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均相酶免疫法测定尿激素类项目的性能验证
目的 验证均相酶免疫法尿游离皮质醇(COR)、17-羟类固醇(17-OHCS)、17-酮类固醇(17-KS)和香草扁桃酸(VMA)试剂盒在全自动生化分析仪Beckman DXC800上的性能,并初步评价其临床应用价值.方法 依据WS T420-2013文件(临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证)进行实验设计.精密度验证:采用各项目试剂盒配套的2水平质控品重复测定3次,连测5天,计算尿游离COR、17-OHCS、17-KS和VMA的重复精密度、期间精密度和实验室内变异系数(coefficient of variation,CV),并与厂家提供的数值进行比较,如果实验数值小于厂家数值,则验证通过.正确度验证:采用各项目试剂盒配套的定值校准品进行批内重复测定2次,验证4个项目各个水平定值校准品的均值与厂家提供的定值是否一致(相对偏移< 1/2允许总误差),如果一致则表示正确度验证通过.同时,尿游离COR还采用20例随机住院患者的新鲜尿液标本,通过本试剂盒与Beckman化学发光法试剂盒检测进行比对.另外,尿游离COR和VMA还采用回收试验进行正确度验证.线性范围验证:选择配套定值校准品中的高值,与低值按比例进行混合稀释后,每个水平测2次,计算均值和偏移,并计算相关系数平方r2.生物参考区间验证:选取20例表观健康体检人员的新鲜尿液标本,验证尿游离COR、17-OHCS、17-KS和VMA的参考区间.结果 测定各项且试剂盒配套的2水平质控品,尿游离COR、17-OHCS、17-KS和VMA低值质控品实验室内CV分别为:5.01%、3.75%、7.52%和6.11%,高值质控品实验室内CV分别为:5.24%、6.32%、6.26%和4.38%,4个项目实验室内CV均小于厂家提供的数值(均为10%),精密度验证通过.正确度验证时,4个项目各水平定值校准品均值的相对偏移均小于1/2允许总误差(25%).尿游离COR本试剂盒与Beckman化学发光法试剂盒检测结果一致.尿游离COR回收率为109.75%,尿VMA回收率为93.67%.线性范围验证时,尿游离COR的线性范围为20.0~ 1600.0 ng/ml,尿17-OHCS的线性范围为0.0~60.0 mg/L,尿17-KS的线性范围为2.0~130.0mg/L,尿VMA的线性范围为2.0~100.0 mg/L,各项目相关系数平方r2均大于0.995.生物参考区间验证,20例表观健康体检人员的新鲜尿液标本,4个项目检测结果均在厂家提供的参考区间范围之内.结论 此均相酶免疫法尿游离COR、17-OHCS、17-KS和VMA试剂盒在全自动生化分析仪Beckman DXC800上具有良好的精密度、正确度和线性范围,性能指标符合质量标准,可满足临床测试要求.
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肾上腺巨大血管平滑肌脂肪瘤1例
患者女,40岁,因“阵发性腰背部酸痛2月余”于2014年3月18日入院。既往无高血压等疾病史。腹部 B 超:右侧肾上腺部位见一无回声区,大小约6.4 cm ×5.0 cm ×1.5 cm,其内未见血流信号(图1A),考虑肾上腺囊肿可能。腹部 CT平扫可见右侧腹膜后一不规则囊性低密度影,CT 值10 HU,边界清楚,大小约6.8 cm ×5.3 cm ×1.7 cm;增强后未见明显强化(图1B、1C)。拟诊右侧腹膜后淋巴管瘤。术前血、尿、粪常规、血液生化、血电解质以及肾上腺全套(肾上腺素、血浆醛固酮、血浆皮质醇、血浆儿茶酚胺)、尿香草扁桃酸均未见异常。患者于2014年3月20日行腹腔镜下腹膜后肿瘤切除术,术中见肿瘤位于右肾上腺中部,大小约6 cm ×5 cm ×1 cm,囊实性。距肿瘤边缘约0.5 cm 处完整切除肿瘤。标本送检病理(图2):梭形细胞 Vimentin、抗平滑肌抗体阳性,Desmin 散在阳性,S-100小灶阳性,Melan-A,CD34, HMB45、Ki-67均阴性。诊断:右侧肾上腺血管平滑肌脂肪瘤(angiomyolipoma, AML)。
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膀胱嗜铬细胞瘤1例报道
1 临床资料患者男,78岁,既往健康.2年前出现小便后头晕、心慌、心悸,手指麻木等感觉,同时血压升高,高达180/110 mmHg,口服降压药后上述症状缓解.3月前来入住本院,行肾脏及.肾上腺CT检查,未见异常.怀疑肾上腺外嗜铬细胞瘤,化验尿儿茶酚胺含量较正常值升高12倍,24 h尿香草扁桃酸(+),膀胱彩超检查示膀胱左侧壁内可探及一低回声结节,大小约2.7 cm×2.2 cm,边界尚清,内回声欠均匀,凸向膀胱,表面粘膜光滑,CDFI:结节内可探及丰富血流信号.术前给予酚苄明20 mg,3次/d,7 d,充分扩充血容量.
