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  • 岩白菜素的研究进展

    作者:刘斌;谭成玉;池晓会;陈宇婷;韩梦迪;波拉提·马卡比力

    目的:综述了近年来对岩白菜素的研究进展。方法采用文献查阅,对相关文献进行归纳总结。结果对岩白菜素的研究主要集中于植物来源、提取分离、分析方法、结构改性、生物活性及其药代动力学等方面。结论岩白菜素具有显著的镇咳、镇痛、抗炎、增强免疫、保护肾脏、抗糖尿病、抗H IV、抗凝血等活性,仍具有较为广泛的研究开发空间。

  • 两色金鸡菊化学成分及生物活性研究进展

    作者:姚新成;田丽萍;秦冬梅;王新兵;李乐;唐辉

    目的:综述两色金鸡菊化学成分及相关生物活性的研究进展。方法系统查阅国内外相关两色金鸡菊的研究文献,进行综合分析。结果两色金鸡菊富含多种对人体有益的化学成分,并具有多样的生物学活性。结论两色金鸡菊具有潜在的药用和食用开发价值,值得更进一步研究。

  • 中华七叶树种子化学成分及生物活性研究进展

    作者:路强强;石新卫;胡浩;周军辉;崔新爱

    目的:对中华七叶树种子的化学成分及生物活性研究进展进行综述。方法结合数据库检索及文献查阅,对其化学成分及生物活性进行系统分析和归纳总结。结果中华七叶树种子主要含有五环三萜皂苷类化合物26个、黄酮苷类化合物10个,具有抗炎消渗、抗肿瘤、抗病毒、抗血管生成和减肥等方面的生物活性。结论七叶皂苷Ⅰa和七叶皂苷Ⅰb,异七叶皂苷Ⅰa和异七叶皂苷Ⅰb是中华七叶树种子中含量高的4种功效成分,其药理作用显著,临床应用前景广阔。

  • 白蛋白和甘露醇对IL-2活性的影响

    作者:包春杰;赵宁;王利兵;李波;张英起

    0 引言  白蛋白和甘露醇是生产IL-2冻干粉针剂时常用的赋形剂, 其目的是保持制剂的生物活性和制剂性状, 提高产品的稳定性, 并且容易进行冷冻干燥和利于贮藏及运输. 我们在实验中利用不同浓度的两种赋形剂生产IL-2冻干制剂, 通过检测IL-2的活性, 对制剂中白蛋白和甘露醇的保护作用进行比较, 以评价该产品的冻干工艺.1 材料和方法1.1 材料 RPMI 1640为美国Gibco公司生产. 小牛血清为杭州四季青生物工程材料研究所生产. 3H-TdR购于中国科学院上海原子核研究所. IL-2标准品为中国药品生物制品检定所出品. 液体闪烁计数仪(LS-6500,美国Beckman公司). 细胞收集器为江苏江阴生产. 冷冻干燥机(JB-300型)为中国长江制冷公司生产.

  • 可溶性人PD-1IgV(shPD-1IgV)活性检测及抑瘤作用的观察

    作者:吴守振;王伟华;韩苇;张英起

    目的:检测可溶性人PD-1IgV(shPD-1IgV)的活性,观察其抑瘤效果. 方法:利用Ni-NTA亲和层析和分子筛层析纯化蛋白,对其进行复性得到可溶性人PD-1IgV(shPD-1IgV). 通过结合ELISA和竞争ELISA检测shPD-1IgV生物学活性,计算抑瘤率检测其抑瘤效果. 结果:高效气相色谱分析结果表明纯化复性的shPD-1IgV蛋白的纯度达到95%以上;shPD-1IgV能够分别与鼠源性和人源性B7H1/Fc结合;其与人源性B7H1/Fc的结合可被抗人B7H1 mAb阻断;治疗组抑瘤效果与对照组比较具有统计学意义(P<0.05). 结论:纯化复性的可溶性人sPD-1IgV具有很高的纯度和生物学活性,体内显示了良好的抑瘤效果.

