首页 > 文献资料
-
MTHFR基因C677T突变与脑梗死的相关性研究
近年来许多研究表明,高同型半胱氨酸(Hcy)血症是脑血管疾病的独立危险因素[1].亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)是Hcy代谢的重要酶,编码此酶基因的C677T突变可产生不耐热的MTHFR,致酶活力下降,Hcy水平升高.但对于MTHFR基因C677T突变是否与脑血管疾病相关则矛盾重重.认为MTHFR-T纯合子是动脉疾病的危险因素和认为MTHFR基因突变并非脑血管疾病的危险因素两种对立观点相持不下.本实验旨在探讨在华东汉人中MTHFR基因C677T突变是否与脑梗死的发生相关.
-
利用错配PCR鉴别小片段缺失的纯合子与野生型斑马鱼
目的:利用错配PCR鉴别小片段缺失的纯合子与野生型斑马鱼.方法:将突变型斑马鱼杂合子F1杂交,收集胚胎裂解获得粗基因组模板,进行第1次PCR基因分型,经凝胶电泳后确认,对单条带产物的模板进行第2次PCR基因分型(利用错配PCR引物),再次经凝胶电泳检测.结果:利用错配PCR引物进行基因分型,纯合子PCR产物为单一条带,而野生型PCR产物无条带.结论:该方法稳定可靠,省时省钱,可用于小片段缺失的纯合子与野生型斑马鱼的鉴别.
-
普罗布考抗动脉粥样硬化发生机制的研究
动脉粥样硬化(AS)是由多种遗传及环境因素参与的慢性炎症免疫反应性疾病[1-4],是心脑血管事件发生的病理学基础,目前动脉粥样硬化的发病机制尚未阐明.普罗布考对非家族性高胆固醇血症和家族性纯合子及杂合子型高胆固醇血症均有明显的降低作用,后因其可降低高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平及延长QT间期使其临床应用受到限制,以往观点认为HDL-C水平与冠心病风险呈负相关,HDL-C是预测心血管事件发生率的重要指标,但近十几年通过基础和临床试验研究发现HDL-C水平并不能完全代表高密度脂蛋白(HDL)功能,HDL的功能可能比其水平更重要[5].
-
孕妇ABO血型血清抗体产前诊断的临床意义
新生儿溶血病(HDN)是发生在胎儿和早期新生儿的一种自限性免疫溶血性疾病.该病由母婴血型不合引起,常导致早期流产.妊娠妇女除常规产前检查外,应进行ABO和RH血型检查,不规则抗体筛选.另外,配偶也要检查相关的血型抗原.特别是配偶基因纯合子,且孕妇有过流产史,HDN史,应当密切监测与孕妇体内血清抗体水平.笔者针对前来本院门诊就诊的189例孕妇进行ABO、HDN血型血清学检查.现报告如下.
-
β-地中海贫血纯合子一例及其家系分析
目的检测1例地中海贫血患儿及其家系的血红蛋白中珠蛋白链和HbA2,并区分其所属地中海贫血类型.方法采用高效液相层析法检测β-地中海贫血患儿及其家系的珠蛋白链;用微型DE-52 柱层析方法检测家系的HbA2.结果患儿缺乏β-珠蛋白链并检出AγT变异体;其父母的HbA2 高于正常人.结论该患儿为β-地中海贫血纯合子,其父母为β-地中海贫血基因携带者.
-
长治地区红细胞不规则抗体筛选细胞的建立
目的 对200例O型献血者进行稀有血型抗原鉴定与筛选,建立适用于本地区的抗体筛选细胞.方法 对所有标本进行ABO血型、稀有血型抗原的检测,根据筛查的结果,选出2~3份抗原表位广,而且通过互补覆盖长治地区可能出现的稀有血型抗原的O细胞组成抗体筛选细胞.结果 本次共制备2组筛选细胞,均覆盖了D、C、E、c、e、JKa、JKb、M、N S、s、、Fya、ryb、k、lea、Leb、P1、Lub等抗原.结论 本次制备的抗体筛选细胞不仅覆盖了长治地区可能出现的抗原,而且与商业筛选细胞相比有漏检抗体少、不易漏检低效价抗体等特点,更适合用于长治地区抗体筛选.
