中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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自体干细胞移植治疗严重下肢缺血
背景：严重下肢缺血是周围血管疾病中难于治疗的疾病，自体干细胞移植方法的运用可以为该病的治疗带来一定的希望。
目的：总结自体干细胞移植治疗严重下肢缺血的发展近况，探讨其机制及存在的问题。
方法：以“干细胞，移植，严重下肢缺血”，“stem cell，transplant，critical limb ischemia”为检索词，检索时间1990年1月至2013年3月，检索数据库：万方数据库、中国知网和Pubmed数据库，纳入与自体干细胞移植治疗严重下肢缺血疾病方面的相关研究，排除与研究无关和重复文献，保留47篇文献进行综述。
结果和结论：对于严重下肢缺血的自体干细胞移植治疗，干细胞类型、数量、分离方式，是否有细胞因子的刺激都可能影响治疗效果，自体干细胞移植治疗严重下肢缺血是一全新治疗手段，疗效显著，但是自体干细胞如何长期维持治疗效果其机制尚不清楚，尚需进一步研究和探讨。 -
中药干预干细胞移植治疗脑血管病
背景：干细胞在适当条件下可诱导分化为神经样细胞，中药对细胞增殖分化会有一定的影响。
目的：探讨不同中药对干细胞移植治疗脑血管病的实验研究。
方法：通过数据库检索的方式分析中药干预干细胞移植治疗脑血管病的实验研究。在体外特定的条件下，干细胞以悬浮成球或单层贴壁的方式增殖，具有可以诱导分化为神经元、少突胶质细胞和星形胶质细胞的潜能，为干细胞移植治疗脑血管病提供可能。通过检测神经细胞标志物巢蛋白、胶质纤维酸性蛋白、微管相关蛋白等表达来分析干细胞的增殖分化。
结果与结论：黄芩苷或黄芪皂甙Ⅳ等中药可以促进干细胞在体外向神经细胞分化。脑脉通或丹参等中药联合骨髓间充质干细胞移植可以促进脑血管病大鼠神经功能的修复。补阳还五汤能显著促进脑缺血后室下区神经干细胞增殖和神经功能恢复。中药在干预干细胞治疗帕金森病的多巴胺能神经元方面可以提高移植细胞的存活率，防止大部分细胞发生凋亡，如止颤汤、三七总皂甙等。益气升阳法或人参皂苷Rg1等联合干细胞治疗痴呆大鼠可以良好改善记忆能力。干细胞经过中药诱导干预后会对脑血管病起到促进治疗的作用。 -
人脐带间充质干细胞腹腔移植治疗急性肝损伤大鼠
背景：体外实验证实人脐带间充质干细胞可诱导成肝样细胞，故认为其可能具有肝脏修复功能。
目的：进行动物体内实验，观察人脐带间充质干细胞移植治疗大鼠急性肝损伤的效果。
方法：将健康SD大鼠随机分为3组，正常对照组不造模，细胞移植组和PBS组腹腔注射体积分数10%CCl4橄榄油溶液制造急性肝损伤模型后24 h，分别经腹腔移植人脐带间充质干细胞悬液0.5 mL和等量PBS。
结果与结论：苏木精-伊红染色显示，CCl4腹腔注射24 h后大鼠肝脏出现急性肝损伤的病理变化，细胞移植后7 d时肝脏结构完全恢复正常，PBS组14 d才恢复正常肝脏组织结构。与正常对照组相比，其他2组大鼠血清丙氨酸转氨酶及天门冬氨酸转氨酶均明显升高(P<0.05-0.01)；人脐带间充质干细胞移植后3 d，大鼠血清2种转氨酶水平较PBS组明显降低(P<0.05-0.01)；7 d后均降至正常水平。移植后第3天肝脏组织内可见抗人核蛋白抗体阳性细胞分布于汇管区，第7天抗人白蛋白抗体的阳性表达。提示经鼠腹腔移植人脐带间充质干细胞后可以在一定程度上改善肝功能及修复受损的肝组织。 -
