中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位: 中华人民共和国卫生部
- 主办单位: 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子: 1.38
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 2095-4344
- 国内刊号: 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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颈椎前路融合与置换体外生物力学实验的新观点
背景:传统“金标准”颈前路减压植骨融合及近年来迅速发展的人工颈椎间盘置换是临床上常见的治疗颈椎病的方式。大量科研工作者和临床医生希望通过颈椎体外标本实验研究脊柱生物力学,为临床治疗提供指导数据。
目的:对现有颈椎体外标本生物力学实验研究进展进行综述,并对未来的研究方向进行展望。
方法:以“Cervical Spine, Fusion, Replacement, Hybrid, Biomechanics, In vitro, Adjacent-level Degeneration, Review”为英文检索词检索Pubmed数据库,以“颈椎,融合,置换,混合术,生物力学,体外,相邻节段退变,综述”为检索词检索CNKI数据库和万方数据库,检索2007年1月至2013年3月有关颈椎前路融合与置换体外生物力学实验研究进展的文献,主要整理近3年来相关研究,排除陈旧文章和重复性工作,后对40篇文献进行归纳与讨论。
结果与结论:文章对现有的颈椎体外标本融合、置换实验进行总结,集中体现在手术多节段、运动控制条件差异化、颈椎耦合运动测试和新型植入器械4个方面,对比总结融合与置换治疗对邻近节段运动范围、关节内压力、髓核内压力和椎间孔形态的影响,探讨融合、置换后存在的问题。后结合临床的需求,展望颈椎体外标本实验的发展趋势及应用前景。 -
人工腰椎间盘假体设计原理与研究进展
背景:人工腰椎间盘置换作为治疗腰椎间盘退行性疾病的新选择,由于在消除患者疼痛的同时保留了腰椎原有的生物力学状态,得到了临床的广泛关注,对于假体结构和材料设计尚需进一步研究和验证。
目的:对现有人工腰椎间盘假体结构和材料的设计情况进行了综述,并对未来的优化设计趋势进行了展望,可为今后开发以及评估新的人工腰椎间盘假体提供指导。
方法:计算机检索PubMed、CNKI、中国生物医学文献数据库,纳入包含人工腰椎间盘的结构设计、材料设计以及体内、体外生物力学评价的文章,排除观点重复和陈旧的文章,后对46篇文献进行归纳与讨论。
结果与结论:人工腰椎间盘已经历了近30年的发展,对于假体的结构和生物材料的设计也经历了不断的发展与改进,文章对现有人工腰椎间盘假体的运动保留设计、运动限制设计、即刻固定设计、基体材料、负重面材料、涂层材料的研究现状进行了归纳总结,并结合现有的体内、外生物力学实验结果对各种设计进行评价。后结合新的研究趋势,对腰椎间盘假体未来在结构仿生设计、材料改进、假体和辅助植入器械的优化设计等发展方向进行了展望。 -
锚钉治疗踝关节骨折合并三角韧带损伤
背景:踝关节骨折合并三角韧带损伤可使踝关节解剖结构发生紊乱,治疗不当会引起行走障碍等更严重的并发症发生。
目的:评价锚钉修补结合切开复位内固定治疗踝关节骨折合并三角韧带损伤的临床效果。
方法:上海交通大学附属第六人民医院骨科2009年5月至2011年1月,应用锚钉修补结合切开复位内固定治疗踝关节骨折合并三角韧带损伤的患者35例,其中男24例,女11例;年龄22-61岁,平均35.7岁,均为闭合性损伤,未合并其他部位骨折。受伤至治疗时间2-10 d,平均4.6 d。根据Lauge-Hansen分型,26例为旋后-外旋型;9例为旋前-外旋型。根据Danis-Weber分型,26例为C型;9例为B型。35例患者应用锚钉修复固定治疗后,通过评估临床症状及体征的改善,以及影像学检查愈合修复情况,评价锚钉修复固定治疗效果。
