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采用康宁 HYPERFlask?细胞培养瓶快速扩增人体脂肪干细胞
人脂肪干细胞(hASCs)是一种丰富、易得的多能成体干细胞[1]。尽管我们可获取大量吸脂术后的脂肪,但是细胞治疗所需的大量未分化存活细胞仍需要通过高效的体外扩增方法才能得到。例如,在一项旨在改善肌肉萎缩症,并以小鼠为模型的治疗实验中,我们在每月一次注射106个细胞时得到了阳性结果[2]。如果我们将其应用于人体,一个体重60 kg的人每月大约需要3×109个干细胞。我们试验了多种体外扩增方案,采用康宁 HYPERFlask?细胞培养瓶,我们能够生产大量用于研究的间充质干细胞,并开发出面向未来的细胞治疗手段。
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干细胞研究为制药业辟新径
干细胞这一概念自19世纪问世以来,已得到科学家越来越广泛的研究.干细胞分为两类:一类是胚胎干细胞,是有发育全能性的细胞,可以定向分化为几乎所有种类的细胞,甚至形成复杂的组织和器官,由此在药物开发、细胞治疗和组织器官替代治疗中发挥着重要作用,成为组织器官移植的新资源;另一类是成体干细胞,它是出生后遗留在机体各种组织器官内的干细胞.
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人脐带间充质干细胞对毛细支气管炎大鼠模型免疫调节作用
毛细支气管炎是一种婴幼儿时期以喘息发作为临床表现的疾病,日后易发展为支气管哮喘,有研究表明毛细支气管炎与哮喘有相似的免疫学发病机制。间充质干细胞( MSC)是一类具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞,目前研究多的主要是骨髓来源的间充质干细胞( BM-MSC ),人脐带来源的间充质干细胞( hUC-MSC )更易于制备以及低风险病毒感染,更重要的是hUC-MSC更具有免疫耐受性。本研究对 hUC-MSC对毛细支气管炎大鼠模型免疫调节作用做了初步研究。
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成人骨髓来源间充质干细胞对伴刀豆球蛋白A诱导小鼠免疫性肝损伤的影响
间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一群来自中胚层的具有强大自我更新和分化潜能的成体干细胞,因其兼具可跨越个体及种属的免疫调节特性,而在组织再生及免疫损伤修复领域被视为重要的种子细胞[1].
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干细胞移植治疗与重要脏器功能的修复与重建
干细胞(stem cells, SCs)是具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的细胞,通过分裂维持自身细胞群的大小,同时又可分化成为各种不同的组织细胞,从而构成机体各种复杂的组织器官[1]。根据干细胞所处的发育阶段分为:胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs);成体干细胞(somatic stem cells,SSCs)。人体几乎所有组织都存在经历相当程度的分化SSCs,但在特定条件下,一种组织的SSCs可以“横向分化”成其他组织的功能细胞,如间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)可以分化成神经、肌肉、软骨和骨等多种细胞[2]。MSCs属于中胚层的一类多能干细胞,主要存在于结缔组织和器官间质中,以骨髓组织中含量为丰富,且主要来源于骨髓,又称为骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)。Friedenstein等[3]于1976年首先分离BMSCs,研究证实BMSCs具有强大的增殖能力和多向分化潜能、免疫调节及免疫重建功能,并且来源方便,易于分离、培养、扩增和纯化,经多次传代扩增后仍具有干细胞特性,不存在免疫排斥。因此,BMSCs可能成为细胞移植和基因治疗的理想材料,目前国内外正在探索用于神经系统疾病及多领域多学科难治性疾病的治疗,并已取得了重大突破性进展[4-6]。我国MSCs的研究发展极为迅速,某些核心技术已占国际领先地位,2001年国家批准建立“国家干细胞工程产品产业化基地”,2002年4月在天津建立“国家干细胞工程技术研究中心”。
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神经干细胞在脑性瘫痪中的临床应用
对于干细胞的研究在20世纪末生命科学发展进程中占有举足轻重的地位,在推进医疗事业的发展和某些疾病的诊治方面具有重要的现实意义和研究价值.依据发育阶段的差异,干细胞可分为胚胎干细胞和成体干细胞.
