乙酸佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA),第3组同时加入PMA和P38MAPK特异性抑制剂SB203580,将单核细胞进行培养, western blot法检测核蛋白P38MAPK的表达,RT-PCR法检测IL-6和TNF-α的表达, ELISA法检测上清液中的IL-6和TNF-α蛋白含量.结果 加入PMA培养的AR组T单核细胞P38MAPK蛋白表达、IL-6和TNF-α mRNA的表达及培养上清液中的IL-6和TNF-α蛋白表达与空白对照组比较均明显增加 (均p<0.01);且与加入PMA培养的正常T淋巴细胞组比较上述指标也均明显增加 (均p<0.01);而同时加入PMA和SB203580培养的AR组单核巴细胞的上述指标与加入PMA培养的AR组比较明显降低,但与AR空白对照组比较仍有增加 (均p<0.01).单核细胞P38MAPK蛋白表达与IL-6和TNF-α的mRNA表达均存在正相关(均p<0.01),与培养上清液中的 IL-6和TNF-α蛋白含量也均存在正相关(均p<0.01).结论 p38MAPK信号转导途径参与调节AR的单核细胞活化及IL-6、TNF-α的基因表达.
-
四君子汤对脾气虚大鼠SP/CCK和Mapk14 mRNA表达水平的影响
目的:观察四君子汤对脾气虚大鼠血清、小肠SWCCK含量和Mapk14 mRNA的影响.方法:受试动物随机分为4组,即正常对照组、模型组(7、14、21 d组)、四君子汤组,每组10只.除正常对照组外,其余各组采用大黄法、力竭法及饥饿法复合法建立脾气虚证大鼠模型,造模同时四君子汤组给予四君子汤20g/(kg·d)干预21 d,各组大鼠分时段采用放免法测定小肠、血清SP/CCK含量,采用实时荧光定量PCR检测小肠组织Mapk14 mRNA表达水平.结果:与正常对照组比较,脾气虚模型大鼠血清及小肠组织SWCCK含量均升高(P＜0.05),小肠组织Mapk14 mRNA相对表达量升高(P＜0.05),且以脾虚模型21 d组显著;与模型21 d组比较,四君子汤组大鼠血清及小肠组织SP/CCK含量均降低(P＜0.05),小肠组织Mapk14 mRNA相对表达量降低(P＜0.05).结论:四君子汤具有调节脑肠肽SP/CCK正常分泌及抑制小肠组织Mapk14 mRNA异常表达的作用.
-
银屑病发病诊断及治疗中的MPAK/NF-κB信号通路作用
目的 探讨MPAK/NF-κB信号通路在银屑病发病、诊断及治疗中的表达和意义.方法 选取2015年5月-2017年5月本院收集的90例中度和重度寻常型银屑病患者,给予口服阿维A治疗8周,采用免疫组织化学法和Western blot法检测银屑病患者皮肤组织中MAPK和NF-κB蛋白的表达;ELISA法检测患者血清中MAPK、NF-κB、TNF-α、1L-6、IL-8含量.结果 与对照组相比,进行期和稳定期患者血清内MAPK、NF-κB、TNF-α、IL-6和IL-8含量显著升高;MAPK 和NF-κB蛋白含量显著增加,差异具有统计学意义(P＜0.05);与进行期相比,稳定期患者m清内MAPK、NF-κB、TNF-α、IL-6和IL-8含量显著降低,患者体内MAPK和NF-κB蛋白含量明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.05);与治疗前相比,在阿维A治疗后,进行期和稳定期血清内MAPK、NF-κB、TNF-α、IL-6和IL-8含量显著降低,患者体内MAPK和NF-κB蛋白含量均明显下降,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 MPAK/NF-κB信号通路在银屑病发病、诊断及治疗中具有重要的作用:阿维A对银屑病的治疗具有一定的临床意义.
