糖皮质激素连接物在大鼠胃肠道的转运及其对溃疡性结肠炎的治疗

目的：研究地塞米松(DX)-右旋糖酐(500 000)连接物(DXD50)在大鼠胃肠道的转运及其对大鼠溃疡性结肠炎的疗效.方法：将DXD50给大鼠ig，监测该DXD50在大鼠胃肠道不同部位释放DX的动力学过程及血药浓度变化.用三硝基苯磺酸诱导大鼠溃疡性结肠炎，以结肠溃疡面积、结肠重量、结肠组织髓过氧化物酶、大鼠外周血淋巴细胞数、胸腺及脾脏重量为指标，观察连接物的疗效.结果：口服连接物后，DX主要分布在盲肠和结肠中.DXD50及DXO.25 μmol·kg-1·d-1可分别使大鼠溃疡面积缩小55.6％和33.3％，同时结肠重量下降17.9％和2.6％.DXD50 0.25 μmol·kg-1·d-1对大鼠外周血淋巴细胞数、胸腺及脾脏重量无影响，而同等剂量的DX可引起大鼠外周血淋巴细胞数、胸腺及脾脏重量明显下降(P＜0.05 vs contro1).结论：DXD50可将DX特异地转运到结肠，它是一种有潜力的治疗炎症性肠病药物.

D-硫酸多糖抗血管平滑肌细胞增殖作用及其机制

目的：探讨硫酸多糖(DPS)抗增殖作用及其机制.方法：用MTT法评价DPS抗大鼠主动脉平滑肌细胞(VSMC)增殖作用.用流式细胞仪观察DPS对VSMC胞浆内游离Ca2+的含量、细胞周期和蛋白质含量的影响.结果：DPS在0.001-100 mg/L浓度下，对AngⅡ诱导的VSMC增殖均有明显抑制作用，佳抑制浓度为1 mg/L.流式细胞术分析结果表明，DPS在抗增殖的浓度(1 mg/L)下能抑制VSMC从G0/G1到S期的转换，阻止VSMC进人G2/M期；减少VSMC蛋白质的合成.DPS能明显抑制胞浆内游离Ca2+浓度的升高，此作用可被一氧化氮合酶抑制剂(L-NAME)所阻断，提示一氧化氮可能介导了DPS降低胞浆内游离Ca2+浓度的作用.结论：硫酸多糖DPS可拮抗AngⅡ诱导的VSMC增殖，其作用机理可能与降低胞浆内游离Ca2+浓度，抑制VSMC的DNA及蛋白质合成有关.

醋氨酚、咖啡因和布他比妥联合镇痛组方的定量设计与优化

目的：寻找醋氨酚(Ace)，咖啡因(Caf)和布他比妥(Bul)联合镇痛作用的优化组方，并定量分析三药相互作用特点.方法：角叉菜致大鼠足爪急性炎症，以痛阈下降率作为药效指标；用权重配方法进行组方优选，映射法分析药效相互作用，参数法分析急性毒性的相互作用.结果：在联合镇痛组方中的重要程度为Ace＞Caf＞Bul.联用中Ace呈现明显的量效关系，而Caf和Bul则不甚明显.理论分析获得一个新的优化组方，并经确定性实验证实，其Ace+Caf+Bul联用比例为8.6：1：1.5，剂量为(240+28+42)mg/kg(ig).Caf和Bul对Ace均有协同作用，而Caf更强.同样比例，Ace(153.6-300 mg/kg)与Caf(17.9-35 mg/kg)和Bul(26.8-52.5 mg/kg)联用，其镇痛效应明显增加.剂量至(300+35+52.5)mg/kg，对大鼠产生镇静作用.上述剂量的药效达峰时间约为1 h，峰值具有剂量依赖性，作用持续时间小于2 h.联用时急性毒性表现为相加性(即未增加).结论：Ace+Caf+Bul(240+28+42)mg/kg(ig)是一个优化组方；该方的治疗窗为Ace(153.6-240 mg/kg)+Caf(17.9-28mg/kg)+Bul(26.8-42mg/kg)，其联用比例为8.6：1：1.5；Caf对Ace的协同作用强于Bul.

