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胎鼠不同脑组织中神经干细胞和神经元所占比例及差异
背景:目前,小鼠神经干细胞的体外培养技术已被众多科研平台熟练掌握,但是各科研平台在培养脑源性神经干细胞时所使用的脑组织有很大差异.胎龄14 d(E14)小鼠脑组织被广泛用于培养胎鼠神经干细胞,而对于此时胎鼠不同脑组织中所含神经干细胞的详细比例及其间有无差异,目前研究较少.目的:比较E14小鼠全脑、大脑皮质和前脑组织中神经干细胞和神经元所占比例及差异,为后期优化分离高纯度神经干细胞提供直接量化数据和前期研究基础.方法:分离E14小鼠全脑、大脑皮质和前脑组织,加入胰酶消化成单细胞,贴壁培养3.0-4.0 h,然后通过细胞免疫荧光实验,用DAPI标记总细胞,神经干细胞特异性抗原Nestin标记神经干细胞,神经元特异性抗原Tuj1标记神经元,统计分析Nestin+/DAPI和Tuj1+/DAPI所占比例.另外,通过实时荧光定量PCR技术检测E14小鼠全脑、大脑皮质和前脑组织中Nestin和Tuj1 mRNA的表达水平.结果与结论:①细胞免疫荧光结果显示,E14小鼠全脑、大脑皮质和前脑组织中均有大量Nestin+和Tuj1+细胞存在;小鼠前脑组织中Nestin+细胞所占比例高,明显高于全脑(P<0.01)和大脑皮质(P<0.05);而前脑组织中Tuj1+细胞比例明显低于全脑(P<0.05)和大脑皮质(P<0.001).该结果表明,与全脑和大脑皮质相比,前脑组织中神经干细胞所占比例高,神经元所占比例低;②Real time PCR结果显示,E14小鼠前脑组织中Nestin mRNA表达水平高,明显高于全脑组织(P<0.05),略高于大脑皮质(P>0.05),说明前脑组织中有较多神经干细胞存在;而Tuj1 mRNA的表达水平明显低于全脑组织(P<0.05)和大脑皮质组织(P<0.05),说明前脑组织中有较少神经元存在;③综合以上结果,与全脑和大脑皮质相比,分离、消化E14小鼠前脑组织所获得的神经干细胞比例高,是后期培养优质神经干细胞的重要前提.
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国内外脑卒中患者社区护理模式的比较及思考
脑卒中是由于急性脑动脉的破裂或闭塞导致的局部或全脑神经功能障碍持续时间>24 h或者死亡,包括蛛网膜下隙出血、脑出血和脑梗死.
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癌性脑膜炎1例分析
1病历摘要女患,48岁,以"头痛6个月,加重1周"为主诉入院.患者6个月来无明显诱因出现头痛,开始时呈全脑间断性闷痛,尚可忍痛.近1个月来逐渐疼痛难忍,疼痛呈持续性,并以后颈部及脑后部为主.自诉不敢转头,后颈部僵硬,需要家人不停揉捏后颈部方感舒适,夜间因疼痛而整夜不能入睡,服大量止痛药无效,曾到当地医院进行针灸和理疗颈部及躯体(自述右腿自针灸后即不能走路),不见好转.近1周来疼痛加重,曾因头痛而晕厥,不能进食,进食即呕吐,遂来诊,门诊以"头痛待查"收入院.
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赫曼全脑概念对神经心理侧化优势研究的新成果
神经心理侧化优势的研究经历了史培利的“二分脑模型”和麦克连的“三分脑模型”阶段,现已发展到赫曼的“四分脑模型”新阶段。赫曼是风行世界的全脑技术的创始人,其代表作《The Creative Brain》轰动美国之后,又推出了《Whole Brain Technology》。他创立了“全脑概念”(Whole Brain Concept)的理论体系,其要旨是:“四分脑模型”是神经心理侧化优势的新概念和新成果;“四分脑模型”可通过“赫曼大脑优势量表”的技术来测量[1]。“全脑概念”的理论和技术已在美国和欧洲许多国家得到推广使用,但在我国赫曼全脑概念及其医学哲学的理论价值鲜为人知。因此,介绍赫曼全脑概念对神经心理侧化优势研究的新成果,有助于医学心理学基础理论研究的深化和神经心理临床技术的试用。
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全身强直-阵挛性发作癫痫的脑电图诊断作用
癫痫是一种常见、病因不清的神经系统疾病,主要特点是脑局部或全脑的异常放电.我国癫痫的终身患病率为0.7%[1],癫痫的发作类型各异,脑电图(EEG)监测时观察到的脑部放电各不相同.现对脑电图描记资料完整,26例大发作(GTCS)癫痫患者脑电图进行分析.
