HPLC同时测定妇炎康复片3种主要抗炎成分含量

目的:建立HPLC同时测定妇炎康复片中芍药苷、橙皮苷及黄芩苷含量的方法.方法:采用HPLC条件为:色谱柱为Phenomenex C18柱(250 mm x4.60 mm,5μm);流动相:乙腈-磷酸二氢钾水溶N(0.05 mol/L,磷酸调pH至3.0)(梯度洗脱:O min,17:83;10 min,17:83;15 min,22:78;30 min,30:70);流速:1.0 mL/min;柱温:40℃;检测波长:231 mm.结果:芍药苷的线性范围为0.0533～0.4800 μg(r=0.9997),橙皮苷的线性范围为0.0798～0.7182 μg(r=0.9999),黄芩苷的线性范围为0.3600-3.420gμ(r=0.9999);平均加样回收率,芍药苷为99.49%.RSD=1.70%(,n=5),橙皮苷为99.59%,RSD=0.41%(n=5),黄芩苷为99.92%,RSD=1.26%(n=5).结果测得3厂家妇炎康复片中每片含芍药苷为1.0656,1.4455,0.7042 mg;橙皮苷为0.5383,0.7676,0.4403 mg;黄芩苷为3.9544,7.0312,2.8877 mg.结论:该方法简便、快速、准确,可用于妇炎康复片的质量控制.

362株肠球菌对抗菌药物的耐药性研究

目的:了解粪肠球菌、屎肠球菌及其它肠球菌对抗菌药物的敏感性,为临床提供治疗依据.方法:采用K-B法对362株自临床送检的血液、尿液及其他标本分离的肠球菌进行药敏试验.结果:362株肠球菌属中,粪肠球菌256株、屎肠球菌85株、其他肠球菌21株.粪肠球菌对氨苄西林、环丙沙星、青霉素G的耐药率分别为61.8%、48.7%、36.8%,低于屎肠球菌的90.5%、76.7%、82.3%;粪肠球菌、屎肠球菌对红霉素的耐药率分别达到86.3%和91.2%,对万古霉素的敏感性均>95%.高耐氨基糖苷类肠球菌(HLAR)的分离率为粪肠球菌42.7%、屎肠球菌71.0%,屎肠球菌HLAR的检出率高于粪肠球菌.通过高耐氨基糖苷类肠球菌与非HLAR肠球菌株的敏感性比 较发现,肠球菌的非HLAR株的敏感性均高于HLAR株.结论:粪肠球菌、屎肠球菌对不同抗菌药物的敏感性差异较大,治疗时应根据耐药特点及菌种间的耐药性差异选择相应的药物和方案,目前万古霉素仍然是治疗肠球菌属感染的有效药物,但临床应慎用万古霉素,以免诱发耐药菌株的产生和流行.

兔激素性股骨头坏死软骨与软骨下骨组织损伤的实验研究

目的:通过分析早期激素性股骨头坏死(SANFH)软骨与软骨下骨组织损伤的相互关系以探讨其发病机制.方法:42只日本大耳白兔通过大剂量注射醋酸泼尼松龙制作激素性股骨头坏死SANFH模型,第2,6周观察其股骨头软骨、软骨下区骨组织、软骨下区血管的变化.结果:第2周时软骨下区骨组织部分陷窝空虚,呈区域性分布;第6周骨小梁稀疏、变细,出现微骨折.软骨下区小动脉结构破坏.静脉及毛细血管扩张、淤血.造血组织减少,肥大细胞增多,基质水肿、出血.结论:早期SANFH中软骨深层细胞损伤与软骨下骨组织坏死可能同时形成,其在SANFH发病过程中可能起到重要作用.

STR基因座在湖北土家族人群多态性研究

目的:对湖北土家族群体D3S1358、TH01、D21S11、D18S51、PentaE、PentaD、VWA、D8S1179 8个STR基因座的遗传多态性进行群体遗传学研究.方法:利用荧光标记复合扩增及毛细管电泳自动荧光检测的方法,对226例无关个体的8个STR基因座进行检测.结果:在湖北土家族人群中8个STR基因座个人识别率为0.843-0.981,多态性信息含量为0.66-0.90.所有基因座经卡方检验符合Hardy-Weinberg平衡.结论:上述8个STR基因座在湖北土家族人群中等位基因分布较好,个体识别率高,可用于人类遗传分析及法医学中的亲子鉴定和个体识别.