人胎盘来源间充质干细胞移植促进肌腱移植物在骨隧道内的愈合
背景：研究表明，人胎盘来源间充质干细胞来源广泛，增殖能力强，其移植对腱-骨愈合有明显的促进作用。
目的：进一步验证人胎盘来源间充质干细胞对骨-肌腱结合处愈合的影响。
方法：采用贴壁分离筛选法获取人胎盘来源间充质干细胞。30只雄性SD大鼠随机分为2组各15只。建立大鼠骨-肌腱损伤模型，实验组在骨-肌腱结合面注入人胎盘来源间充质干细胞，对照组只注入生理盐水。
结果与结论：实验组人胎盘间充质干细胞移植后2，4，6周显微镜观察在腱骨界面有干细胞存在并有较多血管组织再生，并且有部分纤维软骨增生。在移植后4，6周实验组大拔出载荷显著高于对照组(P <0.05)。说明人胎盘来源充质干细胞可以促进骨-肌腱结合部的早期愈合，提高其生物力学强度。 -
人脐带间充质干细胞防治新生大鼠急性肺损伤的作用
背景：研究发现间充质干细胞对成年动物急性肺损伤具有一定的防治作用。
目的：进一步验证人脐带间充质干细胞对内毒素所致的新生大鼠急性肺损伤的防治作用。
方法：选取7 d龄新生SD大鼠120只，随机分为3组。模型组和干细胞组大鼠腹腔注射内毒素3 mg/kg建立新生鼠急性肺损伤模型；生理盐水组大鼠腹腔注射0.1 mL生理盐水。30 min后干细胞组腹腔注射0.1 mL人脐带间充质干细胞(1×106)，生理盐水组和模型组大鼠腹腔注射等量生理盐水作对照。分别于6 h、1 d、2 d、4 d、7 d留取新生大鼠肺组织及血清标本，观察肺组织病理变化，ELISA方法测定血清中肿瘤坏死因子α及白细胞介素10的浓度及肺组织中髓过氧化物酶活性。
结果与结论：肺组织苏木精-伊红染色及髓过氧化物酶活性均提示模型组呈急性肺损伤改变，干细胞组造模后4 d及7 d时肺损伤比模型组轻。与模型组比较，干细胞组的抗炎因子白细胞介素10水平显著升高，而促炎因子肿瘤坏死因子α则明显减低，差异有显著性意义(P<0.05)。说明用人脐带间充质干细胞早期细胞干预新生 SD 大鼠急性肺损伤，可以减轻肺部炎性病变，其主要机制可能为人脐带间充质干细胞通过免疫调节，平衡抗炎因子及促炎因子的表达，减轻肺损伤。 -
外源性硫化氢预处理骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠心肌梗死
背景：骨髓间充质干细胞移植可促进心肌修复，治疗心肌梗死，但移植后细胞存活率低等原因制约了其应用与发展。
目的：探讨硫化氢预处理对骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死效果的影响。
方法：从(100±20) g SD大鼠中分离培养骨髓间充质干细胞，第4代时按实验分组处理，移植前2 h给予DAPI标记。将50只体质量(200±20) g雄性SD大鼠分为心肌梗死组和假手术组，心肌梗死组结扎冠状动脉前降支建立心肌梗死模型，假手术组只穿线不结扎，每组10只。模型建立24 h后，分组在梗死心肌周围选择4个点，分别注射生理盐水、骨髓间充质干细胞、硫化氢预处理骨髓间充质干细胞及硫化氢。细胞移植4周后用超声心动图检测心功能指标，Masson染色测定梗死交界区胶原。