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高效毛细管电泳技术同时检测随机尿中香草扁桃酸、高香草酸和肌酐含量
目的 建立高效毛细管电泳技术快速检测随机尿中香草扁桃酸(vanillylmandelic acid,VMA)、高香草酸(homovanillic acid,HVA)和肌酐(creatinine,Cr)的方法.方法 在毛细管区带电泳模式下,以120 mmol/L NaH_2PO_4-Na_2HPO_4(pH值6.80)为缓冲液,在非涂层石英毛细管(47 cm×75μm内径)中进行电泳.样品离心后直接稀释压力进样4 s,20 kV电压分离后通过二极管阵列检测器(DAD)检测(λ=200 nm).对该法进行系统的方法学评价后,测定健康成人及儿童随机尿标本各100份,建立成人与儿童尿VMA/Cr、HVA/Cr参考值.结果尿中VMA、HVA和Cr在13 min内出峰.VMA、HVA和Cr分别在0~500、0~500、0~4 000 μmol/L范围内呈良好的线性,相关系数(r)在0.997 2~0.999 1之间(P<0.01),检出限(S/N=3)分别为1.0、1.0和50.0 μmol/L.尿中VMA、HVA和Cr迁移时间的平均批内(n=10)变异系数(CV)分别为0.58%、0.56%和0.25%,平均批间(n=10)CV分别为0.95%、1.00%和0.48%;峰面积的平均批内(n=10)CV分别为3.78%、3.97%和2.76%,平均批间(n=10)CV分别为4.60%、4.08%和4.42%.VMA、HVA和Cr平均回收率分别为98.36%、93.56%和98.85%.儿茶酚胺、5-羟色胺和清蛋白等对测定结果无干扰.该法与HPLC法有较好的相关性,VMA、HVA浓度的相关系数(r)分别为0.954 9(P<0.01)和0.945 1(P<0.01).健康成人与儿童随机尿标本的VMA/Cr、HVA/Cr比值均呈偏态分布(n=100),以百分位数法建立其95%参考值,成人VMA/Cr、HVA/Cr分别为0~4.26和0~1.69(μmol/mmol),儿童VMA/Cr、HVA/Cr分别为0~10.39和0~4.31(μmol/mmol).结论 该法可同时检测随机尿中VMA、HVA和Cr,样品用量少,且稀释后直接进样,操作简便、快速,准确度和精密度高,易于自动化,是尿液VMA、HVA常规检测及相关疾病筛查的理想方法.