DNA拓扑异构酶Ⅱ是salvicine作用于酿酒酵母的主要靶点

目的：确定DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)是否为salvicine在酿酒酵母细胞内的主要作用靶点及其作用方式.方法：用TopoⅡ介导的超螺旋pBR322解旋反应检测salvicine在无细胞体系中对TopoⅡ催化活力的影响；用克隆形成实验检测salvicine对四种酵母细胞系生长的作用.结果：salvicine能明显抑制无细胞体系中TopoⅡ对超螺旋pBR322的解旋作用.salvicine对JN394母系细胞及TOP1缺失的JN394top1-细胞毒作用相似，验证了TopoⅠ不是其作用靶点.在25℃时，salvicine对温度敏感型JN394t2-1细胞具有良好的细胞毒作用；但在30℃时，TopoⅡ的活力大为降低，在有意义的浓度范围内salvicine对此类细胞的生长无明显抑制作用.另外，TopoⅡ发生突变的JN394t2-5细胞显示出对salvicine和etoposide(VP16)高度的耐受性.结论：TopoⅡ是salvicine细胞内主要作用靶点；salvicine通过捕获TopoⅡ-DNA断裂复合物而杀死细胞.此外，salvicine与VP16在TopoⅡ上有相似的作用位点.

氨基胍对博莱霉素诱发大鼠肺毒性的抑制作用

目的：观察氨基胍(AG)对博莱霉素A5(BLMA5)诱发大鼠肺毒性作用的影响.方法：BLM-a5(5 mg·kg-1)气管滴注诱发大鼠肺损伤和肺纤维化形成；在气管滴注BLM-A5的同时及之后21 d腹腔注射AG(20 mg·kg-1·d-1，ip).化学比色法测定肺组织羟脯氨酸含量、肺泡巨噬细胞培养上清液中NO-/2/NO-/3含量、出肺血中NO-/2/NO-/3含量；HE染色组织切片上观察组织形态学变化.结果：(1)滴注BLM-A5后d 14至30，肺组织羟脯氨酸含量和出肺血中的MDA含量逐渐升高；注BLMA5后d 30，肺间质可见萎陷的和纤维化的肺泡，并出现大量的成纤维细胞.(2)滴注BLM-A5后d 7至14，出肺血NO2-/NO3-含量升高；肺泡灌流液中巨噬细胞培养上清液中NO2-/NO3-含量升高.(3)AG明显抑制出肺血MDA含量和肺羟脯氨酸含量的升高；AG还减轻肺间质组织形态学变化.(4)AG明显抑制出肺血NO-/2/NO-/3含量的升高.结论：AG对BLM-A5诱发的大鼠肺损伤和纤维化有抑制作用，此作用与其抑制肺内NO大量生成有关.

血管紧张素转换酶基因多态性在北方汉族、达斡尔族、鄂温克族中的分布

目的：观察血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性在北方汉族、达斡尔族和鄂温克族中的分布.方法：采用聚合酶链反应(PCR)检测90例北方汉族，84例达斡尔族和64例鄂温克族ACE基因内含子16的插入/缺失多态标记.得到三种基因型：插入/缺失杂合子(D)、缺失纯合子(DD)、插入纯合子(Ⅱ).结果：北方汉族ACE基因频率D 27.8％、DD 17.8、Ⅱ54.4％.达斡尔族ID 60.7％、DD 26.2％、Ⅱ13.1％；鄂温克族D 70.3％、DD 21.9％、Ⅱ7.8％.结论：中国北方汉族与达斡尔族和鄂温克族间ACE基因多态性存在差异.

雷公藤多甙与白介素-10对人外周血树突细胞的影响

目的：体外研究雷公藤多甙与白介素-10(IL-10)对人外周血树突细胞表面HLA-DR、CD80抗原表达及IL-12 p40蛋白表达和mRNA转录的影响.方法：采用GM-CSF、IL4和TNFα体外培养体系获得人外周血树突细胞(DC)，HLA-DR和CD80抗原的表达经免疫荧光染色后采用流式细胞仪进行分析，用酶联免疫吸附测定和逆转录聚合酶链反应分别检测IL-12p40蛋白水平和mRNA的转录.结果：雷公藤多甙5-20 mg/L显著下调HLA-DR和CD80抗原的表达，IL-10 50-200 μg/L能抑制HLA-DR和CD80抗原的表达，并都具有剂量依赖关系；雷公藤多甙5-20mg/L和IL-10 50-200μg/L均能抑制DC分泌IL-12p40蛋白，同时经雷公藤多甙20 mg/L和IL-10 200μg/L处理的DC中IL-12 p40 mRNA的表达受到显著抑制.结论：雷公藤多甙和IL-10能通过抑制DC表面分子的表达和IL-12的合成而发挥免疫抑制作用.

