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对WHO分类中涉及中间型肿瘤的几点疑惑
1990年前后WHO第2版分类使交界性肿瘤概念得到了进一步推广和引用,除了对卵巢上皮性肿瘤的应用外,还体现在卵巢其他上皮-间质性肿瘤、胰腺、乳腺、膀胱等肿瘤的分类上,如增添了3种胰腺外分泌腺交界性肿瘤、乳腺交界性叶状肿瘤、膀胱低度恶性倾向的乳头状泌尿上皮肿瘤等[1].此外还提出了软组织中间型肿瘤概念,明确了5种中间型纤维组织肿瘤和3种中间型血管内皮细胞肿瘤.
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光镜水平下Fabry病溶酶体贮积物的检测和定性
Fabry病是由于细胞溶酶体中α-半乳糖苷酶遗传性缺失,导致该酶的底物,神经鞘脂类化合物的正常降解受阻, 神经鞘脂类化合物在溶酶体中贮积而导致的疾病[1,2].神经鞘脂类化合物由酰基鞘氨醇及第一碳位上的一个或多个糖残基组成.α-半乳糖苷酶是一种可水解神经鞘脂类化合物中酰基鞘氨醇三巳糖苷脂末端α-半乳糖残基的外糖苷酶,其功能缺失引起酰基鞘氨醇三巳糖苷脂在血管内皮细胞、纤维母细胞和汗腺细胞等细胞的溶酶体中堆积,从而导致皮肤和黏膜角质瘤、肢端疼痛和感觉异常、少汗、心血管及肾功能不全等多种临床表现[3].从遗传学上看,Fabry病是一种X连锁隐性遗传病,α-半乳糖苷酶基因已被定位于X染色体,Xq22区,其核苷酸序列已经明确[4,5].许多研究已证实Fabry病患者中的确存在α-半乳糖苷酶基因突变,而不同的突变类型体现了这种病的遗传异质性[3].
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内毒素致伤小鼠肺组织SSeCKS表达变化的研究
目的观察内毒素/脂多糖(LPS)致伤小鼠肺组织中Src抑制的蛋白激酶C的底物(SSeCKS)的表达变化和细胞定位.方法腹腔注射LPS制备小鼠内毒素肺损伤模型,依据注射时相和剂量不同随机分组.用Real-time PCR法和Western blot法检测各组肺组织SSeCKS的mRNA和蛋白质水平表达情况,间接免疫荧光双标法检测SSeCKS在肺组织中的细胞定位.结果 SSeCKS表达水平与LPS用量呈现剂量和时间依赖关系:1、5、10和15 mg/kg组SSeCKS mRNA水平皆显著高于对照组(P＜0.05),且随注射剂量增高SSeCKS mRNA表达量亦逐渐增高;不同时相LPS(5 mg/kg)注射后肺组织中SSeCKS mRNA水平表达呈动态变化过程,1 h开始增高,3 h达到表达高峰,12 h降至正常水平;SSeCKS蛋白水平表达变化与mRNA水平变化相一致.SSeCKS在肺组织中定位于肺泡间隔毛细血管内皮细胞.结论SSeCKS是炎症反应蛋白,其表达量与炎症的严重程度相关.内毒素可诱导肺泡间隔毛细血管内皮细胞SSeCKS表达上调.
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羧肽酶E促进淋巴细胞跨血管内皮细胞迁移的研究
目的 研究羧肽酶E如何促进淋巴细胞及其亚群跨血管内皮细胞进行迁移.方法利用CRISPR/Cas9技术对MS1细胞上的基因cpe进行敲除;淋巴细胞与血管内皮细胞黏附试验比较淋巴细胞对MS1细胞和敲除细胞Cpe-/-MS1的黏附能力,RT-PCR及流式方法比较MS1细胞和敲除细胞Cpe-/-MS1表面黏附分子的表达;Transwell试验比较淋巴细胞及其亚群穿过MS1细胞和敲除细胞Cpe-/-MS1的能力.结果我们成功获得了敲除细胞系Cpe-/-MS1;在TNF-α刺激下,淋巴细胞对MS1细胞的黏附能力显著高于敲除细胞Cpe-/-MS1;在TNF-α刺激下,MS1细胞表面黏附分子的表达量显著高于敲除细胞Cpe-/-MS1;在TNF-α刺激下,淋巴细胞及其亚群穿过MS1细胞的能力显著高于敲除细胞Cpe-/-MS1.结论羧肽酶E影响淋巴细胞与血管内皮细胞的黏附及跨血管内皮细胞迁移,本研究对于深入理解淋巴细胞跨血管内皮细胞向外周淋巴结迁移具有重要指导意义.