瘦素与体外循环胰岛素抵抗关系的研究

目的:探讨血瘦素浓度与体外循环(CPB)手术患者胰岛素抵抗的关系.方珐:中低温体外循环手术22例,于麻醉诱导前、体外循环开始30 min、开放主动脉、体外循环开始后6、12、18、24 h抽取颈内静脉或体外循环血液,检测血糖、血清胰岛素浓度、血清瘦素浓度,计算各时间点胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)并分析它与血清瘦素浓度的关系.结果:CPB过程中、CPB术后胰岛素抵抗指数均降低;血清瘦素浓度在CPB过程中明显降低,CPB术后逐渐恢复;体外循环过程中血清瘦素浓度与胰岛素抵抗指数无明显相关性,CPB术后血清瘦素浓度与胰岛素抵抗系数呈正相关,P<0.01.结论:CPB术后血瘦素浓度改变与体外循环胰岛素抵抗正相关,CPB术中胰岛素抵抗可能与血瘦素浓度的改变没有关系.

猪性激素水平的变化及其在异种移植中的意义

目的:研究不同性别湖北白猪在不同阶段血清性激素水平的变化规律,从生理功能匹配性的角度,为猪到人异种器官移植选择合适的供体提供理论依据.方法:健康2月龄湖北白猪23头,分为雌性(8头)、雄性(7头)、雌性去势(4头)及雄性去势(4头)四组,分别于2、3、4、5、6及7月龄采血5 mL,应用放射免疫法测定血清雌二醇(E2)、睾酮(T).结果:雌性组的E2水平从2到7月龄逐渐升高,尤其在5～7月出现显著性增加(P<0.05);雄性组T水平随月龄的变化趋势与雌性组相似;雌性去势组的E2水平从2月龄到7月龄,先降低,后逐渐升高,但仍未达到去势前的水平;雄性去势组T变化趋势与之相似.结论:雌雄性湖北白猪不同阶段性激素变化与人类生长发育过程相似,从生理功能方面认为,湖北白猪作为异种移植的供源具有可行性,在异种移植时,还应考虑供受体的性别匹配问题.

氢气对百草枯中毒大鼠急性肺损伤的保护作用

目的:探讨氢气对百草枯中毒大鼠急性肺损伤的保护作用.方法:24只大鼠随机分为3组:对照组、百草枯组和氢气组,百草枯组和氢气组腹腔注射百草枯(35 mg/kg),氢气组于注射后立即开始吸入含2%氢气的空气.72 h后检测肺湿/干比、肺泡灌洗液PMN、PaO2、肺损伤评分、肺组织丙二醛含量.结果:与对照组比较,百草枯组、氢气组肺湿/干比、肺泡灌洗液PMN、肺损伤评分、肺组织丙二醛含量升高,PaO2降低;与百草枯组比较,氢气组肺湿/干比、肺泡灌洗液PMN、肺损伤评分、肺组织丙二醛含量降低,PaO2升高.结论:吸入氢气能够通过抑制脂质过氧化,抑制白细胞在肺部的聚集,从而减轻百草枯中毒后引起的急性肺损伤.

Survivin蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

目的:探讨Survivin蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达和临床意义.方法:S-P法检测86例食管鳞癌标本及其癌旁组织Survivin蛋白表达情况,研究其与食管鳞癌临床病理特征之间的关系.结果:Survivin蛋白主要位 于肿瘤细胞胞质,在食管鳞癌组织阳性表达率为75.5%(65/86),癌旁组织中不表达,其表达与淋巴结转移密切相关(P<0.05),与鳞癌分化程度无关(P>0.05).结论:Survivin表达可能与食管鳞癌的发生、发展及淋巴结转移密切相关,其表达水平可以作为判断食管癌恶性潜能的重要生物学指标.

