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媒介按蚊抗疟原虫感染的免疫相关基因研究进展
疟疾仍然是严重危害人类健康的传染性疾病之一,每年有300~500万人感染疟疾并导致100多万人死亡.按蚊是疟疾的传播媒介,由于按蚊对杀虫剂抗性的产生和扩散,目前尚无有效的防制措施.随着分子生物学技术的发展和疟疾防治的需要,世界卫生组织于20世纪 90 年代初提出一项基因操纵控制蚊媒新策略,即通过转基因手段,把蚊虫抵抗疟原虫感染的相关基因转入蚊基因组, 使其稳定遗传并在自然种群中扩散, 以期减少甚至阻断疟疾的传播.研究疟原虫感染引起蚊媒体内的生物学改变,特别是对按蚊中抑制疟原虫感染免疫相关基因的研究, 是实现这一策略的重要研究课题.目前的研究热点主要集中于三类基因:按蚊的模式识别受体、抗疟原虫感染的基因和效应调节基因.本文就这一方面的研究进展作一综述.
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重组BCG疫苗在传染病防治中的应用
卡介苗(Bacille Calmette-Guérin,BCG)作为预防结核病的重要手段,已证明其对人体安全,且接种效果不受母体抗体的影响,成为WHO推荐的两种新生的活疫苗之一.BCG本身是强免疫佐剂,临床上常用于肿瘤治疗.近年来国内外学者以BCG为疫苗载体,将具有免疫保护作用的外源基因转入BCG[1],希望开发在BCG中表达保护性抗原或免疫因子的新一代活疫苗,以达到增强BCG免疫原性和一苗多用的目的.本文就重组BCG疫苗在传染病防治中的应用作一综述.
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基因疗法治疗脊柱疾病——现状与展望
随着对人类基因结构及其功能研究的深入,基因疗法极可能成为21世纪临床治疗脊柱疾病的有效手段。成功地将治疗基因转入椎间盘内的靶细胞,以及在动物模型上利用基因疗法成功促进脊柱融合,标志着在这一领域的研究正取得快速进展[1]。但是在基因疗法终进入临床阶段之前,还有待进一步研究。本文在介绍基因治疗研究新发展的基础上,展望基因疗法治疗脊柱疾病尤其是椎间盘变性和脊柱融合相关疾病的前景。1 基因治疗概念的新发展 基因治疗是将编码目的基因的核酸系列(RNA或者DNA)导入某群细胞,改变细胞的基因成分,使细胞成为特定蛋白的“生产工厂”,从而改变该细胞本身的代谢,而且还能影响邻近的未经基因改造的细胞。它不再专指通过转移功能性基因代替缺陷基因来治疗已发生的疾病,而是指通过核酸转移治疗或预防疾病。也就是说基因治疗不仅可用来治疗遗传性疾病,而且将来可治疗后天性疾病,包括肌肉骨骼的病变[2]。
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基质金属蛋白酶抑制剂-3基因转染抗人肝癌细胞系侵袭与转移的研究
我们将基质金属蛋白酶抑制剂-3(TIMP-3)基因转入肝癌细胞HCC-7721细胞系,观察上调TIMP-3的表达对肿瘤生物学行为的影响,进而探讨基质金属蛋白酶(MMPs)和TIMPs与肿瘤恶性表型的相关性及其在恶性肿瘤基因治疗上的意义.材料与方法
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外源基因转入角膜内皮细胞的实验研究
基因转移作为一种全新的方法,正在开始逐步应用于对临床疾病的治疗和诊断.如果能将具备治疗或诊断的外源基因通过基因转移技术转入角膜,来治疗疑难的角膜病或提高角膜移植手术的成功率,将有很好的应用前景.为此我们应用人5型腺病毒(Ad5)将外源基因转入兔角膜内皮细胞的方法进行实验研究,探讨不同时间外源基因在角膜内皮细胞的表达,分析Ad5载体的靶向性和安全性.
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携带sbr基因的农杆菌二元载体系统的构建及稳定性分析
利用转基因植物生产防龋疫苗,其中一个主要的步骤是如何将目的基因转入植物组织中.对于双子叶植物番茄来说,农杆菌为载体的基因转移法是合适的,因此本实验构建含sbr基因的农杆菌二元载体系统,并分析质粒在农杆菌中的稳定性,为下一步植物遗传转化奠定基础.