-
乌司他丁保护百草枯中毒大鼠肺免受损伤的作用
目的：探讨乌司他丁保护百草枯中毒大鼠肺免受损伤的作用及其机制。方法： Wistar大鼠108只，随机分为对照组、百草枯组和乌司他丁组。百草枯组和乌司他丁组给予百草枯灌胃染毒，对照组给予无菌生理盐水灌胃，乌司他丁组同时给予乌司他丁治疗。1、3、7、14、21、28 d测血清中的MDA、SOD、IL-6、IL-10和TNF-α水平，以及肺组织中的p38 MAPK、MMP-2和TIMP-1表达水平。结果：1、3、7 d百草枯组和乌司他丁组的SOD均较对照组下降（P＜0.01），乌司他丁组SOD明显高于百草枯组（P＜0.05）。1、3、7 d百草枯组和乌司他丁组的MDA、IL-6、IL-10及TNF-α均较对照组增高（P＜0.01），乌司他丁组各指标明显低于百草枯组（P＜0.05）。1、3、7、14、21、28 d百草枯组和乌司他丁组肺组织中的p38 MAPK及TIMP-1均较对照组增高（ P＜0.01），乌司他丁组各指标明显低于百草枯组（P＜0.05）。1、3、7、14、21 d百草枯组和乌司他丁组肺组织中的MMP-2均较对照组增高（P＜0.01），乌司他丁组MMP-2明显低于百草枯组（P＜0.05）。结论：乌司他丁通过抑制p38 MAPK信号通路及抗炎、抗氧化作用保护百草枯中毒大鼠肺免受损伤的作用。
-
尾加压素Ⅱ通过ERK1/2途径诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和上调Egr-1表达
目的:研究不同浓度尾加压素Ⅱ(UⅡ)及其受体拮抗剂urantide对培养大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖的影响,探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径及早期生长反应因子1(Egr-1)在UⅡ诱导大鼠PASMCs增殖中的作用.方法:以组织贴块法原代培养大鼠PASMCs:(1)采用BrdU掺入实验测定不同浓度(1μmol/L、0.1 μmol/L和0.01 μmol/L)UⅡ及其受体拮抗剂对大鼠PASMCs增殖的影响;(2)采用real-time PCR检测UⅡ及其受体拮抗剂对细胞外信号调节激酶1/2 (ERK1/2)、应激活化蛋白激酶(SAPK)、p38 MAPK及Egr-1mRNA表达的影响;(3)采用Western blotting检测UⅡ、urantide及ERK1/2抑制剂PD98059对PASMCs磷酸化ERK1/2 (p-ERK1/2)、p-SAPK、p-p38 MAPK和Egr-1蛋白表达的影响.结果:(1)UⅡ在一定浓度范围(1μmol/L、0.1 μmol/L和0.01 μmol/L)呈浓度依赖性地促进肺动脉平滑肌细胞增殖(P＜0.01或P＜0.05),这种增殖作用可被urantide拮抗(P＜0.05);(2)UⅡ上调ERK1/2、SAPK及Egr-1 mRNA表达(P＜0.01或P＜0.05),PD98059和(或)urantide可拮抗UⅡ诱导的ERK1/2、SAPK和Egr-1 mRNA的表达(P＜0.01或P＜0.05),但对p-p38 MAPK无影响;(3)UⅡ可增加PASMCs p-ERK1/2、p-SAPK及Egr-1蛋白表达(P＜0.01或P＜0.05),urantide及PD98059可拮抗UⅡ诱导的p-ERK1/2、p-SAPK和Egr-1蛋白表达(P＜0.01,P＜0.05).结论:UⅡ可能通过ERK1/2途径诱导PASMCs增殖和上调Egr-1表达,Egr-1可能通过激活ERK1/2途径参与了PASMCs的增殖.
-
SB203580在电压依赖性钾离子通道阻断剂4-氨基吡啶增强大鼠低氧高二氧化碳性肺血管收缩中的作用
目的:探索电压依赖性钾离子通道(KV)和p38 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在低氧高二氧化碳性肺血管收缩(HHPV)中的作用.方法:制作正常SD大鼠离体二级肺动脉环,在常氧及低氧高二氧化碳条件下观察肺动脉环的张力变化;在急性低氧高二氧化碳条件下,分别用KV阻断剂4-氨基吡啶(4-AP)、p38 MAPK信号通路抑制剂SB203580和4-AP+SB203580孵育二级肺动脉环,测定各组血管环的张力值.结果:在急性低氧高二氧化碳条件下,(1)肺动脉环呈现双相性的收缩(P＜0.05或P＜0.01);(2)经4-AP孵育的二级肺动脉环,Ⅱ期收缩幅度增强(P＜0.05或P＜0.01);(3)SB203580能使4-AP所致的二级肺动脉环Ⅱ期持续收缩幅度显著降低(P＜0.05或P＜0.01).结论:4-AP可增强大鼠HHPV的作用,而 SB203580能使4-AP所致的二级肺动脉环Ⅱ期持续收缩幅度显著降低,提示p38 MAPK信号通路的参与可能是KV调节大鼠HHPV作用的重要机制之一.
