浙江大学学报(医学版)杂志
Journal of Zhejiang University(Medical Sciences) 절강대학학보(의학판)
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VEGF165和VEGF121在MC3T3-E1细胞中的表达及生物学功能
目的:构建一个能在MC3T3-E1细胞中稳定表达,并具有生物学活性的VEGF165和VEGF121基因表达载体.方法:采用RT-PCR技术从HL-60细胞中扩增人VEGF165和VEGF121基因,将获得的基因定向插入pcDNA3.1(+)真核表达质粒中,测序正确后用脂质体将表达质粒转染入MC3T3-E1细胞.细胞经G418加压有限稀释筛选,采用ELISA法、Western blot法及免疫荧光法检测VEGF蛋白表达,并用MTT法检测表达的蛋白对血管内皮细胞株(HUECV304)的增殖活性影响.结果:通过基因测序表明获得的VEGF165和VEGF121与GeneBank登录的序列一致,构建的质粒分别为VEGF165/pcDNA3.1(+)质粒和VEGF121/pcDNA3.1(+)质粒,ELISA及Western blot检测结果均表明VEGF165和VEGF121基因转染MC3T3-E1后能在细胞中稳定表达,表达产物能明显促进HUECV304细胞生长.结论:基因转染的MC3T3-E1细胞能稳定、高效表达具有生物学活性的VEGF165和VEGF121重组蛋白.
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大鼠睾丸移植模型的建立及植睾损伤机制的研究
目的:探讨影响植睾生精细胞发育的内在因素及胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)mRNA在植睾丸组织中的表达.方法:应用Cuff管技术建立大鼠原位异体睾丸移植模型,并将实验动物分为6组,在光镜和电镜下分别观察移植物的形态学和超微结构变化,应用放免法和RT-PCR技术检测实验各组T、FSH、LH水平和GDNFmRNA的表达量.结果:术后7 d,同种移植组植睾组织在光镜下可见间质内大量淋巴细胞浸润,曲细精管内生精细胞层次紊乱,支持细胞数目减少并出现萎缩,电镜下可见支持细胞之间构成的紧密连接出现断裂;血清T值下降而FSH、LH值反馈性升高,GDNFmRNA的表达量较正常对照组减少.术后14 d,同种移植组植睾损害进一步加剧,且GDNFmRNA的表达量明显下降.结论:同种移植植睾组织中支持细胞数目的减少和萎缩及其胞突构成的紧密连接出现断裂可能是植睾生精功能不良的主要原因;GDNFmRNA表达水平可作为睾丸生精功能状态指标之一.
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临床病理因素在结肠癌和直肠癌预后中的不同作用
目的:研究各临床病理因素对结肠癌和直肠癌预后影响的区别,并分析根治术后直肠癌患者的预后因素.方法:运用单因素及多因素COX比例风险模型分别对101例结肠癌、219例直肠癌及137例根治术后的直肠癌患者进行生存分析.结果:经单因素分析显示,发生淋巴结转移、远处转移是结肠癌和直肠癌预后共同的不利因素,吸烟、浸润达浆膜外、未化疗和血清白蛋白含量低是结肠癌的可疑不利因素,印戒细胞癌、肿块大于6 cm、浸润达浆膜外、未行根治性手术和TNM分期高则是直肠癌的不利因素.根治术后的直肠癌病例,浸润深度深、发生淋巴结转移、脉管侵犯、肿瘤间质淋巴细胞浸润少、无Crohn样反应、肿瘤芽多、TNM分期高和尿糖阳性是不利因素.多因素分析显示,与结肠癌有关的独立预后因素为吸烟、淋巴结转移和血清白蛋白含量;直肠癌的独立预后因素包括远处转移、TNM分期和手术方案;根治术后的直肠癌患者独立预后因素包括脉管侵犯、淋巴结转移与尿糖.结论:吸烟、淋巴结转移和血清白蛋白含量是结肠癌的独立预后因素;远处转移、TNM分期和手术方案是直肠癌的独立预后因素.对于根治术后的直肠癌患者,脉管侵犯、淋巴结转移和尿糖是独立的预后因素.