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脂肪干细胞的基础研究及在泌尿外科的应用进展
脂肪源性干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)是从脂肪组织中分离出的具有多方向分化能力的成体干细胞。在以往的医学研究领域中,骨髓基质干细胞( bone marrow derived stem cells,BMSCs)一直是成体干细胞中热门的一个研究热点,但由于其具有来源较少,提取困难,提取过程对患者痛苦较大等诸多缺点,极大地限制了其在临床的应用。直到2001年,Zuk等[1]通过吸脂手术第一次从人体的脂肪中提取分离并获得了可在一定条件下分化为肌肉、软骨、脂肪、表皮,造血、神经等多种组织的ADSCs。而De Ugarte等[2]发现ADSCs与BMSCs在细胞形态、生长动力学、细胞衰减、多向分化能力及基因转导能力等方面基本相似。而ADSCs相对BMSCs具有取材方便,难度较小,对患者创伤痛苦较低的优点。因此, ADSCs已成为新的成体干细胞的研究热点。
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干细胞与糖尿病肾病相关研究进展
糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是导致终末期肾衰竭(end-stage renal disease,ESRD)的主要原因,也是糖尿病患者的主要死亡原因之一.DN一旦出现临床蛋白尿(尿蛋白>0.5 g/24 h),就会不断进展,肾小球功能将呈进行性不可逆转地下降.美国Joslin临床研究显示糖尿病患者发生蛋白尿的平均病程为17年,出现蛋白尿后平均生存期为10年左右,终都将进入ESRD[1].DN的治疗已经成为全世界糖尿病和DN界的关注热点,但目前临床尚无有效的治疗手段能够阻止DN的发生和进展.干细胞是在动物胚胎和成体组织中具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的干细胞.它在一定条件下可以分化为多种功能的细胞.目前试验研究中和肾脏相关的干细胞主要有胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)、成体干细胞,后者又泛指包含了间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)、内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPC)、诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,IPS)等多种类型干细胞.随着干细胞医学、再生医学等学科的发展,DN的治疗也有了一个全新的思路.目前有关干细胞治疗DN的报道较少,本文将对干细胞治疗DN的相关研究进展作如下综述.
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骨髓间充质干细胞在临床医学中的应用
骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,MSC)是存在于骨髓中的具有高度自我更新能力和多相分化潜能的成体干细胞,又称骨髓基质干细胞、间充质祖细胞,由于取材容易、培养简便、多相分化及应用前景广泛等特点成为干细胞中研究的热点,在医学各个领域都具有研究和应用价值,目前已在多个临床科室中应用.本文对MSC在临床医学中的应用做一综述.
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应用骨髓间充质干细胞修复皮肤损伤的研究进展
机体在受到创伤刺激时,骨髓间充质干细胞会向受损部位聚集,并能够向该受损器官的组织细胞转化,从而修复受损的组织.在异体移植时,骨髓间充质干细胞的免疫抑制作用能够延长移植物的存活时间.体外实验证实人的骨髓间充质干细胞的增殖和分化潜能不受年龄因素的影响,因此我们可以在一个很宽的年龄范围内抽取自体骨髓间充质干细胞在体外扩增后进行自体移植,扩大了成体干细胞自体移植的年龄应用范围.
