热带医学杂志
Journal of Tropical Medicine 열대의학잡지
- 主管单位： 广东省科学技术协会
- 主办单位： 广东省寄生虫学会 中华预防医学会
- 影响因子： 0.64
- 审稿时间： 1个月内
- 国际刊号： 1672-3619
- 国内刊号： 44-1503/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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深圳市福田区1985-2009年病毒性肝炎流行特征分析
目的 分析深圳市福田区1985-2009年病毒性肝炎流行特征.方法 对福田区1985-2009年法定传染病报告的病毒性肝炎疫情资料进行统计分析.结果 深圳市福田区1985-2009年病毒性肝炎的发病率为47.50/10万,发病率从1985年的57.3/10万上升至1990年高225.16/10万,然后逐年下降,2009年下降至低4.15/10万:常住人口病毒性肝炎的发病率基本高于暂住人口的发病率;每年春季病毒性肝炎发病人数明显较其他季节多,而冬季发病人数少;发病人群男女比例为2.12∶1;发病人群的职业以职员和工人为主,两者发病人数占总发病人数64.15%.结论 深圳市福田区1985-2009年病毒性肝炎的防治工作取得了显著效果,但发病率仍处于较高水平.
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虫源性蛋白酶在寄生虫感染与免疫作用的研究进展
蛋白酶是一类广泛分布于微生物、植物和动物中具催化蛋白质肽键水解活性的酶的总称.近年来,随着寄生虫基因组和后基因组研究的深入,发现了一批在寄生虫感染与免疫中发挥重要作用的虫源性分子,寄生虫蛋白酶就是其中的典型代表.
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甘露聚糖结合凝集素诱导人白血病细胞系U937细胞凋亡
目的 研究甘露聚糖结合凝集素(MBL)对白血病细胞系U937凋亡的影响.方法 不同浓度MBL处理U937细胞后,应用CCK-8法分析细胞增殖情况,Hoechst33258染色观察细胞核及染色质,Annexin V/PI双染流式细胞术分析细胞凋亡率,real-time PCR和免疫印迹分析凋亡相关基因及蛋白表达.结果 30～50 μg/ml MBL培养72 h,U937细胞增殖明显受抑,出现不同程度核固缩、核碎裂;随MBL浓度升高或作用时间延长,凋亡细胞数逐渐增多:Fas Caspase-3mRNA、Fas和FasL蛋白表达量升高,Caspase-3和多腺苷二磷酸多聚酶(PARP)蛋白被剪切激活或失活.结论 MBL可诱导白血病细胞U937细胞凋亡,其机制与上调Fas表达、剪切Caspase-3和PAPR有关.
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Wistar大鼠带形囊尾蚴的鉴定和重度感染的病理分析
目的 鉴定动物实验中Wistar大鼠所感染寄生虫的种属和分析其感染特征.方法 解剖检查正常条件下饲养的大鼠肝脏表面的囊泡,取囊中的虫体头节以10%甲醛及KOH溶液处理后光学显微镜下进行寄生虫的形态学鉴定;并对所感染部位的肝组织进行病理学检查.结果 大鼠生长状况良好,无明显异常体征,寄生的虫体鉴定为带形囊尾蚴;本次所解剖检查的Wistar大鼠对该虫的感染率高达85.7%,感染部位均为肝脏,感染虫体数目为5～120个不等,可见带形囊尾蚴早期和成熟期两种形态;肝脏病理虫体周围有嗜酸性粒细胞、淋巴细胞和浆细胞浸润,未被虫体占位的肝小叶结构正常,未见肝脏纤维瘤样变.结论 Wistar大鼠在饲养中易反复感染带形囊尾蚴,并能耐受重度感染,作为动物模型,一方面应严防该虫的感染对实验结果的干扰,另一方面可作为一个很好的免疫应答的干预模型应用于其他疾病的研究.
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汉坦病毒感染C57BL/6小鼠组织中特异性抗原的检测
目的 通过检测汉坦病毒感染C57BL/6小鼠组织中特异性病毒抗原,以建立汉坦病毒感染动物的评价体系.方法 将汉坦病毒陈株按照原病毒液、10-1、10-2三个滴度经肌肉注射感染C57BL/6小鼠,在感染后的第3、6、9、12、15天,分别取小鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑等组织研磨后制成病毒悬液,以ELISA法检测各组织中的病毒特异性抗原.结果 C57BL/6小鼠感染汉坦病毒后短期内在其肝脏和脾脏可以检测到特异性抗原,随着时间的延长,这些抗原逐步消失.结论 上述结果为建立汉坦病毒感染动物的评价体系提供了一种参考.
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PI3K p85α在大肠癌侵袭转移过程中的表达及意义
目的 研究PI3K p85α在大肠癌侵袭和转移过程中的表达及意义.方法 用免疫组织化学二步法检测试剂盒检测123例大肠病变组织标本中PI3K p85α的表达情况,用等级相关的秩和检验分析PI3K p85α在大肠病变组织中表达的意义及其与临床病理特征间的关系;培养已成功沉默PI3K p85α表达的大肠癌Lovo细胞(PI3K p85α/RNAi-Lovo)及Lovo对照组细胞,肿瘤细胞侵袭实验(transwell)和划痕愈合实验观察PI3K p85α对lovo细胞的侵袭和转移能力的影响,明胶酶谱检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达.结果 PI3K p85α蛋白在大肠癌癌变过程中表达阳性率呈递增趋势,差异有统计学意义(P<0.05).PI3K p85α/RNAi-Lovo细胞组侵袭和转移能力明显低于对照组;MMP-2表达量及活性显著降低.结论 PI3K p85α蛋白可能在大肠癌的侵袭和转移中起重要作用,沉默PI3K p85α基因可以显著抑制其侵袭、转移和基质金属蛋白酶的分泌及活性,因而PI3K p85α影响lovo细胞的侵袭和转移可能与调控基质金属蛋白酶分泌密切相关.