结果与结论：生理盐水组大鼠心肌纤维化严重，梗死区域无心肌组织再生；外源性硫化氢处理后的骨髓间充质干细胞移植组比单用硫化氢或者骨髓间充质干细胞组心肌纤维化程度轻，胶原组织中可见较多心肌细胞再生。硫化氢预处理骨髓间充质干细胞组左室射血分数、左室短轴缩短率显著高于硫化氢组及骨髓间充质干细胞组(P<0.05)。提示硫化氢预处理骨髓间充质干细胞可提高移植后的细胞存活率，改善梗死后心功能，其作用优于单用硫化氢或者骨髓间充质干细胞。 -
不同月龄人脐带间充质干细胞移植梗死心肌的血运重建
背景：干细胞移植有利于心肌梗死后的心肌血运重建及改善心功能，HLA-G分子在免疫耐受状态的形成及维持中具有重要作用。
目的：观察不同月龄有HLA-G表达差异的人脐带间充质干细胞移植后对急性心肌梗死兔血运重建的影响。
方法：健康新西兰大白兔30只，随机数字表法分为小月龄细胞移植组、足月龄细胞移植组及对照组。建立兔心肌梗死模型后2周，将小月龄人脐带间充质干细胞和足月人脐带间充质干细胞分别标记BrdU，多点注射心肌梗死的交界区和中心区，对照组注射无血清培养基。
结果与结论：移植后4周，小月龄和足月龄细胞移植组在心肌梗死区均发现有 BrdU 示踪细胞，且两组梗死区心肌纤维化程度、心肌梗死面积均少于对照组(P <0.01)，两移植组间差异也有显著性意义(P <0.05)。Ⅷ因子染色见小月龄细胞移植组毛细血管密度高于足月龄细胞移植组(P<0.01)，且两移植组与对照组比较差异也有显著性意义(P<0.05)。提示HLA-G表达量较高的小月龄脐带间充质干细胞能更好促进梗死区血管新生，改善血运重建，有潜力成为心肌细胞移植的更理想来源。 -
自体外周血造血干细胞移植后序贯CIK细胞治疗急性髓系白血病
背景：细胞因子诱导的杀伤细胞作为一种有效的过继免疫治疗方法，成为治疗急性髓系白血病的一种新的手段，目前关于急性髓系白血病自体移植后序贯细胞因子诱导的杀伤细胞治疗的报道尚少，值得进一步研究。
目的：观察急性髓系白血病 M2患者自体外周血造血干细胞移植后序贯细胞因子诱导的杀伤细胞治疗的临床疗效和不良反应。
方法：入选45例低、中危急性髓系白血病M2患者，其中19例在自体外周血造血干细胞移植后序贯了细胞因子诱导的杀伤细胞治疗，另26例未序贯细胞因子诱导的杀伤细胞治疗，比较两组患者的复发率、无病生存率、总生存率，观察细胞因子诱导的杀伤细胞治疗的安全性。
结果与结论：①序贯细胞因子诱导的杀伤细胞治疗组的复发率低于未序贯细胞因子诱导的杀伤细胞治疗组(21.05%，38.46%，P<0.05)；序贯细胞因子诱导的杀伤细胞治疗组患者的2年无病生存率和2年总生存率均高于未序贯细胞因子诱导的杀伤细胞治疗组，差异均有显著性意义(P<0.05)。②19例接受细胞因子诱导的杀伤细胞治疗的患者均顺利完成治疗方案，治疗过程中除4例出现寒战、发热外，无其他不良反应。结果显示低、中危急性髓系白血病 M2患者自体外周血造血干细胞移植后序贯细胞因子诱导的杀伤细胞治疗可降低原发病的复发率，提高患者的无病生存率及总生存率，且无明显不良反应，是一种安全、有效、可行的治疗方法。 -
脐血单个核细胞移植治疗冠状动脉性心脏病合并心力衰竭的安全性
背景：多项实验和临床研究表明，干细胞移植可能取代坏死心肌、建立新生血管、改善心脏功能，明显改善心血管疾病患者临床症状和预后。
目的：观察新生儿脐血单个核细胞移植治疗冠状动脉性心脏病合并心力衰竭患者的安全性。