关键词： 低氧高二氧化碳 P38 丝裂原活化蛋白激酶 电压依赖性钾离子通道 4-氨基吡啶 -
丝裂原活化蛋白激酶p38与低浓度一氧化碳对脂多糖诱导肺损伤大鼠肺炎症反应的作用
目的:观察低浓度一氧化碳(CO)吸入对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)大鼠肺炎症反应的影响及影响过程中丝裂原活化蛋白激酶p38(p38 MAPK)的变化.方法:4组SD大鼠静脉注入5 mg/kg质量LPS或等容量生理盐水,1 h后.对照及LPS组吸入室内空气,C0吸人及LPS+CO吸入组吸入250 ppm CO.观察3 h后放血处死,取肺组织,酶联免疫吸附法测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及白细胞介素-10(IL-10)含量.蛋白印迹法测定磷酸化p38 MAPK表达.结果:LPS组TNF-α、IL-6、磷酸化p38 MAPK表达明显升高、IL-10显著降低,与对照组及CO吸人组比较,差异有统计学意义(P均<0.01).LPS+CO吸入组TNF-α、IL-6显著低于、IL-10和磷酸化p38 MAPK表达明显高于LPS组(P均<0.05).结论:p38 MAPK信号转导通路可能参与了低浓度CO吸入对LPS诱导ALI大鼠肺炎症反应的抑制.
-
MAPK信号转导途径与糖尿病肾病
糖尿病状态下,多种因素激活丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路.MAPK激活后,使肾脏细胞肥大,细胞外基质积聚,终导致肾小球硬化和肾小管间质纤维化.应用MAPK阻断剂可以有效对抗上述作用,为临床上有效治疗糖尿病肾病提供一条新的思路.
-
PTEN在心力衰竭心肌MAPK/PKC信号通路的作用
目的 观察充血性心力衰竭病人心肌重构病理过程中肿瘤抑制因子PTEN(phosphatase and tensin homolog tumor suppressor,PTEN)及丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)与蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)的作用.方法 通过手术取材,选择因瓣膜性心脏病接受二尖瓣置换术的心力衰竭病人39例,正常对照38例(其中8例来自意外伤亡的器官捐献者).竞争蛋白结合法检测心肌组织PKC及MAPK活性,免疫沉淀法检测PTEN蛋白表达.结果 心力衰竭病人心肌组织呈典型的重构心肌的病理改变.心肌组织PTEN表达蛋白光吸收(absorbance,A)与β肌动蛋白光吸收比值(PTEN/β-actin)随心功能恶化而降低,各心力衰竭组与正常组相比,差异有统计学意义(P＜0.01);相反,心力衰竭病人心肌组织PKC和MAPK活性明显高于对照组(P＜0.01),并随心功能恶化其表达逐渐增加,各心力衰竭组与正常组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 PTEN及MAPK与PKC信号通路共同参与调节CHF病人心肌重构的病理过程,PTEN在心肌重构病理过程中起负性调节作用.