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RNA干扰GPC3基因表达影响肝癌细胞Huh-7凋亡的机制研究
目的 观察RNA干扰GPC3基因表达对人肝癌细胞Huh-7凋亡的影响,并探讨其初步机制.方法 设计并合成靶向GPC3的特异性siRNA片段,通过脂质体转染法瞬时转染肝癌细胞Huh-7,48 h后验证siRNA的干扰效率;Annexin V/PI染色法观察GPC3基因沉默对细胞凋亡的影响:通过Western blot和定量PCR来检测caspase3的蛋白水平和核酸水平表达.结果 设计合成的GPC3 siRNA转染后,能够有效抑制Huh-7细胞中GPC3的表达;流式细胞仪检测结果显示,GPC3干扰组细胞在转染后48、72 h的凋亡率显著高于空白对照组(P<0.01),96 h后两组凋亡率差异无统计学意义(P>0.05).GPC3干扰组的caspase3在转染后48、72 h的表达高于未转染组,96 h后两组间caspase3水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 siRNA静默GPC3基因能促进肝癌细胞凋亡,其机理可能与上调caspase3有关.进而推测,GPC3基因可能成为肝癌靶向治疗的一个新靶点.
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华支睾吸虫LAP2基因的生物信息学分析及克隆表达、组织定位
目的 利用生物信息学方法分析华支睾吸虫LAP2全长基因的结构和功能,并将该基因克隆至原核表达载体进行表达、纯化、为进一步研究LAP2功能奠定基础.方法 利用生物信息学相关软件,分析华支睾吸虫LAP2基因及其蛋白的结构、生物学和免疫学功能特征.针对LAP2的EST序列的编码区设计引物,从华支睾吸虫囊蚴cDNA质粒中扩增目的基因,克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,经PCR、双酶切及DNA测序鉴定的阳性克隆诱导目的蛋白表达、亲和层析纯化、免疫印迹鉴定及组化定位.结果 华支睾吸虫LAP2基因全长为1 761 bp,其编码序列长度为1 662 bp,编码553个氨基酸,理论分子量是59 696.5 Da,与人的该基因氨基酸序列相似性为26.7%,一致性仅为15.4%.该基因在大肠杆菌中可被高效表达,纯化的重组蛋白能被感染华支睾吸虫的大鼠血清识别,免疫组化结果表明该重组蛋白定位于华支睾吸虫成虫的肠支及表膜.结论 华支睾吸虫LAP2在大肠杆菌中呈高效的可溶性表达,具有良好的抗原活性,可能为华支睾吸虫成虫分泌排泄抗原的组份之一.
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异丙酚对H2O2刺激下细胞内ASK1蛋白激活的影响
目的 探讨在H2O2刺激下,异丙酚对细胞中Daxx-ASK1信号通路的影响.方法 对体外培养的HEK293细胞分为对照组、H2O2刺激组以及H2O2刺激合并异丙酚处理组.采用免疫荧光、Western blot及MTT等方法,观察异丙酚预处理对H2O2刺激下的HEK293细胞存活率以及细胞中Fas死亡结构域相关蛋白(Daxx)的亚细胞定位以及凋亡信号调节激酶1(ASK1)激活的影响.结果 在200～500 μmol/L H2O2刺激下,异丙酚在一定程度上能有效保护细胞,缓解抗氧化应激损伤.进一步实验发现,H2O2刺激细胞后,与H2O2刺激组相比,异丙酚处理组细胞中Daxx蛋白大部分仍然聚集在细胞核中,只有少部分移人到细胞浆中,相应ASK1的激活程度也较低.结论 氧化应激刺激下,异丙酚可通过抑制细胞中Daxx蛋白的出核,进而抑制胞浆中ASK1蛋白的激活,从而起到保护细胞、抑制细胞死亡的效能.
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慢病毒载体介导的RNAi技术构建稳定抑制β-catenin的人鼻咽癌细胞株
目的 建立稳定抑制β-catenin基因表达的人鼻咽癌6-10B细胞株,为探讨Wnt/β-catenin信号在鼻咽癌发生中的作用提供细胞模型.方法 于β-catenin CTNNB1基因编码区选择3个siRNA靶点合成3对shRNA干扰序列,分别与pLKO.1载体连接,构建pLKO.1-sh-β-catenin质粒(干扰组1)、pLVTHM-sh-β-catenin(干扰组2)和pLKO.1-sh-β-catenin-Neg质粒(阴性对照组);将重组质粒与慢病毒包装质粒共转染293T细胞,收集含慢病毒颗粒的上清液感染人鼻咽癌6-10B细胞,感染pLKO.1-sh-β-catenin和pLKO.1-sh-β-catenin-Neg质粒的细胞经嘌呤霉素筛选并扩大培养后得到稳定克隆株.Western blot检测干扰组β-catenin抑制效率及下游基因c-myc蛋白的表达;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测比较细胞增殖状况,Transwell细胞迁移实验检测细胞迁移率.结果 Western blot检测结果显示pLKO.1-sh-β-catenin(干扰组1)干扰效率佳,β-catenin及c-myc蛋白表达减少;MTT检测显示干扰β-catenin后细胞吸光度下降,细胞增殖受到抑制;穿过Transwell小室底膜的细胞数:干扰组1为(23.5±4.6)个,明显低于阴性对照组(50.3±5.3,P<0.01)及空白对照组(54.3±5.6,P<0.01).结论 成功构建了β-catenin shRNA慢病毒表达载体,建立了稳定抑制β-catenin基因表达的人鼻咽癌6-10B细胞株,为进一步研究以β-catenin为靶点的鼻咽癌基因治疗奠定基础.