方法：共入选冠状动脉性心脏病合并心力衰竭患者(急性心肌梗死合并心力衰竭6例，陈旧心肌梗死合并心力衰竭6例)12例，入院后在常规药物与介入治疗基础上，经皮经腔导管建立冠状动脉通道，利用微导管移植分离的新生儿脐血单个核细胞悬液。细胞移植后1周进行常规抽血检查，与移植前对比血常规、肝肾功能、免疫指标的变化。
结果与结论：脐血单个核细胞移植后有1例发热，不良反应发生率为8.3%，无微栓塞发生，随访1周无移植物抗宿主病发生。与细胞移植治疗前比较，治疗后1周血常规、肝功能、肾功能、C-反应蛋白、IgA、IgG等指标差异无显著性意义。说明新生儿脐血单个核细胞移植治疗冠状动脉性心脏病死合并心功能衰竭在短期是安全的。 -
红细胞裂解液法体外分离培养兔骨髓间充质干细胞
背景：有研究向骨髓液中加入红细胞裂解液来提高分离纯化骨髓间充质干细胞的效率，以期获得纯度高、数量多的骨髓间充质干细胞。
目的：进一步验证红细胞裂解液法体外分离纯化兔骨髓间充质干细胞的增殖特性，并对其进行细胞生物学鉴定。
方法：使用红细胞裂解液提取含有兔骨髓间充质干细胞的骨髓悬混液，于4，7，10，13 d记录比较原代细胞的生长相对数量；观察传代细胞的生长情况，绘出 P2、P3、P4及P5代细胞的生长曲线，比较各代细胞的增殖特点；倒置相差显微镜观察细胞的形态，细胞免疫荧光及流式细胞仪检测所获得细胞的CD44、CD34表面抗原的表达情况。
结果与结论：红细胞裂解液法所获得的兔骨髓间充质干细胞为均一规则的以梭形为主的贴壁细胞，其胞核胞核均质、核仁明显、胞浆丰富，且CD44抗原表达阳性、CD34抗原表达阴性；原代细胞生长曲线呈类“S”型；P4代细胞具有较好的增殖活性，其生长速度、所获取的细胞数量均优于其他代数细胞。说明红细胞裂解液法可以在体外较好的培养出骨髓间充质干细胞，其P4代细胞是骨髓间充质干细胞增殖能力强的一代细胞。 -
红景天苷与淤胆血清诱导骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化
背景：大量实验证实骨髓间充质干细胞在诱导因子及特定微环境下可诱导分化为肝细胞，并已广泛用于终末肝病的临床替代治疗，而其佳诱导条件目前尚不清楚。
目的：初步探讨中草药红景天苷联合淤胆大鼠血清体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的可行性和有效性。
方法：采用全骨髓贴壁培养法从大鼠骨髓中获取骨髓间充质干细胞，流式法检测干细胞表型；胆总管结扎切断法制备大鼠淤胆血清。取第3代骨髓间充质干细胞分3组体外诱导培养：空白对照组，基础培养基+5%淤胆血清；红景天苷组：基础培养基+5%淤胆血清+30μmol/L红景天苷；阳性对照组：基础培养基+5%淤胆血清+20μg/L肝细胞生长因子；观察各组诱导培养过程中细胞形态变化，RT-PCR法、Western-Blot法检测各诱导组肝细胞特异性蛋白表达水平。
结果与结论：骨髓间充质干细胞高表达 CD90、CD105，不表达 CD45、CD14、CD34、CD79a；空白对照组、红景天苷组、阳性对照组细胞在诱导培养中均出现多角及双核细胞；空白对照组、红景天苷组、阳性对照组在诱导培养7 d开始出现甲胎蛋白、白蛋白的mRNA及蛋白表达；在同一时间点空白对照组表达率低(P<0.05)，红景天苷组、阳性对照组间比较，差异无显著性意义(P>0.05)。与传统淤胆血清体外诱导相比，红景天苷联合淤胆血清能更有效诱导骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化。 -
