首页 > 文献资料
-
应用快速检测试剂盒预测水样和水产品中孔雀石绿
目的 应用快速检测试剂盒预测水样和水产品中孔雀石绿和隐性孔雀石绿残留量.方法 水样采用水体中孔雀石绿快速检测试剂盒预测;水产品采用水产品中孔雀石绿、结晶紫现场快速检测试剂盒预测.结果 水样中孔雀石绿和隐性孔雀石绿检出率为2.9%,水产品中孔雀石绿和隐性孔雀石绿检出率为11.4%.结论 可用快速检测试剂盒对水样和水产品中孔雀石绿和隐性孔雀石绿残留量进行预测.
-
广西玉林铁路医院加强实习生培训/江苏有了专业伤口护理师/护士不够聘护工医院埋单/新型SARS检测试剂盒获准生产等7则
-
人胚胎肝脏褪黑素受体的鉴定
目的:应用免疫组织化和核酸原位杂交技术检测人胚胎肝脏的MEL受体及其亚型分布,为进一步研究MEL对肝脏功能的调节作用提供证据.方法:1.研究对象:中期水囊引产人胎儿,取出心脏和主动脉,立即用4%多聚甲醛+0.1%DEPC固定,石蜡包埋组织,4℃冰箱贮存待检测.2.MEL探针制备:培养含有MEL1A或MEL1B受体质粒的大肠杆菌,抽提质粒,酶切,地高辛标记探针(宝灵曼公司).3.核酸分子原位杂交:原位杂交检测试剂盒、APES、Poly-L-Lysine(多聚赖氨酸)和专用盖玻片均购自武汉博士德生物工程公司、APES与Poly-L-Lysine 联合应用处理载玻片.按原位杂交试剂盒的说明进行检测.实验设不加探针为阴性对照.4.免疫组织化学法:一抗为鼠抗人MEL1A和MEL1B受体单克隆抗体,由香港大学生理系彭树勋教授馈赠.免疫组化试剂盒购自福建迈新公司.MEL1A和MEL1B受体单克隆抗体的稀释浓度为1∶75,以缓冲液代替第一抗体作为阴性对照,下丘脑组织作为阳性对照.结果:1.肝脏MEL1A和MEL1B受体蛋白的检测:肝脏免疫组织化学染色结果显示,在人胚胎肝脏细胞存在MEL1A和MEL1B受体蛋白,分布于细胞膜和胞核,但以胞膜为主.2.肝脏MEL1A受体和MEL1B受体mRNA的检测:肝脏的核酸分子原位杂交结果显示,在肝细胞的胞核和胞浆均存在MEL1A和 MEL1B受体mRNA的表达,但以胞核为主.结论:肝细胞的胞膜和胞核存在MEL1A和MEL1B受体蛋白,同时在胞浆和胞核检测到MEL1A受体和MEL1A受体mRNA的表达,提示肝细胞存在MEL1A和MEL1B受体,从而证实了肝脏是MEL作用的外周靶器官.
-
G试验在ICU侵袭性肺部真菌感染检测中的作用
目的:探讨G试验对侵袭性肺部真菌感染( invasive pulmonary fungal infection,IPFI)的临床诊断价值及与传统真菌培养之间的关系。方法:应用MB-80微生物动态快速检测系统及GKT-5MSet动态真菌检测试剂盒,定量检测血浆中(1-3)-β-D葡聚糖的含量,并与真菌培养结果进行比较。结果:50例患者中,35例患者真菌培养阳性,其中白色念珠菌18例,热带念珠菌6例,克柔念珠菌6例,光滑假丝酵母菌3例,近平滑假丝酵母菌2例。 G试验含量增高者13例,占总数的26%,G试验含量正常37例,占总数的74%。 G试验含量增高组真菌培养阳性13例, G试验含量正常组真菌培养阳性22例,G试验含量增高组真菌培养阳性率显著高于G试验含量正常组( P<0.05)。以真菌培养为标准,G试验的敏感度为37.14%,特异度100%,阳性预测值为100%,阴性预测值为40.5%。结论:G试验较传统的真菌培养法特异性强,可作为侵袭性肺部真菌感染的辅助诊断。
-
2017年度人EGFR基因突变检测试剂盒抽验质量分析
目的 按照国家体外诊断试剂抽验工作方案,从8家企业共抽检9批次的"人EGFR基因突变检测试剂盒",评价该试剂盒的质量.方法 依据企业产品技术要求,使用企业参考品对试剂盒的准确性、特异性、检测限和重复性进行检验,同时依据EGFR基因突变检测试剂盒即将实施的行业标准,使用统一参考品,对试剂盒进行探索性研究.结果 9批次试剂均符合各自产品技术要求.探索性研究发现,试剂盒准确性和检测限均有1批次的1个突变位点未检出.结论 各企业产品技术要求存在差异,影响产品质量.建议将来及时根据行业标准更新企业技术要求,并统一使用国家参考品进行检测.