解脲脲原体上转换发光免疫层析试纸条的制备

目的:获得抗解脲脲原体外膜多条带蛋白(MB蛋白)的多克隆抗体,制备能够用于解脲脲原体检测的上转换发光免疫层析试纸条.方法:以体外表达的解脲脲原体外膜MB蛋白N端保守性序列为抗原,免疫小鼠制备抗MB蛋白的抗体,ELISA检测免疫动物血清抗MB抗体滴度,并以小鼠抗体标记上转换发光体颗粒(UCP颗粒),制备能够检测解脲脲原体的上转换发光免疫层析试纸条.结果:解脲脲原体多条带蛋白免疫动物血清抗MB的IgG抗体滴度均超过1:25 600,以此抗体为基础建立的解脲脲原体上转换发光免疫层析试纸条能够识别1～200μg/L的解脲脲原体MB抗原.结论:初步制备的上转换发光免疫层析试纸条能够检测解脲脲原体.

心跳停止时间对兔心肺复苏后脑损伤的影响

目的:探讨心跳停止时间对心肺复苏后神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达和脑损伤的影响.方珐:40只兔气管夹闭窒息法制作心肺复苏模型,心跳骤停后4、5、6 min进行复苏,分别在0、24、48、72、96、120 h 6个时间点测定血清NSE含量,并对兔脑损伤情况进行神经功能评分.结果:心肺复苏后24、48、72、96 h NSE表达均明显高于假手术组,48h达峰值;心跳骤停组神经功能评分均明显高于假手术组,以复苏后24 h高;心跳骤停5、6 min组间神经功能评分无差异(P>0.05);血清NSE水平与神经功能评分正相关(P<0.01).结论:血清NSE水平评价CPR后脑损伤灵敏、客观.心跳停止4 min复苏后脑组织损伤较轻;停止5 min以上,脑组织损伤严重.

2型糖尿病肾病患者免疫相关因素分析

目的:探讨2型糖尿病肾病(DN)患者血液中细胞免疫、体液免疫的变化.方法:采用流式细胞术和免疫比浊法测定42例糖尿病肾病患者血液细胞免疫参数CD3、CD4、CD8、CD4/CD8、B细胞和NK细胞,及血清免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)、补体(C3、C4)等体液免疫参数,并与50例2型糖尿病无肾病者及46例健康体检者比较.结果:2型糖尿病无论是否并发肾病,与健康对照组比较CD3、CD4、CD4/CD8、B、NK显著性减低(P<0.01),IgA、IgM、C3、CA.显著升高(P<0.01);并发肾病组C4较单纯糖尿病组显著增高(P<0.01).结论:2型糖尿病肾病患者存在细胞免疫和体液免疫异常,应提高患者免疫功能.

静息心率与脑梗死患者颈动脉内-中膜厚度的关系

目的:探讨脑梗死患者静息心率(RHR)与颈动脉内-中膜厚度(CIMT)的关系.方法:按测得RHR值将87例脑梗死患者分为RHR<80次/min组(n=46)与RHR≥80次/min组(n=41),分别测量两组患者的CIMT、空腹血糖、血脂和血尿酸.结果:两组患者空腹血糖、血脂和血尿酸检测差异无统计学意义(P>0.05);与RHR<80次/min组相比,RHR≥80次/min组患者的CIMT明显增厚(P<0.01);RHR与CIMT呈正相关(r=0.46,P<0.01).结论:随着RHR的增加CIMT明显增加,RHR是一个可以反映脑梗死患者动脉硬化程度的指标.

连续性血液净化治疗急性肾衰竭

连续性血液净化(continuous blood purification,CBP)已广泛应用于复杂性ARF、SIRS、ARDS、MODS、肝脏疾病等领域,对降低急性肾衰竭死亡率有重要意义.我们应用CBP治疗急性肾衰竭病人取得了良好效果,现报道如下.

印堂穴持续贴敷法治疗失眠症

失眠症可引起头昏、记忆力减退、判断力和日常工作能力下降,严重者合并焦虑、抑郁和强迫等病症,失眠还是冠心病和症状型糖尿病的独立危险因素[1].治疗失眠临床多用安定类镇静安眠药物,长期服用可出现健忘、消化功能减退、易成瘾等副作用[2],远期疗效较差.