结果与结论:35例患者均获随访,随访时间9-26个月,平均13.8个月。患者伤口均Ⅰ期愈合,无感染、螺钉松动等并发症发生。X射线片随访结果,35例患者踝关节骨折均达到骨性愈合,愈合时间10-21周,平均13.6周。改良Baird-Jackson 评分系统评分,优11例,良19例,可4例,差1例,优良率85.7%。内固定后6个月应力位X射线片测量结果,患侧内踝间隙为(3.49±0.36) mm,与健侧(3.37±0.41) mm比较差异无显著性意义(P>0.05)。结果表明,切开复位内固定治疗踝关节骨折的同时,应用锚钉修复三角韧带损伤,能够获得满意的治疗效果。 -
Deluxe-ps膝关节假体在一期双膝关节置换过程中的应用
背景:Deluxe-PS 型人工膝关节假体是根据中国人膝关节解剖特点尤其是股骨髁的形态特征而设计的,其膝关节假体股骨髁内外侧距(M-L)较进口假体少3.5 mm。
目的:探讨Deluxe-ps膝关节假体行一期双膝关节置换中的近期疗效。
方法:纳入使用Deluxe-ps型膝关节假体行一期双侧膝关节置换的膝关节炎患者15例(30膝)设为实验组,对照组为同期采用P.F.C.Sigma膝关节假体行一期双侧膝关节置换的20例患者(40膝)。采用KSS评分和关节功能HSS评分、膝关节关节活动度评估两组手术前、后膝关节功能,对比两组手术时间、及术中输血量。
结果与结论:两组患者置换后均得到12-24个月随访,平均16个月。置换后患者膝关节疼痛均缓解,关节功能恢复满意。两组膝关节置换后与置换前 KSS 评分、HSS 评分及膝关节关节活动度比较,差异均有显著性意义(P<0.05)。置换后,两组间KSS评分和HSS评分及膝关节关节活动度,差异均无显著性意义(P>0.05),两组间置换过程中出血量比较,差异均无显著性意义(P>0.05),手术时间比较,差异有显著性意义(P<0.05)。说明采用Deluxe-ps膝关节假体行一期双膝关节置换近期疗效满意。 -
美洛昔康与吲哚美辛防治全髋关节置换后异位骨化的比较
背景:为了避免全髋关节置换后发生异位骨化,常使用吲哚美辛等非类固醇类消炎药进行预防治疗。
目的:对比观察美洛昔康与吲哚美辛对全髋关节置换后预防异位骨化药物的效果。
方法:收集2010至2011年广州中医药大学第一附属医院骨科收治的51例患者,其中9例患者行双侧全髋关节置换,所有患者均由同一位医师采用后外侧入路进行关节置换。根据患者置换后使用的药物不同,分为对照组及实验组,分别在置换后口服吲哚美辛缓释片25 mg/d+奥美拉唑肠溶胶囊20 mg/d或美洛昔康片15 mg/d。
结果与结论:单独使用美洛昔康和使用吲哚美辛+奥美拉唑对关节置换患者异位骨化的发生率、疼痛、改良D'Aubigne和Postel评分的差异均无显著性意义(P>0.05),但美洛昔康的胃肠道不良反应较少。因此,认为单独服用美洛昔康能够有效避免异位骨化的发生及缓解疼痛,可以作为预防全髋关节置换后异位骨化及疼痛的推荐用药。 -
消除人工髋关节应力遮挡等问题的理论分析与研究
背景:为减小应力遮挡采用了很多的方案,经过几十年的试验与应用,至今未能取得重大的进展。起源于股骨和金属柄结合为固定柄的根源,引发了骨质吸收等严重问题,这种应力遮挡效应产生于骨的异常应力和异常应变的作用,且受诸多因素的制约,找不到有效而适用的方法解决。
目的:为使金属柄不传导应力是消除应力遮挡的关键,选择初级多孔层方案作为研究的对象,彻底改造它的外貌和内在的质量,采取有效的措施制造高级多孔层,是消除应力遮挡的基础,能解决初级多孔层引发的隐患和部分劣势。
方法:采用相等直径的钴铬钼合金小球为制造高级多孔层结构件的方案,其结构件作用在股骨上使柄与骨分离,作用在领平面上由股骨距截骨面固定柄,这些结构件有能力消除人工髋关节上全部的应力遮挡。