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表现为急性心肌梗死的嗜铬细胞瘤一例
患者,男性,65岁,主因“反复胸痛2年,再发加重2 h”入院。近2年来胸痛发作时伴有血压升高,可达200/120 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),平时血压正常。入院前2 h,胸痛再发,持续不缓解,伴全身大汗。入院查体:躁动不安,全身大汗,呼吸急促,血压210/125 mmHg,双肺底可闻及少许湿啰音,心率98次/min,律齐,未闻及杂音。心电图示V1~6 ST段明显压低,T波高尖。发病2 h心肌标志物正常。初步诊断:冠心病,急性冠状动脉综合征,高血压病3级。入院后给予扩冠、降压治疗,由于血压升高显著,暂未给予抗血小板、抗凝治疗。发病7 h复查心肌标志物明显升高:肌酸激酶251 IU/L、肌酸激酶同工酶19.64μg/L、高敏肌钙蛋白I 6.45μg/L。故补充诊断:急性非ST段抬高型心肌梗死,心功能Killip 2级。患者胸痛无明显缓解,在硝酸异山梨酯8 mg/h静脉泵入的情况下血压仍波动在180/100 mmHg左右,心电图仍呈缺血改变。在发病8 h行紧急冠状动脉造影示冠状动脉未见狭窄。行主动脉、肺动脉计算机断层摄影术(CT)血管造影检查除外主动脉脉夹层,及肺动脉栓塞。CT扫描意外发现左侧肾上腺肿块影,进一步行肾上腺CT(平扫+增强)示左侧肾上腺肿块影,大小约7.3 cm×3.7 cm。结合该患者血压明显升高且不易控制,考虑有嗜铬细胞瘤的可能性,行24 h尿香草扁桃酸(VMA)定量示VMA 42.18 mg/24 h。后补充诊断为嗜铬细胞瘤。患者心肌梗死后8周于泌尿外科行左侧肾上腺肿块切除术,手术顺利,病理学检查实为嗜铬细胞瘤。术后随访1年,患者血压正常,无胸痛发作。
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异位嗜铬细胞瘤合并腹主动脉夹层1例
患者,女性,43岁。因胸腹部撕裂样疼痛, CT检查发现腹膜后肿块1个月于2013年8月2日入院。1个月前患者突然出现胸腹部撕裂样疼痛,向肩背部放射,急诊入当地医院。CT血管造影(computed tomographic angiography, CTA)检查:胸、腹主动脉血栓形成并局部小溃疡;右髂总动脉分支平面占位。予以硝普钠控制血压等治疗后疼痛缓解,为求进一步治疗遂来我院。患者7年前出现视力模糊和高血压,测血压高达200/100 mmHg (1 mmHg=0.133 kPa),未规律服用降压药。查体:脉搏106次/分,血压167/114 mmHg。心、肺、腹部检查未发现明显异常。辅助检查:24h尿香草扁桃酸111.8μmol/24h(参考值<68.6μmol/24小时)。主动脉全长CTA检查:自左肾动脉发出处远端约3.3 cm处主动脉后方见一夹层,血管腔形成双腔结构,右侧腹膜后见一大小约4.6 cm×4.1 cm肿块灶,边界清晰,增强后明显强化,其内有坏死(见图1,2)。患者入院后血压波动剧烈,高达到了286/166 mmHg。血压高时伴有心悸、头痛不适,硝普钠降压效果不明显,后改用酚妥拉明,血压控制在130/80 mmHg左右。初步诊断:①腹膜后肿瘤:异位嗜铬细胞瘤;②腹主动脉夹层;③高血压病,3级,极高危组。
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肾上腺皮质腺癌伴髂骨转移一例报告
患者,女,67岁。患者于8年前因血压升高就诊发现右肾上腺腺瘤,行右侧肾上腺全切术,病理诊断为肾上腺皮质腺瘤,后血压恢复正常。患者于2015年10月因腰椎间盘突出入院治疗时再次查出血压升高,高时达160/90 mmHg (1 mmHg=0.133 kPa),口服降压药物效果不佳,其间患者出现肥胖,以面部和后颈部为著,并有一过性头晕症状,无大汗、面色潮红、心悸等症状,外院彩色多普勒超声检查示右肾上腺区多发结节影。后就诊我科,入院后体检:血压150/90 mmHg;血钾3.58 mmol/L;促肾上腺皮质激素<5.0 pg/ml (参考值7.2~46.0 pg/ml);皮质醇(4PM)16.6μg/dl(参考值2.5~12.5μg/dl);肾素、醛固酮、24h-尿香草扁桃酸、血糖均在正常范围。肾上腺CT检查:右侧肾上腺区2枚类圆形团块影,大者直径约2.3 cm,平扫CT值约36HU,增强后分别为48HU、82HU;肝肾间及肾脏背侧各见一类似病变。初步诊断:右侧肾上腺腺瘤复发。全麻下行腹腔镜下右腹膜后多发肿瘤切除术。术中见腹膜后区粘连明显,肾上极见4枚肿瘤,周围粘连,均有假包膜形成;肾背侧亦见一黄褐色肿瘤,与肾脏界限不清。