高压氧综合治疗重度窒息3例

窒息是由于呼吸、循环障碍造成全身器官缺血、缺氧,尤其是脑组织的急性缺血缺氧,从而使脑细胞发生严重的代谢障碍和脑水肿,引发一系列精神、神经症状.现将我科行高压氧(HBO)抢救3例重度窒息患者经验报告如下.

孟鲁司特治疗慢性阻塞性肺疾病的疗效分析

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是以逐溉发展的不完全可逆性气流阻塞为特征,其发病机制包括气道、肺实质和肺血管的慢性炎症,多种炎性因子如白介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白三烯B4(LTB4)参与其中.本文就白三烯受体拮抗剂孟鲁司特对慢性阻塞性肺疾病的作用及部分机制进行探讨.

椎管内镇痛联合拉美兹分娩法的临床观察

无痛分娩一般分药物和非药物两种.药物镇痛主要是椎管内镇痛,其镇痛效果确切,但有些产妇不知道如何使用产力,导致了自然分娩的失败,转为剖宫产.非药物镇痛,尤其是拉梅兹分娩呼吸法,简单有效,在分娩过程中应用,可减少产后并发症,但它解决不了客观的分娩疼痛.

改良双环法治疗乳房肥大

乳房肥大不仅使女性失去曲线美,还引起肩背部疼痛、乳房下湿疹等,患者心理压力很大,常需手术矫正.我科采用改良双环法行乳房缩小矫形术后效果满意,报告如下.

切开复位内固定治疗桡骨小头骨折

传统的桡骨小头切除术存在许多远期并发症,如桡骨向近侧移位而致腕部疼痛、肘关节外翻不稳定、桡骨近端部分缺损后导致力量减弱以及骨性关节炎等[1].随着对桡骨小头生物力学作用认识的深入及内固定技术和材料的发展,仅仅采取桡骨小头切除术的治疗方法应当仔细地重新评价[2].

复方丹参注射液治疗高白细胞急性白血病

白血病患者常因白细胞异常升高,出现神经精神症状、小血管阻塞、呼吸困难等,即高白细胞综合征,尤其是急性白血病患者更突出.

微晶磨削术联合乐为治疗面部痤疮

痤疮是青春期常见的一种毛囊皮脂腺炎症性皮肤病,主要发生于面部,影响美观,患者求治心切.本科于2008年4月-2008年10月采用微晶磨削术联合乐为乳膏(0.1%他扎罗汀乳膏)外用治疗痤疮,取得满意疗效,现报道如下.

改良腹腔镜辅助子宫腺肌瘤剔除术

子宫腺肌瘤治疗的主要方式有全子宫切除术、子宫楔形切除术或开腹子宫腺肌瘤剔除术.多数患者不愿接受全子宫切除术,且开腹剔除不彻底、手术时间较长、出血量较多,患者恢复慢.对于局限性子宫腺肌瘤(直径约≥5 cm)要求保留子宫和有生育要求患者,我们采用腹腔镜辅助下子宫腺肌瘤剔除术获得良好疗效,现报道如下.

转移因子口服液治疗湿疹的临床研究

转移因子口服液为小分子多肽和核苷酸,可特异或非特异性地调节机体免疫状态,对机体免疫功能呈双向调节作用,使机体的免疫紊乱获得纠正,可降低体液免疫IgE水平、促进INF-γ释放,从而增强Th1细胞功能、抑制,Th2细胞活性.

参松养心胶囊治疗伴焦虑症的早搏

多种原因均可引发早搏,无器质性心脏病的早搏一般无需治疗,但有明显临床表现者则需要药物干预[1].而出现明显临床症状的早搏患者又易出现心境障碍性疾病,反过来心境障碍性疾病又加重早搏,形成恶性循环.