结果与结论:高级多孔层是用相等直径(1.00-1.29 mm)的钴铬钼合金小球,在其表面镀以高性能的中间层合金,作有序紧密排列,经由活性扩散焊工艺连接而成。全部孔隙的孔径均为155-200μm,且均匀分布,供骨单元长入。实施金属材料合金化、合金表面陶瓷化,并控制磨损颗粒的大小和数量等办法能解决多孔层周围的骨溶解、金属溶解及其纯金属钴、铬微粒的毒性、癌变和白血病等问题。理论根据的规定是先除去柄刚度的作用,让骨柄分离成为消除应力遮挡的前提,让股骨距截骨面长入领平面上焊接的结构件孔隙中,能固定柄是消除应力遮挡的根本,这两者共同的作用可以达到消除股骨中应力遮挡的目的,而髋臼窝上的应力遮挡较容易消除。 -
全膝关节置换后类风湿关节炎生化指标及受累关节功能变化
背景:以往有关全膝关节置换治疗晚期类风湿关节炎临床疗效的研究报道较多,而关于全膝关节置换对类风湿关节炎整体病情活动性的影响研究较少,因此需要更多的临床证据支持。
目的:探讨膝关节表面置换对类风湿关节炎患者整体病情活动性的影响。
方法:纳入109例类风湿关节炎患者,置换组48例患者行全膝关节置换联合内科药物治疗,药物治疗组61例单纯行内科药物治疗。2组患者分别在治疗前、治疗后1,2年检测类风湿因子、血沉和C-反应蛋白水平,功能评定采用Ishikawa关节功能评分标准。
结果与结论:治疗前2组患者类风湿因子、血沉和C-反应蛋白水平差异无显著性意义(P>0.05)。治疗后1,2年,药物治疗组各项指标显著高于置换组(P<0.05);2组治疗后2年各项指标均显著低于治疗前(P<0.05)。2组患者治疗后受累关节类风湿关节炎症状评分均显著改善,主要表现在疼痛、肿胀和主观感受方面,其中置换组优于药物治疗组(P<0.05)。提示全膝关节置换在短期内可影响类风湿关节炎的病情活动性,效果优于单纯药物治疗。 -
手术室环境预防人工关节置换后感染的有效性
背景:层流手术室应用于人工关节置换,提高了无菌条件,使关节置换后感染得到有效的预防。
目的:比较层流手术室与传统手术室环境下人工关节置换手术室菌落数。
方法:选择百级层流手术室进行人工关节关节置换手术患者300例,在外院传统手术室进行人工关节置换患者300例,所有患者均未出现感染。随机抽取在百级层流手术室进行人工关节置换患者100例和传统手术室行关节置换者100例,比较两组患者关节置换前后手术室平均菌落数。
结果与结论:两组患者关节置换前菌落数比较,差异无显著性意义,百级手术室患者关节置换后沉降菌数明显少于传统手术室(P<0.05)。提示与传统手术室相比,百级层流手术室进行人工关节置换安全性更高,更能有效预防人工关节置换后的感染。 -
全膝关节置换后股骨假体周围的骨折
背景:全膝关节置换后股骨假体周围骨折与骨质疏松、骨缺损、假体、患者脆弱以及高并发症发生率等因素有关,其防治较困难。
目的:综合近几年的文献以探讨全膝关节置换后股骨假体周围骨折的危险因素、分型、治疗、康复及预防。
方法:应用计算机分别检索 PubMed 和Spinger Link数据库相关文献,检索时间分别设定为1990年1月1日至2011年12月31日和1980年至2011年,检索词设定为“periprosthetic fracture, knee”,检索语言设定为英语,共检索到626篇文章。
结果与结论:按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入40篇文章。结果表明,随着全膝置换在临床中的广泛开展,股骨假体周围骨折的发生率正在逐年增高,因其预后较差,所以要重视其预防,这一骨折的危险因素包括患者自身内在的难以控制的因素和固定技术等外在因素。Rorabeck 分型是全膝置换后股骨假体周围骨折常用的分型方法,但其在临床应用中并不理想;Kim分型将会更有效的指导临床。股骨假体周围骨折的治疗包括非手术治疗、切开复位内固定、逆行髓内钉以及翻修等,合适治疗方案的选择主要取决于骨折的类型、局部骨质量、患者的健康状况等,目前尚缺乏完美的原则来指导选择合适的治疗措施,置换后早期功能锻炼将有益于预防固定过久引起的相关并发症及关节功能的丢失。因此,全膝关节置换后股骨假体周围骨折的治疗要严格把握适应证,在牢固固定的同时,应该尽量鼓励患者早期功能锻炼。 -