动员自身骨髓干细胞与缺血再灌注肾损伤细胞的凋亡与增殖
背景：骨髓干细胞具有多项分化潜能，可分化为肾组织固有细胞、修复损伤肾组织。
目的：探讨粒细胞集落刺激因子联合干细胞因子动员自身骨髓干细胞对大鼠缺血再灌注肾损伤细胞凋亡与增殖的影响。
方法：160只大鼠尿筛阴性后随机均分为正常对照组、模型组、细胞因子治疗组、治疗对照组。模型组和细胞因子治疗组建立大鼠单侧肾脏缺血再灌注损伤模型；细胞因子治疗组和治疗对照组于造模后24 h开始皮下注射粒细胞集落刺激因子(50μg/kg，1次/d)和干细胞因子(200μg/kg，1次/d)，连续5 d；模型组不给药，正常对照组不予干预。TUNEL法检测细胞凋亡；免疫组织化学法(SABC法)检测肾组织CD34+细胞、Caspase-3、Bcl-2、细胞增殖核抗原表达情况。
结果与结论：细胞因子治疗组肾组织内CD34+细胞较正常对照组、模型组明显增多(P<0.05)。不同时间点模型组和细胞因子治疗组凋亡指数、Capase-3表达量均高于正常对照组和治疗对照组(P <0.05)，且模型组均显著高于细胞因子治疗组(P<0.05)。不同时间点模型组和细胞因子治疗组Bcl-2阳性表达细胞均高于正常对照组和治疗对照组(P<0.05)。细胞因子治疗组显著高于模型组，然后随着时间推移Bcl-2表达量明显减少(P<0.05)。模型组和细胞因子治疗组均可见细胞增殖核抗原阳性表达细胞；模型组于第24天增殖指数达峰值，后逐渐下降。细胞因子治疗组在第10天即达到高峰，持续至第17天，然后逐渐下降。说明粒细胞集落刺激因子联合干细胞因子动员自身骨髓干细胞可以促进肾缺血再灌注损伤后肾小管上皮细胞的增殖和减少细胞凋亡，从而有利于肾小管损伤的恢复。 -
骨髓间充质干细胞对高转移肝癌模型的干预
背景：骨髓间充质干细胞具备化学趋向性和归巢作用，对于促进患者免疫系统的重建、消除残留病灶及防止复发转移具有良好的效果。
目的：观察人骨髓间充质干细胞移植入动物模型对肝癌组织的影响情况及对肝癌转移潜能影响。
方法：制作高转移潜能动物模型，实验组在接种肿瘤后第7日开始尾静脉注射骨髓间充质干细胞，5×105/次，2次/周；对照组尾静脉注射骨髓间充质干细胞培养液，0.2 mL/次，实验开始后每4 d用测量肿瘤体积，肿瘤接种后14 d(2周)，21 d(3周)，28 d(4周)，35 d(5周)，42 d(6周)处死动物，称质量，取瘤块，称瘤质量，计算肿瘤质量抑制率。PCR检测动物模型标本转移相关因子骨桥蛋白、骨唾液蛋白、整合素αⅤ基因的表达，及肿瘤标本凋亡相关因子bcl-2、bax、caspase3基因的表达。
结果与结论：第3周时肿瘤的质量抑制率效果好，随着时间的延长，肿瘤的抑制率逐渐下降。肝癌转移相关的生物学指标均呈逐渐下降趋势，代表肿瘤凋亡指标的因子呈两极分化表现，抗凋亡bcl-2因子呈逐渐下降的趋势，凋亡因子bax、caspase3呈逐渐升高的趋势。骨髓间充质干细胞对肝癌动物模型肿瘤抑制效能随时间而变化，骨髓间充质干细胞移植后第3周对肝癌抑制效果显著，随着时间的延长，抑制效能减弱。骨髓间充质干细胞对肝癌的转移潜能具有抑制作用。 -
改良富血小板血浆对骨髓间充质干细胞增殖与免疫原性的作用
背景：课题组前期实验发现改良富血小板血浆对人牙髓细胞增殖的促进作用具有浓度依赖性，以10%浓度尤为明显。