-
家族性高胆固醇血症纯合子患者低密度脂蛋白受体缺陷的研究
目的:研究家族性高胆固醇血症纯合子患者的发病机理.方法:在临床研究和家系调查的基础上,培养患者皮肤成纤维细胞,采用放射性配体结合受体分析技术研究其低密度脂蛋白受体.结果:患者低密度脂蛋白受体对低密度脂蛋白的高亲和性结合为正常人的78.2%,高亲和性内移和降解则分别为正常人的3.6%和1.7%.结论:本例家族性高胆固醇血症纯合子患者的发病机制为低密度脂蛋白受体内移功能障碍.
-
β-地中海贫血基因突变型与益髓生血颗粒疗效相关性
目的 探讨β-地中海贫血基因突变型与益髓生血颗粒疗效的相关性.方法 收集β-地中海贫血47例.男28例,女19例;年龄3~15岁.其中重型β-地中海贫血34例,中间型13例.均检查血液学指标及行血红蛋白电泳,基因分析采用PCR反向斑点杂交技术,治疗采用益髓生血颗粒10 g/次,3次/d,3个月为1个疗程,疗程结束进行疗效评价.结果 47例β-地中海贫血中有7种β基因突变类型.其中复合血红蛋白E(HbE)占18例;中药治疗后43例临床症状明显改善,Hb、RBC、网织红细胞(Ret)及胎儿血红蛋白(HbF)值均增高,治疗前后比较差异显著(Pa《0.01).其中β0-纯合子21例中17例有效,β0与β+双重杂合子7例、β-地中海贫血与HbE杂合子18例、1例β+纯合子均有效.结论 益髓生血灵颗粒治疗β-地中海贫血有较好疗效.
-
β0纯合子β地中海贫血基因分析及益髓生血颗粒治疗的效果
目的 探讨β0纯合子β地中海贫血的基因突变类型及使用中药益髓生血颗粒(CTM)治疗的临床效果.方法 采用反向斑点杂交技术进行基因检测诊断为β0纯合子β地中海贫血21例.男13例,女8例;年龄4~16岁,平均9.5岁.应用CTM治疗,10 g/次,3次/d,3个月为1个疗程.结果 21例患儿有5种基因突变类型,其中密码子41-42(-TTCT)框架位移多,占52%.经治疗后症状改善,Hb、RBC、Ret及胎儿血红蛋白(HbF)值均有增高,治疗前后比较差异显著(Pa<0.01).结论 CTM治疗β0纯合子β地贫有一定效果.
-
近亲婚配十一个家系调查
当今世界人口有60多亿,耳聋患儿约占1‰,约50%的患儿与遗传有关….在近亲结婚人群中,耳聋患者多为隐性等位基因的纯合子.为预防近亲婚配致残,现将1990~1998年间就诊的3 200名聋儿中近亲婚配十一个家系调查报告如下:
-
早发动脉粥样硬化——家族性高胆固醇血症的基础与临床研究
冠心病是严重危害人类健康的重要疾病,家族性高胆固醇血症(FH)是以血浆胆固醇水平大幅度增高、多部位皮肤肌腱黄色瘤和早发冠心病为特点的遗传代谢性疾病,纯合子发生率为百万分之一,儿童期即可因严重的冠心病而死亡;杂合患者发生率为1/500,在早发心肌梗死患者中占5%,我国大约有2 600 000例潜在患者,20~40岁间冠心病的危险性增加约100倍.给社会带来严重危害.目前我国缺乏适合于临床应用的基因筛查方法,若按照临床诊断标准仅能预测出大约1/4的FH病例,大多数患者直到中年才能得到确诊,失去早期治疗机会.