术后病理检查:肾背侧肿瘤与肾上腺肿瘤均为金黄色结节,表面有包膜,边界尚清;镜下见腺样结构,呈条索状排列,核膜及核仁无明显异形性;(肾背侧、肾上腺)符合肾上腺皮质腺瘤,肿瘤为多发性,细胞增生较活跃。术后予患者激素治疗,恢复良好后出院。同年11月患者因不慎摔伤致骨盆受伤。急查四肢关节CT考虑右侧髂骨翼占位性病灶伴骨折。胸部CT检查未示明显异常。患者行右髂骨占位病变切除植骨+骨折内固定术。术后病理检查:(右髂骨)考虑为浆细胞瘤;免疫组化染色检查:Vimentin (+),Melan-A(+),Inhibin-α(+),Syn(+),CgA(-),Ki67(约10%+);符合骨转移性肿瘤,结合病史及免疫组化梁色检查符合转移性肾上腺皮质腺癌( adrenal cortical carcinoma, ACC)。术后复查骨骼ECT未示其他部位骨转移征象。出院后每周复查皮质醇水平均小于正常范围,予外源性激素辅助治疗。随访5个月,患者一般情况良好,无复发转移。
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选择性α1受体阻滞剂控释片在嗜铬细胞瘤术前准备中的应用
我科于2003年7月至2004年4月,对16例嗜铬细胞瘤患者采用多沙唑嗪控释片进行术前准备,取得了比较满意的效果,现报告如下.资料与方法1.一般情况:本组16例患者,其中男性9例、女性7例.年龄22~75岁,平均50.0岁.病程4周~5年;病变部位:左侧肾上腺4例,右侧肾上腺9例,腹主动脉旁左髂血管分叉处2例,左侧肾门旁1例.以高血压为主要表现的功能性嗜铬细胞瘤14例,其中阵发性12例、持续性2例;体检发现2例;2例伴儿茶酚胺心肌病变,1例有急性心衰史.14例功能性嗜铬细胞瘤患者24 h尿儿茶酚胺水平升高,4例同时伴尿香草扁桃酸(VMA)升高,2例无症状患者术前24 h尿儿茶酚胺水平正常.
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新生儿肾母细胞瘤1例
患儿女性,出生4 d.因"发现腹部包块4 d"于2011-03-28入本院.病史采集: G1P1,胎龄为34+6孕周,经阴道自然分娩,出生体重为2200 g.Apgar评分1 min-5 min-10 min分别为6分-9分-9分.4 d前(出生当日)于当地医院新生儿查体发现腹部肿块,超声检查见右肾区一实质肿块(约为54 mm ×52 mm),未治疗,转入本院.入院查体:T为38℃,P为148次/min,R为40次/min,体重为1960 g,头围为31 cm,胸围为27.5 cm,全身皮肤轻度黄染,前囟平软,心、肺(-).腹胀、软,腹围为29.5 cm,右腹部可触及一肿块(约为4 cm×6 cm),质硬、界限清楚,肠鸣音正常,水肿(-).辅助检查:血常规WBC为11.3×109/L,ANC为47%,Hb为114 g/L,PLT为189×109/L.尿香草扁桃酸(anillylmandelic acid, VMA)为1.5 mg/24 h.
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力量训练对游泳运动员单胺类神经递质代谢物的影响
目的:观察不同类型的力量训练对运动员机体内单胺类神经递质代谢物的作用,并探讨其机制,从而在无创性尿液神经递质代谢指标方面为运动训练监控提供部分科学理论依据.方法:选择北京市参加全运会的一线男子游泳运动员6名进行3个阶段(大力量期、专项力量期和爆发力量期)的力量训练.取力量训练周期前、3个阶段力量训练期内第1次训练课后以及3个阶段力量训练期结束后24小时全尿,测量其尿肌酐及单胺类神经递质代谢物水平.结果:一次性力量训练课后的24h尿体积均显著降低(P<0.05),而尿肌酐水平均无变化;与训练前的安静值相比,3种力量训练的一次性力量训练后尿液中香草扁桃酸(VMA)与高香草酸(HVA)均有不同程度的升高,其中大力量训练期提高水平多,专项力量期次之,爆发力量期低;而一次性力量训练后尿液中的5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)均未有显著变化;长期力量训练后受试者安静态24小时的尿体积和尿肌酐水平均无显著变化.与训练前安静值相比,长期力量训练后安静态24小时尿VMA、HVA、5-HIAA的水平均无显著变化.结论:一次性力量训练可促进尿液VMA和HVA浓度升高,提示机体儿茶酚胺(CA)的代谢水平增强,并且训练强度越大促进的效果越明显;一次性力量训练对5-HIAA代谢没有影响,提示机体5-HT的代谢水平未受影响;而长期的力量训练对尿液中单胺类神经递质代谢物的水平没有影响.