-
应用IVT特异性吸入过敏原检测试剂盒对慢性荨麻疹病因的检测
慢性荨麻疹是临床上常见的过敏性疾病之一,其病因复杂,使疗效不甚满意.作者采用IVT过敏原检测试剂盒系列中的(701)对慢性荨麻疹患者进行吸入性过敏原检测,以了解IVT试剂盒检测的临床应用价值.
-
TERT-原位杂交技术的使用难点及解决方法
RNA原位杂交技术在基因分析和诊断方面能作定性、定位和定量分析,已成为有效的分子病理学技术之一[1].用寡核苷酸探针检测组织切片中相关的mRNA是较为常见的RNA原位杂交[1],而Telomerase Reverse Transcriptase(TERT)又是较为常用的原位杂交检测试剂盒,其探针较短,组织穿透性好,有较高的灵敏度.由于在大多数的恶性肿瘤中存在着TERT-RNA,所以,TERT-原位杂交检测方法可以应用于众多的恶性肿瘤的诊断.但由于该方法存着消化时间、杂交时间、温度难以掌握以及杂交液滴加多少较难控制等技术难点,常常会使结果出现假阳性或假阴性.我们采用TERT-原位杂交检测方法对舌癌标本进行了检测,经过反复的实践、改进,解决了许多的难点,获得了比较满意的结果,现报道如下.
-
CHIKV Real-time PCR检测方法的建立及试剂盒研发
目的 建立快速特异检测基孔肯雅病毒的Real-time PCR方法及试剂盒.方法 根据发表在Genbank上15株基孔肯雅病毒基因序列全长,应用ClustalW2.0和DNAMAN8软件筛选出位于其E1基因上的种内保守种间特异的目的片段,并据此设计出优引物.人工合成该基因片段并构建重组质粒,对重组质粒梯度稀释后,再利用SYBR Green Ⅰ Real-time PCR的方法检测该特异基因的浓度,建立标准品曲线,用于临床上基孔肯雅病毒的早期诊断.结果 琼脂糖凝胶电泳结果显示,标准品的PCR扩增产物的电泳条带长度与目标条带一致,测序结果显示与目标条带序列一致,说明引物与阳性质粒性能良好.经优化确定CHIKV荧光定量PCR反应体系中佳的引物浓度为350 nmol/L,佳的反应条件为:50℃ 2 min;95℃预变性2 min;以95℃ 15s,60℃ 15 s,72℃ 1 min进行40个循环扩增,在72℃进行荧光采集.根据荧光定量PCR熔解曲线出现特异性单峰,并对黄病毒属成员登革病毒和寨卡病毒的检测为阴性,表明该检测方法特异性高;检测阈值达302拷贝,显示敏感性好,重复试验的变异系数均小于0.1%,说明该实验设计稳定性良好.结论 基于该方法的试剂盒具有特异性好、灵敏度高、重复性好、能够快速定量等优点,有利于临床上基孔肯雅病毒的早期诊断,具有良好的应用前景.
-
国产与进口试剂盒在血小板抗体检测中的比较
目的 采用进口Sanquin血小板抗体检测试剂盒和长春博迅血小板抗体检测试剂盒同时进行血小板抗体检测,并对两种试剂盒检测结果进行比较.方法 选择血小板减少症患者(疑似原发性血小板减少性紫癜患者)及血小板输注无效患者共96例和20例健康对照组进行检测,两种试剂盒方法均为固相凝集法.结果 在96例患者中Sanquin血小板抗体检测试剂盒共检出阳性23例,阳性率为24%;国产长春博迅血小板抗体检测试剂盒共检出阳性24例,阳性率为25%.两种试剂盒检测结果进行比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 两种试剂盒检测结果基本一致.国产试剂盒相对价格实惠,更适合于基层医院进行批量标本的临床初筛试验.
-
末梢血快速检测HBV标志物5项指标
我国是乙型肝炎病毒感染的高发国家,有超过1亿的HBV携带者,HBV的慢性感染可导致肝硬化和肝癌[1].目前,乙型肝炎病毒标志物5项指标(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)检测已作为常规检测项目在临床中得到了广泛的应用,成为乙型肝炎诊断和评价的重要血清学标志.临床常用ELISA试剂盒检测HBV血清标志物,相对用血量多,需静脉采血,患者痛苦大,对老人、幼儿等不容易采血的患者是种负担,群众不易接受,也不利快速诊断.研究者用毛细血管采血法,采用免疫层析法HBV标志物检测试剂盒(乳胶法)快速检测乙型肝炎病毒标志物5项指标取得了良好的效果并与ELISA试剂盒检测结果作了对比,现报道如下.