-
CYP2C19基因多态性对幽门螺杆菌感染酸相关性疾病治愈率的影响
细胞色素P450(CYP450s)的同工酶有14种之多(CYP1-14),其基因多态性与药物代谢及其疗效密切相关.与质子泵抑制剂(PPI)代谢相关的P450同工酶主要为肝脏微粒体中的CYP2C19和CYP3A4.CYP2C19基因多态性对酶活性的影响显示基因剂量效应,表现为野生型纯合子(homEM)高于野生型杂合子(hetEM),更高于突变等位基因纯合子(PM).PPI联合阿莫西林、克拉霉素或甲硝唑等抗生素组成的三联疗法治疗幽门螺杆菌(HP)感染酸相关性疾病的疗效与CYP2C19遗传多态性有关.
-
应用PCR测定Cx43转基因小鼠的基因型
目的:应用聚合酶链反应(PCR)技术,检测Cx43(connexin 43)转基因小鼠的基因型.方法:采用CMV43转基因小鼠和Cx43剔除小鼠分别与野生型小鼠杂交繁殖,切取子代小鼠尾巴制备DNA,应用PCR技术扩增DNA,观察目的基因的阳性率.结果:CMV43转基因小鼠子代66个,dhfrPCR检测阳性率为31.8%.Cx43基因剔除小鼠子代21个,分别与Cx43野生型引物和Cx43剔除引物进行PCR,两者均阳性(+/+)12个,百分率为57.1%,前者阳性而后者阴性(杂合子+/-)7个,百分率为33.3%,两者均阴性(纯合子-/-)2个,百分率为9.6%.野生型小鼠经Cx43野生型引物PCR检测结果均为阳性.结论:PCR技术用于Cx43转基因小鼠基因型的检测敏感度高,特异性强,易操作,可用作Cx43转基因小鼠心血管畸形模型研究的初选方法.
-
应用优化银染测序法鉴定HLA-DQA1*0102/*0102纯合子
聚合酶链式反应-序列特异引物(polymerase chain reaction-sequence specific primer,PCR-SSP)技术是目前临床上或科研工作中较为常用的基因分型方法,尤其在人类白细胞抗原(HLA)基因的分型中更是被广泛使用.然而,与其它分型方法一样,PCR-SSP亦无法回避所谓"空白基因"问题.如果在分型过程中出现过多的"空白基因",势必影响某个等位基因频率的统计,进而影响到整个结果的可靠性.对于"空白基因",目前多采用DNA序列测定加以确定到底是等位基因纯合子或存在新的突变,有的学者也结合使用PCR-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法来进行确认[1].我们在用PCR-SSP为109名广西巴马县壮族长寿老人及71名对照组进行HLA-DQA1座位进行基因分型过程中,发现了33个HLA-DQA1*0102/-个体,经本实验室优化的DNA直接银染测序法[2]进行序列测定,终确定这些个体均为HLA-DQA1*0102/*0102等位基因纯合子.
-
益髓生血灵治疗儿童β地中海贫血/血红蛋白E综合征14例的临床观察
β地中海贫血(β地贫)在我国南方发生率较高,广西高达1.525%.血红蛋白E(HbE)在我国长江以南地区发生率也较高,广西少数民族京族发生率0.39%、毛南族0.1%、苗族0.075%、壮族0.4%.因此,β地贫与HbE复合并不少见.HbE杂合子临床无贫血表现,纯合子只有轻微贫血也无需治疗,而HbE与β地贫复合体时,其临床表现和不同类型β地贫同样严重.我们根据中医传统思维肾主骨,骨益髓的观点,拟定中药益髓生血灵治疗(由中国中医研究院广安门医院提供),并用西医诊断和用现代方法观察疗效机理,现将所治疗β地贫/HbE综合征14例报告如下.
-
改良高铁血红蛋白还原定量试验
高铁血红蛋白还原定量试验能大致确定患者G6PD缺乏程度(纯合子或杂合子),对于优生优育及疾病的防治比定性试验有着更为重要的意义.但该法的敏感性较差.经改良后的高铁血红蛋白还原定量试验具有简便快速,试剂稳定性好,准确性好,更适应于临床检验工作的需要.