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P-gp对树突状细胞从皮肤迁移至引流淋巴结的影响
细胞膜P-糖蛋白(P-gp,P-glycoprotein)是多药耐药(mdr)基因表达产物,广泛分布在各种排泄器官包括肠道、肝、肾等上皮细胞,脑及胎盘血管内皮细胞、造血干细胞及外周血细胞的细胞膜上.人类mdr1基因,小鼠mdr1a基因表达产物与多药耐药有关.目前,有关P-gp的研究多集中在肿瘤化学治疗的药物抵抗方面,对其在免疫调节中的作用还不清楚.本文用FVB(H-2q)野生型(FVB/N)与FVB mdr1a敲除(mdr1a-/-)突变型小鼠,探讨P-gp对树突状细胞(DC)从皮肤向引流淋巴结迁移的影响.
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肺炎支原体膜脂蛋白诱导ECV304细胞表达mICAM-1的研究
肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae, Mp)除引起原发性非典型性肺炎、支气管炎等呼吸道疾病外,亦可引起其他多系统、多器官的肺外并发症,如脑膜脑炎、心肌炎、免疫性溶血性贫血及肾炎等[1].研究证实,许多支原体的膜脂蛋白在体外具有诱导人单核/巨噬细胞分泌TNF-α、IL-1β的能力[1],而TNF-α、IL-1β可以使血管内皮细胞mICAM-1的表达水平增加促进炎症细胞的黏附引起局部炎症反应[2].
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登革2型病毒调控血管内皮细胞纤溶系统相关蛋白的表达
目的观察登革2型病毒(DV2)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)表达组织纤溶酶原激活物(tPA)和纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)的影响. 方法应用胰酶消化分离HUVEC并进行传代培养,用生长良好的第2、3代细胞进行试验.用cell counting kit-8(CCK-8)测定DV2感染后细胞活性变化;发色底物法测定感染DV2组和对照组培养液中tPA、PAI-1活性;RT-PCR检测细胞内tPA和PAI-1 mRNA水平. 结果 DV2感染对细胞活力的影响与对照组相比差异无统计学意义.感染DV2组培养液中tPA活性在12～72 h显著升高(P＜0.05);DV2诱导HUVEC表达tPA mRNA的水平显著上调,12 h达到峰值,以后渐降,72 h mRNA表达水平仍高于对照组(P＜0.01).而DV2感染组培养液中PAI-1活性和PAI-1 mRNA的表达与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 DV2感染可显著上调HUVEC的tPA mRNA转录,增强内皮细胞tPA蛋白的分泌,而不影响PAI-1 mRNA的转录或改变内皮细胞PAI-1的分泌.结果提示DV2可活化但并不损伤内皮细胞,诱发内皮细胞增强表达纤溶酶原激活物而致使纤溶系统失衡,引起纤溶亢进,这可能是诱发DHF/DSS患者急性期出血、低血容量性休克等体征的主要因素之一.
关键词： 登革病毒 血管内皮细胞 组织纤溶酶原激活物 纤溶酶原激活物抑制物1 -
血管内皮钙黏蛋白在自身免疫性疾病中的作用研究进展
VE-cadherin是内皮细胞特异性钙黏蛋白,主要分布在细胞间连接部位的细胞膜上,其表达依赖于血管内皮细胞的完整性；反过来,其正常表达与功能为维持血管内皮的完成性所必需。简言之,VE-cadherin在正常血管发生、形成、保持血管内皮完整性、细胞内的信号转导的各个过程中均起着重要作用。现有的研究提示,除血管内皮外, VE-cadherin还在某些肿瘤细胞中发挥作用。近年来发现,在自身免疫性疾病中,往往伴随着抗 VE-cadherin 自身抗体的出现,这预示着VE-cadherin可能在免疫功能紊乱的疾病中同样发挥重要作用。以下对VE-cadherin的生物学特性及其与自身免疫性疾病的一些相关研究进展做一综述。
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内毒素解毒物质研究进展
内毒素是G-细菌细胞壁外膜的LPS成分,可激活单核/巨噬细胞、肝Kupffer细胞、血管内皮细胞等,并诱生TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8等炎性细胞因子及氧自由基等化学介质的释放,诱发全身炎症反应综合征(包括感染性休克)和肝脏等组织器官的严重损伤[1].人体内也有多种蛋白质分子是人或动物体内天然存在的内毒素解毒物质,能直接或间接地拮抗LPS的毒性作用,具有十分重要的免疫防御意义.本文对相关研究概况介绍如下.