-
国产丙型肝炎病毒抗体酶免检测试剂盒的质量评价
我国血站目前在抗HCV检验中,采用二种厂家的试剂进行初、复检,结果发现二次检验差异很大,造成血液的大量报废.为此,受医政司委托卫生部临床检验中心对此问题进行了调查.
-
氧合液复苏对失血性休克时脾脏TNF和IL-6生成的影响
研究表明,失血性休克与细胞因子反应密切相关,单纯失血性休克可引起细胞因子的产生和释放,且在复苏后休克诱生的细胞因子仍继续存在.细胞因子在休克过程中互相诱生,协同作用,对休克的发生发展具有重要影响.肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素(IL-6)是休克时释放的两种重要的细胞因子,其在休克发生中的作用已引起人们的高度重视,本文旨在观察失血性休克对脾脏与IL-6生成的影响及氧合液复苏的调节作用.1 材料和方法1.1 动物健康杂种家犬21只,雌雄不拘,体重10~20kg,全部购自甘肃省兰州市榆中县和平乡.1.2 试剂 TNF和IL-6检测试剂盒购自北京东亚免疫技术研究所,氧合液在临用前自行配制.
-
征兵体检尿液吗啡、冰毒检测结果分析
为保证兵役质量,杜绝吸毒人员进入部队.尿液吗啡(MOR)、甲基安非他明(MAMP俗称"冰毒")检测作为征兵体检的必检项目,去年我市应征青年691人,检测MOR/MAMP发现假阳性36例,经过再次复查,均呈阴性,现将结果报告如下.1 资料和方法1.1 一般资料去年应征入伍人员,男性,年龄17~22周岁.1.2 试剂与方法吗啡(MOR)、甲基安非他明(MAMP)联合检测试剂盒(胶体金法),上海凯创生物技术有限公司制造.严格按照试剂盒说明书操作,3~8min内读取结果,8min以后结果无效.
-
人心脏型脂肪酸结合蛋白检测试剂盒的临床评价
目的 评价人心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)检测试剂盒(胶体金法)在急性心肌梗死(AMI)诊断中的价值.方法 采用平行、盲法、对照的对比试验设计,比较其试验产品和对比产品对诊断AMI的敏感性、特异性、准确性.结果 共测定240份临床血液标本.试验产品和对比产品的阳性符合率为100%,阴性符合率为96.15%,总符合率为97.92%.对比产品和试验产品结果不一致的5例标本以临床诊断结果为标准进行验证后,试验产品与临床诊断结果的阳性符合率为100%,总符合率为100%.采用Kappa检验考核两种产品测定结果的一致性,Kappa 指数为0.958.经McNamara's test分析,两产品之间无差异,X2=3.20,P>0.05.结论 试验产品显示出较好的诊断价值,可以作为AMI早期诊断标志物,试验产品与对比产品等效.
关键词: 人心脏型脂肪酸结合蛋白 急性心肌梗死 胶体金 检测试剂盒 临床评价 -
Anti-HIV ELISA试剂间接法与双抗原夹心法的比较
由于艾滋病目前既无疫苗预防又缺乏有效的治疗手段,使艾滋病在全球范围内迅速蔓延,这就使诊断艾滋病的试剂质量水平显得尤为重要.一个好的方法首先要考虑简单、快速、准确.笔者试用国产第三代HIV酶免检测试剂盒,一段时间后,认为其有很大优势,完全能替代目前一直延用的间接法酶免试剂.