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粉尘螨抗细菌活性物质的分离与鉴定
目的 从粉尘螨丙酮提取液中分离抗细菌活性成分,并对其抗菌活性进行初步鉴定.方法 用丙酮抽提粉尘螨,并用Sephadex G50分子筛层析进行对粉尘螨提取液中的抗细菌活性进行初步分离、纯化.对各组分的抗细菌活性进行初步鉴定.结果 经Sephadex G50分子筛层析分离得到Ⅰ及Ⅱ两个峰.粉尘螨丙酮粗提物对绿脓假单胞菌无抑制作用,但对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌及短小芽孢杆菌均有抑制作用.峰Ⅰ及峰Ⅱ则对大肠埃希杆菌、枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌及金黄色葡萄球菌都有抑制作用.粉尘螨粗提液及第二个峰在加热及蛋白酶K处理后仍然保留抗细菌活性,但是第一个峰在同样处理后失去了抗菌活性.结论 首次从粉尘螨分离纯化得到抗细菌成分.
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儿童肱骨远端有限元模型的建立及力学分析
目的 建立儿童肱骨远端有限元模型,并模拟肱骨轴向受力状态下应力分布,为肱骨的生物力学研究提供数值分析模型.方法 通过CT扫描正常儿童右侧肱骨,获得连续断层图片,导入mimics13.1医学建模软件进行网格划分、材料属性赋值,生成有限元模型,应用有限元分析软件ANSYS10.0,约束边界条件,模拟肱骨轴向受力状态进行加载,得出肱骨远端有限元模型上的应力分布.结果 建立的肱骨远端有限元模型节点共50 364个、四面体单元29 951个.肱骨在轴向载荷状态下应力集中主要位于髁上区,且尺侧应力集中现象较桡侧明显.结论 应力分析结果解释了肱骨骨折好发于髁上区的原因,髁上区尺侧骨质的高应力是肱骨髁上骨折致肘内翻的基本生物力学因素.
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联合PCR技术克隆白纹伊蚊漆酶型酚氧化酶基因及其生物信息学分析
目的 测定白纹伊蚊漆酶型酚氧化酶的基因的全长序列并用生物信息学方法分析其结构和功能.方法 从白纹伊蚊卵、幼虫、蛹、雌蚊、雄蚊中提取总RNA,逆转录后以总cDNA为模板,设计简并引物进行巢式PCR,扩增部分序列后设计新的特异性引物补全5'端序列,使用3'-RACE法补全3'端序列,拼接全长后进一步进行生物信息学分析.结果 通过巢式PCR扩增出1 145 bp的核苷酸序列,测序后设计5'端序列的下游引物,扩增出约900 bp的核苷酸序列,设计3'端的上游引物,配合3'RACE试剂盒扩增出约600 bp的核苷酸序列,寻找重复序列将三段序列进行拼接,得到国内外从未获得的长2 244 bp、编码747个氨基酸序列的白纹伊蚊漆酶型酚氧化酶基因的全长序列.生物信息学分析其与白纹伊蚊的相似性高,为含信号肽的跨膜蛋白,含3个Cu氧化酶超家族位点,属于蓝色多铜氧化酶家族.结论 联合PCR技术的应用使较长长度的基因序列的扩增更为方便、准确.为进一步对其进行功能的研究奠定了基础.
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广州管圆线虫Asp-1基因的克隆表达及各虫期转录水平研究
目的 构建广州管圆线虫天冬氨酰蛋白酶(Asp-1)基因的原核表达系统,研究该基因在各虫期的转录水平.方法 构建重组质粒pET-30a(+)-Asp-1,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)表达载体,经IPTG诱导表达后,Ni-IDA亲和层析纯化表达产物.通过以β-肌动蛋白为内参、以各期虫cDNA为模板的实时荧光定量PCR,研究该基因在各虫期的表达水平.结果 获得纯化的重组蛋白,相对分子质量约为43 000,与生物信息学分析预测结果一致.qRT-PCR显示该基因在三期幼虫中表达丰度高,四/五期幼虫、成虫雄虫、雌虫依次降低.结论 Asp-1基因的表达丰度在三期幼虫中高的实验数据与三期幼虫感染性强的事实相符,提示天冬氨酰蛋白酶有可能是幼虫入侵宿主的关键酶,为后续广州管圆线虫虫体侵入宿主的机制以及宿主保护机制研究打下基础.
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长期能量限制对成年雌性大鼠生殖寿命的影响
目的 探讨长期能量限制对成年雌性大鼠生殖寿命的影响.方法 6月龄雌性SD大鼠30只,分为正常饮食组、能量限制(CR)20%组和CR40%组,记录正常饮食(NC)组每日摄食量,并将此摄食量的80%和60%分别喂养CR20%组和CR40%组大鼠,监测大鼠体重及动情周期变化,12个月后取大鼠卵巢.卵巢组织切片由苏木精-伊红染色,观察卵泡储备数量和不同发育阶段的卵泡比例.结果 NC组体重持续上升,而CR20%组体重小幅增加,CR40%组体重持续下降.CR40%组大鼠的卵泡储备数量(105.7±9.5)和原始卵泡数(55.0±6.8)与NC组(51.2±5.4,18.3±3.7)相比差异均有统计学意义(P<0.001,P<0.001),原始卵泡比例(52.1%±2.9%)与对照组(35.8%±5.5%)相比差异有统计学意义(P<0.001),而成熟卵泡比例(6.8%±1.9%)和发育卵泡比例(41.2%±3.0%)与NC组(15.6%±6.2%,48.9%±4.2%)相比差异亦有统计学意义(P<0.001,P<0.05).CR20%组卵泡储备数量和不同发育阶段的卵泡比例与NC组相比差异无统计学意义.结论 长期能量限制可能通过抑制卵泡发育启动、减少发育卵泡和成熟卵泡的数量,从而减少卵泡的消耗,有益于生殖寿命延长.
