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免疫组化检测明胶酶在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义
目的:探讨明胶酶(MMP-2和MMP-9)在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义.方法:应用免疫组化方法检测72例喉鳞状细胞癌组织标本中MMP-2和MMP-9蛋白的表达,并与临床病理特征和预后进行对比.结果:72例喉鳞状细胞癌中MMP-2和MMP-9的阳性表达率分别为50.0%(36/72)和73.6%(53/72).MMP-2和MMP-9的表达与肿瘤的进展相关,其中T1+T2与T3+T4中的阳性表达率分别为2.9%(1/35)、24.3%(9/37)和25.7%(9/35)、48.6%(18/37),有显著差异(P=0.008,P=0.045).MMP-2的表达与临床分期亦存在显著相关,Ⅰ+Ⅱ期和Ⅲ+Ⅳ期的阳性表达率分别为3.1%和22.5%,晚期喉鳞状细胞癌MMP-2的表达显著增强.MMP-2和MMP-9蛋白的强阳性表达也是预后不良的指标.MMP-2表达阴性/弱阳性和强阳性患者的5年生存率分别为62.9%(39/62)和20.0%(2/10),表达强阳性者其生存率显著降低(P=0.004 0);MMP-9表达阴性/弱阳性和强阳性患者的5年生存率分别为64.4%(29/45)和44.4%(12/27),MMP-9的强阳性表达亦引起喉鳞状细胞癌生存率下降,经Log Rank检验P=0.055 3,统计学有显著差异.结论:喉鳞状细胞癌中存在MMP-2和MMP-9蛋白的表达,其表达与喉鳞状细胞癌的进展显著相关,两者的表达可能是喉鳞状细胞癌预后不良的指标.
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脑脾胰肺肝组织粗提物对人胃癌细胞侵袭转移能力的影响
目的:探讨不同组织粗提物对人胃癌细胞株GASL侵袭转移能力的影响及机制.方法:采用Transwell小室法,比较裸鼠脑、脾、胰、肺、肝组织粗提物对人胃癌细胞株GASL侵袭透膜能力的影响;用明胶酶谱法检测不同组织粗提物对GASL分泌基质金属蛋白酶的作用;用MTT法比较GASL对裸鼠脑、脾、胰、肺、肝组织的粘附能力水平.结果:1)肺、肝、胰、脾、脑组织粗提物及照组GASL透膜的细胞数分别是(10.2±3.1)个、(21.3±2.3)个、(25.4±4.1)个、(9.3±1.6)个、(6.0±0.8)个、(7.2±1.1)个,肝、胰组织粗提物作用组GASL侵袭透膜数多于肺、脾、脑粗提物组及无血清对照组,差异具有显著性(P<0.05).2)明胶酶实验结果表明:经胰组织粗提物、肝组织粗提物作用后,GASL细胞分泌明胶酶能力较强.3)GASL细胞在体外对肝和胰组织粗提物粘附率较高(P<0.05);结论:肝、胰组织粗提物促进人胃癌细胞GASL分泌明胶酶,并与其有较强粘附作用,可提高GASL侵袭转移能力.
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凝血酶诱导人类胚胎血管平滑肌细胞明胶酶分泌及活化
目的:探讨凝血酶对血管平滑肌细胞明胶酶合成及活化的影响.方法:采用不同浓度的凝血酶(0.5、5、25、50 u/ml)与培养的人类胚胎血管平滑肌细胞(HVSMC)或其条件培养上清液共育,用SDS-PAGE明胶酶谱法测定上清液中明胶酶的活性.结果:浓度大于或等于5u/ml的凝血酶可以诱导HVSMC合成MMP-2,且呈剂量递增关系.0.5u/ml的凝血酶可激活proMMP-2,且随剂量增加而增强.剂量大于或等于25u/ml的凝血酶有诱导HVSMC合成MMP-9的作用.凝血酶与HVSMC条件培养液共育,证实凝血酶具有时间和剂量依赖性直接激活的作用.结论:凝血酶以剂量依赖性方式促进pro MMP-2分泌,并对MMP-2有直接激活作用,提示局部凝血酶浓度升高可通过降解基质,促进血管成形术后再狭窄或使斑块稳定性下降.