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脉络膜新生血管患者房水中血管内皮生长因子和色素上皮衍生因子的浓度
目的:研究血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)在活动性脉络膜新生血管膜(CNV)患者房水中的表达.方法:应用酶联免疫吸附测定法对32例活动性CNV患者和10例白内障患者(对照组)的房水标本进行VEGF和PEDF检测.结果:CNV患者房水中的VEGF为(523.0±273.7)pg/ml,PEDF为(16.58.±13.11)ng/ml;对照组患者房水中的VEGF为(108.3±72.3)pg/ml,PEDF为(0.35±0.57)ng/ml.两组间的VEGF和PEDF均有显著性差异(均P=0.000).结论:活动性CNV患者房水中VEGF和PEDF增高,可能与脉络膜新生血管的形成有关.
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壳寡糖激活巨噬细胞的机制
目的:探讨巨噬细胞结合、内吞壳寡糖以及壳寡糖激活巨噬细胞的机制.方法:利用荧光物质2-氨基吖啶酮标记壳寡糖,在激光共聚焦显微镜下观察巨噬细胞内吞壳寡糖的过程,流式细胞仪分析细胞的荧光强度,通过竞争性抑制实验及钙离子、胰蛋白酶、秋水仙碱对内吞的影响来确定巨噬细胞内吞壳寡糖的机制.通过RT-PCR方法检测TNF-α来反映结合及内吞过程对壳寡糖刺激巨噬细胞的影响.结果:巨噬细胞可结合内吞壳寡糖.内吞易受温度影响,37℃较迅速(<2 min),4℃只能结合不能内吞.EDTA可抑制巨噬细胞内吞壳寡糖;经胰蛋白酶预处理的巨噬细胞摄取壳寡糖的能力大大降低,终止胰蛋白酶后巨噬细胞摄取壳寡糖的能力得到恢复.秋水仙碱预处理可明显抑制巨噬细胞摄取壳寡糖,并呈剂量依赖性.0.1 mol/L甘露糖可抑制壳寡糖对巨噬细胞的刺激作用.结论:甘露糖受体介导的吞饮是巨噬细胞内吞壳寡糖的一条重要途径,甘露糖受体在壳寡糖激活巨噬细胞中起重要作用.
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孕母慢性淋巴细胞性甲状腺炎对婴儿智能发育的影响
目的:探讨孕母患慢性淋巴细胞性甲状腺炎对婴儿的影响.方法:通过浙江省新生儿疾病筛查网络系统,从2001年7月至2003年6月对21例母亲患慢性淋巴细胞性甲状腺炎的婴儿进行随访,观察其甲状腺功能情况,并采用Gesell发育量表对其智能发育进行跟踪调查.结果:21例婴儿中甲状腺功能正常8例,高TSH血症11例,先天性甲低2例,与同期健康母亲的新生儿相比差异有显著性(P<0.01);孕母患慢性淋巴细胞性甲状腺炎的婴儿其应物能、应人能、粗动作能、细动作能发育均落后,与健康孕母的婴儿比较,差异有显著性(P<0.05).结论:孕母患慢性淋巴细胞性甲状腺炎对婴儿甲状腺功能及智能发育有影响.
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代谢综合征及其代谢指标异常对患者血浆vWF与NO含量的影响
目的:观测代谢综合征(MS)患者血浆中血管性假性血友病因子(vWF)和一氧化氮(NO)含量的改变,探讨其对内皮功能的影响.方法:79例患者按MS代谢指标异常数量的不同分为1~2个代谢指标异常组(n=43)和MS组(n=36),另设正常对照组(n=30),测定其血浆中vWF及NO含量,分析MS代谢指标异常与vWF、NO的关系.结果:MS患者的vWF含量高于1~2个代谢指标异常组(P<0.05)和正常对照组(P<0.01),1~2个代谢指标异常组的vWF值高于正常对照组(P<0.05);MS组的NO含量低于正常对照组(P<0.05),1~2个代谢指标异常组的NO含量低于正常对照组(P<0.05),MS组与1~2个代谢指标异常组无明显差异(P>0.05),但是在两组去除糖尿病患者后,MS组的NO值低于1~2个代谢指标异常组.结论:随着代谢指标异常增多,患者内皮功能受损加重.