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能量限制条件下SIRT1和SIRT2的表达变化
目的 研究不同程度的能量限制(CR)下,大鼠脑组织中SIRT1和SIRT2的表达变化.方法 60只大鼠随机分成四组:正常对照组、75%CR组(喂养食物为正常对照组的75%),55%CR组(喂养食物为正常对照组的55%)和高脂组,喂养8周.免疫组织化学检测大鼠脑组织中SIRT1和SIRT2的表达与定位.RT-PCR及Western-blot检测各实验组中SIRT1、SIRT2的表达.结果 在大鼠脑组织中发现SIRT1可于细胞浆和细胞核中表达,且主要于细胞核中表达;SIRT2主要在细胞核中表达.能量限制下,与对照组相比SIRT1表达升高;高脂食物条件下,SIRT1表达相对于对照组增高,但是比CR组减少.75%CR与55%CR相比,后者中的SIRT1的表达增加更多.与对照组相比,55%CR增加SIRT1的表达差异有统计学意义(P<0.05),而75%CR和Hfa增加SIRT1的表达差异无统计学意义.SIRT2在CR和Hfa下表达无明显变化.结论 CR能增加SIRT1而不增加SIRT2的表达,重度CR比中等程度CR对SIRT1表达的影响更大.
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不同剂量维生素D对哮喘大鼠肺组织eotaxin和CCR3的影响
目的 观察早期补充不同剂量维生素D对哮喘大鼠肺组织CC族趋化因子嗜酸粒细胞激活趋化因子(eotaxin)和受体CCR3表达的影响.方法 对用卵清蛋白(OVA)建立的大鼠哮喘模型进行1,25-(OH)2VitD3干预,分为低、中、高三个剂量,采用细胞计数、免疫组织化学染色和Western blot方法检测哮喘大鼠肺组织炎症和eotaxin及CCR3的变化.结果 低中剂量维生素D可以减轻哮喘的炎性浸润,表现为肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数减少,嗜酸粒细胞(EOS)百分比下降,eotaxin和CCR3蛋白质表达减弱.相反,高剂量维生素D则促进哮喘的发作.结论 早期补充低中剂量的维生素D对哮喘大鼠肺组织中eotaxin和CCR3有抑制作用,而高剂量维生素D则会促进eotaxin和CCR3的表达,从而加剧大鼠哮喘的气道炎症.
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伯氏疟原虫感染早期的根治性治疗对再感染细胞免疫应答的影响
目的 探讨疟疾感染早期根治性治疗对再感染细胞免疫应答的影响.方法 用伯氏疟原虫感染DBA/2小鼠,感染后3 d进行根治性治疗,并于初次感染后90 d进行再感染.通过吉姆萨薄血膜染色法计数红细胞感染率,流式细胞术检测再感染前(0 d)和再感染后(1、3、5 d)不同时间点脾T细胞中活化性T细胞百分含量,ELISA检测脾细胞培养上清中IFN-γ、TNF-α、IL-4和IL-10水平.结果 同源疟原虫再感染后,根治性治疗小鼠仅出现短暂的低水平虫体血症;再感染后第1～5天活化性T细胞百分率持续升高.IFN-γ于再感染后第1天即出现有意义的升高,第3天达到峰值水平,与此同时,TNF-α和IL-10水平也开始出现有意义的升高,但IL-4的升高出现在再感染后的第5天.结论 疟疾感染早期的根治性治疗并不影响宿主在再感染时产生有效的细胞免疫应答,CD4+Th1应答反应也是抵御疟疾再感染的关键因素之一.
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X射线诱导Raji细胞凋亡的实验研究
目的 探讨X射线对人Burkkit淋巴瘤细胞株Raji细胞增殖及凋亡的影响.方法 用不同剂量X射线照射细胞,并在不同时间段用倒置显微镜观察照射后细胞的形态变化及生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞周期,并观察X射线对克隆形成的影响.结果 16 Gy照射后48 h对Raji细胞的抑制率(92.67±1.20)%显著;8 Gy照射后48 h早期凋亡率(42.04±3.62)%高;8 Gy照射后24 h细胞周期G2/M期细胞(57.86±3.31)%,明显大于正常对照组(14.54±2.32)%;8 Gy照射后第7天无克隆形成,第14天克隆数为(5.33±2.40),明显小于正常对照组第7天(116.67±20.28)和第14天(263.33±20.27).结论 X射线可抑制细胞增殖,并诱导细胞凋亡,照射后细胞周期阻滞在G2/M期,X射线8 Gy照射后不能完全抑制Raji细胞的增殖.
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广东岗梅药材的HPLC指纹图谱研究
目的 用高效液相色谱法(HPLC)建立岗梅药材的指纹图谱.方法 采用RP-HPLC方法,色谱柱为phenomenex-C18柱(250×4.60mm,5 μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液梯度洗脱;流速:1.0 ml/min;柱温:室温;检测波长为203 nm.结果 该方法可使岗梅药材中各成分较好分离,检测了不同来源10批岗梅药材,并根据检测结果确定了11个共有指纹峰,相似度较高,建立了岗梅HPLC指纹图谱共有模式.结论 建立的HPLC指纹图谱准确、简便、可靠,为岗梅的质量控制提供更全面的信息.