钢板和髓内针固定治疗成人肱骨干骨折的系统评价
背景:肱骨干骨折应选择钢板还是髓内针内固定,目前仍存在争议。一些研究比较了二者的疗效,但得出的结论不甚相同。针对这些对比性研究的系统评价和Meta分析研究,因为纳入研究数目及对研究数据提取的差异,得出的结论也不尽相同。
目的:系统评价钢板内固定与髓内针固定治疗成人肱骨干骨折的疗效。
方法:计算机检索PubMed、MEDLINE、CINAHL (Cumulative Index to Nursing&Al ied Health Literature)、EBM(Evidence-Based Medicine)、中国生物医学文献数据库、万方数据知识服务平台和中国学术期刊网。收集钢板内固定与髓内针固定比较治疗成人肱骨干骨折的随机或半随机的临床试验,应用Jadad评价纳入研究的方法学质量,并提取有效数据采用Stata 12.0软件进行Meta分析。
结果与结论:共纳入15个随机或半随机的临床试验,其中4个半随机试验,11个随机试验。结果显示交锁髓内针固定会导致并发症风险增高(OR=0.37(0.19,0.59),P=0.00)。发表偏倚Egger’s检验P=0.91,无显著性发表偏倚。再手术发生上交锁髓内针治疗的风险增高(OR=0.28(0.14,0.57),P=0.00),Egger’s检验P=0.69。肩部撞击发生率髓内针固定要显著高于钢板固定(OR=0.13(0.05,0.35),P=0.00),肱骨干骨折后感染、骨不连、内固定失效、医源性神经损伤、手术时间及骨折愈合时间比较无显著性差异。说明与钢板内固定相比较,髓内针固定治疗成人肱骨干骨折容易导致肩部撞击的发生,导致并发症、再手术风险增高。感染、骨不连、内固定失效、医源性神经损伤、手术时间及骨折愈合时间等方面无显著性差异。 -
钢板内固定与外固定架治疗桡骨远端不稳定骨折的Meta分析
背景:桡骨远端不稳定骨折的手术治疗方式主要包括钢板内固定和外固定架,但2种治疗方法各有优缺点,哪种治疗更有利于患者的康复目前仍存在较大争议。
目的:通过Meta分析系统评价钢板内固定与外固定架治疗桡骨远端不稳定骨折的临床疗效。
方法:计算机和手工检索相关数据库和杂志,收集对比钢板内固定与外固定架治疗桡骨远端不稳定骨折的随机对照试验,提取文献数据及质量评价后,用RevMan5.2软件进行系统评价,比较2组治疗后握力、DASH评分、总的并发症、感染率、畸形愈合率、尺骨变异率等结局指标。
结果与结论:纳入9篇文献,患者共524例,内固定组286例,外固定组238例。钢板内固定与外固定支架相比,握力方面2组差异无显著性意义。钢板内固定治疗后3个月及1年DASH评分较优,总的并发症较少,感染率较低,畸形愈合率较低,尺骨变异率较低。说明钢板内固定治疗桡骨远端不稳定骨折疗效优于外固定架,以上结论需要更多大样本、双盲、高质量的随机对照研究加以论证。 -
经胸腰段伤椎单节段椎弓根螺钉固定后的生物力学特性
背景:临床常采用经伤椎椎弓根螺钉内固定治疗胸腰椎骨折,研究已证实经伤椎双侧椎弓根螺钉固定后脊柱稳定性加强,但也有研究认为经伤椎单节段椎弓根螺钉固定足以增加脊柱的稳定性,但此结论缺乏生物力学结果支持。
目的:观察胸腰段椎体骨折经伤椎单节段固定的相关生物力学特性。
方法:取扬州大学医学院解剖教研室提供8具中国人新鲜胸腰段标本(T11-L3),锯条横断2/3椎体,制成完整胸腰段椎体实验标本,将8具标本等分成跨伤椎固定组和单节段经伤椎固定组,分别在跨伤椎临近椎体四钉固定和临近椎体四钉固定+经伤椎单侧椎弓根固定。