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心搏骤停者血清一氧化氮的测定及意义
心搏骤停中有心血管病史者约占75.7%[1],冠状动脉内皮细胞损伤是心血管疾病的病理基础[2],而一氧化氮(NO)是血管内皮细胞合成分泌的舒张因子的重要成分.本文通过对心搏骤停者血清NO的测定,探讨NO在心搏骤停发生中的作用及意义.
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谷氨酰胺对脓毒症大鼠肺血管内皮细胞的作用
目的 观察脓毒症大鼠肺血管内皮细胞(vascular endothelial cell,VEC)、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)和E-选择素的变化特点并探讨谷氨酰胺对其的作用.方法 将Sprague-Dawley(SD)大鼠56只随机分成对照组、脓毒症组和治疗组.实验地点在中山大学北校区动物实验中心.脓毒症组注射脂多糖4mg/kg制备大鼠脓毒症模型,治疗组注射脂多糖4mg/kg和谷氨酰胺0.3g/kg,对照组不注射脂多糖.造模成功后,在6,12,24 h时间点分离大鼠肺标本,采用逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学方法研究肺ICAM-1和E-选择素的表达;用Hoechest染色评价肺VEC凋亡;用电子显微镜观察肺VEC.采取SPSS 13.0软件包进行统计学处理,统计分析方法采用方差分析法.结果 脓毒症组大鼠肺ICAM-1和E-选择素的表达与治疗组和对照组比较明显增加(P＜0.01),治疗组ICAM-1蛋白和E-选择素的表达明显高于对照组(P＜0.05).脓毒症组和治疗组ICAM-1的表达24 h达到高峰,E-选择素的表达6 h达高峰.脓毒症组大鼠肺VEC凋亡明显多于治疗组(P＜0.05)和对照组(P＜0.01);治疗组大鼠VEC凋亡明显多于对照组(P＜0.01).电子显微镜观察也得到证实.结论 脓毒症大鼠肺ICAM-1和B选择素的表达明显增加,导致肺VEC的坏死和凋亡以及急性肺损伤的发生.谷氨酰胺对其有保护作用.
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Chromofungin抑制TNF-α诱导血管内皮通透性增加的钙信号机制
目的 探讨嗜铬粒蛋白A(chromogranin A,CGA)衍生多肽Chromofungin (CHR)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导血管内皮细胞钙内流的影响.方法 以人脐静脉内皮细胞系EA.hy926细胞为研究对象,建立TNF-α刺激炎症模型,实验分为对照组、TNF-α组、10 nmol/LCHR+ TNF-α组、100 nmol/L CHR+TNF-α组和1 000 nmoL/L CHR+ TNF-α组.Transwell小室法检测EA.hy926细胞通透性,激光共聚焦法检测EA.hy926细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的变化.结果 与对照组比较,TNF-α组明显增加EA.hy926细胞通透性[(1.189±0.086)vs.(1.771±0.195),t=4.343,P=0.01];10 nmol/L、100 nmol/L和1 000 nmol/L CHR抑制TNF-α诱导的EA.hy926细胞通透性增加,其中10 nmol/L和100 nmol/L CHR显著降低TNF-α诱导的EA.hy926细胞高通透性[(1.771±0.195)vs.(1.315±0.134),t=3.403,P=0.042;(1.771 ±0.195)vs.(1.236±0.181),t=3.985,P=0.017],1 000 nmol/L CHR降低TNF-α诱导的EA.hy926细胞高通透性,差异无统计学意义[(1.771 ±0.195)vs.(1.411 ±0.255),t=2.679,P=0.126].10nmol/L、100 nmol/L和1 000 nmol/L CHR作用于EA.hy926细胞时细胞内Ca2+浓度无明显变化.TNF-α诱导EA.hy926细胞外Ca2+快速内流,各时间点细胞内Ca2+荧光强度F40、Ftl100与起始荧光值F130比较,差异具有统计学意义[荧光强度分别为:(41.497 ±3.788)vs.(56.193 ±3.082),F=196.129,P=0.000;(41.497±3.788)vs.(53.457±4.536),F=101.19,P=0.000],10nmol/L、100 nmol/L和1 000 nmol/L CHR能够抑制TNF-α引起的Ca2+快速内流.结论 CHR抑制TNF-α诱导的EA.hy926细胞通透性增加,这一作用可能是通过阻止TNF-α诱导的细胞外Ca2+内流来实现的.