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高效液相色谱—电化学法测定尿液中单胺类神经递质代谢物含量
目的:建立快速、准确测定人体尿液中香草扁桃酸(VMA)、高香草酸(HVA)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)的高效液相色谱-电化学法,为实施无创性采样运动训练监控研究提供新的实验室检测手段.方法:采用ISO-3100高效液相色谱仪系统,BM钛系统泵、WPS 3000自动进样器、WAX-1阴离子交换色谱柱(3 μm,3×150 mm),5011A双通道库仑电化学检测器;流动相由20 mmol/L磷酸缓冲盐配制成盐溶液并调节pH值=5,然后与乙腈分别按照75∶20(v/v)和80∶25 (v/v)配制成流动相A和流动相B,超声20 min后使用.流速为0.4 ml/min,进样量为5μl.检测器采用E1=100 mV和E2=500 mV两种电势条件.采用以上色谱条件分别测定标准品和成年人24 h尿样的VMA、HVA、5-HIAA含量,并进行统计和分析.结果:VMA、HVA、5-HIAA的线性关系分别为v=55.387x-0.2327(r=0.9998),y=55.31x+0.3247(r=0.9996),y=59.752x-0.1938(r=0.9987);低检测限分别为5 ng/ml、5 ng/ml和7 ng/ml;批内变异系数(CV)分别为2.7%、2.4%、1.6%,批间变异系数分别为3.2%、3.1%、4.1%;所测成年人24h尿的VMA、HVA和5-HIAA含量分别为(1.65±0.08)mg/day、(2.67±0.24)mg/day、(1.79±0.13)mg/day,均分别符合正常成年人24 h尿中VMA、HVA、5-HIAA的水平.结论:本研究所采用的新型WAX阴离子交换色谱柱特异性好,对阴离子化合物的分离效果显著.本方法测定结果良好,线性关系、精密度以及检测限均满足定量要求,值得在研究中推广使用.
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侵犯腹主动脉、肠系膜下动脉及左肾静脉的腹膜后 Castleman病1例
1病例介绍
患者,女,61岁,因“反复左侧腰部疼痛不适12天”收入本院泌尿外科,行泌尿系超声示:左肾积水并同侧输尿管扩张。腹部增强CT示:腹膜后腹主动脉左侧占位性病变,肝右叶巨大囊肿(图1)。入院查体:双肾区对称,无隆起,双肾未触及,左肾区轻度叩击痛,双侧输尿管区未触及肿物,无触痛,余未见明显异常。化验检查示:肿瘤生长因子63.0U/ml(0~64 U/ml),癌胚抗原2.85μg/L (0~3.4μg/L),尿17-羟皮质类固醇14.30μmol/24 h (11.04~38.64μmol/24 h ),尿17-酮类固醇93.2μmol/24 h (13.90~55.50μmol/24 h ),尿香草扁桃酸( VMA )89.8μmol/24 h (15.66~85.58μmol/24h),C反应蛋白39.2mg/h (0~5mg/h),血沉88mm/h(0~23mm/h)。穿刺取病理示:增生纤维组织,见灶状淋巴细胞浸润,免疫组化:c-kit 受体( CD117)(-), CD34分子( CD34)(-), S-100蛋白( S-100)(-),细胞角蛋白( CK)(-),平滑肌肌动蛋白( SMA)灶状(+),增殖标志物( ki-67)<1%。召集相关科室会诊,排除嗜铬细胞瘤、脂肪肉瘤等相关疾病,诊断为:①腹膜后腹主动脉旁肿物;②肝右叶巨大囊肿。