结果与结论:胸腰段椎体骨折后经跨伤椎固定与经单节段伤椎固定的载荷-应变关系相差12%、载荷-位移关系相差11%、强度相差18%、轴向刚度相差11%、扭转力相差11%及拔出力相差1.8%,两组差异有显著性意义(P<0.05),说明经伤椎单节段固定胸腰段椎体骨折的生物力学性能更好。 -
单纯悬吊与双圈外固定治疗儿童锁骨骨折的稳定性比较
背景:儿童锁骨骨折一般均不主张切开复位,因为厚韧的骨膜仍然完整,并由韧带附着。临床上常用双圈固定法和单纯悬吊法外固定,至于采用何种方法可以达到更好的效果,目前尚无可靠的依据。
目的:比较单纯悬吊法与双圈固定法治疗儿童锁骨骨折的稳定性。
方法:2008年6月至2012年12月采用单纯悬吊法与双圈固定法治疗儿童锁骨骨折,17例采用单纯悬吊法,22例采用双圈固定法,定期行X射线检查,观察骨折愈合情况及肩部功能。
结果与结论:单纯悬吊法17例患儿配合良好,骨折愈合良好;3例患儿骨折处断端1周后检查有分离,再次悬吊提高高度后1例恢复骨折处的接触,2例仍有分离,改为双圈固定法固定后,断端接触。双圈固定组22例患者均骨折愈合;5例患儿固定后,有骨折侧上肢神经血管受压的表现,松解后,3例缓解,2例改为单纯悬吊固定后,断端接触;腋下发红6例;早期睡眠困难4例;2例骨折处断端1周后检查有分离,再次调整松紧后,2例恢复骨折处的接触。结果显示2种疗法均不会造成外观畸形,骨折均愈合。单纯悬吊固定,操作简单,疗效可靠,儿童舒适易于接受,可早期功能锻炼,对组织损伤小,不会影响血运;双圈固定法外固定易压迫两侧腋下动脉及神经,出现双上肢肿胀、麻痛、皮肤发红,夜间睡眠不适,患儿舒适度差,不易接受。但是不管采用何种方法,1周后的复查以及远近端对线、骨折断端的接触很重要。 -
股骨骨折髓内钉置入内固定后1年骨愈合有限元模型的快速建立
背景:当前判断内固定取出后正常站立情况下股骨是否断裂仅依靠X射线或CT数据。
目的:通过有限元方法对股骨骨折髓内钉置入内固定1年取出内固定后的骨愈合模型进行分析,探讨该方法是否能判定内固定取出后骨折断端断裂。
方法:运用Mimics、Geomagic Studio、Abaqus等软件采用快速个体化建模方法对股骨骨折髓内钉置入内固定1年取出内固定后的骨愈合多层螺旋CT数据进行模型快速建立,并采取4种方法处理模型,分别为不作模型简化;对骨愈合区以外的模型表面网格给予50%简化;对骨愈合区以外的模型表面网格给予20%简化;对骨愈合区以外的模型表面网格给予10%简化。对于以上4种模型进行有限元分析,施加3,9倍重力载荷和约束,观察米赛斯应力大值及其所处部位。
结果与结论:按照材料属性进行区别显示米赛斯应力的大值及小值,在不同应力载荷下,术后各类型材料的米赛斯应力大值及小值部位相同,各类型材料中,大值均未位于骨折断端,不同方法的大应力值部位相近,均在中远端1/4交界处,其中表面网格简化10%模型的数值偏倚小,网格处理、材料赋值及有限元分析运算时间短。采用适当的个体化建模方法可以对骨折内固定取出后的骨折模型进行有限元分析,快速判断内固定取出是否导致骨折断端断裂。 -
三维重建及虚拟手术在复杂胫骨平台骨折治疗中的应用
背景:复杂胫骨平台骨折一直是创伤骨科的难题,全面的修复前评估及合理的修复前规划是临床手术的关键。
目的:探讨三维重建及虚拟手术技术在复杂胫骨平台骨折修复前评估和修复前规划中的应用价值。
方法:修复前将30例胫骨平台骨折患者CT扫描图像数据导入Mimics 13.0软件,建立复杂胫骨平台骨折三维数字化模型,对胫骨平台骨折模型进行三维数据测量,按胫骨平台三柱分型进行重新分型,在三维数字化模型上进行开窗、骨块复位、植骨的虚拟手术。
结果与结论:重建的胫骨平台骨折三维数字化模型可准确反映出骨折特点,并可进行任意角度旋转观察,可以准确的进行三柱分型。Mimics13.0软件施行的胫骨平台骨折开窗、复位、植骨的虚拟手术可以逼真模拟临床手术,并且有效估算植骨量。结果证实,三维重建及虚拟手术技术有利于复杂胫骨平台骨折的修复前评估及规划,应该作为修复前准备的常规项目。 -
保留髓内钉附加侧板治疗股骨干非峡部段骨不连