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G蛋白偶联受体激酶2参与血小板活化因子致肺微血管内皮细胞损伤的机制
目的探讨G蛋白偶联受体激酶2(GRK2)参与血小板活化因子(PAF)诱导大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)损伤的机制.方法在体外分离、培养PMVEC的基础上,采用微滤器检测PAF作用于PMVEC前后单层通透性的变化;用流式细胞仪检测F-肌动蛋白(F-actin)的变化;并用Western blot方法检测PMVEC 的GRK2表达,用佛波酯刺激PMVEC以观察GRK2的变化及其对单层通透性和F-actin的影响.结果 10 mg·L-1剂量的PAF 在120 min内可使PMVEC单层通透性增高、F-actin解聚,GRK2表达明显高于正常对照组,佛波酯刺激PMVEC可使GRK2表达进一步增高并可抑制PMVEC单层通透性增高和F-actin解聚.结论 PAF作用后可引起PMVEC 单层通透性增高和GRK2表达增加,且PMVEC F-actin解聚与单层通透性增高密切相关,GRK2表达增加可抑制PMVEC单层通透性增高和F-actin解聚,减轻PAF对PMVEC的损伤.
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活化蛋白C抑制血管内皮细胞凋亡的机制研究
目的 观察活化蛋白C(activated protein C,APC)对线粒体凋亡途径相关调节因子的影响,以阐述其抑制血管内皮细胞凋亡作用的可能机制.方法 人脐静脉血管内皮细胞与脂多糖(1μg/mL)孵育诱导细胞凋亡模型后,分别给予APC(10 ng/mL或50 ng/mL)建立药物治疗组,另设立对照和凋亡模型组,24 h后取材,RT-PCR和Western blotting检测Bcl-2,Bax,P53和Caspase 3 mRNA及蛋白表达.结果 不同剂量APC治疗组与凋亡模型组比较P53,Bax和Caspase 3 mRNA和蛋白表达下调,Bcl-2 mRNA和蛋白表达上调,尤以APC 50 ng/mL治疗组为显著(P<0.05).结论 APC可能参与调节Caspase 3依赖性的线粒体凋亡途径相关因子的表达,发挥抑制LPS诱导的血管内皮细胞凋亡,从而为APC制剂在感染性疾病中的使用提供了理论基础.
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急性肺损伤与中性粒细胞凋亡
研究表明,急性肺损伤(ALI)是始于有害环境及内源性因子作用下的肺泡壁爆炸性炎症反应.中性粒细胞的增多与激活以及血管内皮细胞的功能受损,释放多种炎症介质是ALI的主要发病机制,其病理组织学表现为肺泡Ⅱ型细胞增生、成纤维细胞增殖及胶原的聚集[1].传统观念认为,急性损伤常引起组织坏死,自从1972年Kerr等人提出细胞凋亡的概念后,细胞凋亡已被证实在许多生物过程中起着重要的调节作用,包括炎症反应[2].有实验显示,内毒素、烧伤、缺血与再灌流损伤及脑外伤等均可导致相关脏器的细胞凋亡[3].本文即是从细胞凋亡的角度来探讨急性肺损伤的发生机制及其在损伤后肺组织的修复过程中所起的作用.
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解毒化瘀汤对多器官功能障碍综合征大鼠血管内皮细胞的保护作用
目的探讨解毒化瘀汤对多器官功能障碍综合征(MODS)大鼠血管内皮细胞的保护作用.方法将52只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组,以及低、中、高剂量中药组共5组.尾静脉注射内毒素方法制作MODS鼠模型,中药组每日用解毒化瘀汤灌胃1次,对照组每日用相同剂量的饮用水灌胃1次,第4天取血,以硝基四氮唑蓝(NBT)法查中性粒细胞(PMN)活化计数,用酶联免疫吸附(ELISA)法查血管性血友病因子(vWF)及血栓调节蛋白(TM)值.结果模型组及低、中、高剂量中药组的vWF、TM值和PMN活化计数水平均明显高于对照组(P＜0.05),低、中、高剂量中药组vWF、TM值和PMN活化计数水平均明显低于模型组(P＜0.05),3项指标间两两呈正相关.结论 MODS大鼠模型制作成功,解毒化瘀汤对MODS大鼠血管内皮细胞具有保护作用.