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脂肪组织来源干细胞的研究进展
间充质干细胞(MSCs)[1-3]是一类具有自我更新和多向分化潜能的成体干细胞,在组织修复和再生的过程中起着非常重要的作用。MSCs可在体外进行培养扩增,在应用激素或生长因子的适当培养条件下可分化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞、神经细胞以及肌肉细胞等多种组织细胞[4-7]。MSCs可以从多种组织器官中分离出来,如骨髓、脐带血和脂肪[8]。其中,骨髓间充质干细胞(BMSC)是研究较多的一种成体干细胞,但因其取材时对机体的创伤较大,而且骨髓中干细胞的比例要比脂肪中含量少。而脂肪组织来源干细胞(adipose tissue-derived stem cells,ADSCs),因其来源广泛、取材方便、给患者带来的损伤小,而且脂肪组织中的干细胞含量丰富、细胞增殖快、免疫原性低等优点而日益受到研究者的重视。
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骨髓间质干细胞的研究现状及其在肝衰竭治疗中的应用
骨髓间质干细胞(bone marrow mesenchy stem cell,BMSC)是存在于骨髓中的二种多能干细胞之一,本身没有造血功能,是具有高度自我更新能力和多向分化潜能的成体干细胞,在体外不同的诱导条件下可分化为骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌腱、肌肉细胞、神经细胞等多种细胞.
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成体干细胞可塑性及对肝脏的重建作用
成体干细胞有多向分化潜能,可以横向分化为不同类型的特化细胞,甚至逆分化为更原始的干细胞.本文介绍了近年来成体干细胞"横向分化"潜能、分化机制,对成体干细胞横向分化为肝脏细胞的研究进展及存在问题进行了讨论.
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干细胞在心肌梗死治疗中的研究进展
细胞移植治疗的出现为众多心衰患者带来了新的希望,干细胞是主要的细胞来源.胚胎干细胞能分化为真正的心肌细胞,是心肌修复治疗中一种理想的细胞来源,但其受免疫和伦理学方面的限制;成体干细胞作为自体细胞移植治疗对研究者来说则具有很大的吸引力,但其分化潜能则不如胚胎干细胞.目前,用于基础研究和临床试验的成体干细胞主要来源于骨髓,且认为只有骨髓间充质干细胞能分化为心肌细胞.本文主要讨论了不同干细胞移植在受损心肌修复治疗中的作用.
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成体干细胞来源胰岛素分泌细胞的研究概况
通过胰腺或胰岛移植补充体内的β细胞,是糖尿病患者获得稳定血糖水平的佳办法.但胰腺或胰岛移植面临供体缺乏和免疫排斥两大难题.干细胞可通过体外扩增和诱导分化获得充足的胰岛细胞,为移植提供丰富的细胞来源,并可通过基因修饰减轻或抑制排斥反应,因此干细胞成为糖尿病治疗的研究热点.
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老年成体干细胞的研究现状
干细胞是一类具有不同分化潜力的细胞群体的总和[1].干细胞存在于整个生命过程中,根据其发育阶段,干细胞分为胚胎干细胞(embryonic stemcell)和成体干细胞(adult stem cell),胚胎干细胞的增殖和分化是个体发育的基础,而成体干细胞的增殖和进一步分化则维持个体组织细胞损伤的修复和再生.