因肿物在腹主动脉旁,考虑手术风险较大,泌尿外科慎重考虑后转入血管外科,排除手术禁忌后,与入院第6日行“腹膜后肿物切除+肝囊肿去顶减压术”,术中游离肿物时,将小肠推向右侧,显露肠系膜根部后腹膜,沿腹主动脉左侧纵行打开后腹膜,见肿物约8cm×5cm大小,周围淋巴结肿大,与周围组织粘连严重,肠系膜下动脉及生殖静脉同时被肿物包裹侵犯,肿物上极与左肾静脉粘连,右侧侵犯腹主动脉左侧壁,离断肠系膜下动脉及生殖静脉,见肿物根部与脊柱骨膜粘连,完整游离并移除肿物及周围淋巴结,创面仔细止血,术中因肿物与周围组织粘连严重,术中泌尿外科会诊后确认输尿管无损伤,缝合后腹膜。患者手术恢复顺利,住院10天出院,术后病理示:病变符合浆细胞型Castleman病(图2)。 -
尿中高香草酸和香草扁桃酸的高效液相色谱测定法
目的 建立一种能同时测定人尿液中高香草酸和香草扁桃酸含量的高效液相色谱荧光检测方法.方法 尿样经0.45 μm滤膜过滤后直接进样,经ODS色谱柱(250mm×4.6mm,5.0μm)室温分离,以甲醇-0.1 mol/L磷酸盐缓冲液(体积比为20:80)为流动相,流量为1 ml/min,进样量为10μl,激发波长为277 nm,发射波长为320 nm.结果 分离测定过程在15 min之内完成,香草扁桃酸、高香草酸保留时间分别为3.18、6.72 min.高香草酸检出限为0.15 μg/ml.线性范围为0~25μg/ml,加标回收率为84.53%~106.1%,相对标准偏差<3.44%.香草扁桃酸检出限为0.13 μg/ml,线性范围为0~20μg/ml,加标回收率为94.66%~107.3%,相对标准偏差<2.16%.结论 该方法各项指标均达到<生物材料分析方法的研制准则>的要求,能准确测定尿液中高香草酸和香草扁桃酸的含量.
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使用全自动生化分析仪检测尿香草扁桃酸的性能评价
目的:评价使用全自动生化分析仪检测尿香草扁桃酸(VMA)的性能指标,并与手工法相比较.方法:分别使用基于均相酶免疫分析技术的全自动生化分析仪(即上机法)和手工法检测VMA的正确度、精密度、线性范围、回收率和抗干扰能力等指标;并使用2种方法对高血压、甲状腺功能亢进、甲状腺功能减退、待确诊患者和表面健康受试者的尿液标本进行检测试验,评价其阳性率等指标.结果:2种方法检测VMA的正确度、精密度、线性范围、回收率和抗干扰能力等指标均达到了试剂盒说明书给出的标准,但上机法的上述指标优于手工法.上机法临床标本检测的总体阳性率和手工法大体相似,但对检测结果处于临界值处患者诊断更有优势.结论:上机法检测VMA较传统的手工法具有更好的性能和更大的临床应用价值,值得进行更大范围的临床应用实验.
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尿中高香草酸和香草扁桃酸测定的高效液相色谱-串联质谱法
目的 建立尿中高香草酸和香草扁桃酸测定的高效液相色谱-串联质谱(HPLC/MS/MS)法.方法 取尿样200μl置于离心管中,分别加入20μl氯唑沙宗内标,混匀后加入100μl甲醇(含1%乙酸),涡旋震荡1 min,13 000 r/min(半径8.2 cm)离心5 min,提取上清后,取10μl进样,利用HPLC/MS/MS法对高香草酸和香草扁桃酸进行定性定量分析.结果 该方法测定高香草酸和香草扁桃酸的线性范围分别为20~10 000和20~7 500 ng/ml,相关系数分别为0.995 6和0.997 0,检出限分别为4.69和2.33 ng/ml,回收率分别为85.72%~ 117.95%和95.82%~113.78%.结论 该方法操作简便、快速、准确、灵敏度高,可满足尿中高香草酸和香草扁桃酸测定的要求.