关键词： 解毒化瘀汤 多脏器功能障碍综合征 血管内皮细胞 -
妊娠高血压疾病与血管细胞粘附因子相关性的研究
目的：探讨妊娠高血压疾病与血管细胞粘附因子的相关性。方法选取自2012年10月至2014年10月收治的48例妊娠高血压疾病的患者（妊高症组），并随机选取正常妊娠妇女30例（正常妊娠组）及正常非妊娠妇女30例（正常非妊娠组）作为两个对照组。采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ ELISA）测定各组妇女血清中血管细胞黏附分子-1（VCAM -1）和白细胞介素6（IL -6）的浓度，并采用免疫组织化学染色法检测30例妊高症患者，20例正常妊娠妇女的胎盘组织中 VCAM -1的表达。对比各组妇女血清中 VCAM -1和 IL -6的浓度，以及妊高症组和正常妊娠组胎盘组织中 VCAM -1的表达情况。结果妊高症组血清 VCAM -1浓度、IL -6含量均明显高于正常妊娠组和正常非妊娠组，组间对比差异有显著性（ P ﹤0.01）。VCAM -1和 IL -6的浓度水平呈正相关（ r =0.62，P ﹤0.01）。VCAM -1在妊高症组胚胎滋养叶细胞的表达明显低于正常妊娠组（23.33% vs.65.00%），差异有显著性（χ2=10.85，P ﹤0.005）；妊高症组的毛细血管内皮细胞阳性率高于正常晚期妊娠组（43.33% vs.30.00%），但差异无显著性（χ2=0.95，P ﹥0.05）。结论血清中 VCAM -1的升高参与了妊高症组血管内皮损伤过程，IL -6可诱导 VCAM -1的表达；VCAM -1在妊高症组患者的胚胎滋养细胞呈低表达，表明妊高症患者缺乏血管内皮表型，VCAM -1在妊高症的病理变化中起一定的作用。
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银杏叶提取物通过激活PI3K/AKT通路抑制IL-1β诱导血管内皮细胞的凋亡
目的 研究银杏叶提取物对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的血管内皮细胞凋亡的抑制作用及其作用机制.方法 对人脐静脉血管内皮细胞进行培养,用IL-1β 诱导血管内皮细胞建立细胞凋亡模型:分为对照组、IL-1β组、不同剂量的银杏叶提取物处理组(20μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml),对照组为空白对照,IL-1β刺激组给予10 ng/ml IL-1β 处理细胞,银杏叶提取物处理组给予相应剂量银杏叶提取物处理细胞.通过CCK-8法检测不同剂量的银杏叶提取物对IL-1β诱导的血管内皮的增殖影响,流式细胞术检测银杏叶提取物对细胞凋亡的影响,Western blot检测通路蛋白PI3K、AKT、p-AKT和凋亡蛋白caspase 3、Bax和Bcl-2的表达情况,RT-PCR检测凋亡相关基因caspase 3、Bax和Bcl-2的表达变化.结果 不同剂量的银杏叶提取物能显著提高IL-1β诱导血管内皮细胞的增殖能力,尤其是200μg/ml的银杏叶提取物组对IL-1β诱导血管内皮细胞的增殖能力作用非常显著.与对照组比较,IL-1β组细胞凋亡率、凋亡相关蛋白caspase 3和Bax的表达明显上升,抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显下降.与IL-1β组比较,银杏叶提取物预处理组细胞凋亡率、凋亡相关蛋白caspase 3和Bax的表达明显下降,抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显上升(P<0.05).同时与对照组比较,IL-1β组细胞通路蛋白PI3K和p-AKT蛋白的表达明显下降,而给予银杏叶提取物预处理后,其PI3K和p-AKT蛋白的表达明显上升(P<0.05).结论 银杏叶提取物对IL-1β诱导的血管内皮细胞的凋亡具有一定的抑制作用,且其具体的抑制机制与激活PI3K/AKT信号通路有关.