-
一个Gly341Arg纯合突变所致遗传性FⅫ缺陷症近亲婚配家系的分析
目的 对一个姨表近亲婚配的遗传性凝血因子Ⅻ(coagulation factor FⅫ,Ⅻ)缺陷症家系进行实验室表型和FⅫ基因突变的分析,探讨其分子发病机制.方法 检测先证者及9名家系成员活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)等凝血常规功能、FⅫ活性(FⅫactivity,FⅫ∶C)和FⅫ抗原(FⅫantigen,FⅫ∶Ag)含量,进行表型诊断;用DNA直接测序法分析先证者FⅫ基因所有14个外显子、侧翼、5'和3'非翻译区及家系成员相应的突变位点区域,用反向测序证实突变.采用ClustalX-2.1-win软件分析突变氨基酸的保守性,并同时采用4个生物信息学评分软件(PolyPhen-2,PROVEAN,SIFT和MutationTaster)分析突变对蛋白质功能的影响.结果 先证者(Ⅳ2)和哥哥(Ⅳ1)APTT明显延长(分别为61.6s和68.6s),FⅫ∶C和FⅫ∶Ag分别降低为12%、10%和11%、10%;先证者祖母(Ⅱ2)、外祖母(Ⅱ3)、父亲(Ⅲ2)、母亲(Ⅲ6)、大姑(Ⅲ1)和大姨(Ⅲ5) APTT正常,FⅫ∶C和FⅫ∶Ag均降低约为正常值的一半;先证者小姑(Ⅲ3)和大舅(Ⅲ4)各项指标及家系成员其它指标均正常.基因测序发现先证者(Ⅳz)和其哥哥(Ⅳ1)FⅫ基因第10外显子存在c.1078G>A(p.Gly341Arg)纯合错义突变;先证者祖母(Ⅱ2)、外祖母(Ⅱ3)、父亲(Ⅲ2)、母亲(Ⅲ6)、大姑(Ⅲ1)和大姨(Ⅲ5)均存在p.Gly341Arg杂合错义突变;先证者小姑(Ⅲ3)和大舅(Ⅲ1)为正常野生型.ClustalX-2.1-win软件保守性分析结果表明,Gly341在同源物种间高度保守.4个生物信息学软件对该突变的预测结果一致:PolyPhen-2评分(0.934分)、PROVEAN评分(-6.214分)均预示为有害突变;MutationTaster评分(0.976分)预示可引起相应疾病;SIFT评分(0.01分)预示可影响蛋白质功能.结论 Gly341Arg纯合错义突变是该家系遗传性FⅫ缺陷症的分子发病机制,与先证者父母近亲结婚有关.
-
恶性高脂血症患儿父母载脂蛋白CⅡ的基因分析
载脂蛋白CⅡ(apolipoprotein CⅡ,apoCⅡ)是一含有79个氨基酸的载脂蛋白,其生理作用为甘油三酯代谢中脂蛋白脂酶(liporotein lipase,LPL)的激活物[1].1964年Hegberg等[2]首次报道的一种罕见的临床综合征,发生于1个家系两例,命名为婴儿恶性高脂血症.1973年Jacken等[3]报道了第3例.据数据库光盘检索显示,到目前为止,未发现新的病例及相关报道.我们的前期工作对这例患儿临床表现及家系进行了分析[4],其父母apoCⅡ浓度均在正常值半量以下,考虑到其父母同村同姓、血缘关系较近,初步推测患儿为apoCⅡ缺乏纯合子.我们利用DNA序列分析技术对患儿父母apoCⅡ基因进行分析,以期在分子水平上揭示恶性高脂血症的发病机理.
-
家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体基因的新变异
家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemia, FH)的早报道见于1938年,其临床表现为:血胆固醇、尤其是低密度脂蛋白(low density lipoprotein, LDL)胆固醇明显增高,皮肤及跟腱黄色瘤和早发冠心病.1974年,Goldstein和Brown[1]发现了成纤维细胞表面的低密度脂蛋白受体,并由此阐明了FH的发病机理在于编码LDL受体的基因发生了突变,引起LDL受体功能异常.我们对1例FH纯合子进行了研究,发现了2个新的点突变.
-
088.1例接种白喉-百日咳-破伤风疫苗后并发自身免疫性溶血性贫血患者接受MK纯合子RBC支持治疗