削薄游离股前外皮瓣治疗四肢软组织缺损

游离股前外皮瓣修复四肢软组织缺损有许多优点,但修复有些部位愈合后皮瓣仍显臃肿,外观欠佳,使其临床应用受到一定程度的限制.鉴于此,我们经过反复实践,对股前外皮瓣进行大胆削薄处理.自2006年1月-2009年6月,运用削薄的游离股前外侧穿支皮瓣修复四肢软组织缺损13例,愈合后功能恢复良好,而且达到较好外观,治疗效果较为满意,现报告如下.

单纯超滤治疗顽固性心衰伴水肿23例

目的:探讨单纯超滤治疗顽固性心衰伴水肿患者的疗效与安全性.方法:回顾性分析了23例以单纯超滤治疗为主的顽固性心衰伴水肿病例.结果:23例患者均能耐受2～4 h血液超滤,透析后体重、LVEF值、BNP浓度、呼吸困难等较透析前有明显改善,总有效率87%.结论:单纯超滤是一种治疗难治性心衰伴顽固性水肿的有效方法.

32P-磷酸铬胶体注射治疗婴幼儿眼睑海绵状血管瘤

皮肤血管瘤是起源于中胚叶的皮肤血管的良性肿瘤,常在出生后不久发现,是软组织肿瘤中常见的一种.海绵状血管瘤是眼睑常见的血管病变,以往对其治疗曾用冷冻、放射线、外科手术、注射硬化剂、激光以及注射平阳霉素等方法,都存在一些不足,而采用32P-磷酸铬(32P-CrPO4)胶体局部注射治疗具有疗效好、方法简便、几乎无副作用等优点,临床上已有较多应用.

超声引导下输卵管积水的抽吸硬化治疗

输卵管积水是常见女性盆腔慢性炎症病变,近几年对其介入治疗的探讨较多[1-2],长期效果不十分满意.我院自2005年开展超声引导下输卵管积水抽吸硬化治疗以来,取得了满意效果,现将结果报道如下.

张力带法固定近指间关节掌侧骨折脱位

近指间关节掌侧骨折脱位并不是一种很罕见的运动性损伤,但经常被忽视或漏诊,其损伤晚期效果难以满意.临床上常表现为手指戳伤后肿胀,有时伤后有自行复位感,拍片可发现伸指肌腱中央束止点的撕脱骨折,有时伴有近指间关节半脱位.通常采用钢丝抽出法止点重建或克氏针固定,以及近指间关节克氏针固定治疗.

细菌性阴道病快速检测在性传播疾病中的应用

细菌性阴道病(bacterial vaginosis,BV)是由于滥用抗生素、全身性疾病、阴道灌洗不当、频繁性生活、性激素变化等原因引起阴道内菌群失调,乳酸杆菌的优势地位被大量的加德纳菌或混合性厌氧菌替代所导致的下生殖道临床症侯群.

肋骨骨折的护理

肋骨骨折多由直接或间接暴力导致,多发于4～10肋间,多见于成年人.可为单根或多根肋骨骨折,主要临床表现为局部疼痛、呼吸困难、痰液增多,严重者可发生多种并发症而危及患者生命.

血浆置换治疗血栓性血小板减少性紫癜的护理

血栓性血小板减少性紫癜(TTP)是一种较少见的弥散性微血管血栓-出血综合征.临床上以血小板减少性紫癜、微血管病性贫血、神经精神症状、肾脏损害和发热典型五联征表现为特征[1].多数患者起病急骤,病情凶险,死亡率高.

双氯芬酸钠栓引起过敏性休克的护理

双氯芬酸钠栓为非甾体抗炎药,具有较强的抗炎、解热和镇痛功效,双氯芬酸钠栓体外实验已证实其对上尿路平滑肌痉挛有抑制作用.2007年6月笔者于泌尿外科值班期间1名患者因体外冲击波碎石后疼痛使用双氯芬酸钠栓后出现过敏性休克,经采取抗过敏和抗组胺药物、持续心电监护及吸氧等措施,密切监测病情后隔日好转,并治愈出院.现将护理体会报告如下.