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短暂性完全遗忘综合征(附4例临床分析)
短暂性全脑遗忘是一种临床综合征,特点为突然不能接受新的信息,而保留远期记忆,保持自知力,常在24小时内缓解.我科1989年~1999年共收治了4例,现报告如下.例1,女,68岁,干部.1989年8月6日上午散步后上街买菜,中午时发现上午3个多小时的买菜经过全无记忆,不知道买了多少菜,花了多少钱,是否与菜主讨价,买菜后是否又做了其它事情.查体无阳性体征,心电、脑电、头颅CT均正常,TCD示椎基底动脉紧张度增高.诊断:短暂性完全遗忘综合征.予盐酸培它啶及胞二磷胆碱治疗15天.2个月随访正常,无再次发作.
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脑死亡的新研究进展
脑死亡是全脑功能包括脑干功能不可逆终止.评估脑死亡作为一项严肃而慎重的工作,其判定标准在大多数国家是建立在临床判断和确认试验的基础上.随着医学伦理学和器官移植技术的发展,对脑死亡判断有愈来愈重要的意义.本文就脑死亡判断标准、脑死亡判断的临床价值等方面做一下探讨.
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小檗碱治疗脑梗死的疗效观察
小檗碱又称黄连素,传统医学因其清热解毒、杀菌消炎之功效而广泛应用于胃肠道感染.九十年代以来,有研究者发现小檗碱能保护脑缺血,并对其机制作了一定的探讨[1,2].本室研究发现小檗碱可抑制小鼠全脑缺血后神经元凋亡及其相关基因[3,4],并将其应用于临床治疗急性脑梗死,观察其疗效.
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纳络酮对全脑缺血大鼠的神经保护作用研究
全脑缺血后如何保护脑功能、减轻缺血/再灌注损伤是目前研究热点,但有效的神经保护剂并不多,仅tempol、MK-801等在实验中证明有效.纳络酮,作为传统意义的阿片受体拮抗剂,在许多实验和临床研究中亦被证明有神经保护作用,但仍存在较多争议.近研究揭示纳络酮具有抑制钙超载的作用,本文通过研究其对钙结合蛋白表达的影响来探讨纳络酮的神经保护作用.
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L-NNA对大鼠脑缺血时脑组织含水量和乳酸含量的影响
研究一氧化氮合酶(NOS)抑制剂对脑缺血的作用,选用易于透过血-脑脊液屏障的N-硝基左旋精氨酸(L-NNA),观察其对大鼠全脑缺血后脑组织含水量和乳酸含量的影响.
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伽玛刀结合全脑外放疗治疗脑转移瘤(附67例分析)
脑转移瘤是颅内常见的恶性肿瘤,占脑瘤患者10%~15%,尸体解剖证实30%~50%癌症患者死亡原因为脑转移瘤,其中20%~40%为单发肿瘤,未经治疗的脑转移瘤病人中位生存期仅1个月[1],所以无论原发病灶控制如何,脑转移瘤对患者的生存质量和生存期均有严重影响.随着放疗技术的不断发展,经全颅外放疗的病人中位生存期为3个月~6个月,50%以上病人死于肿瘤进展.我科采用伽玛刀结合全颅外照射治疗脑转移瘤病人,效果满意,优于单纯外放疗和伽玛刀治疗,现介绍如下.