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红藤饮片提取物抑菌活性与次生代谢产物含量的相关性
目的:了解3个不同产地、2个不同批次的红藤饮片6种次生代谢产物含量、抑菌活性及两者的相关性.方法:利用分光光度法对红藤饮片提取物的6种次生代谢产物含量进行分析,以金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌为实验菌株,用纸片琼脂扩散法测定抑菌圈大小;以平板二倍稀释法统计小抑菌浓度(MIC);以试管二倍稀释法统计小杀菌浓度(MBC).结果:红藤药液对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑菌活性以安徽产地第一批次高,抑菌圈大小、MIC、MBC分别为(9.67±0.29)mm、12.5 mg/ml、31.25 mg/ml和(10.17±0.58)mm、12.5 mg/ml、31.25 mg/ml,江苏产地第二批次低,抑菌圈大小、MIC、MBC分别为(7.67±0.29)mm、25 mg/ml、125 mg/ml和(8.17±0.29)mm、25 mg/ml、125 mg/ml.红藤饮片提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌活性在不同产地和不同批次之间均有显著性差异(P<0.01);对枯草芽孢杆菌的抑菌活性在不同产地亦有显著性差异(P<0.01),但不同批次之间无显著性差异(P>0.05).红藤药液的6种次生代谢产物总量以安徽产地第一批次高(3.61%),江苏产地第二批次低(1.90%).红藤提取物的总生物碱和游离蒽醌在不同产地之间有显著性差异(P<0.01),而在不同批次之间无显著性差异(P>0.05);总绿原酸、黄酮类化合物、总鞣质和总皂苷在不同产地和不同批次之间均有显著性差异(P<0.01).影响红藤饮片对2种细菌的抑菌活性的主要次生代谢产物可能为总皂甙、总鞣质、游离蒽醌及总绿原酸.结论:不同红藤饮片的次代谢产物的含量及抑菌活性以安徽和浙江产地较高,江苏产地较低;红藤的抑菌活性与饮片中总皂甙、总鞣质、游离蒽醌及总绿原酸的含量密切相关.
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血管紧张素转换酶基因多态性与冠心病及其冠状动脉粥样硬化病变程度的关系
目的:研究汉族人血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性与冠状动脉造影确诊的冠心病及其冠状动脉粥样硬化病变程度的关系.方法:应用聚合酶链反应技术和遗传学方法,测定169例经冠状动脉造影确诊的冠心病患者和168例汉族正常人的ACE基因插入/缺失(I/D)多态性.比较ACE I/D多态性与冠心病及其冠状动脉病变支数和冠状动脉积分的关系.结果:①汉族正常人和冠心病患者的ACE基因型频率观察数与期望数差异均无显著性(P均>0.05);②冠心病患者ACE DD基因型频率显著高于正常人(0.296 vs 0.161,P<0.01);③冠心病患者冠状动脉单支、双支、多支病变组比较,ACE基因型与等位基因频率差异均无显著性(P均>0.05);④冠心病患者的冠状动脉积分在ACE基因型间差异无显著性(P>0.05).结论:ACE基因缺失多态性与冠心病有关,与冠状动脉粥样硬化病变程度无关.