胎儿先天畸形孕产妇不同阶段知识需求调查

胎儿先天畸形是出生缺陷的一种,指胎儿在宫内发生的结构异常.发生的原因很多,主要为遗传、环境、食品、药物、病毒感染、母儿血型不和等[1].为了提高孕产妇的保健意识,降低缺陷儿的出生率,我科对110例胎儿先天畸形孕产妇健康教育方法及需求进行了调查研究,结果报道如下.

护理干预对中等面积烧伤患者焦虑及生活质量的影响

烧伤对人体破坏性很大,烧伤后患者常伴有焦虑情绪,严重者可影响患者生活质量[1].本文探讨护理干预对中等面积烧伤患者焦虑及生活质量的影响,以加深对此类疾患的认识及护理.

脑卒中继发抑郁症心理护理

目的:探讨心理护理干预对脑卒中继发抑郁症患者治疗效果.方法:45例脑卒中继发抑郁症患者,按入院先后顺序分为对照组和心理护理干预组.心理护理组在普通护理治疗基础上由经过一定培训的护士给予专门的心理辅导.测量患者康复治疗前(治疗前)及病人出院前一周内(治疗后)汉密顿抑郁量表(HRSD)评分.结果:治疗后两组HRSD评分均低于治疗前(P<0.01),但心理护理组HRSD评分显著低于对照组(P<0.01).结论:给予脑卒中继发抑郁症的患者必要的心理护理干预,可更显著降低其HRSD评分,提示心理护理有助康复.

会阴部烧伤的护理体会

1 临床资料我科自2003年1月-2009年4月期间,已治愈会阴部烧伤患者92例,其中男性60例,女性32例.年龄2～40岁.烧伤面积范围为1%～30%.烧伤深度:浅二度52例,深二度伴感染创面40例,其中浅二度烧伤平均住院12.5 d,深二度烧伤伴感染创面通过手术植皮修复创面平均住院25.3 d.

《郧阳医学院学报》投稿须知

预见性护理对糖尿病患者血糖控制的影响

糖尿病是一种典型的全身性、慢性、终身性疾病.我科从2007年3月起对所辖社区糖尿病病人进行预见性护理干预,具体报告如下.

乙状结肠代阴道成形术的护理

先天性无阴道为女性生殖道畸形,其发病率为1/4 000～1/5 000[1].成年后为恢复其生理功能,提高生活质量,需进行阴道形成术.手术方式有皮瓣、羊膜、皮肤等移植,但存在干燥、易感染、感觉差、术后需带模具等缺点,且一般需在婚前实施手术.而乙状结肠代阴道成形术,克服了上述缺点,且成形后的阴道具有分泌功能,非常接近阴道粘膜.

人脐血干细胞移植治疗股骨头坏死的护理体会

股骨头缺血坏死是由于不同病因破坏股骨头的血液循环,终导致股骨头塌陷、髋关节功能障碍的一种疾病[1],传统治疗效果不佳.

口腔颌面外科全身麻醉病人术中眼部护理

口腔颌面外科手术消毒范围一般包括上至发际,下至颈胸上部,体位多为头低仰卧位,肩部垫高.手术时采用气管插管全身麻醉,术中大部分病人眼睑闭合不全,消毒时消毒液流人眼内易引起眼睑肿胀、结膜水肿、角膜擦伤等并发症,引发一些不必要的医疗纠纷.

经尿道输尿管镜气压弹道碎石术护理

经尿道输尿管镜气压弹道碎石术与开放手术相比具有微创、经济、效果好、恢复快的优点,是治疗输尿管结石的理想方法,现将我院护理体会报告如下.

臭氧联合胶原蛋白酶消融治疗腰椎间盘突出症的护理

腰椎间盘突出症是外科常见疾病外伤或正常的活动使椎间盘压力增加,髓核从纤维薄弱处或破裂处突出,95%发生于L4、L5或L5-S1椎间盘[1],压迫了L5或S1神经根,故主要表现为坐骨神经痛.