目的：观察不同浓度改良富血小板血浆对人骨髓间充质干细胞体外生长增殖的作用效果，以及佳浓度改良富血小板血浆对骨髓间充质干细胞免疫原性的影响。
方法：使用健康志愿者捐献骨髓血培养的第三四代人骨髓间充质干细胞，行流式细胞术及成脂、矿化诱导分化鉴定。将由同一志愿者采集的静脉血制备的改良富血小板血浆作用于人骨髓间充质干细胞，以CCK-8法测定细胞增殖变化，绘制生长曲线。选取适合人骨髓间充质干细胞增殖的改良富血小板血浆浓度，以体积分数10%FBS培养基为对照，通过流式细胞术测定连续培养3代的人骨髓间充质干细胞表面Stro-1的表达率。
结果与结论：5%-10%的改良富血小板血浆在培养第6，8天均显著促进了骨髓间充质干细胞的增殖，其中以10%浓度组尤为显著在培养第10天仍显著促进了骨髓间充质干细胞的增殖且细胞表面Stro-1的表达率连续3代均高于对照组。说明改良富血小板血浆对人骨髓间充质干细胞增殖的促进作用具有浓度依赖性，10%改良富血小板血浆可以较好地保持人骨髓间充质干细胞的免疫原性。 -
人羊膜间充质干细胞体外大量扩增的方法
背景：一个胎盘羊膜的面积约600 cm2，羊膜来源间充质干细胞即取材于胎盘上的羊膜。
目的：建立一种简单的体外分离培养人羊膜来源间充质干细胞的方法，并分析其生物学特性。
方法：采用胰酶和直接贴壁相结合的方法分离获取人羊膜来源间充质干细胞并进行体外培养，观察细胞形态，分析传代第5代细胞生长曲线，检测第5代细胞表面标志表达和检测细胞周期。取传代第4代细胞行体外成骨细胞诱导和成脂诱导，冻存第4代细胞6个月后复苏，计数复苏后细胞存活率并绘制复苏细胞生长曲线。
结果与结论：原代接种后第9天有少许细胞爬出，15 d左右细胞达80%-90%融合，细胞以梭形为主。细胞传代后，细胞形态均一，螺旋状排列。传代细胞潜伏期48 h，对数增殖期4 d左右，对数增殖期后进入平台期。间充质干细胞表面CD34、CD14、CD19、CD45、HLA-DR 呈阴性表达，CD73、CD105、CD90呈阳性表达。茜素红染色及油红O染色阳性，证实具有向脂肪细胞、成骨细胞分化的能力。流式细胞术细胞周期检测，S期占28%。冻存复苏后细胞存活率达90%以上，且与未冻存传代细胞具有相同的生长特性。结果证实实验成功地建立了一种简化的人羊膜来源间充质干细胞大量扩增的方法。 -
Neurogenin2基因调控许旺细胞转分化为神经元
背景：Neurogenin2(Ngn2)基因调控星形胶质细胞分化为神经元已被实验证实，这提示许旺细胞也可能通过基因调控分化为神经元。
目的：研究Neurogenin2基因调控大鼠许旺细胞向神经元分化的可行性。
方法：体外培养、纯化及鉴定大鼠许旺细胞，然后用含绿色荧光蛋白基因的慢病毒载体系统将Neurogenin2基因转染导入许旺细胞中，后用含碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子和脑源性细胞生长因子的无血清DMEM诱导培养许旺细胞2周。显微镜观察细胞形态，免疫细胞化学检测髓磷脂碱性蛋白及神经元特异性烯醇化酶。
结果与结论：许旺细胞转染导入 Neurogenin2基因并诱导分化后，免疫荧光检测发现12.56%的细胞表达神经元标志性蛋白神经元特异性烯醇化酶，而对照组均未发现表达神经元标志性蛋白神经元特异性烯醇化酶。Neurogenin2基因植入可使大鼠许旺细胞表达神经元标志性蛋白神经元特异性烯醇化酶，提示该基因可调控许旺细胞转分化为神经元。 -