关键词: 凝血酶 血管平滑肌 明胶酶 SDS-PAGE酶谱法 -
测定血清基质金属蛋白酶的临床意义
支气管哮喘是气道的慢性变态反应性炎症,这种炎症损伤可导致气道的破坏及气道重构,所谓气道重构是指炎症损伤后基底膜增厚,平滑肌增生及管腔狭窄[1.2],其中血清基质金属蛋白酶(MMPS)在哮喘的发病机制中起了重要作用,而MMP-9(92KD的明胶酶)是MMPS中的主要成分.哮喘患者支气管肺泡灌洗液及支气管粘膜的组织中,MMP-9也是MMPS的主要存在形式[3].
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NGAL在腹膜透析相关性腹膜炎中的研究进展
持续性不卧床腹膜透析( CAPD)作为终末期肾脏疾病的一种肾替代治疗方式,被广泛运用于临床. 腹膜炎是腹膜透析( PD)过程中发生的常见并发症,反复发生的腹膜炎导致腹膜纤维化、腹膜功能受损,终导致腹膜透析终止. 因此,早期诊断和有效治疗腹膜炎是维持腹膜透析的关键. 中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)是脂质蛋白家族的新成员,研究表明,NGAL可能作为腹透相关性腹膜炎的早期诊断指标,正越来越受到关注. 本文现就NGAL的结构功能及在腹透相关性腹膜炎中的研究近况作一综述.
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NGAL的结构功能及其在慢性肾脏病中的作用
慢性肾脏疾病的发病率仍在不断增加,每年达到7%以上.根据 2007年国际肾脏病学会新资料,全世界有超过5亿人患有不同的肾脏疾病,每年超过百万人死于慢性肾脏疾病及相关的心脑血管疾病.中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)是众多肾小管损伤检测指标中早出现的敏感特异的标志物,测定快捷方便,结果可靠.对于早期诊断AKI具有非常重要的作用.而近期的研究发现其在预测慢性肾脏病也有着很好的前景,本文就NAGL结构功能及其在慢性肾脏病中的作用做一综述.
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明胶酶与心肌梗死后左室重构
基质金属蛋白酶是一类结构相关的内肽酶家族,能够降解细胞外基质成分.明胶酶是这个家族的重要成员之一,以明胶为降解底物.近年的研究发现,明胶酶还可以同胶原酶一样降解间质胶原,是心肌梗死后左室重构发生的主要驱使因素.本文就明胶酶在心肌梗死后左室重构中的作用及其可能的机制进行论述.
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基质金属蛋白酶-2-9与卵巢周期性变化的研究进展
卵巢的正常功能依赖细胞外基质(ECM)周期性的重建.由于纤溶酶家族的酶不能独立完成蛋白水解,它们不能降解ECM的胶原成分,而基质金属蛋白酶家族能够降解几乎所有的ECM.近年来,大量研究证实,基质金属蛋白酶在这一过程的代谢平衡调节中起决定性作用.而水解Ⅳ型胶原的明胶酶MMP-2和MMP-9在这一过程中的调节具有更为特殊的意义.
关键词: 基质金属蛋白酶-2 基质金属蛋白酶-9 细胞外基质(ECM) 明胶酶 -
明胶酶-B及其抑制剂与类风湿性关节炎
明胶酶-B(Gelatinase B)属于金属蛋白酶(MMPs)家族,又称MMP-9,其主要功能是降解细胞外基质中的Ⅳ型、Ⅴ型胶原和明胶.在体内可参与多种生理、病理过程.明胶酶-B可在多个水平上受多种方式的调节,基因表达的调节、酶原激活的调节、酶抑制剂的调节.明胶酶-B在类风湿性关节炎 (RA)发生发展过程中起多种不同的作用,包括对骨和软骨的破坏、对滑膜新血管形成的影响和对细胞因子的调节.由于明胶酶-B在RA发病过程中起重要作用,因此抑制其活性是对RA进行治疗的一种有效手段.