-
pSVPoMcat微基因修饰雪旺细胞移植对脊髓损伤 c-fos、bcl-2基因表达的影响
创伤性脑损伤的分子生物学研究机制已深入到基因水平,但在分子水平上对脊髓损伤(SCI)的探讨尚少。笔者旨在检测pSVPoMcat微基因修饰雪旺细胞(SC)移植对SCI后早期局部脊髓组织神经细胞中c-fos基因及bcl-2基因表达的影响,并初步探讨其意义。 一、材料与方法 健康SD大鼠80只,体重250~300g,雌雄不拘(由华西医科大学动物中心提供)。随机分为4组,pSVPoMcat微基因(在华西医科大学基础医学院重组DNA研究室构建)修饰的SC组为A组,SC组为B组,损伤组为C组,正常对照组为D组。用质量浓度为5 g/L的戊巴比妥钠麻醉动物后,采用笔者等[1,2]的方法,制备T8平面成鼠半横断损伤模型后将pSVPoMcat微基因修饰的SC、SC及明胶海绵分别移植入A、B、C组。移植术后8 h(SCI继发损害的高峰在伤后6~8 h)[3],迅速取伤段脊髓,D组取相对应(T8)脊髓。将上述标本随机分为甲、乙两组,每组分别含A、B、C、D各10只。用酸性异硫氨氰酸胍-酚-氯方法提取上述脊髓组织中的RNA。然后用地高辛标记探针进行斑点杂交,标记及检测试剂盒为Bohringer Manheim公司产品,c-fos探针和bcl-2探针分别购于北京华美公司及美国Sigma公司。
-
胞间黏附分子1在妊娠合并烧伤大鼠血清及胎盘中的表达
妊娠合并烧伤可引起流产、死产,也可引发早产且新生儿病死率较高[1].烧伤引起的炎症反应可使胎盘功能发生一系列改变,其中胞间黏附分子1( ICAM-1)在炎症与胎盘功能改变中起重要介导作用.本研究探讨ICAM-1在妊娠合并烧伤大鼠病理生理变化过程中的作用,通过监测血清与胎盘组织中ICAM-1表达水平,分析其与胎盘功能的关系.1 材料与方法1.1主要试剂与仪器总RNA提取试剂盒、反转录试剂盒购自美国Promega公司,血清ICAM-1检测试剂盒购自美国R&D Systems Inc公司.5804R型冷冻台式离心机购自德国Eppendorf公司,PTC-200型PCR仪购自美国MJ Research公司,DU-600型紫外分光光度计购自美国贝克曼库尔特公司,UVP凝胶图像分析系统购自英国EEC公司,Image J图像分析软件购自美国国立卫生研究院.
-
一种荧光PCR方法用于高危型HPV基因分型检测
目的:建立一种可以检测高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)的荧光PCR方法,为临床宫颈癌的筛查提供新的检测试剂盒.方法:选择高危型HPV的L1区基因序列作为靶序列,应用Primer Premier 5.0软件在选取的序列区域设计引物和探针,建立和优化该检测方法.通过评价其准确性、灵敏度和特异性,建立一种荧光PCR方法,用于高危型HPV基因分型的检测.结果:用HPV L1基因型质控品进行检测时,该试剂盒针对高危型HPV L1基因质控品均具有较好的阳性结果;检测灵敏度约为10~100拷贝·反应体系-1;低危型HPV L1基因质控品则为阴性结果,用正常人白细胞全基因组DNA进行检测时,没有HPV特异性扩增信号出现.结论:建立的高危型HPV基因分型荧光PCR检测方法具有良好的准确性、检测灵敏度和特异性,可以用于临床官颈癌的筛查.
-
绿原酸对Aβ引起的小脑颗粒细胞损伤的保护作用
目的:探讨绿原酸对淀粉样β蛋白(amyloid beta-protein,Aβ)引起的小脑颗粒细胞损伤的保护作用。方法:体外培养小脑颗粒细胞和腹腔巨噬细胞,将经过10μmol/L Aβ预处理48h的巨噬细胞上清液移入神经细胞中,同时加200μmol/L的绿原酸。培养2天后,采用MTT法、western bolt和乳酸脱氢酶检测试剂盒检测细胞活性、微管相关蛋白-2(microtubule-associated protein-2,MAP-2)表达水平和乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)漏出量。结果:将Aβ预处理的巨噬细胞上清液移入到单独培养的小脑颗粒细胞48h后,可使小脑颗粒细胞活性明显降低,仅为正常的28.35%,加入绿原酸后,细胞活性明显增加达到正常的75.82%(P<0.01)。而在正常培养的神经细胞+Aβ组中,小脑颗粒细胞仅有少许死亡。在加入巨噬细胞上清液的小脑颗粒细胞组中,MAP-2表达量明显下降,仅为正常培养组的31.23%,加入绿原酸后,MAP-2的表达量则显著回升(P<0.01),达到正常的79.77%。LDH漏出量明显增加,由402nkat/L增加到3046nkat/L,加入绿原酸后,可以使LDH漏出量明显下降,只有1285nkat/L。结论:①Aβ蛋白是通过激活巨噬细胞,使其释放毒性物质,从而引起神经细胞的损伤。②绿原酸对Aβ引起的神经细胞损伤具有保护作用。
-
AxB血型鉴定1例
ABO血型是临床医学中重要的血型系统.ABO血型鉴定在临床医学中非常重要.我院在临床患者ABO血型鉴定中发现1例样本正反定型不符,通过进一步血清学实验和分子生物学实验验证,确认为AxB亚型,现报告如下.1 材料与方法1.1 对象:丁某,女,28岁,汉族,宫外孕患者.1.2 试剂抗-A、抗-B、抗-A1、抗-A+B、抗-H血型定型试剂和人ABO血型反定型红细胞(上海市血液中心生物医药有限责任公司);DNA提取试剂盒(TBG公司);人红细胞ABO血型基因检测试剂盒Ⅰ(天津秀鹏,批号:1001).