双苯氟嗪对豚鼠心室肌细胞L-钙电流的影响

目的：观察双苯氟嗪(Dip)对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流(ICa-L)的影响.方法：酶解法制备单个心室肌细胞.应用全细胞膜片箝技术记录豚鼠单个心室肌细胞钙电流.结果：在0.3-30μmol/L范围内，Dip可浓度依赖性地降低电压依赖性激活ICa-L峰值，被Dip 3 μmol/L所抑制的ICa-L在冲洗5 min后可得到部份恢复.但Dip对ICa-L的电压依赖特征，大激活电压，以及ICaL稳态激活无明显影响.在Dip3 μmol/L存在下，半数激活电压(V0.5)和斜率参数(κ)与对照组相比，差异均无显著性.V0.5分别为(-12.8±1.7)mV和(-13.2±2.4)mV，κ分别为(7.1±0.4)mV和(7.5±O.5)mV(P＞0.05).Dip3μmol/L可明显使钙电流稳态失活曲线左移，加速钙通道电压依赖性稳态失活.V0.5分别为(-19.7±2.4)mV和(-3l±6)mV，κ分别为(3.6±0.3)mV和(1.8±0.2)mV(P＜0.05).Dip 3 μmol/L还使ICa-L从失活状态下的恢复明显减慢.结论：Dip主要作用于L-型钙通道的失活状态，加速钙通道失活，并使其从失活状态下恢复减慢，从而抑制ICa-L.

血管内皮生长因子165诱导人血管内皮细胞多药耐药表型

目的：研究血管内皮生长因子165(VEGF165)对血管内皮细胞药物敏感性的影响.方法：人真皮微血管内皮细胞(H-DMEC)与抗癌药物和VEGF165混合培养，MTT法分析药敏变化，琼脂糖电泳检测细胞凋亡，RT-PCR、免疫印迹法分析HDMEC产生多药耐药表型的机制.结果：VEGF165体外诱导 H-DMEC对多种抗癌药物耐药，如表柔比星、顺铂、足叶乙甙、丝裂霉素C、长春新碱、CP T-11、泰素等，其机制与VEGF 165诱导HDMEC上调表达多药耐药相关蛋白和肺耐药相关蛋以及下调表达Bax蛋白有关.结论：VEGF165诱导血管内皮细胞的多药耐药表型，提示化疗时抗癌药物的抗血管生成活性可能取决于肿瘤微环境.

分枝石蕊多糖诱导人白血病K562细胞凋亡

目的：研究分枝石蕊多糖(CFP-1)是否能诱导K562细胞凋亡.方法：抑制细胞增殖的测定采用MTT法；用荧光显微镜和透射电镜观察细胞的形态学变化；采用琼脂糖凝胶电泳法观测DNA碎片；用流式细胞仪检测凋亡细胞数.结果：CFP-1(50-800mg/L)明显抑制K562细胞增殖，并且呈浓度依赖性.K562细胞与CFP-1 300 mg/L共同培养5 d后，观察到典型的凋亡形态变化，电泳呈现梯形条带.结论：CFP-1诱导人白血病K562细胞凋亡.

一种新的小鼠Gabarapl2 cDNA的克隆和鉴定

目的：克隆一个新的小鼠GABAA受体相关蛋白相似蛋白2基因(Gabarapl2)，并对其功能进行初步分析.方法：将已知的人GABARAPL2 cDNA序列为信息探针筛选GenBank小鼠EST数据库，将获得的一系列互相重叠的同源度较高的EST序列进行拼接.经过实验验证，在小鼠中分离和鉴定了新基因.自行制备小鼠RNA印迹膜，用杂交方法分析该基因在不同组织中的表达情况.结果：新基因在GenBank注册，登录号AF190644.同源比较显示，该推导蛋白与人GABARAPL2基因编码的蛋白完全相同，被基因命名委员会命名为小鼠Gabarapl2.该基因的推导蛋白含多个蛋白激酶磷酸化位点.杂交显示，该基因在脑、胸腺等组织表达较高，转录本大小约1.35 kb.结论：克隆到一个新的小鼠Gabarapl2基因.

L-精氨酸对人肾系膜细胞增生及胞外基质产生的影响

目的：研究L-精氨酸(L-arg)对人肾系膜细胞增生和胞外基质成分胶原产生的影响.方法：采用MTT法、细胞免疫化学检测增殖细胞核抗原(PCNA)表达以及流式细胞仪等方法观察L-arg对系膜细胞增殖的影响；L-arg对系膜细胞胞外基质产生的影响分别采用放免法、羟化脯氨酸比色法以及RT-PCR等方法测定前胶原Ⅲ、总胶原以及胶原Ⅳ mRNA的表达.结果：L-arg呈剂量和时间依赖性抑制人系膜细胞增殖；细胞免疫化学法显示L-arg导致细胞总数下降，但PCNA阳性比例相对增高，用流式细胞仪进一步证实L-arg治疗组细胞主要处于细胞周期的S及G2-M期.另外，L-arg显著抑制培养的系膜细胞上清液中总胶原和前胶原Ⅲ合成(分别为P＜0.05和P＜0.01)以及细胞对胶原Ⅳ mRNA的表达(P＜0.01).结论：L-arg可抑制人肾系膜细胞增生和胞外基质成分产生，此提示L-arg对慢性肾脏纤维化可能有潜在的治疗价值.