K562细胞株侧群细胞中部分白细胞分化抗原的表达
背景：白血病侧群细胞表型的研究对于理解肿瘤细胞的异质性和起源、分子标记和靶向治疗等都有积极意义。
目的：鉴定人慢性粒细胞白血病细胞株 K562中是否存在侧群细胞，并观察侧群细胞亚群与非侧群细胞亚群中部分白细胞分化抗原的表达差异。
方法：采用流式细胞术检测K562细胞株中是否存在侧群细胞；并进一步分析K562侧群细胞和非侧群细胞两亚群间CD34+、CD34+CD38-、CD34+CD38+、HLA-DR+细胞的表达情况。
结果与结论：经Hoechst33342染色，流式细胞仪分析结果显示在K562中存在侧群细胞，这部分细胞比例少，为(2.7±0.5)%；统计学分析侧群细胞和非侧群细胞亚群中 CD34+、CD34+CD38-细胞表达率差异有显著性意义，而CD34+CD38+细胞表达率和HLA-DR+细胞表达率差异均无显著性意义；侧群细胞和非侧群细胞相比在分化抗原表达上有异质性。 -
大鼠椎间盘髓核来源间充质干细胞的体外分离及培养鉴定
背景：目前椎间盘髓核组织的细胞组成和特性仍未阐明。
目的：旨在建立大鼠椎间盘髓核来源间充质干细胞的体外培养体系，并对其体外多项分化潜能进行鉴定。
方法：体外培养SD大鼠盘髓核来源间充质干细胞，取第3代细胞进行三系诱导分化，将成骨、成脂和成软骨分化作为实验组，基础细胞培养作为对照组。
结果与结论：低密度培养获得的髓核来源细胞早期可形成葵花样细胞集落，克隆样生长。第3代后，细胞形态趋向均一，呈成纤维细胞样生长。成骨诱导28 d，实验组茜素红染色阳性，且 RunX2、osteopontin 及osteocalcin表达较对照组显著增高(P<0.05)；成脂诱导21 d，实验组油红O染色阳性，C/EBPα及PPARγ2表达较对照组显著增高(P <0.05)；成软骨分化诱导21 d，实验组番红O快绿染色和Ⅱ型胶原免疫组织化学染色阳性，aggrecan和Col2a1表达较对照组显著增高(P<0.05)。可见成年SD大鼠椎间盘髓核组织中可分离培养出体外呈克隆样生长的细胞群，且有向脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞发生定向分化的潜能。 -
结直肠腺癌组织中CD44+/Oct4+癌干细胞的形态及分布
背景：越来越多的证据显示 CD44可作为结直肠腺癌干细胞的一个特异性的标志物，近年发现胚胎干细胞转录因子Oct4在结直肠腺癌中有表达。
目的：观察CD44+/Oct4+细胞在原发性结直肠腺癌组织中的数量、位置及分布方式。
方法：取108例结直肠腺癌、18例癌旁正常肠黏膜组织及18例伴不典型增生的结直肠腺瘤标本制成48点共3块组织芯片，应用免疫组织化学双重染色和苏木精-伊红染色，定位CD44+/Oct4+肿瘤细胞，观察计数并在苏木精-伊红切片的对应位置上观察其形态特征。
结果与结论：免疫组织化学双重染色结果显示，癌旁正常肠黏膜中未见CD44+/Oct4+细胞，在伴不典型增生的腺瘤中可见极少量CD44+/Oct4+细胞，结直肠腺癌中可见到少量CD44+/Oct4+细胞。双阳性细胞主要分布在腺管样结构基底膜侧或共壁腺体的共壁侧，呈小灶状或散在点状分布；细胞呈卵圆形或立方状，胞浆稀少，胞核规则，均质深染，呈卵圆形或高柱状。其数量与结直肠癌分化程度呈负相关(r=-0.579，P<0.01)，与肿瘤浸润深度有一定关联(r=0.236，P<0.05)。结果提示CD44+/Oct4+细胞可能是结直肠腺癌干细胞。 -