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生物泡沫敷料覆盖封闭负压引流加速慢性创面愈合中活性明胶酶的变化
背景:有研究表明封闭负压引流可以通过增加创面血流量的方式加速创面愈合,但关于其对人慢性创面中活性形式明胶酶的影响,尚缺乏相应的具体研究。目的:观察封闭负压引流技术对加速慢性创面愈合的活性形式明胶酶的影响。方法:从2013年4月到2014年1月,选取湖北医药学院附属人民医院的96例创伤患者进行临床治疗,将其分为2组,慢性创面组52例患者给予创面封闭负压引流,对照组44例患者于乳腺癌切除后第3天的创面引流液设为急性创面对照。慢性创面组将从压疮和乳癌术后皮肤坏死创面收集的渗出液标本分别成为样本 A和B;从2例静脉瘀滞性溃疡创面收集的标本分别称为样本C,D;从创伤性皮肤缺损创面收集的称为样本E。结果与结论:薄层分析仪测定表明:负压治疗15 d后,慢性创面组所有样本中活性较低的活性形式的明胶酶A样本中的活性基质金属蛋白酶2,B样本中的活性基质金属蛋白酶9,C,D,E样本中的活性基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9活性较治疗前均增高(P<0.05),而活性过高的活性形式明胶酶A样本中的活性基质金属蛋白酶9,B样本中的活性基质金属蛋白酶2活性则较治疗前显著减弱(P<0.05)。治疗15 d后,慢性创面中活性基质金属蛋白酶2、活性基质金属蛋白酶9、活性形式明胶酶总活性与对照组相比均差异无显著性意义(P>0.05)。结果证实,人慢性创面中活性形式明胶酶活性的改变可能是慢性创面长期不愈的原因,封闭负压引流能调节慢性创面中活性形式明胶酶的活性。
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子宫内膜异位症患者血清和腹腔液中明胶酶活性测定及其临床意义
目的通过检测子宫内膜异位症患者血清及腹腔液中明胶酶(MMP-2、MMP-9)的活性,探讨其在子宫内膜异位症发病中的作用.方法2004年6月至2005年6月对吉林大学第二医院妇科60例子宫内膜异位症患者采用含SDS-明胶的聚丙烯酰胺凝胶电泳为基础的酶谱法,检测血清和腹腔液MMP-2、MMP-9活性,其中Ⅰ~Ⅱ期22例,Ⅲ~Ⅳ期38例,良性卵巢囊肿患者20例为对照组.结果子宫内膜异位症患者血清和腹腔液中MMP-2、MMP-9明显高于对照组(P<0.05).随着子宫内膜异位症(EMs)分期的增加,其血清和腹腔液中MMP-2表达量呈上升趋势,且血清中EMsⅢ~Ⅳ期组MMP-2酶活性比对照组增高2倍(P<0.01).结论酶谱法是诊断子宫内膜异位症的有效手段,内异症患者明胶酶MMP-2、MMP-9的表达水平增高,其在子宫内膜异位症的发生发展中具有重要作用.
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明胶酶与卵巢癌侵袭转移关系的研究
卵巢癌目前仍是病死率高的妇科恶性肿瘤,肿瘤的局部侵袭和弥漫的腹腔内转移是卵巢癌患者治疗失败和死亡的直接原因.肿瘤的侵袭转移是一复杂的、多步骤的肿瘤细胞与宿主细胞及基质间相互作用的过程,但肿瘤细胞对细胞外基质的破坏是肿瘤细胞侵袭转移的基本模式.在卵巢癌侵袭转移中,肿瘤细胞降解细胞外基质造成局部侵袭、腹腔种植、穿透血管壁,实现远处转移[1].大量实验表明,明胶酶介导的基质降解对肿瘤的侵袭和转移起着极为重要的作用,也是目前研究肿瘤侵袭和转移的热点.
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明胶酶与牙髓炎和根尖周炎相关性研究进展
明胶酶是基质金属蛋白酶(MMPs)家族的重要组成之一,包括MMP-2和MMP-9,是降解细胞外基质(ECM)的重要酶类.近年研究发现,明胶酶在牙髓炎和根尖周炎发病机制中起重要作用.文章就明胶酶的基础研究及其在牙髓炎和根尖周炎致病、诊断、治疗方面的研究进展做一综述.
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吡咯烷类明胶酶抑制剂的合成及初步活性
目的 设计合成一系列新型吡咯烷衍生物并测定其抑制明胶酶(MMP-2,MMP-9)的活性,研究其构效关系.方法 以L-羟脯氨酸为原料,经多步反应合成吡咯烷类衍生物,采用体外抑酶试验测定化合物抑制明胶酶(MMP-2,MMP-9)的活性.结果 合成了33个未见文献报道的吡咯烷衍生物,其结构经红外光谱、核磁共振氢谱及质谱确定.其中化合物A0、A8、A9、A10、B9、C10抑制明胶酶的活性较强.结论 吡咯烷类衍生物对明胶酶有较强的抑制活性,有可能抑制肿瘤的发生、发展和转移,值得进一步研究.