苦参碱抑制小鼠腹膜巨噬细胞纤维化细胞因子的产生和作用

目的：研究苦参碱对小鼠腹腔巨噬细胞释放纤维化细胞因子以及对巨噬细胞条件培养基(MCM)促HSC-T6大鼠储脂细胞和NIH3T3成纤维细胞增殖和胶原合成的影响.方法：巨噬细胞先后用卡西霉素l μmol/L和脂多糖100 μg/L刺激诱导产生纤维化因子.细胞上清中促细胞增殖活性和促胶原合成活性分别用结晶紫染色法和[3H]．脯氨酸掺入法测定.转化生长因子β活性采用貂肺上皮Mv-l-Lu细胞增殖抑制法测定.结果：苦参碱(0.5-2 mmol/L)显著抑制LPS诱导的促胶原合成活性和TGFβ的产生，但不能抑制巨噬细胞产生促细胞增殖活性；苦参碱还能剂量依赖地抑制MCM诱导的HSC-T6细胞以及NIH3T3细胞增殖和胶原合成.结论：苦参碱抗肝纤维化作用与抑制巨噬细胞纤维化因子的产生和阻断其作用有关.

三乙酰莽草酸对凝血酶和局灶性脑缺血再灌注诱导的血小板与白细胞粘附的作用及其机制

目的：研究三乙酰莽草酸(TSA)对凝血酶和局灶性脑缺血再灌注诱导的血小板与中性粒细胞粘附及活化血小板膜P-选择素表达的作用.方法：观察玫瑰花环形成率作为血小板与中性粒细胞粘附率指标，并用流式细胞仪测定血小板表面P-选择素的表达.结果：TSA 10-1000 μmol/L可明显抑制凝血酶0.4kU/L诱导的血小板与中性粒细胞的粘附.TSA50-200 mg/kg剂量依赖性抑制大脑中动脉阻断3 h再灌注21 h引起的血小板与中性粒细胞的粘附.TSA可明显抑制凝血酶诱导的血小板P-选择素的表达和ADP 5 μmol/L诱导的全血中血小板膜表面P-选择素的表达.结论：脑缺血再灌注和凝血酶引起血小板和中性粒细胞粘附，TSA对P-选择素表达的影响可能是其抑制血小板与中性粒细胞粘附的重要机制.

人参皂甙Rg1对抗多巴胺诱导的PC12细胞凋亡1

目的：探讨外源性多巴胺诱导PC12细胞凋亡以及人参皂甙Rgl保护作用的分子机制.方法：流式细胞仪定量测定PC12细胞的凋亡和Bcl-2、Bax蛋白的表达；电子显微镜观察PC12细胞的形态；凝胶电泳评价DNA的断裂；荧光分光光度计法测定caspase-3的活力；半定量RT-PCR分析bcl-2和bax mRNA的表达.结果：多巴胺(浓度为0.15、0.30、0.45和0.60 mmoL/L)诱导PC12细胞凋亡，各剂量组细胞凋亡率分别从对照组1.1％±0.4％增加到41％±3 ％，46.4 ％±2.7 ％，53 ％±3 ％和64.5 ％±2.7 ％；人参皂甙 Rg1 10 μmol/L预处理24 h后，较多巴胺0.45 mmol/L单独处理时，PC12细胞的凋亡率和caspase-3的活力分别从53％±3％和683±8(平均荧光强度)下降到1.9％±0.6％和325±5，Bcl-2蛋白阳性率从14.3％±1.1％增加到25.9％±1.6％，Bax蛋白阳性率从48％±3％下降到35％±3％.结论：人参皂甙Rg1通过抑制cas-pase-3的激活并调节Bcl-2和Bax两者间蛋白的比值对抗多巴胺对PC12细胞凋亡的诱导作用.