碱性成纤维细胞生长因子和地塞米松联合诱导骨髓间充质干细胞的增殖和成骨分化

目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和地塞米松联合对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖和成骨分化的影响.方法:以第三代BMSCs为实验材料,分别给予10%FBS的DMEM培养基,含80μg/L bFGF的10%FBS的DMEM培养基,含bFGF 80μg/L+地塞米松10-8暑mol/L+β-甘油磷酸钠10 mmol/L+维生素C 50 mg/L的10%FBS的DMEM培养基处理,通过计数BMSCs细胞数评价其增殖能力,同时行碱性磷酸酶(ALP)活性检测及茜红素染色评价其成骨分化的能力.结果:与对照组相比较,bFGF可以显著提高骨髓间充质干细胞的增殖能力,bF-GF和地塞米松联合不仅促进了骨髓间质干细胞的增殖,而且促进碱性磷酸酶的表达和钙结节的形成.结论:bFGF和地塞米松联合促进了骨髓间充质干细胞的增殖和成骨分化.

不同转染方式对腺病毒介导的基因转染效率的影响

目的:研究携带绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein,GFP)基因的重组腺病毒在大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)中的表达.方法:将纯化的GFP重组腺病毒分别用单次转染和多次转染两种不同方法转染MSC,观察其感染效率和GFP表达水平.结果:培养的MSC呈CD90和CD105强阳性,且具有成骨、成脂肪等多向分化能力;携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒单次转染和多次转染P3代MSC都呈现出浓度依赖性;单次转染在80 MOI时转染效率高,而多次转染在20 MOI时转染效率即已达90%.结论:建立稳定、高效表达Ad-GFP的骨髓间充质干细胞实验体系,为MSC的标记及示踪奠定基础.

免脱钙骨基质材料复合骨髓间充质干细胞的体外培养

目的:制备兔脱钙骨基质材料,研究脱钙骨基质作为软骨组织工程支架材料的可行性.方法:参照Ursit方法制得兔脱钙骨基质材料,扫描电镜观察脱钙骨基质的结构,将兔骨髓基质干细胞与兔脱钙骨基质体外复合培养,第2、4、6,8、10、12天时行MTY法测定及扫描电镜观察.结果:兔脱钙骨基质支架材料外观均呈乳白色,SEM观察脱钙骨基质呈天然的高密度孔隙网架结构,平均孔隙率为(65.86±5.15)%;平均孔径大小为(124.82±42.79)μm;兔脱钙骨基质材料接种于骨髓基质干细胞后可见大量骨髓基质干细胞粘附,随培养时间延长,骨髓基质干细胞增殖明显,MTT法检测显示复合培养8 d骨髓基质干细胞增殖达稳定状态.结论:兔脱钙骨基质支架材料具有天然孔隙网架结构,利于细胞的粘附生长,具有良好的生物相容性,是一种较好的软骨组织工程支架材料.

骨髓间充质干细胞移植联用褪黑素对大鼠脊髓损伤修复的影响

目的:观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植联用褪黑素(MT)对大鼠脊髓损伤修复的影响,并对其作用机制进行探讨.方珐:首先采用密度梯度离心法分离培养大鼠BMSCs,以Brdu标记细胞核.然后将48只SD大鼠用改良Allen法制备T10脊髓损伤模型,并随机平均分为MT+BMSCs组、BMSCs组、MT组、模型对照组,另取12只作为空白对照组.分别于造模后1 d、3 d、7 d、14 d、21 d行神经功能BBB评分及斜板试验,免疫组化检测带标记的BMSCs迁移情况,显微镜下观察移植后脊髓形态结构变化.结果:术后神经功能BBB评分及斜板试验结果MT+BMSCs组优于BMSCs组(P<0.05),BMsc8组优于MT及模型对照组(P<0.05);MT+BMSCs组及BMSCs组损伤阶段脊髓内可见Brdu标记阳性BMSCs存活,且阳性数目前者多于后者,灰质分布较白质多,以注射部位向周围损 伤组织迁移;同时显微镜下可观察到MT+BMSCs组脊髓损伤区无明显空腔,空泡小而少,并可见较多神经纤维及细胞.结论:BMSCs联合MT移植促进大鼠损伤脊髓结构和功能恢复的效果明显优于单纯细胞移植组,两者联用具有协同效应.