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真胰岛素和免疫反应性胰岛素检测对评价精氨酸刺激试验的影响
目的:探讨真胰岛素(TI)和免疫反应性胰岛素(IRI)水平在反映胰岛β细胞功能和胰岛素抵抗方面的不同.方法:对141例受试者行精氨酸刺激试验,分别测定各时点血糖(PG)、TI、IRI及胰岛素原(PI),其中正常糖耐量(NGT)组35例、2型糖尿病(T2DM)组106例,用精氨酸刺激试验后TI/PG、(TI+PI)/PG和IRI/PG的增值及曲线下面积来评价β细胞功能.结果:①TI/PG与(TI+PI)/PG及IRI/PG的增值无论在NGT组还是T2DM组均有相关性(r=0.68~0.99,均P<0.01),其曲线下面积亦有类似现象(r=0.62~0.99,均P<0.01).②TI/PG的增值与曲线下面积在NGT组和T2DM组均相关(r分别为0.96、0.82,均P<0.01).③以TI、(TI+PI)和IRI分别计算的HOMA-IR在T2DM组明显高于NGT组(均P<0.01).④精氨酸刺激试验结果证实T2DM病理生理改变主要表现为胰岛素抵抗伴分泌不足.结论:TI较IRI更能客观地反映T2DM患者β细胞功能状态和胰岛素抵抗程度,但在无条件检测TI的情况下IRI也可推广使用,从而指导临床实践.
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糖尿病大鼠心肌超微结构改变及过氧化物酶体增殖激活受体gamma配体对其作用的研究
目的:明确糖尿病大鼠心肌超微结构改变及过氧化物酶体增殖激活受体(PPAR)gamma配体(罗格列酮)对之的作用.方法:建立6周和10周糖尿病大鼠组,其中10周糖尿病大鼠的1组用PPARgamma配体治疗,各组左心室心肌制作透射电镜标本.结果:STZ诱导的糖尿病大鼠心肌细胞胞浆肌原纤维束减少并断裂、融合,肌原纤维束与线粒体结构排列紊乱,线粒体崩解,细胞核固缩,核仁消失.10周组糖尿病大鼠心肌超微结构破坏比6周组明显.与未治疗组比,罗格列酮治疗组心肌结构完整、清晰,基本和正常大鼠心肌超微结构相似.结论:高血糖引起心肌超微结构损伤明显,糖尿病病程越长病变越明显;PPARgamma配体具有心肌保护作用,而且不依赖于降血糖.
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氯沙坦对高糖状态下内皮细胞的保护作用及其机制探讨
目的:探讨高糖环境下氯沙坦对内皮细胞的保护作用及其机制.方法:比色法测定内皮细胞条件培养上清中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性和丙二醛(MDA)水平,RT-PCR方法分析细胞VEGF mRNA的表达水平,ELISA方法检测细胞分泌的VEGF蛋白.结果:在高糖处理的细胞条件培养上清中SOD和CAT活性降低,而MDA含量升高(P<0.05),同时细胞VEGF mRNA和蛋白质表达增加(P<0.05);而氯沙坦可削弱上述变化,降低内皮细胞MDA含量、增强SOD与CAT活性,以及下调VEGF mRNA和蛋白质表达(P<0.05).结论:高糖可诱导内皮细胞活性氧产生增多,抗氧化酶活性下降,导致细胞氧化平衡失调,使VEGF mRNA表达与蛋白分泌增加,促进高糖时内皮细胞病变的进展,提示氯沙坦对高糖状态下的内皮细胞的保护作用可能与调节内皮细胞氧化平衡和抑制内皮细胞的活化有关.
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不同HIV蛋白酶抑制剂对鼠胰岛素瘤细胞功能的影响
目的:探讨不同HIV蛋白酶抑制剂对胰岛beta-细胞功能的影响.方法:体外观察不同浓度ritonavir或amprenavir干预48 h对鼠胰岛素瘤INS-1细胞葡萄糖刺激的胰岛素释放速率的影响,胰岛素测定采用ELISA法,并用细胞内DNA含量标准化.用苔盘蓝染色细胞计数、MTT试验评估ritonavir或amprenavir对INS-1细胞活力的影响.结果:Ritonavir治疗可以显著降低基础胰岛素分泌速率及葡萄糖刺激的胰岛素释放速率,并呈剂量依赖关系(r分别为-0.861,-0.839,均P<0.01).10 μmol/L ritonavir分别降低基础胰岛素分泌和葡萄糖刺激的胰岛素释放达46%和47%.Amprenavir对胰岛素释放功能没有影响.结论:不同HIV蛋白酶抑制剂对胰岛beta-细胞功能的影响不同.