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成肌细胞在肌肉骨骼系统疾病基因治疗中的应用研究进展
基因治疗,就是利用分子生物学的方法将目的基因转入靶细胞内,通过靶细胞表达目的基因产物治疗疾病的方法.基因治疗主要有两种途径:即in vivo 及ex vivo 方式.in vivo 途径即体内基因治疗,是将外源基因装配于特定的真核细胞表达载体,直接导入体内.ex vivo 途径也称"回体基因治疗",是将含有外源基因的载体在体外导入自体或异体(异种)细胞,经体外细胞扩增后,输回自体.此方法易于操作,并且使用自体细胞有利于解决安全性问题.
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自杀基因治疗肿瘤研究现状
自杀基因疗法是指利用转基因方法,将哺乳动物不含有的药物酶基因转入肿瘤细胞内,该基因表达的产物可以将无毒性的药物前体转化为有毒的药物,影响细胞的DNA合成,从而引起该细胞死亡.基因转导的方法有多种,如基因直接注射、电穿孔、脂质体转导,磷酸钙沉淀以及病毒载体转导方法.因为常以病毒作为载体,称为病毒介导的酶解药物前体治疗.
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脑源性神经营养因子基因转导对骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的影响
动物实验表明骨髓间充质干细胞(MSC)移植到脑组织中可长期存活,并可向包括神经元在内的神经细胞分化[1,2].但MSC移植也面临一个问题:移植细胞多分化为胶质细胞,分化为神经元的数量较少.本研究旨在观察外源基因转入MSC后,持续稳定高表达的脑源性神经营养因子(BDNF)对MSC向神经细胞分化的作用.
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慢病毒介导绿色荧光蛋白转染人胚胎干细胞的研究
1998年Thomson等[1]成功分离、建立了人胚胎干细胞(hESC)细胞系之后,有关hESC的研究得到迅猛发展.hESC的自我更新和分化过程涉及到多种相关基因表达的活化或抑制,而开展这方面的研究需要有效的转基因技术来完成.由于hESC的培养条件非常苛刻,外源基凶的转入通常较困难.常用的转基因方法如脂质体、电穿孔、磷酸钙共沉淀等不能有效地将外源基因转入hESC中.目前关于hESC的转基因研究报道较少,我们采用慢病毒(lentivirus)载体成功地将绿色荧光蛋白(EGFP)基凶转入hESC,建立了稳定表达EGFP的hESC细胞系.
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1例p53基因治疗胆管癌病人的护理
癌症是人体细胞在外环境因素的作用下,内在多种前癌基因被激活和抑癌基因失活的多阶段长期演变的过程.p53基因是研究透彻、功能强大的一种抑癌基因,而重组人p53腺病毒(rAd-p53)是一种基因工程改造过的活病毒,在结构上由两部分组成,一是抑癌基因p53,二是载体.载体是改造过的无复制能力的腺病毒,能携带p53的腺病毒特异感染肿瘤细胞,它可以有效地将治病的p53基因转入肿瘤细胞内,而对正常细胞无害,达到抑制或减小肿瘤的目的.2004年9月,我科收治1例从英国来的胆管癌女性病人,经过p53基因5次治疗,病人住院40d,好转出院.现将护理介绍如下.
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肝癌靶向基因治疗载体研究进展〔1〕
目前对于肝癌治疗的研究已经进入分子水平,随着分子生物学的快速发展和基因工程技术的日臻成熟,肝癌的基因治疗已经迅速发展成为继手术切除、放化疗和介入治疗之后一个新的治疗模式。虽然已有许多将目的基因转入活细胞的方法,但仍存在转移效率不高、靶向性不高的问题。因此寻求一种高靶向性、高转染率的方法已成为研究肝癌靶向基因治疗的热点。在肝癌靶向基因治疗过程中,目前常用的治疗基因转移方法主要包括病毒载体和非病毒载体介导的基因转移。
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现代生物技术潜在的安全问题引发的思考
现代生物技术是以重组DNA技术和细胞融合技术为基础,包括基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程等四大体系组成的现代高新技术.特别是由分子遗传学和工程技术相结合的产物--基因工程,是现代生物技术的核心技术.它采用类似工程设计的方法,按照人类的需要,将具有遗传信息的基因,在离体条件下进行剪切、组合、拼接,然后把这种人工重组的基因转入宿主细胞内进行大量繁殖并表达,以创造新的生物.基因工程的大特点就是重组DNA技术开辟了在短期内改造生物遗传性状的新天地,它填补了生物种属间不可逾越的鸿沟,克服了常规育种的盲目性,使人类有可能按照需要来培育生物新品种、新类型乃至创造自然界从来未有过的新生物.