-
高糖环境下肾小管上皮细胞来源外泌体诱导巨噬细胞激活的作用与机制
目的 探讨高糖环境下肾小管上皮细胞来源外泌体诱导巨噬细胞激活的作用与机制.方法 (1)正常糖(5.5 mmol/L)及高糖(30.0 mmol/L)分别处理人肾小管上皮细胞(HK2)48 h,收集两组上清液,使用超速离心法提取外泌体,采用透射电镜、Western印迹鉴定外泌体.(2)两组外泌体以PKH67标记后分别刺激人急性单核细胞白血病细胞株(THP-1)诱导分化的巨噬细胞,激光共聚焦观察THP-1巨噬细胞是否吞噬外泌体;显微镜下观察THP-1巨噬细胞的形态;Transwell小室法检测THP-1巨噬细胞的趋化能力;实时荧光定量PCR与酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测THP-1巨噬细胞的诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1/CCL2)水平;Western印迹检测各组p-JNK、p-p38MAPK和NF-κB p65蛋白的水平.结果 (1)上清液经超速离心获取的囊泡,在电镜下观察到外泌体,粒径30～100 nm.Western印迹检测囊泡表达外泌体的标志蛋白CD63和TSG101,不表达Calnexin蛋白,提示所获取外泌体的纯度较高.(2)激光共聚焦证实各组外泌体均能被THP-1巨噬细胞吞噬.与正常糖外泌体刺激组相比,高糖外泌体刺激组的THP-1巨噬细胞趋化能力增强,iNOS、TNF-α、IL-1β、MCP-1的表达和分泌水平均上调(均P＜0.01),p-JNK、p-p38 MAPK和NF-κB p65蛋白水平也显著升高(均P＜ 0.01).结论 高糖环境下肾小管上皮细胞分泌的外泌体可通过MAPK/NF-κB信号通路诱导巨噬细胞的激活和功能改变.
-
金雀异黄素在甲状旁腺激素诱导的人近曲小管上皮细胞结缔组织生长因子表达中的调控作用
目的 探讨金雀异黄素(Gen)对甲状旁腺激素(PTH)引起的人近曲小管上皮细胞分泌结缔组织生长因子(CTGF)的调控作用.方法 应用实时定量-聚合酶链反应(real time-PCR)、Western蛋白印迹、报告基因等技术,观察Gen对PTH诱导人近端肾小管上皮细胞系HK-2细胞CTGF表达的影响.使用MAPK通路抑制剂U0126阻断信号通路以明确Gen发挥作用的机制.结果 HK-2细胞有基础量的CTGF mRNA和蛋白表达,PTH刺激后其表达量显著增加(P＜0.05).10~(-10)mol/L PTH作用12h后,荧光素酶活性较对照组明显升高(1.8884±0.0780比0.9891±0.0300,P＜0.01).Gen剂量依赖性下调PTH诱导的HK-2细胞CTGF表达.正常HK-2细胞有少量磷酸化(P)ERK1/2表达,PTH刺激后p-ERK1/2表达明显升高,以10~(-10)mol/L PTH作用30 min时效应强.U0126作用后,CTGF mRNA、蛋白表达均明显下降(P＜0.05).Gen抑制PTH所致的HK-2细胞ERK1/2活化.结论 Gen可通过阻断MAPK信号通路抑制PTH诱导的HK-2细胞CTGF表达.
-
甲状旁腺激素通过丝裂原活化蛋白激酶信号通路诱导人近曲小管上皮细胞结缔组织生长因子表达
目的 观察甲状旁腺激素(PTH)对人肾小管上皮细胞分泌结缔组织生长因子(CTGF)的影响,并探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号途径在此过程中的作用.方法 采用实时定量PCR、Western印迹、报告基因等技术,观察PTH诱导人近端肾小管上皮细胞系HK-2细胞CTGF表达的情况.使用信号通路抑制剂PD98059、U0126阻断信号通路以明确PIH发挥作用的信号途径.结果 正常HK-2细胞有基础水平的CTGF mRNA和蛋白表达,PIH刺激后其表达水平显著增加.10-10mol/L PTH作用12 h后,荧光素酶活性较对照组明显升高[(1.8884±0.0780)比(0.9891±0.0300)A,P<0.01].正常HK-2细胞有少量p-ERK1/2表达,PTH刺激后p-ERK1/2表达明显升高,以10-10mol/L PTH作用30 min时效应强;MAPK通路抑制剂PD98059、U0126作用后,CTGF mRNA、蛋白、基因启动子表达均明显下降.结论 PrH可诱导HK-2细胞CTGF表达,其作用可能是通过MAPK信号通路来实现的.
-
氯沙坦通过ERK1/2丝裂原活化蛋白激酶途径抑制高糖诱导的小鼠系膜细胞结缔组织生长因子表达
糖尿病肾病(DN)是糖尿病严重的慢性并发症之一,其主要病理特征是由细胞外基质(ECM)增多引起的肾小球硬化.血管紧张素(Ang)受体拮抗剂氯沙坦可有效地延缓肾小球硬化,被用于DN的治疗.高糖可诱导肾脏系膜细胞结缔组织生长因子(CTGF)的表达,从而促进ECM积聚和组织器官的纤维化.丝裂原活化蛋门激酶(MAPK)作为真核细胞胞质内的信号转导终末通路,与DN的发病密切相关[1].本研究观察高糖是否通过ERK1/2 MAPK途径调节小鼠系膜细胞CTGF的表达,以及氯沙坦对CTGF的作用是否也与ERK1/2 MAPK通路相关.