  • 重组胸腺素α1的分离纯化和活性测定

    作者:石继红;张英起;赵宁;颜真;韩苇;赵永同

    目的 利用融合表达载体pThioHisA的重组质粒pThioHisA-Tα1④, 转化大肠杆菌TOP10得到的工程菌,来分离纯化表达的胸腺素α1(thymosin alpha 1,T α1). 方法 将高效表达融合蛋白 的工程菌用细胞破碎器裂解,经80℃热处理,离心上清采用Q-Sepharose FF阴离子交换色谱纯化融合蛋白. 融合蛋白经CNBr裂 解后用常压离子交换色谱纯化Tα1单体. 应用SDS-PAGE,2L-Tricine-SDS-PAGE和HPLC进行鉴定. 结果 [ HTSS SDS-PAGE分析表明菌体表达的融合蛋白占菌体总蛋白的400 g*kg-1. 经2L-Tricine-SDS-PAGE分析证实,融合蛋白可裂 解出Tα1单体,裂解物经简单的离子色谱可以纯化出Tα1单体,HPLC鉴定纯化出的Tα1纯度可达950 g*kg-1以上. 利用3H-TdR进行的生物活性测定表明,在致有丝分裂原ConA存在的条件下,融合蛋白和Tα1单体均具有刺激小鼠脾淋巴细胞 分裂增殖的能力,与化学合成的Tα1相比具有相似的生物活性. 结论 该方法是分离纯化Tα1 简便易行,经济有效的方法;同时也为Tα1的分离纯化和大规模的开发生产奠定了基础.

  • 人神经生长因子成熟蛋白基因片段在大肠杆菌中的表达和生物活性鉴定

    作者:马巍;刘淼;杨广笑;王全颖

    目的在大肠杆菌中表达人神经生长因子成熟蛋白基因片段(hNGFβ)并检测其生物活性.方法将NGFβ目的基因亚克隆人表达载体pBV220的BamHI-BamHI位点,连接产物转化大肠杆菌DH5α菌株通过热诱导表达NGFβ蛋白,利用溶解包涵体和重折叠使表达产物复性,将复性后的蛋白质加入体外培养的鸡胚背根神经节及PC12细胞BrdU掺入实验,观察表达蛋白的生物学活性.结果成功构建了重组质粒pBV220/NGFβ.使用该质粒转化DH5o宿主菌,使用热诱导方法表达了NGFβ蛋白,SDS-PAGE结果提示表达蛋白主要存在于包涵体中.通过肝素亲和层析可以获得纯度大于90%的NGFβ.每升表达菌可以获得1.8~2.0 mg NGFβ.鸡胚背根神经节突起生长实验和PC12细胞培养生长刺激BrdU掺入实验表明原核表达的NGFβ是具有生物活性的.它的生物活性按生物制品鉴定章程判断为1×105BU/g.结论在大肠杆菌中可以表达出有活性的NGFβ蛋白.

  • 人脐血CD3AK细胞生物活性及抗瘤作用的实验研究

    作者:魏绪仓;邢佩霓;赵文理;翟欣辉;李梅生;郭亮

    目的应用抗CD3单克隆抗体(CD3McAb)和重组人白细胞介素-2(rhIL-2)共同诱导人脐血单个核细胞以制备CD3AK细胞,动态观察其体外增殖能力、杀伤活性、免疫表型变化及分泌细胞因子水平.方法用台盼蓝活细胞计数计算细胞扩增倍数,MTT法测定细胞杀伤活性,间接免疫荧光法分析细胞免疫表型,ELISA双抗夹心法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-6(IL-6)的水平.结果脐血CD3AK细胞在第2周增殖能力强,增殖倍数为78.56;培养至第12天的脐血CD3AK细胞杀伤活性高,并对多种靶细胞的杀伤作用显著;表型分析脐血CD3AK细胞属异质性细胞群,培养第7、14天,群体中CD3+、CD8+、CD25+、CD38+、CD16+及CD56+细胞较培养前显著增加(P<0.01);CD3AK细胞培养至第3天的上清中TNF-α、IFN-γ、IL-6水平明显升高.结论脐血CD3AK细胞是一种具有广谱杀瘤活力且增殖活性强的免疫细胞.本研究为脐血CD3AK细胞的免疫治疗提供了实验和理论依据.