在烟碱诱导的大鼠海马CA1区长时程增强形成中p42/44促细胞分裂剂活化的蛋白激酶通路被激活

目的：研究p42/44 MAPK通路在烟碱诱导大鼠海马CA1区长时程增强(LTP)形成中的作用.方法：细胞外场电位记录离体海马脑片CA1区锥体细胞层群体峰电位；蛋白质印迹检测p42/44 MAPK磷酸化程度及其总蛋白表达.结果：PD98059 25 μmol/L和50 μmol/L呈剂量依赖性抑制烟碱(10 μmol/L)诱导大鼠海马CA1区LTP的形成；在烟碱诱导LTP形成的海马CA1区组织内p42和p44 MAPK磷酸化均明显增强并有p42和p44 MAPK总蛋白表达量的增加.结论：p42/44 MAPK通路参与烟碱诱导大鼠海马CA1区LTP形成的信号转导过程.

自介素-4和其他因子在天花粉蛋白诱导的卵清白蛋白特异性IgE应答过程中的作用

目的：研究小鼠模型中天花粉蛋白(TCS)诱导的卵清白蛋白(OVA)特异性的E型免疫球蛋白(IgE)应答反应的可能机理.方法：首先用抗白介素-4(IL-4)的单抗治疗TCS和卵清白蛋白(OVA)免疫的小鼠，通过减少内源性IL-4的水平，以观察其对血清中IgE抗体水平的影响.其次，用重组IL-4处理小鼠，通过增加外源性IL-4的水平观察其对血清中OVA特异性IgE形成的影响.后，我们在TCS免疫小鼠IgE形成过程中，用半定量PCR方法检测了腹腔淋巴结中CD40的配体(CD40L)，肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-13(IL-13)基因表达的趋势.结果：抗IL-4的单抗可以抑制TCS对OVA诱导的特异性IgE的形成，但重组IL-4本身并不能引起OVA特异的IgE应答反应.在TCS的初次和二次免疫中均有较高的表达峰，且CD40L的表达峰与IL-4类似，仅持续较短的时间.结论：IL-4对于TCS诱导的IgE应答反应为必要非充分条件.CD40L、TNF-α和IL-13可能也参与了此过程，其中CD40L可能具有与IL-4同样重要的作用.

蜂毒肽对离体豚鼠乳头状肌的影响

目的：研究蜂毒肽(Mel)对离体豚鼠乳头状肌的影响.方法：观察Mel对豚鼠乳头状肌基本生理特性的影响，并应用标准玻璃微电极技术记录快反应动作电位(FAP)和慢反应动作电位(SAP).结果：Mel(0.5，3 μmol/L)显著增强乳头状肌收缩力，Mel(5μmol/L)在增强收缩力之前可出现短暂的抑制作用.Mel(0.5，3，5 μmol/L)可显著缩短功能性不应期，在一定浓度下(Mel 3，5 μmol/L)可升高肾上腺素诱发的自律性，使时间-兴奋曲线上移(Mel 3μmol/L).Mel(0.3，5 μmol/L)可显著缩短FAP的动作电位时程(APD)，减小动作电位幅度(APA)和静息电位(RP).Mel 0.8 μmol/L可减小SAP的APA和RP，仅缩短APD20和APD50，对APD90无影响.结论：Mel增强豚鼠乳头状肌收缩性和自律性，缩短不应期，降低兴奋性，缩短APE，减小APA和RP.

四种砷拮抗剂对三氧化二砷诱导的三种粒系白血病细胞凋亡和端粒酶活性的减量调节作用

目的：研究巯基供体N-乙酰半胱氨酸(NAC)和二巯丁二钠(NDMS)、抗氧化剂过氧化氢酶(CAT)和Ca2+清除剂(Quin 2)对三氧化二砷诱导的三种粒系白血病细胞凋亡和端粒酶活性改变的调控作用.方法：用流式细胞仪和PCR ELISA法分别检测NAC、NDMS、CAT或Quin 2与三氧化二砷共同作用于三种粒系白血病细胞后其凋亡和端粒酶活性的变化.结果：三氧化二砷0.6、2.7和8.1μmol/L可分别诱导急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4，慢性粒细胞白血病细胞株K562，急性粒细胞白血病细胞株H-L-60细胞发生40％-60％的凋亡，同时下调三种细胞的端粒酶活性.NAC 4 mmol/L，NDMS 200μmol/L，CAT 80kU/L，Quin 2 20μmol/L不同程度抑制这种凋亡作用.NAC和CAT既可独立降低三种细胞的端粒酶活性，也可促进三氧化二砷对端粒酶的下调作用，而Quin 2可抑制K562和HL-60细胞中的这种下调作用.结论：三氧化二砷诱导的三种细胞的凋亡过程涉及了疏基失活、自由基的改变、细胞内Ca2+浓度改变及端粒酶活性下降.NAC、NDMS、CAT及Quin 2可不同程度拮抗三氧化二砷对三种细胞的作用.

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