-
恒河猴骨髓源性神经样细胞分化分子机制的基础研究
目的 探讨神经发育音猬因子(SHH)诱导恒河猴骨髓间质细胞(BMSCs)向神经样细胞分化的丝裂原活化蛋白激酶信号分子变化. 方法 密度梯度离心法分离培养恒河猴骨髓干细胞,应用Westem-blot方法检测SHH诱导细胞内信号蛋白变化,免疫组化方法观察丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)特异性抑制剂对细胞诱导过程的影响. 结果 SHH诱导恒河猴BMSCs分化为神经样细胞分化过程,细胞内激酶p38在加入诱导液5 min后即被激活,随着时间的延长持续升高,1h达到高峰,诱导前、后p38的总量未见变化；而磷酸化的ERKl/2被抑制,5 min时即开始减少,在2h内逐渐降低,诱导前、后ERKl/2的总量未见变化. 结论 MAPK激酶系统参与SHH诱导恒河猴MSCs分化为神经样细胞分化过程,p38被激活,而ERK被抑制.
-
1,25-二羟基维生素D3对喉癌细胞增殖的抑制作用及其可能机制
背景与目的:1,25-二羟基维生素D,[1,25-dihydroxy-vitamin D3,1,25(OH)2D3]是维生素D的活性形式,体内外实验均已证明它能抑制多种肿瘤细胞的生长.本研究观察其对人喉癌细胞株Hep-2增殖的抑制作用并探讨其可能作用机制.方法:体外培养Hep-2细胞,培养时添加100、10和1 nmol/L 1,25(OH)2D3,分别作用24、48、72和96 h后,用四唑蓝比色实验(MTT)检测细胞的增殖;用流式细胞仪检测细胞凋亡;用Western blot检测MAPK信号转导通路中ERK、P38、JNK蛋白及其磷酸化蛋白的表达.结果:1,25(OH)2D3可以显著抑制Hep-2细胞的增殖,10 nmol/L 1,25(OH)2D3作用96 h可以诱导Hep-2细胞凋亡,凋亡率为(34.08±1.75)%;p38MAPK的磷酸化水平随1,25(OH)2D3浓度的增加而增强,而丝裂原活化蛋白激酶ERK和JNK的磷酸化程度没有明显改变;应用p38MAPK通路特异性抑制剂SB2035080作用后,1,25(OH)2D3诱导的Hep-2细胞凋亡率减少.结论:1,25(OH)2D3可诱导喉癌细胞Hep-2发生凋亡,其作用机制可能与p38MAPK信号转导通路有关.
-
MiR-125a-3p通过MAPK信号通路影响胶质瘤细胞的增殖及凋亡的实验研究
目的 探讨miR-125a-3p对胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响及其在丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中的作用.方法 (1)比较肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库中565例胶质瘤组织和10例正常脑组织中miR-125a-3p的表达.(2)收集中山大学孙逸仙纪念医院神经外科自2015年4月至2018年4月手术切除并经病理检查证实的胶质瘤标本30例,其中低级别脑胶质瘤7例,高级别胶质瘤23例.另外收集同期因手术入路需要和颅脑外伤切除的正常脑组织标本8例.应用反转录-实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测脑胶质瘤组织和正常脑组织中miR-125a-3p的表达.(3)体外培养正常胶质细胞HA1800及人脑胶质瘤细胞U251、U373、U87、U138、T98G,72 h后应用RT-qPCR检测6组细胞miR-125a-3p的表达;(4)取对数生长期的U251、U373细胞,分为无义序列组和miR-125a-3p模拟物组,应用LipofectamineTM 2000分别转染无义序列和miR-125a-3p模拟物.转染后72 h应用RT-qPCR检测2组细胞miR-125a-3p的表达,克隆形成实验检测2组细胞的增殖情况,流式细胞术检测2组细胞的凋亡情况,Western blotting检测2组细胞凋亡相关蛋白和MAPK信号通路相关蛋白的表达.结果 (1)TCGA数据库中,胶质瘤组织中miR-125a-3p的表达低于正常脑组织,差异有统计学意义(P<0.05).(2)临床收集的正常脑组织、低级别胶质瘤、高级别胶质瘤标本中miR-125a-3p的表达依次降低,差异有统计学意义(P<0.05);(3)与HA1800细胞比较,U251、U373、U87、U138、T98G细胞中miR-125a-3p的表达均降低,差异有统计学意义(P<0.05),其中U251和U373细胞中miR-125a-3p表达下降得明显.(4)与无义序列组比较,miR-125a-3p模拟物组U251和U373细胞中miR-125a-3p的表达增加,克隆形成率降低,凋亡率增加,凋亡相关蛋白活化的半胱氨酸蛋白酶(cleaved-caspase)-3、cleaved-caspase-9和cleaved-caspase-7的表达均增加,磷酸化(p)-P38/MAPK蛋白的表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 miR-125a-3p在脑胶质瘤组织及胶质瘤细胞中表达水平较低,过表达miR-125a-3p可以通过MAPK信号通路抑制胶质瘤细胞的增殖并促进细胞凋亡,其有望为胶质瘤的治疗提供新的潜在靶点.