  • B7.1胞外编码区的真核表达及其生物活性

    作者:杨章民;王一理;司履生

    目的真核表达B7.1细胞外编码区以研究其生物学活性.方法电穿孔法将重组质粒pDisplay/B7.1(V+C)导入人子宫颈癌细胞株,免疫组化及核酸原位杂交法分别检测其蛋白及mRNA表达,3H-TdR掺入法测定表达物对T细胞的刺激作用;MTT法研究转染细胞-T细胞混合培养引发的细胞毒性杀伤作用.结果 B7.1细胞外区在Hela细胞表面表达,所表达的B7.1细胞外区在抗CD3单抗存在的情况下具有刺激T细胞活化的特性,重组质粒转染的Hela细胞与T细胞混合培养可引起细胞毒性杀伤.结论真核表达的B7.1(V+C)具有T细胞共刺激活性,可用于构建肿瘤免疫治疗之双功能分子.

  • 猪骨胶原蛋白降压成分的提取与生物活性的研究

    作者:耿秀芳;李桂芝;王守训;孙晓丽;任维栋;李耀辉;张义军

    目的从猪骨胶原蛋白中提取小肽做为血管紧张素转换酶抑制剂.方法猪骨胶原蛋白经胰蛋白酶水解,阳离子交换树脂层析,Sephadex-G25凝胶过滤,反相高效液相层析(HPLC),终得到一种9肽,其氨基酸组成:Ile,Ser,His,Gly,Ala,Pro,Tyr,Leu,Asp.结果以马尿酰- 甘氨酰-甘氨酸(HGG)为底物,对从猪肺中提取的血管紧张素转换酶(ACE)有明显的抑制作用 ,I50为2.6×10-2?mmol/L.将含此肽0.01%的混合物做静脉注射试验,对肾性高血压大鼠和自发性高血压大白鼠均有明显降压作用;口服给药15?d,对自发性高血压有一定的降压作用.对离体豚鼠回肠平滑肌有收缩作用.结论胶原蛋白酶解物9肽的抗高血压效果,可能是通过对血管紧张素转换酶的抑制作用.

  • 碱性成纤维细胞生长因子的结构功能概述

    作者:罗文广;陈绍宗

    碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblastgrowth factor,bFGF)是一种具有广泛生物活性的肽类物质,70年代中期首次从牛脑重体中被提纯,因它能促进成纤维细胞增殖,被命名为成纤维细胞生长因子(FGF),至目前为止,在成纤维细胞生长因子家族中,以对bFGF的研究较为充分,现就该注长因子的结构功能等作一文献回顾.

  • 一氧化氮与肝缺血再灌注损伤的研究进展

    作者:雷团结;黎一鸣

    一氧化氮(NO)是一种具有多种生物活性的小分子物质,参与多种生理及病理过程.近几年的研究发现,NO与肝移植关系密切,涉及到缺血及再灌注损伤、排斥反应、血流动力学变化、移植后并发症等多个环节.