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苏木素复染对免疫组化显色强度定量分析的影响
目的 探讨苏木素复染是否影响免疫组化显色反应强度,为免疫组化定量分析的质量控制提供科学依据.方法 用免疫组织化学方法检测GLC-82肺腺癌细胞株细胞蜡块中Ki67、Tiam1的表达,检测分为复染组和非复染组;在Nikon显微镜下通过Canon数码像机和Zoom Browser Ex采图软件随机截取样品显色反应细胞图像,用Imagepro Plus图像分析软件,分别测试苏木素复染与不复染时GLC-82细胞Tiam1、Ki67蛋白表达的阳性单位(PU值),每组各测试100个细胞.结果 苏木素复染后GLC-82细胞Tiam1的PU值为(36.76±5.12).大于未复染Tiam1的PU值(26.64±5.09,t=9.906,P=0.000),相对偏差为38%.苏木素复染后GLC-82细胞Ki67的PU值为(21.74±4.59),大于未复染Ki67的PU值(14.37±4.65,t=7.985,P=0.000),相对偏差为51%.结论 经苏木素复染,Tiam1、Ki67的PU值均明显增大,且核表达抗原Ki67的相对偏差明显大于浆表达抗原Tiam1的相对偏差.因此,对免疫组化结果定量分析时,为保证测试结果的可靠性,不应进行苏木素复染.
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碱性成纤维细胞生长因子对体外培养人羊膜间充质干细胞增殖的影响
目的 观察不同浓度碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对体外培养人羊膜间充质干细胞(HAMSCs)增殖的影响.以探索体外培养HAMSCs的适条件.方法 分离、培养HAMSCs,选取第3代细胞进行鉴定及检测.实验组将bFGF分为0.1、0.5、1、5、10、20、40、80 ng/ml 共8个浓度组;阴性对照组只加HAMSCs,不加bFGF;空白对照组只加培养基.各组孵育48 h后加入Am-Blue试剂,继续孵育,待培养基由靛青蓝色开始变成粉红色时取出用酶标仪测量各组的吸光度(OD),重复3次实验.结果 0.5、1、5、10、20、40、80 ng/ml浓度组与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05);10 ng/ml组与0.5、1、5 ng/ml组相比,差异均有统计学意义(P<0.05);10 ng/ml组与40、80 ng/ml组相比,差异无统计学意义(e=0.067),表明bFGF促增殖作用强的小浓度为10 ng/ml.结论 bFGF能够促进HAMSCs增殖,且促增殖作用强的小浓度为10 ng/ml.
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两种PCR方法检测狂犬病毒的敏感性和特异性比较
目的 比较Nested-PCR和SYBR Green Ⅰ Real-Time PCR两种方法检测狂犬病毒的敏感性、特异性和时效性.方法 对10倍连续稀释的狂犬病毒(疫苗株)核酸样品,采用Nested-PCR和SYBR Green Ⅰ Real-Time PCR方法进行平行检测,比较两种方法的敏感性:同时以登革热2型病毒、诺如病毒、星状病毒、EV71和乙型脑炎病毒核酸对两种方法的特异性进行评价.结果 SYBR Green Ⅰ Real-Time PCR方法可检测出2.3×106 copies/μl核酸分子,与NestedPCR方法相比,敏感度提高10倍.两种检测方法的特异性均好,与登革热2型病毒、诺如病毒、星状病毒、EV71和乙型脑炎病毒核酸均无交叉反应.SYBR Green Ⅰ Real-Time PCR方法检测花费3 h,检测时间比Nested-PCR方法节省2 h.结论 与Nested-PCR相比,SYBR Green Ⅰ Real-Time PCR是相对高效的检测狂犬病毒的方法.
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大鼠脑皮质星形胶质细胞体外培养方法的改进
目的 改进大鼠脑皮质星形胶质细胞体外培养方法,获得纯度较高的大鼠脑皮质星形胶质细胞.方法 取出生后1 d内SD大鼠大脑皮质,用机械吹打法使细胞分散制成初细胞悬液,10μm尼龙膜过滤除去成纤维细胞后接种.待7 d细胞铺满瓶底后,"十"字形震荡培养液5 min后传代接种.传代2次后行GFAP免疫组化染色鉴定.结果 通过微孔尼龙膜过滤和传代前"十"字形震荡培养液等操作可以得到形态典型、纯度较高的星形胶质细胞.通过纯度计算可得离体培养的星形胶质细胞的纯度平均值为95.49%(n=6).结论 改进的星形胶质细胞体外培养方法,降低了实验操作难度,方法稳定有效,得到的星形胶质细胞纯度较高.
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判别函数在法医学溺死诊断中的应用
目的 探讨判别函数在法医学溺死诊断中的价值.方法 运用环境扫描电镜、能谱分析仪及图像分析软件观测生前入水溺死、死后抛尸入水尸体,根据异物颗粒面积、大直径、整体密度等参数建立与溺死、死后入水判别函数.结果 异物颗粒的大直径和整体密度有助于判别函数鉴别溺水及死后抛尸入水,交叉验证判别函数符合率为89.0%.与传统方法相比,该法在保证实验结果可靠性的同时具有简便、快捷、客观等优势.结论 判别方程对法医学实践鉴别溺水、死后入水具有积极的提示及勘验指导价值.