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三七通舒在大鼠脑缺血耐受和自体神经干细胞增殖中的作用
目的 明确缺血预处理(IPC)及中药三七三醇皂苷(PTS)对大鼠脑梗死后7d脑海马区自体神经干细胞增殖、神经行为学评分,以及δ阿片受体(DOR)、Bax和Bcl-2 mRNA表达水平的影响. 方法 采用二次线栓法建立局灶性SD大鼠脑缺血耐受动物模型.80只SD雄性大鼠随机分为:假手术(Sham)组、缺血(MCAO)组、假手术+缺血(Sham+ MCAO)组、预缺血+缺血(IP+MCAO)组、三七三醇皂苷-缺血(PTS+ MCAO)组.每组取10只行BrdU荧光标记细胞免疫组化染色,另6只行荧光定量PCR测定DOR、Bax、Bcl-2 mRNA水平.大鼠在处死前1d予腹腔注射BrdU.采用Zea-Longa评分方法对大鼠脑梗死后7d进行神经行为学评分,运用荧光免疫组织化学技术检测大鼠脑缺血侧海马区BrdU标记阳性细胞数量. 结果 SD大鼠脑梗死后7d,Zea-Longa神经行为学评分MCAO、Sham+ MCAO两组与IP+ MCAO、PTS+ MCAO间均差异有统计学意义(P<0.01),而MCAO和Sham+ MCAO组间、IP+ MCAO和PTS+ MCAO组间差异无统计学意义(P>0.05).SD大鼠脑梗死后7d,缺血侧海马区BrdU标记阳性细胞Sham、MCAO、Sham+ MCAO3组与IP+ MCAO、PTS+ MCAO间均有差异(P<0.01);而MCAO和Sham+MCAO组间、IP+MCAO和PTS+ MCAO组间差异无统计学意义(P>0.05).IP+ MCAO组,DOR、Bcl-2 mRNA的表达水平明显高于MCAO、Sham+ MCAO和PTS+ MCAO组(P<0.01),而Bax mRNA的表达水平明显低于MCAO、Sham+ MCAO和PTS+ MCAO组(P<0.01).MCAO、Sham+ MC AO和PTS+ MCAO3组间差异无统计学意义(P>0.05). 结论 IPC可促进大鼠脑梗死后海马区成体神经干细胞增殖,并能改善其神经功能缺损症状;IPC可促使DOR、Bcl-2 mRNA水平的上调,并降低BaxmRNA的表达水平;PTS可改善大鼠脑梗死后的神经功能缺损症状,促使大鼠海马齿状回颗粒成体神经干细胞增殖,但对DOR、Bcl-2、Bax mRNA表达水平无影响.
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骨髓干细胞再生心肌研究进展
干细胞是具有潜在分化能力的细胞,根据干细胞的来源可分为两类 ,胚胎干细胞(embryonic stemcells,ES)和成体干细胞(adult stem cells, AS).机体内几乎所有的组织都包含有干细胞,其中骨髓干细胞以其取材方便、体外易培养扩增成为具临床应用前景的干细胞之一[1].已有的研究证实,将骨髓干细胞移植到受损心肌,可以增强心肌收缩力,改善心脏功能.其作用机制不明,存在横向分化(transdifferation)或细胞融合(cell fusion)[2]等多种争论.现就骨髓干细胞再生心肌的研究进展作一综述.
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干细胞的临床应用研究进展
干细胞(stem cells)是一类具有自我复制(self-renewing)能力的多潜能细胞,在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞.根据其发育阶段,干细胞可分为胚胎干细胞和成体干细胞.胚胎干细胞的分化和增殖构成个体发育的基础,即由单个受精卵发育成为具有各种组织器官的个体;而成体干细胞的进一步分化则是成体组织和器官修复再生的基础[1].当受精卵分裂发育成囊胚时,将内细胞团(inner cell mass)分离出来进行培养,在一定条件下,这些细胞既可在体外“无限期”的增殖传代,同时还保持其分化的全能性,因此被称为胚胎干细胞(embryonic stem cells, ES细胞).胚胎动物生殖嵴部位的胚芽细胞(embryonic germ cells, EG细胞)同样具有自我复制和分化成各种功能细胞的能力,因此也隶属于胚胎干细胞.1998年,美国科学家Thomson等[2]和John Gearhart分别用人ES和EG细胞建立了胚胎干细胞系,为研究胚胎干细胞的发育和利用胚胎干细胞治疗疾病提供了广阔的空间[3].
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内源性心脏干细胞的研究进展
缺血性心脏病及其终表现心力衰竭是目前主要死亡原因.对心力衰竭治疗只能延缓疾病的进展,不能逆转其恶化.近期关于心力衰竭治疗的方向主要集中在如何用健康心肌细胞取代受损心肌细胞,诱导血管生成及寻找佳的胚胎或成体干细胞取代受损细胞.