  • 前列腺素在急性肾功能衰竭中的作用

    作者:孟凡钦;房立武

    20世纪80年代以后,肾血流动力学改变在急性肾功能衰竭(ARF)发生、发展中的作用越来越受到人们的重视.对ARF时肾血流改变原因的研究已经取得很大进展.近几年来,前列腺素(PGS)在ARF中的作用已成为一个十分活跃的研究领域.实验证实PGS的代谢异常与ARF关系密切,并且通过改变PGS代谢可以对ARF产生保护作用.ARF初期都有肾血流动力学改变,主要表现为肾皮质血流量少,髓质血流瘀滞及微循环障碍.许多实验表明这些改变与肾脏PGS的生成和代谢异常有关,并通过干扰PGS代谢可以影响ARF过程[1].体内前列环素(PGI2)和血栓素A2(TXA2)是两种生物活性很强且作用相反的内源性物质.近几年人们在这方面的大量研究表明PGI2、TXA 2在肾血管舒缩功能的调节方面发挥着重要作用. 来源于食物中的花生四烯酸(AA)在组织内以磷脂结合的形式储存于细胞壁内.在受到刺激时细胞壁根据需要释出一定量的AA,经过环氧化酶的作用,形成不稳定的环氧化物PGG2和PGH2.PGH2是一个重要的枢纽性产物,可在TXA合成酶和PGI2合成酶的作用下分别形成TXA2和PGI2.

  • Graves病动物模型研究进展

    作者:武敏;施秉银

    Graves病(Graves disease,GD)是一种以甲状腺功能亢进为主征的器官特异性自身免疫性疾病.在环境与遗传因素的相互作用下,机体免疫系统产生了针对促甲状腺激素受体(Thyrotropin receptor,THSR)的抗体(TRAb).其中,刺激性抗体(TSAb)可模拟TSH功能,导致甲状腺激素过度分泌.90%以上初诊Graves患者血清中存在TSAb[1],标准化、符合临床实际的GD动物模型,有助于研究TSAb产生的免疫机制.早期的研究者们做了诸多的探索,如免疫可溶性TSHR抗原肽、肌注TSHR裸cDNA、甲状腺组织异体移植、原核细胞重组TSHR多肽等.上述方法存在的共同问题,为无法维持TSHR抗体滴度、不能激发和保持TSHR在动物体内的生物活性,距离理想的GD动物模型仍有差距.本文对此领域近年来的研究进展加以综述.

  • 血凝实验检测的分析前质量控制

    作者:孙艳华;胡晓艳

    随着科学技术的进步,全自动血凝分析仪的采用,在临床检验中发挥越来越重要的作用.这就需要检验人员对自动化仪器原理、性能、注意事项及影响因素等方面的知识全面了解,才能更好地使用仪器,保证结果的准确性和可靠性.全自动凝血仪具有准确、快捷、灵敏的优点,在临床上对于疾病的诊断、鉴别、病情观察治疗、检测预后判断和术前检查具有重要作用.由于许多凝血因子是具有生物活性的蛋白质,常温下易失活,而凝血、止血又是一个相当复杂的生理病理过程,影响此实验的因素更具有特殊性,而实验结果的准确性是临床应用的前提,所以做好实验各环节各全程质量管理至关重要,尤其是分析前质量控制更为重要.

  • 锌对支气管哮喘儿童白三烯水平的影响

    作者:黄敬之;林甦;黄娴;毛文珍

    支气管哮喘是儿童时期常见的慢性疾病,是一种气道慢性炎症性疾病,这种慢性气道炎症,终导致气道高反应,促使哮喘发作。但是,支气管哮喘的发病机制相当复杂,有许多炎性介质、细胞因子、化学因子和相关细胞组分都参与到发病过程中[1]。目前已经明确白三烯是哮喘发病过程中主要的炎性介质,具有广泛的生物活性,在支气管哮喘发生发展中扮演着相当重要角色。近年有研究表明发现支气管哮喘患儿各年龄组血锌(Zn)含量均值均显著低于健康组[2],经过补充锌在体内的含量,可能使cAMP/cGMP比值趋于正常[3],细胞内cAMP浓度增加,可松弛平滑肌,阻止哮喘的发作[4]。另外,研究结果表明锌有稳定细胞膜的作用,阻断肥大细胞膜受体,阻止肥大细胞脱颗粒,抑制组胺等的释放,从而抑制变态反应的作用[5]。本研究旨在对缺锌的支气管哮喘儿童进行补锌治疗,通过监测分析治疗前后尿白三烯E4(LTE4)水平变化,探讨锌对支气管哮喘儿童白三烯水平的影响。现将研究结果,报道如下。