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铜绿假单胞菌临床分离株主动外排泵的检测
目的 了解铜绿假单胞菌临床分离株的耐药特点及其外排泵存在的状况.方法 采用K-B法检测铜绿假单胞菌临床分离株对9种常用抗生素(庆大霉素、氨曲南、头孢他啶、亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、环丙沙星、左氧氟沙星、多粘菌素B)的耐药情况;通过外排泵抑制剂氰氯苯腙(CCCP)对四种药物(羧苄青霉素、红霉素、亚胺培南、庆大霉素)的琼脂稀释法抑制试验分别检测铜绿假单胞菌的四种外排泵(MexAB-OprM、MexCD-OprJ、MexEF-OprN、MexXY-OprM)的表型;应用PCR检测MexAB-OprM外排泵调节基因mexR的存在情况.结果 铜绿假单胞菌对9种常用抗生素的耐药率依次为:庆大霉素36.67%(22/60),氨曲南33.33%(20/60),头孢他啶31.67%(19/60),亚胺培南28.33%(17/60),阿米卡星26.67%(16/60),哌拉西林/他唑巴坦23.33%(14/60),环丙沙星21.67%(13/60),左氧氟沙星11.67%(7/60),多粘菌素B为0.外排泵表型阳性株依次为:MexAB-OprM 35株,阳性率58.33%(35/60);MexXY-OprM 13株,阳性率21.67%(13/60);MexCD-OprJ 11株,阳性率18.33%(11/60);MexEF-OwN 10株,阳性率16.67%(10/60).35株MexAB-OprM外排泵表型阳性株中有28株扩增出mexR基因片段,检出率为80.0%(28/35).结论 铜绿假单胞菌临床分离株对庆大霉素耐药率高,对多粘菌素B耐药率低:MexAB-OprM外排泵的存在是铜绿假单胞菌临床分离株的重要耐药机制.
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佛波酯对人外周血DNT细胞表面抗原检测的影响及检测方法的探讨
目的 探讨佛波酯(PMA)对人外周血淋巴细胞中TCRαβ+CD4-CD8-T细胞(DNT细胞)表面抗原检测的影响及检测方法的探讨.方法 分离人外周血单个核细胞,分别在激活前后对细胞进行TCRαβ、CD4和CD8荧光单抗标记,流式细胞术计数DNT细胞.结果 A方法(先激活,再标记),淋巴细胞表面抗原CD4分子显著下调,DNT细胞与TCRαβ+CD4+CD8+T细胞、TCRαβ-CD4-CD8-T细胞和TCRαβ-CD4+CD8+F细胞间无法设门,与正常对照比较,DNT细胞计数显著增加;B方法(先标记,再激活),DNT细胞与其他细胞群设门清晰,与正常对照比较,对DNT细胞计数无明显影响;C方法(先标记,再联合激活),DNT细胞检测结果与B方法相同.结论 采用A方法(常规方法),不能对活化后的DNT细胞进行准确计数;采用B和C方法(改进方法),可以对活化后的DNT细胞进行准确计数,避免了磁珠或(和)流式分选,为其计数和表面抗原检测提供了一种新的简便方法.
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基于碳纳米管修饰的无酶型新型甲胎蛋白安培免疫传感器研究
目的 构建新型甲胎蛋白安培免疫传感器.方法 首先在玻碳电极(GCE)表面修饰一层羧基化碳纳米管(CNTs).然后利用带负电荷的DNA分子和带正电荷的硫堇之间的静电作用,层层自组装修饰硫堇以增强检测信号,然后利用硫堇的氨基固定纳米金,以便固定抗体,后利用牛血清白蛋白封闭未结合位点.结果 修饰的碳纳米管能够显著地提高电极的导电性,利用层层组装技术修饰了5层硫堇.在优化的条件下(pH 7.0,温浴时间25 min),制作的甲胎蛋白免疫传感器线性范围在0.5～25 ng/ml内,检测限0.02 ng/ml.结论 成功利用层层自组装技术构建新型基于碳纳米管修饰的无酶型甲胎蛋白安培免疫传感器,该传感器灵敏度高,特异性好,有望成为原发性肝癌早期诊断的新方法.
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561例血液病患者染色体核型分析
目的 探讨血液病患者有关核型改变及其意义.方法 抽取骨髓标本2～5 ml,采用骨髓细胞直接法、24 h短期培养法制备染色体标本,用G显带技术进行核型分析.结果 561例血液病患者中,常规细胞遗传学发现异常核型282例(50.3%),其中结构异常116例(20.7%),数目异常84例(15.0%),同时有结构异常和数目异常82例(14.6%).不同类型血液病患者染色体检测结果不同,在急性髓系白血病(AML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)、慢性粒细胞白血病(CML)、骨髓增生异常综合症(MDS)、再生障碍性贫血(AA)、骨髓增殖性疾病(MPD)、淋巴瘤、血小板减少症中异常核型分别为56.5%(109/193)、44.9%(57/127)、74.7%(62/83)、56.7%(34/60)、3.7%(1/27)、0%(0/15)、72.7%(8/11)、0%(0/5),在急性混合细胞白血病、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、多发性骨髓瘤(MM)、慢性粒单细胞白血病(CMML)、淋巴瘤白血病、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、纯红再障、恶性组织细胞病等较少患者中,异常核型分别为25.0%(2/8)、0%(0/8)、20%(1/5)、0%(0/5)、100%(4/4)、40%(2/5)、0%(0/3)、100%(2/2).M2伴t(8;21),M3伴t(15;17),M4伴inv(16)、t(16;16),ALL伴t(9;22)CR率分别为88.2%、94.7%、80%、45.5%.结论 染色体核型分析在恶性血液病诊断、分型、预后判断和指导治疗中具有重要意义.