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TLR4对ox-LDL作用后的血管内皮细胞ROS及线粒体膜电位的影响
目的 探讨Toll样受体4(TLR4)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)作用后的血管内皮细胞活性氧(ROS)及线粒体膜电位的影响.方法 用qRT-PCR和Western blot分别测定ox-LDL作用后的血管内皮细胞中TLR4 mRNA和蛋白水平.在血管内皮细胞中转染TLR4小干扰RNA和小干扰RNA阴性对照,qRT-PCR和Western blot分别测定血管内皮细胞中TLR4 mRNA和蛋白水平.用ox-LDL作用转染以后的血管内皮细胞,流式细胞术测定细胞凋亡情况,荧光素酶基因报告系统测定三磷酸腺苷(ATP)含量,二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)法测定ROS含量,JC-1法测定线粒体膜电位,Western blot测定细胞浆及线粒体中细胞色素C(Cytochrome C)蛋白水平.结果 ox-LDL作用后的血管内皮细胞中TLR4 mRNA和蛋白水平均明显高于未经处理的细胞(P<0.05).TLR4小干扰RNA转染以后的细胞中TLR4 mRNA和蛋白水平均明显低于未经转染的细胞(P<0.05),而转染小干扰RNA阴性对照后细胞中mR-NA和蛋白水平与未经转染的细胞相比没有明显变化(P>0.05).ox-LDL处理以后的细胞凋亡增多,细胞线粒体膜电位和ATP水平降低,细胞中ROS水平升高,线粒体中Cytochrome C蛋白减少,胞浆中Cytochrome C蛋白增多,与未经处理的细胞相比差异有统计学意义(P<0.05).下调TLR4后的血管内皮细胞经ox-LDL处理以后,细胞凋亡率降低,线粒体膜电位和ATP水平升高,细胞中ROS水平降低,线粒体中Cytochrome C蛋白增多,胞浆中Cytochrome C蛋白减少,与单纯ox-LDL处理的细胞相比,差异有统计学意义(P<0.05).结论 TLR4表达下调后可以提高ox-LDL处理后血管内皮细胞线粒体膜电位,促进细胞ATP合成,减少细胞中ROS的积累,减少线粒体中Cytochrome C蛋白的释放,减少线粒体损伤,减少细胞凋亡发生.
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Bax对过氧化氢作用后的血管内皮细胞MDA生成及内皮素释放影响研究
目的 研究Bcl-2相关X蛋白(Bax)对过氧化氢(H2O2)作用后的血管内皮细胞丙二醛(MDA)生成及内皮素(ET)释放的影响.方法 血管内皮细胞分为对照组、si-NC组、si-Bax组、H2O2组、si-NC组+H2O2组、si-Bax+H2O2组共6组,对照组:不做任何处理,常规培养;si-NC组:血管内皮细胞中转染siRNA Control,常规培养;si-Bax组:血管内皮细胞中转染siRNA Bax,常规培养;H2O2组:血管内皮细胞不做转染,用100μmol/L的H2O2处理;si-NC+H2O2组:血管内皮细胞中转染siRNA Control后24 h,用100μmol/L的H2O2处理;si-Bax+H2O2组:血管内皮细胞中转染siRNA Bax后24 h,用100μmol/L的H2O2处理.qRT-PCR和Western blot测定细胞中Bax mRNA和蛋白的表达水平.在血管内皮细胞中转染Bax小干扰RNA和小干扰RNA阴性对照,用H2O2处理后,硫代巴比妥酸法检测各组培养液中MDA含量,Griess法测定各组培养液中一氧化氮(NO)含量,二硝基苯肼法测定各组培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量,放射免疫法测定各组培养液中ET含量,流式细胞术测定各组细胞凋亡情况.结果 H2O2组细胞中Bax mRNA和蛋白水平高于对照组.si-Bax组细胞中Bax mRNA和蛋白水平低于对照组.si-NC组细胞中Bax mRNA和蛋白水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05).H2O2组细胞培养液中MDA、LDH、ET水平均升高,NO水平下降,细胞凋亡率升高,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05).si-Bax+H2O2组细胞培养液上清中的MDA、LDH、ET水平有所降低,NO水平升高,细胞凋亡率有所降低,与H2O2组相比,差异具有统计学意义(P<0.05).si-NC+H2O2组细胞清中的MDA、LDH、ET、NO水平及细胞凋亡率与H2O2组相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 H 2 O2诱导血管内皮细胞氧化损伤,而下调Bax表达可以减少血管内皮细胞释放MDA、ET、LDH,促进细胞中NO合成,减少细胞凋亡,Bax可以减弱H2O2诱导的血管内皮细胞损伤.