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女性腹型肥胖患者低脂联素血症与胰岛β细胞功能关系探讨
目的:探讨女性腹型肥胖患者脂联素水平与胰岛β细胞功能之间的关系.方法:应用高葡萄糖钳夹技术检测了9例女性腹型肥胖、9例健康女性对照和7例女性2型糖尿病患者的胰岛β细胞功能和胰岛素敏感性,用MRI测定局部体脂和酶联免疫法测定脂联素水平.结果:对照组胰岛素分泌第一时相(FPIR)、葡萄糖代谢清除率(GDR)、胰岛素敏感性指数(ISI)和脂联素水平高于腹型肥胖组和2型糖尿病组;内脏脂肪面积(VA)低于腹型肥胖组和2型糖尿病组(P<0.05).腹型肥胖组脂联素、FPIR、胰岛素分泌第二时相(SPIR)和胰岛素分泌大量(INSmax)高于2型糖尿病组(P<0.05).多元逐步回归分析显示,年龄、FPIR和GDR与脂联素呈独立正相关(B分别为0.145、0.194、0.277,均P<0.05);腰臀比(WHR)与脂联素呈独立负相关(B为-7.424,P<0.05).结论:腹型肥胖女性脂联素水平降低,可能与胰岛素分泌密切相关.
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微囊藻毒素致毒机理的研究进展
微囊藻毒素是一种单环七肽毒素,主要由微囊藻产生.近年来有许多研究表明微囊藻毒素能诱导细胞凋亡、氧化应激和线粒体功能的改变,并发现凋亡相关蛋白Bcl-2蛋白家族和P53在其中起重要作用.
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骨髓组织印片评估有核细胞量的价值
目的:研究骨髓印片评估有核细胞量的价值.方法:272例经骨髓活检术获取的组织块置于载玻片上轻轻滚动制成印片,Wright-Giemsa染色,按有核细胞评判标准与骨髓涂片同步检查.结果:有核细胞明显减少和极度减少,明显增多和极度增多的4个级别,骨髓印片明显高于骨髓涂片(P<0.05),而印片与切片比较无明显差异(P>0.05).以骨髓切片细胞量变化为标准,切片减少组中印片和涂片的符合率(84.4%和97.9%)较高;细胞量正常和增加组中印片的符合率(84.4%和93.2%)高于涂片(60%和64%),两组比较有显著性差异(P<0.01);灵敏度、特异性、Youden index、阳性预示值和阳性似然比,印片优于涂片.以切片诊断为金标准,印片诊断再生障碍性贫血和造血减低阳性率为37.1%,假阳性率为7.3%,比涂片(阳性率66.9%、假阳性率29.8%)低,(P<0.01);诊断指标的性能印片优于涂片,其中印片诊断为脾功能亢进和骨髓增殖性疾病(除感染和少数骨髓增殖性疾病外)涂片为假阴性结论.结论:骨髓印片在评估有核细胞量优于骨髓涂片,印片和涂片简便快速联检可提高骨髓细胞学的诊断水平.
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腹部孤立性纤维瘤的影像学诊断
目的:探讨腹部孤立性纤维瘤(SFT)影像学及病理学特征.方法:回顾性分析了6例腹部孤立性纤维瘤病例的CT和MRI表现以及病理组织学和免疫组织化学变化.结果:CT显示肿块边界清楚,增强扫描因肿瘤富于血管通常早期呈明显均质性强化.MR扫描显示肿瘤实质在T1WI、T2WI多呈低信号,但肿瘤因黏液样变性或出血在T2WI呈高信号.病理学检查:肿瘤由梭形细胞构成,有多种排列方式,免疫组化CD34阳性.结论:SFT是一种间叶源性、境界清楚的软组织肿瘤,影像学上因病理学上肿瘤细胞分布以及有无黏液样变性而呈现不同的改变及强化模式.