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单根毛囊改良分离法在疤痕性秃发毛囊移植中的临床研究
目的 采用改良的单根毛囊分离法得到单根完整毛囊,用于毛发移植治疗头部及眉部的疤痕性秃发,探讨该法应用于疤痕植发的技术要点和临床效果,为毛发移植治疗提供一定的临床数据.方法 头部和眉部疤痕性秃发17例患者,使用改良法获得单根毛囊并植入疤痕秃发区域.统计供区所得完整单根毛囊数和受区毛囊成活数,并在术中取所得毛囊进行组织学检查.结果 17例患者随访3～12个月,生长外观自然,原有疤痕基本遮盖.供区毛囊提取率为54.87%～86.01%,受区毛囊成活率为70.27%～96.36%,组织学检查显示毛囊生发结构完整.结论 改良分离法获取的单根完整毛囊具生长活性,植入后天获得性的疤痕秃发区域内后生长良好,可改善疤痕区外观.
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女大学生亚健康状态与气郁质关系的调查分析
目的 分析亚健康状态与中医气郁质的关系与体质特征.方法 按整群抽样法抽取广州市某医科大学在读各年级本科大学生共7 000名作为调查对象,使用的调查问卷"中医体质量表"及本课题组编制的"亚健康自评量表",由调查员在体检时进行现场调查,问卷当场收回.由中医学专家根据调查问卷进行评价诊断,依据体检报告排除患有各种实质性疾病者后进行统计分析.结果 医科院校学生亚健康总人数为3 879人,占调查人数的62.51%.气郁质的亚健康大学生分布,女生明显(23.04%)高于男生(12.06%),差异有统计学意义(P<0.05),其除具有气郁质的倾向性表现外,不少人还兼夹了血瘀、气虚、湿热等倾向.亚健康大学生在心理、社会方面表现比较突出.结论 医科大学学生广泛存在亚健康状态,特别是心理、社会方面的问题,需要学校加强关注,积极预防亚健康的发生.
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经腹羊膜腔灌注术治疗妊娠32周前合并羊水过少的临床研究
目的 探讨妊娠32周前发生羊水过少的孕妇进行经腹羊膜腔灌注术后的围生儿结局及安全性评估.方法 对81例32周前发生羊水过少的孕妇按自愿原则分组进行经腹羊膜腔灌注术及传统的补液治疗,观察围生儿结局及产科并发症情况.结果 81例患者中,有11例在羊膜腔灌注后B超诊断胎儿畸形.灌注组的新生儿平均出生周数为(37.1±2.47)周,出生体重为(2 738.95±385.90)g,均大于补液组(P<0.05);而早产、胎儿窘迫、新生儿畸形、新生儿黄疸、缺血缺氧性脑病、肺透明膜病、组织学绒毛膜羊膜炎发生率低于补液组,两组差异有统计学意义(P<0.05).两组在分娩方式、宫内感染、胎膜早破等并发症的差异无统计学意义(P>0.05).结论 对孕32周前发生羊水过少的孕妇进行经腹羊膜腔灌注术能及时排除胎儿畸形,并有效改善围生儿预后,操作安全性高.
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乙肝相关慢加急性肝衰竭患者Th17细胞水平及其临床意义
目的 探讨乙肝相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)外周血Th17细胞的表达及其与临床转归的关系.方法 采用流式细胞术分析外周血中Th17细胞比例,flowcytomix技术检测血清中IL-17的水平,荧光PCR检测HBV-DNA载量,ELISA检测HBeAg的状态,分析Th17细胞及IL-17的表达与HBV病毒及预后的关系.结果 与健康对照组及慢乙肝组相比,HBV-ACLF患者Th17细胞及IL-17水平明显升高(P<0.01),且Th17细胞与IL-17水平成正相关;进一步分析发现不同病毒复制水平及HBeAg状态的HBV-ACLF患者Th17细胞及IL-17的差异无统计学意义;与预后好转患者相比,预后不佳HBV-ACLF患者Th17细胞及IL-17水平明显增高(P<0.05),且IL-17的水平与终末期肝病评分成正相关.结论 Th17细胞可能参与了HBV-ACLF的发病机制,且IL-17的表达越高可能提示患者的预后不佳.
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痛风危险因素、体质类型与中医证型的相关研究
目的 探讨痛风危险因素、体质类型与中医证型的关系.方法 回顾性分析2010年1-12月就诊南方医院风湿科、中医科门诊及住院且既往发作符合1977年ACR急性痛风关节的诊断标准的42例患者的临床资料.依据<中药新药临床研究指导原则>,将入选病例分为风湿蕴热证、痰瘀痹阻证、久痹正虚证3个证型.依据王琦<中医体质分类与判定>,将纳入患者体质类型分为痰湿质、湿热质、瘀血质及其他体质.并记录患者年龄、病程、体重指数(BMI)、生化指标及合并症等临床资料,通过SPSS13.0软件分析,观察痛风危险因素、体质类型与中医证型的关系.结果 ①纳入患者大部分合并高脂血症(71.5%),3种证型中痰瘀痹阻证型占患者比例高(66.7%),3个证型间年龄、BMI、甘油三酯(TG)差异均有统计学意义(P<0.05).②体质类型中痰湿质14例(33.3%),湿热质12例(28.6%),瘀血质9例(21.4%),其他体质7例(16.7%),体质类型在3种证型间的分布差异具有统计学意义(P=0.001),其中以痰湿质多,其次是湿热质、瘀血质,痰湿质、湿热质主要分布在风湿蕴热及痰瘀痹阻证型,瘀血质主要分布于痰瘀痹阻证型.结论 痛风危险因素中BMI、TG在中医证型间存在差异,痰瘀痹阻证型是痛风的常见证型,提示控制体重、低脂饮食是防治痛风的有效措施;体质类型在中医证型分布中具有差异,对指导临床辨证、体现"因人治宜"、实施个体化治疗奠定基础.