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真菌免疫调节蛋白的研究进展
真菌免疫调节蛋白(Fungal immunomodulatory protein,Fip)是近年来从一些高等担子菌(蘑菇类)子实体中提取的与植物凝集素和免疫球蛋白的结构和免疫功能相似的一类小分子蛋白质.自1989年Kino等[1]从赤灵芝子实体中分离提取出第一种真菌免疫调节蛋白(LZ-8)以来,目前已分别从赤灵芝,松杉灵芝,金针菇和草菇中的子实体中提取出4种真菌免疫调节蛋白[2-4],它们的氨基酸组分别具有60%~70%的同源性,并且具有相似的免疫生物学活性.根据这4种真菌免疫调节蛋白的氨基酸序列,克隆了这几种蛋白质的编码基因,并将编码基因转入到大肠杆菌或酵母菌中获得了重组免疫调节蛋白的表达[2].本文介绍了这4种真菌免疫调节蛋白的生物学特征、免疫调节活性和分子生物学研究的新进展.
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按蚊抗疟原虫感染免疫机制的研究进展
疟疾严重危害人类健康,杀虫剂灭蚊是控制其传播的重要手段.受蚊虫抗药性和生态多样性的困扰,至今未能取得理想的防制效果.随着分子生物学技术的发展和疟疾防治的需要,世界卫生组织于20世纪90年代初提出一项基因操纵蚊媒新策略,即通过转基因手段,把蚊虫抵抗疟原虫感染的相关基因转入蚊基因组,使其稳定遗传并在自然种群中扩散,以期减少甚至阻断蚊虫的传播.研究疟原虫-蚊媒相互关系的分子机制,尤其对按蚊阻断疟原虫感染的免疫机制的研究,是实现这一策略的重要课题.
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白细胞介素-18基因转染对大肠癌细胞生长及粘附能力的影响
研究表明,将细胞因子基因转入肿瘤细胞中可导致肿瘤细胞的生物学行为发生改变.本研究利用阳离子脂质体将白细胞介素-18(IL-18)基因转入人大肠癌细胞系SW480细胞中,对IL-18基因转导后的SW480细胞生长及粘附能力变化进行研究.
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转基因大豆的是是非非
转基因食品从诞生起,就一直饱受争议,关于转基因大豆是否会致癌、导致不育的争论和研究,也从未间断过.站在当代科学的肩膀上,如何认识“转基因大豆”,这个熟悉的陌生词呢? 转基因大豆乃何方神圣转基因大豆是通过人工手段改变了遗传物质的大豆,改变的方法是采用“基因重组技术”,将人类需要的目的基因转入大豆,使大豆表达新的性状.这些基因要么是抗除草剂的基因,要么是抗虫的基因,转入这些基因后,能降低除草剂或杀虫剂的使用,降低种植成本,提高农民受益,其出油率、产量都要明显高于非转基因大豆,在相当大程度上缓解了全球粮食紧缺的现象,同时也降低了自然环境中除草剂与农药残留,有利于保护人类的生存环境,可谓是“一举多得”.
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转入胰岛素基因胰岛的胰岛素合成功能研究
我们将人类前胰岛素基因转入小鼠胰岛,建立双胰岛素模型,在体外培养中利用在移植后损伤中起重要作用的炎性细胞因子对其进行干预,通过对比不同胰岛素量的变化和胰岛内胰岛素总量的变化,探讨转基因胰岛的胰岛素合成功能特性.
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转基因雪旺细胞与壳聚糖的相容性
大量动物实验证实:将体外培养的雪旺细胞(SC)移植入脊髓损伤区能促进神经元再生,但SC在体外培养和移植过程中,缺乏有效载体[1].本实验拟建立SC体外分离培养的方法,将神经生长因子(NGF)基因转入SC,使用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测NGF在转染前后的分泌情况;使用壳聚糖作为载体,种植转基因SC,并对两者的相容性进行观察,探讨转基因和壳聚糖在脊髓损伤治疗中的作用.
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基因治疗中载体的研究进展
自1990年美国成功地实施了第一例基因治疗以后,基因治疗的理论和临床研究迅速展开, 给我们治疗一些传统疗法难以治愈的疾病带来了新的希望.但随着研究的深入,人们发现其结果并不尽如人意,在基因组、基因的表达调控和疾病的发生机理没有彻底阐明之前,基因治疗还很难取得突破性进展[1].在基因治疗中如何把目的基因转入病人体内并稳定表达是关键所在,这就要求在载体的改造、外源基因的表达调控等诸多方面进行更深入的探索[2].现就有关转基因载体的研究进展做一概述.