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体外受精-胚胎移植治疗多囊卵巢综合征
目的:探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗多囊卵巢综合征(PCOS)合并不孕的疗效.方法:回顾性分析了2001年-2004年PCOS患者(研究组)52例和输卵管阻塞不孕患者(对照组)408例接受IVF-ET治疗的临床资料,比较两组超促排卵刺激时间和剂量,分析两组注绒毛膜促性腺激素(HCG)前血清雌二醇(E2)和孕酮(P)水平、获卵数、受精率、胚胎数及移植周期妊娠率、着床率、流产率、卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率、ET取消率等差异.结果:两组刺激时间和用药剂量无显著性差异;PCOS患者注HCG前血E2、P水平显著高于对照组(P<0.01、<0.05),获卵数、胚胎数均显著多于对照组(P<0.01),但受精率较低,妊娠率、着床率、流产率与对照组无显著差异,OHSS发生率和ET取消率显著高于对照组(P<0.01).结论:多囊卵巢综合征患者行IVF-ET治疗时受精率较低,但获卵数多,所获胚胎数多,周期妊娠率、着床率和流产率与输卵管阻塞性不孕者无显著差异,但OHSS发生高危,取消ET率高.
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小儿复合型先天性心脏病的介入治疗
目的:研究小儿复合型先天性心脏病经导管介入治疗的方法及疗效.方法:1994年3月至2003年12月适合经导管介入治疗的复合型先天性心脏病患儿15例,肺动脉瓣狭窄(PS)伴房间隔缺损(ASD)或动脉导管未闭(PDA)者,先行PS瓣膜成形术,再堵塞ASD或PDA;主动脉缩窄(COA)伴PDA者,先行COA血管成形术,4~15个月后再行PDA堵塞术;主动脉瓣狭窄(AS)伴PDA者,先行瓣膜成形术,再行PDA堵塞;室间隔缺损(VSD)伴PDA采用弹簧圈封堵.结果:15例患者经导管介入治疗均获成功.除2例PDA术后即刻有少量紊流,余均无残漏.随访(3.57±2.61)年,跨瓣(或跨缩窄段)压差经超声心动图或导管测压除AS外均正常.围术期机械性溶血、弹簧圈脱落和动脉栓塞各1例.结论:复合型先天性心脏病经导管介入治疗只要恰当掌握指征,操作规范,可获得良好的治疗效果;对合并AS者,适应证的掌握及球囊大小的选择需进一步摸索.
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糖尿病微血管病变发病机制和治疗靶点
糖尿病微血管病变是糖尿病致死致残的主要原因之一,严重影响糖尿病患者的生存质量.其发病机制尚未完全明了,目前认为主要与多元醇通路活跃、氧化应激增加、糖基化终产物形成及蛋白激酶C通路激活有关.以发病机制为靶点的治疗可能会为预防和延缓糖尿病微血管病变的发生发展带来新的希望.
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高钙血症3例
1 病例摘要例1:患者男,63岁.因发热伴黑便2个月,尿频尿痛10余天入院.患者2个月前受凉后出现发热、头昏、乏力,当地医院拟诊"贫血",给予肌注右旋糖酐,继之解黑便,至当地县医院住院,诊断"慢性浅表性胃炎,十二指肠球部糜烂出血,贫血".经止血制酸等对症治疗好转后出院.几天后又出现上述症状,当地胃肠造影显示"十二指肠球部憩室,未见缺损及龛影",骨穿提示"反应性骨髓像",对症处理后无好转,并出现明显尿频尿痛,即转入本科治疗.
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2011 | 01 02 03 04 05 06 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
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