背景:对于股骨干骨折髓内钉固定后干骺端骨不连患者,有报道称更换髓内钉是一种可选择的佳治疗方法。然而,对于股骨干非峡部段骨折髓内钉固定后骨不连患者,其临床疗效并不理想。
目的:比较更换髓内钉与保留髓内钉附加侧板治疗股骨干非峡部段骨不连的临床与影像学结果。
方法:回顾性分析39例股骨干骨折髓内钉固定后非峡部段骨不连患者临床资料,其中更换髓内钉21例,保留髓内钉附加侧板18例。根据Tohner-Wrnch标准评定临床疗效。
结果与结论:所有患者均获得15个月以上随访。更换髓内钉组中,3例患者内固定后出现内固定松动,经再次行保留髓内钉、附加侧板并联合自体髂骨植骨治疗后顺利完成骨性愈合。保留髓内钉、附加侧板组内固定时间、出血量、输悬浮红细胞、住院费用、再手术率均显著低于更换髓内钉组(P<0.05)。两组患者终均获得骨性愈合,更换髓内钉组的临床及影像学愈合时间均显著长于保留髓内钉附加侧板组(P<0.05);末次随访时,根据Tohner-Wrnch标准评定疗效:更换髓内钉组:优10例,良6例,差5例,优良率76%;保留髓内钉附加侧板组:优11例,良7例,优良率100%,两组之间比较差异有显著性意义(P <0.05)。与更换髓内钉相比,应用保留髓内钉附加侧板及联合自体骨植骨治疗股骨干非峡部段骨不连,其操作相对简单、内固定时间短、内固定中出血少、创伤轻、住院费用少,再手术率低,且临床疗效满意,是一种可选择的更佳的治疗方法。 -
新型儿童股骨颈螺钉设计中的生物力学因素
背景:由于骺板在股骨的生长发育过程中有重要的作用,内固定的设计要求尽量避免对骺板的损伤,因此对儿童股骨骺板的定位显得尤其重要。
目的:探讨新型儿童股骨颈螺钉固定儿童股骨颈骨折的生物力学性能。
方法:由南华大学解剖室提供的6具儿童尸体上取下股骨12根,X射线排除骨病后,分别采用3枚新型儿童股骨颈螺钉固定;3枚2.0 mm克氏针固定。分别进行生物力学实验,测试其轴向压缩、扭转刚度。
结果与结论:轴向压缩刚度及大3 N?m 的扭转力矩下扭转刚度,儿童股骨颈螺钉分别为(190.74±20.88) N/mm、(0.18±0.045) N?m/(°),克氏针为(138.95±15.19) N/mm、(0.120±0.036) N?m/(°),两者比较差异均有显著性意义(P<0.05);显示儿童股骨颈螺钉的抗压能力和抗扭能力上明显强于克氏针。实验说明儿童股骨颈螺钉是一种符合儿童股骨近端解剖学特点,能够满足儿童股骨颈骨折需要的新型内固定器械,具有良好的生物力学性能。 -
梦中的蒲公英
梦的记忆里,篱笆边的蒲公英,开着白色的、黄色的、紫色的花儿,还是那样的艳丽。
梦的记忆里,邻家上高中的大姐姐在窗外平台上朗诵过的那首关于蒲公英的诗还能背下来。“我们是一束飘飞的蒲公英,种子飘落在哪里,便在哪里生根开花。” -
Ⅱ型胶原酶消化结合组织块贴壁法分离培养兔髓核细胞
背景:椎间盘为负重却缺乏血运的组织,在体外培养过程中存在表型丢失问题,因而容易发生退行性改变,但椎间盘退变的机制尚不明确。
目的:探讨兔髓核细胞分离、贴壁培养、扩增和鉴定的方法,并观察髓核细胞在不同代次的生长特性。
方法:应用Ⅱ型胶原酶消化法和组织块贴壁法相结合的方法,分离、纯化髓核细胞并进行体外扩增,用倒置显微镜观察各代细胞的形态、生长状况,计数细胞数量,并绘制细胞生长曲线。苏木精-伊红染色后光镜下观察细胞形态,免疫细胞化学方法检测细胞Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达情况,并进行细胞鉴定。
结果与结论:成功的实现了兔髓核细胞体外分离、培养及扩增。生长特性观察发现,髓核细胞第1-3代细胞增殖能力强,活力旺盛,但随着传代次数的增加,细胞增殖能力程逐渐下降的趋势。分离培养的髓核细胞阳性表达聚集蛋白聚糖和Ⅱ型胶原。体外采用Ⅱ型胶原酶消化法和组织块贴壁法相结合,可获得高纯度的髓核细胞,培养的髓核细胞呈类圆形或多角形生长,第1-3代细胞生长活性较强。