关键词： 神经胶质瘤 miR-125a-3p 细胞增殖 细胞凋亡 丝裂原活化蛋白激酶 -
西洛他唑对人血管内皮细胞增殖及P38MAPK表达的抑制作用
目的 观察西洛他唑(CLZ)对体外培养的血管内皮细胞(VEC)增殖和磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)表达的影响.方法 体外培养人脐静脉血管内皮细胞饵(HUVECs)株EA.hy926,应用10、30、100、300 μmo/L CLZ作用24h(同时设空白对照组)后采用MTT法检测HUVECs的增殖状态,Western blotting检测细胞磷酸化P38MAPK蛋白的表达.结果 与空白对照组比较,30、100、300 μmo/L CLZ组细胞A值降低,且30、100、300μmo/L CLZ组之间比较细胞A值依次降低,差异均有统计学意义(P＜0.05)；与空白对照组比较,30、100、300 μmol/L CLZ组细胞磷酸化P38MAPK蛋白的表达下降,且300 μmol/L CLZ组细胞磷酸化P38MAPK蛋白表达低于30μmol/L CLZ组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 CLZ对体外培养的VEC增殖和磷酸化P38MAPK蛋白的表达均有明显的抑制作用.
-
U0126调节体外培养神经细胞缺氧性损伤后凋亡相关蛋白的表达
目的 研究体外培养的神经细胞缺血缺氧性损伤后凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达,及应用MAPKs信号通路阻断剂U0126对其表达的调节作用.方法 取出生1 d的SD大鼠,断头处死后迅速解剖分离其皮层组织进行培养,3 d后进行缺血缺氧处理致细胞损伤.并分为加药组和缺氧组,前者给予U0126,后者给予空白的DMSO溶剂作为对照.采用MTT法、免疫细胞化学、免疫蛋白印迹(western blot)技术,检测在缺氧性损伤急性期神经细胞的活力、凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达情况,及给予U0126后对神经细胞的活力、凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响.结果 缺氧损伤后Bcl-2和Bax表达升高,细胞活力不佳,死亡较多.给予U0126后ERK1/2和ELK1磷酸化水平降低,同时Bax的表达水平降低,Bc1-2表达增高,细胞的状态和活力亦明显改善. 结论给予MAPKs阻断剂U0126可以调节缺氧损伤后凋亡相关蛋白Bc1-2和Bax的表达,抑制细胞死亡,改善细胞状态.
-
卒中后MAPK/ERK信号转导通路的激活是保护还是损害?
卒中是危害人类健康的常见病,具有较高的致残率和死亡率,因此卒中后脑损伤及其治疗一直是脑血管病研究领域的难点问题.丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activatedproteinskinase,MAPK)是一类存在于所有真核细胞的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,MAPK激活通路在真核细胞的信号转导过程中起着至关重要的作用.MAPK/细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)通路作为MAPK激活通路之一,参与了卒中后脑损伤的发生、发展.本文现对卒中后MAPK/ERK通路的激活作用及相关机制进行综述.