转化生长因子β3诱导脂肪间充质干细胞向纤维软骨细胞的分化
背景：颞下关节盘软骨缺损修复在口腔临床上仍然是较大的挑战，具有多向分化潜能的脂肪间充质干细胞为成纤维软骨类组织修复带来了希望。目前使用转化生长因子β3诱导脂肪间充质干细胞向纤维软骨细胞分化的研究很少。
目的：观察转化生长因子β3对脂肪间充质干细胞生长形貌及向成纤维软骨分化的影响。
方法：采用转化生长因子β3诱导SD大鼠脂肪间充质干细胞，观察成纤维软骨细胞分化的细胞形态，组织学和免疫荧光染色等方法检测脂肪间充质干细胞产生的细胞外基质Ⅰ，Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达情况，评价脂肪间充质干细胞作为纤维软骨组织工程种子细胞的可行性。
结果与结论：倒置荧光显微镜观察结果显示脂经转化生长因子β3生长因子诱导之后，细胞有明显的聚集生长现象，形态呈多角形、多边形，细胞外基质分泌增多。阿利新蓝染色结果表明，经转化生长因子β3诱导脂肪间充质干细胞显示明显的深蓝色，表明脂肪间充质干细胞合成了大量的糖胺聚糖。免疫染色结果表明，在转化生长因子β3诱导下，脂肪间充质干细胞合成Ⅰ，Ⅱ型胶原细胞外基质。提示转化生长因子β3可诱导脂肪间充质干细胞向成纤维软骨样细胞分化，也意味着脂肪间充质干细胞具有作为工程化纤维软骨种子细胞的潜能。 -
转化生长因子β1与骨髓间充质干细胞向心肌样细胞的分化
背景：转化生长因子β1是一种具有调控细胞增殖、分化、黏附和凋亡，在生物发育及组织修复过程中具有重要作用的细胞因子。
目的：观察转化生长因子β1对诱导大鼠骨髓间充质干细胞定向分化为心肌样细胞的影响。
方法：取SD大鼠四肢骨骨髓，分离培养骨髓间充质干细胞，应用转化生长因子β1对第2代骨髓间充质干细胞定向诱导，以未诱导的骨髓间充质干细胞做对照。
结果与结论：①加入转化生长因子β1诱导后的骨髓间充质干细胞培养7d时，相差显微镜观察多紧密平行排列生长，呈类长柱形，少数呈不规则形；14 d后开始出现细胞间连接，形成数个相互连接的长柱形，28 d时骨髓间充质干细胞体积则变小，排列紧密呈条梭状。②转化生长因子β1诱导4周后，免疫细胞化学技术检测骨髓间充质干细胞均可见结蛋白、原肌球蛋白及间隙连接蛋白43的阳性细胞，诱导组各指标的积分吸光度值均显著高于对照组(P均<0.01)。③诱导组心肌肌钙蛋白I呈阳性表达。根据心肌肌钙蛋白I阳性率计算出的心肌样细胞转化率在诱导组显著高于对照组(P=0.000)。④荧光免疫双标技术检测结果显示，经转化生长因子β1诱导4周的骨髓间充质干细胞结蛋白及心肌肌钙蛋白I蛋白均定位于细胞质且呈共表达。⑤透射电镜结果显示，分化细胞的细胞质内可见到平行排列的肌丝，并富含线粒体、糖原和核糖体。提示骨髓间充质干细胞在转化生长因子β1诱导下可定向分化为心肌样细胞。 -
那棵山楂树的花与恋歌
喜欢山楂花，因其可泡茶或入药。近的科学研究还显示，山楂花中总氨基酸含量高，其次是叶，果实中含量低。山楂花中含治疗心律不齐的谷氨酸量高，比叶高2.7倍，比果实高15倍，所以呐，一些研究者在开发山楂花治疗缺铁性贫血、预防动脉粥样硬化、抗心律不齐、调节血脂及降低胆固醇含量的功能，说这花呀比叶和果都好！