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腹腔镜联合人工授精治疗子宫内膜异位症不孕的临床观察
目的 探讨子宫内膜异位症(Ems)不孕患者腹腔镜术后行夫精人工授精妊娠率的影响因素.方法 回顾性分析164例腹腔镜术后的Ems不孕患者进行的318个人工授精周期的临床资料.以年龄、不孕年限、腹腔镜术后时间、用药情况、周期数、是否促排卵、r-AFS分期、IUI时机分别进行妊娠率的比较.结果 Ems不孕患者术后人工授精的周期妊娠率为13.21%.年龄≤35岁的周期妊娠率高于35岁以上者(χ2=6.687,P<0.05),不孕年限≤5年的妊娠率高于5年以上者(χ2=5.430,P<0.05),腹腔镜术后1年内行人工授精的妊娠率高于1年以上者(χ2=6.005,P<0.05),Ⅰ～Ⅱ期患者的妊娠率高于Ⅲ～Ⅳ期患者(χ2=8.264,P<0.05),加用促排卵治疗的妊娠率高于自然周期者(χ2=4.569,P<0.05),3周期内人工授精的妊娠率高于3周期以上者(χ2=4.031,P<0.05),双次IUI者妊娠率高于单次者(χ2=4.371,P<0.05),差异均有统计学意义.而术后是否使用GnRH-a则与妊娠率无关.结论 Ems不孕患者腹腔镜术后行人工授精治疗的佳时间是术后1年内3周期内有较高的妊娠率,建议同时加用促排卵治疗.
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氯沙坦对自发性高血压大鼠血管紧张素Ⅱ及炎症因子的影响
目的 观察血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)的AT-1型受体阻断剂氯沙坦对自发性高血压大鼠(SHR)血清Ang Ⅱ及炎症因子水平的影响.方法 应用ELISA试剂盒检测SHR(n=12)和血压正常大鼠(WKY)(n=6)血清中AngⅡ的水平及炎症因子IL-1β、IL-6和高敏C反应蛋白(hsCRP)的浓度.结果 SHR血清中AngⅡ、IL-1β、IL-6及hsCRP水平明显升高,与WKY的相应指标比较差异均具有统计学意义(P值均<0.05).氯沙坦在降低SHR血压的同时可以明显地降低其血清中AngⅡ、IL-1β、IL-6及hsCRP的水平,与用药前的相应指标比较差异均具有统计学意义(P值均<0.05).结论 氯沙坦可以降低SHR血清的Ang Ⅱ及炎症因子IL-1β、IL-6和hsCRP的水平,这可能是氯沙坦的降压机制之一.
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血清SCCA、CYFRA21-1、TPS在宫颈鳞癌的表达及对化疗疗效评价的意义
目的 检测血清鳞状细胞癌抗原(SCCA)、细胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、组织多肽特异性抗原(TPS)在宫颈鳞癌的表达,分析其在化疗疗效评价中的意义.方法 宫颈鳞癌患者31例,健康对照组30例,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清SCCA、CYFRA21-1、TPS水平,并比较3项指标在两组人员中的差异及在宫颈癌患者组中化疗前后的变化.结果 ①宫颈癌组血清SCCA、CYFRA21-1、TPS水平明显高于健康对照组(P<0.01).宫颈鳞癌患者中,血清SCCA、CYFRA21-1、TPS诊断敏感性分别为70.00%、48.00%、86.21%,特异性均为100%.TPS诊断敏感性明显高于SCCA、CYFRA21-1(P<0.05).SCCA和TPS联合及三者联合诊断敏感性提高,分别为96.43%、95.83%.②SCCA在不同临床分期表达差异均无统计学意义(P>0.05),在中或高分化组表达明显高于低分化组(P<0.05),与有无淋巴结转移无关(P>0.05).CYFRA21-1、TPS在Ⅲ+Ⅳ期表达明显高于Ⅰ+Ⅱ期(P<0.05),与肿瘤分化程度无关(P>0.05).对有无淋巴结转移,CYFRA21-1的表达差异无统计学意义(P>0.05),而TPS表达差异有统计学意义(P<0.05).③化疗有效(CR+PR)的患者中,化疗后血清SCCA、TPS较化疗前明显下降(P<0.05),CYFRA21-1化疗后下降,但差异无统计学意义(P>0.05).化疗后病情稳定(SD)或进展(PD)的患者中,化疗前后血清SCCA、CYFRA21-1、TPS水平均无明显差异(P>0.05).结论 SCCA、CYFRA21-1、TPS检测对宫颈鳞癌的诊断具有一定意义,SCCA、TPS水平变化在化疗疗效评估方面具有一定指导作用.
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约翰霍普金斯大学Welch医学图书馆资源建设研究
数字环境下,信息的载体形式得到了极大的丰富,信息量越来越大,用户希望能够快速、直接、有效的获取信息,这都促使图书馆必须调整资源建设的策略,逐渐适应内外部环境的变化,由单一的物理馆藏转变为物理馆藏与电子馆藏并进.本文以美国约翰霍普斯金大学Welch医学图书馆为例,研究其21世纪以来资源建设的概况、资源建设策略、资源建设实践等,为我国医学图书馆资源建设研究提供参考.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 |