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尿液中四种生物胺代谢物同时测定的高效液相色谱法
目的 建立能同时测定尿液中香草扁桃酸(VMA)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、3,4-二羟苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)4种生物胺代谢物的高效液相色谱法.方法 尿样经0.45 μm过滤头过滤后直接进样,采用C18色谱柱分离,荧光检测器检测,波长:EX 280 nm,EM 315 nm,以甲醇-0.1 mol/L磷酸盐缓冲液(体积比20:80)为流动相,流速为1.0 ml/min,进样体积为20 μl.结果 该方法测定VMA、5-HIAA、DOPAC、HVA 4种物质线性范围分别为0~2.5、0~2.0、0~2.0、0~2.5 μg/ml;相关系数分别为0.999 9、0.999 8、0.999 7和0.999 9;低检出浓度分别为0.006、0.008、0.001 2和0.008 2 μg/ml;平均精密度分别为4.2%、3.7%、4.9%和3.6%;回收率分别为91%~102%、93%~101%、94%~101%、89%~102%.结论 该方法简便、高效、准确,适用于尿液VMA、5-HIAA、DOPAC、HVA含量的同时测定.
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髓质激素增多的肾上腺皮质腺瘤神经内分泌分化
目的:探讨神经内分泌成分与伴有髓质激素增多的肾上腺皮质腺瘤之间的关系.方法:将30例伴有髓质激素增多的肾上腺皮质腺瘤设为观察组(H-Ad 组),16 例髓质激素正常的的肾上腺皮质腺瘤作为对照组(N-Ad 组),正常组(Normal 组)为10例正常肾上腺组织,通过免疫组化的方法观察其中3种神经内分泌指标突触素(SYN),嗜铬粒蛋白(CGA)和神经特异性烯醇化酶(NSE)的阳性表达.结果:SYN、CGA、NSE 在H-Ad 组中的阳性表达率均高于N-Ad 组(PSYN=0.011,PCGA=0.028,PNSE=0.023),而正常肾上腺皮质中仅存在少量神经内分泌阳性细胞.结论:肾上腺皮质中的神经内分泌成分可能来源于内胚层多潜能干细胞,肾上腺皮质腺瘤伴有髓质激素的过度分泌现象与皮质细胞的神经内分泌分化有关.
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健康教育在留取24h尿香草扁桃酸标本中的应用
尿香草扁桃酸(4-羟基-3-甲氧基扁桃酸,vanillylmandelicacid,VMA)是神经递质儿茶酚胺的主要代谢物.测定24 h尿VMA 主要用于评价体内儿茶酚胺的代谢水平, 从而对与其相关的某些神经系统疾病,尤其是嗜铬细胞瘤的早期正确诊断起非常关键的作用.但是许多因素可以干扰儿茶酚胺代谢产物的水平,使实验室检测的生化指标受到影响,导致测定结果假阳性或假阴性,给及时诊断和治疗带来困难.为提高24 h 尿VMA 标本留取的准确率,我院泌尿外科2010 年7月至2011 年4 月为44例留取24 h 尿VMA 的肾上腺疾病患者进行健康教育干预,结果无一例标本留取错误.现总结如下.
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应用ROC曲线评价NSE、AFP及尿中VMA在小儿神经母细胞瘤诊断中的意义
目的 应用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析探讨血清神经元烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、血清甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)及尿中茶酚胺代谢产物香草扁桃酸(vanillyl mandelic acid,VMA)在神经母细胞瘤患儿中的诊断意义.方法 用高效液相色谱和化学发光免疫分析技术,设置分析组和对照组,分析组为39例肿瘤患儿,对照组为31例非肿瘤患儿,分别对患儿血清中NSE、AFP和和尿液儿茶酚胺代谢产物香草扁桃酸(VMA)的含量进行检测分析.结果 (1)分析组中血清NSE和尿液VMA均显著高于正常对照组(P<0.01),AFP无明显差异(P>0.05).(2)分析组中NB患儿血清NSE和尿液VMA、均显著高于非NB组(P<0.01),AFP无显著差异.(3)分析组患儿中NBⅣ期与Ⅰ~Ⅲ期比较血清NSE、AFP和尿液VMA、均显著增高(P<0.01).结论 通过ROC曲线对NSE、AFP和VMA的分析,在神经母细胞瘤的Ⅳ期分型中有重要意义.