关键词: 构效关系 明胶酶 基质金属蛋白酶抑制剂 抗肿瘤活性 吡咯烷衍生物 -
灯盏花素对脑缺血再灌注小鼠明胶酶及血脑屏障通透性的影响
目的:通过检测脑缺血再灌注小鼠明胶酶A(MMP-2)、明胶酶B(MMP-9)的活性及脑组织中伊文思蓝的含量,探讨灯盏花素对脑缺血再灌注小鼠明胶酶及血脑屏障(BBB)通透性的影响.方法:复制脑缺血再灌注模型,并于术前15 min腹腔注射灯盏花素注射液10 mg/kg,采用明胶酶谱分析法检测脑组织海马区明胶酶的活性,同时经尾静脉注射2%伊文思蓝,检测脑组织伊文思蓝含量.结果:脑缺血再灌注后明胶酶(A、B)活性增加;灯盏花素组MMP-9活性明显低于脑缺血再灌注组,而灯盏花素对MMP-2作用不显著.脑缺血再灌注后4 h起脑组织伊文思蓝渗出逐渐增多,48 h达高峰,以后有下降趋势.灯盏花素组于术后伊文思蓝渗出明显低于相应时间的脑缺血再灌注组(P<0.05).结论:灯盏花素具有降低脑缺血再灌注小鼠明胶酶B的活性、降低血脑屏障通透性的作用.
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MMP-2在宫颈腺癌中的表达及其活化状态与转移之间的关系
金属基质蛋白酶(MMPs)是一类Zn2+依赖的细胞外蛋白水解酶家族,可以降解细胞外基质所有成分,在基质重构及胚胎发生过程中发挥重要作用[1].MMPs以酶原形式分泌,随之被其他蛋白酶等激活物所激活,从而发挥生物学作用.MMP-2(明胶酶A/72kDaⅣ型胶原酶)是MMPs家族的重要成员,可降解细胞外基质中的Ⅳ型胶原,在肿瘤侵袭转移时起重要作用[2~4].实验应用免疫组化的方法,研究MMP-2在各型宫颈腺癌中的表达,通过原位酶谱分析的方法,对MMP-2的活化进行检测和定位,从而明确其在肿瘤侵袭转移时的作用.
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血清NGAL检测对AKI早期辅助诊断的研究
急性肾损伤(AKI)是临床常见的以肾功能急性减退为主要特征的危急重病之一,本研究旨在探讨血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)检测对 AKI 早期辅助诊断的临床价值,为临床辅助诊断提供参考依据。
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中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的检测对早期急性肾功能损伤辅助诊断的意义
急性肾功能损伤患者主要临床表现为肾脏功能急剧降低,尿量减少和/或血肌酐浓度水平升高,患者若无及时干预治疗措施,很可能导致急性尿毒症、代谢性酸中毒等,进而诱发急性肾功能衰竭,危及生命,若能及早诊断及早干预治疗,会很大程度的降低患者治疗的难度,提高愈后的效果[1]。本文旨在初探中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的检测对早期急性肾功能损伤辅助诊断临床意义,为临床患者诊治提供参考。
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脑梗死患者牙根尖周炎后居泉沙雷菌严重感染1例
居泉沙雷菌(Serratia fonticola)是近年来才命名的较新菌种[1,2]。居泉沙雷菌属沙雷氏菌属,在自然界的水及动植物中广泛存在,但因其引起的人类感染则较为罕见[3]。居泉沙雷氏菌从临床医学标本中也可分离出,主要见于创口渗出液[4],但居泉沙雷氏菌的生化反应(VP、明胶酶、脂酶、DNA酶阴性)不典型,目前医学界对于居泉沙雷菌的认识尚少之又少[5,6]。2015年我院发现1例居泉沙雷菌致菌血症的严重感染的病例,实属罕见。为增加医务工作者对居泉沙雷菌认识,减轻患者经济负担,现报告如下。
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基质金属蛋白酶类测定的临床应用
基质金属蛋白酶类(matrix metalloproteinases,MMPs)是一类具有Zn2+依赖性的内源性蛋白水解酶,可降解多种细胞外基质(ECM).按作用底物不同主要分为五大类[1]:间质胶原酶(MMP-1、-8、-13)、明胶酶又称Ⅳ型胶原酶(MMP-2、-9)、基质溶酶(MMP-3、-10、-11)、膜型基质金属蛋白酶(MMP-14、-15、-16、-17)和其他类(MMP-7、-12、-18、-19、-20、-21、-22).