  • 不同温度冻存富血小板纤维蛋白的对比

    作者:张宇辰

    目的比较不同温度条件下冷冻保存富血小板纤维蛋白(PRF)后其组织形态与生物活性因子的差异。方法离心提取PRF标本后平均分为三等份,分别标记为实验组1、实验组2和对照组,分别进行光镜观察、透射电镜观察和免疫组化分析。结果冷冻前后实验组1生物活性因子(PDGF及IL-4)阳性率明显高于实验组2。结论-80益冻存PRF的方法优于-196益,对PRF组织形态及生物活性因子影响小。

  • 旋覆花中化学成分及其活性研究

    作者:伍丽雄

    目的针对旋覆花中化学成分的构成情况及其生物活性表现展开分析与研究。方法本次实验研究中所选择的旋覆花属植物样本为2014年5月自XX地区所采集,经过XX鉴定为线叶系旋覆花样本,于XX实验室内保存。以该旋覆花样本为研究对象,拟定通过提取分离的方式对样本中的化学成分进行分析。结果本次研究中对所选择的旋覆花样本进行了化学成分的提取与分析工作,分析结果为:该样本中共分离提取出30类别化合物,同时首次分离出了生物碱成分。将分离得出的各种化学成分按照类别进行统计,并做数据处理,结果显示:倍半萜类化合物是旋覆花中主要的化学成分,其类别构成比明显高于其他各类,数据对比差异显著,<0.05,具有统计学意义。结论旋覆花属植物的化学成分构成比较复杂,组成类别众多,但以倍半萜类为主,也存在甾醇类、黄酮类、生物碱类成分。同时,旋覆花属植物的生物活性丰富,主要表现在抗菌、抗炎、抗肿瘤等多个方面,有相当可观的药用价值,可进一步研究。

  • 脑利钠肽前体在普通人群的预后研究现状及进展

    作者:朱启伟;张今尧;叶平

    血浆脑利钠肽(BNP)早由日本学者于1988年从猪脑分离出来因而得名,但其主要来源是心脏,其他来源有脑,肺,肾和肾上腺等。当心室壁压力升高或受到牵拉时大量BNP释放入血引起循环浓度明显升高。BNP由B型脑利钠肽原前体(pre-proBNP)经酶分解而来,pre-proBNP分解为等摩尔浓度的有活性的BNP和无活性的NT-proBNP。由于NT-proBNP无生物活性、半衰期较BNP长、缺乏主动清除机制等,其血浆浓度较BNP高出2~10倍,另外NT-proBNP在体外不同温度下稳定性更好,对取血样本要求相对低[1],因而具有更好的临床应用价值,这也被许多临床研究证实,这些研究中大部分是针对心功能不全人群的[2],也包括慢性肾功能不全、缺血性心脏病等心血管事件高危人群。还有一些研究发现血浆NT-proBNP在普通人群中也具有显著预测死亡和心血管事件的价值[3],但机体机制尚不明确。本文拟就血浆 NT-proBNP在普通人群中的预后价值研究现状及其可能的机制作一综述。

  • 槲皮素金属配合物的合成及生物活性研究进展

    作者:林哲晓

    槲皮素是已知强抗癌剂之一,只要毫摩尔浓度即可直接阻滞癌细胞增殖硒有抑制致癌物,诱发食管癌、胃癌、肝癌、乳腺癌的作用。通过研究他们的关系来观察他们的配合物的抗癌作用是否有所提高。

    关键词: 硒槲皮素 生物活性
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