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脑啡肽乙酸酯对大鼠急性全脑缺血-再灌注后海马区神经元保护的机制研究
目的:研究脑啡肽乙酸酯( DADLE)是否通过调控胞外信号调控激酶( ERK)信号转导通路而抑制大鼠急性全脑缺血-再灌注后海马区神经细胞凋亡。方法健康雌性SD大鼠50只(180~220 g)随机分为五组,建立大鼠急性全脑缺血-再灌注模型:假手术组( Sham组,n=10),只行手术分离血管,不予结扎血管及再灌注;缺血-再灌注组(I/R组,n=10),缺血15 min,再灌注120 min;DADLE+PD98059组(DA+PD组,n=10),缺血15 min后再灌注开始前静脉注射DADLE(3 mg/kg)及PD98059(0.3 mg/kg),然后行再灌注120 min; PD98059组(PD组,n=10),缺血15 min后再灌注开始前静脉注射PD98059(0.3 mg/kg);DADLE处理组(DA组,n=10),缺血15 min后再灌注开始前静脉注射DADLE(3 mg/kg),然后行再灌注120 min。 HE染色观察各组海马CA1区神经元病理变化情况,TUNEL法检测大鼠海马凋亡细胞,Western blot检测脑组织磷酸化ERK1/2(P-ERK1/2)的表达状况。结果 HE染色显示,I/R组、DA+PD组、PD组、DA组较Sham组正常神经元细胞计数显著减少(P<0.01);DA组神经元的损伤、脱失、细胞肿胀均较I/R组轻,正常神经元细胞计数较I/R组显著增多(P<0.01);PD组、DA+PD组及I/R组正常神经元细胞计数组间两两比较差异无统计学意义。 TUNEL法检测显示,I/R组、DA+PD组、PD组、DA组大鼠海马CA1区神经细胞凋亡指数均较Sham组显著升高(P<0.01);与I/R组比较,DA+PD组及DA组凋亡指数显著下降(P<0.01),PD组凋亡指数则升高(P<0.05);DA+PD组、PD组及DA组组间两两比较差异有统计学意义( P<0.01)。Western blot检测显示,I/R组(0.69±0.07)、DA+PD组(0.59±0.03)及DA组(0.83±0.06)的P-ERK1/2表达较Sham组(0.42±0.06)增多(P<0.01),而PD组(0.41±0.05)则无显著变化;PD组对P-ERK1表达呈完全抑制,予DADLE处理后P-ERK1表达则显著增加;与I/R组比较, P-ERK1/2在DA组的表达显著增加(P<0.01),而在DA+PD组及PD组则显著降低(P<0.01);DA+PD组、PD组及DA组组间两两比较差异有统计学意义( P<0.01)。结论 DADLE可通过激活ERK1/2信号转导通路特别是ERK1通路而发挥抑制急性全脑缺血-再灌注损伤诱导的神经细胞凋亡作用。
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颅内动脉瘤的DSA分析及栓塞治疗
颅内动脉瘤是引起蛛网膜下腔出血的常见病因[1].近5年来,我院对25例颅内动脉瘤进行全脑DSA(数字减影血管造影)检查,并对其中6例进行血管内栓塞治疗,取得良好的效果,现报道如下.
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年龄和性别影响DAT水平的实验研究(摘要)
目的研究年龄、性别对1255I-2β-甲酯基-3β-(4-碘苯基)托烷(β-CIF)与多巴胺转运蛋白(DAT)结合的影响。方法 6周龄与6月龄昆明小鼠年龄影响因素实验,大鼠年龄、性别影响因素实验。结果 6周龄小鼠的纹状体、额叶皮质、顶叶皮质、颞叶皮质、枕叶皮质、海马、脑干、小脑对125I-β-CIT摄取的%ID/g值及全脑摄取量(%ID)均大于6月龄小鼠。3月龄雄性SD大鼠纹状体、额叶皮质、顶叶皮质、颞叶皮质、枕叶皮质、海马、脑干、小脑对125I-β-CIT摄取的%ID/g值及全脑%ID均大于12月龄雄性SD大鼠相应组织的%ID/g或%ID值,而且也大于12月龄雌性大鼠相应组织的%ID/g值(除颞叶皮质、全脑外)。同龄(12月)SD雌性大鼠纹状体、额叶皮质、顶叶皮质、颞叶皮质、枕叶皮质、海马、脑干、小脑对125I-β-CIT摄取的%ID/g值及全脑%ID均大于同龄雄性SD大鼠相应值。结论低龄小鼠、大鼠纹状体摄取125I-β-CIT均高于高龄小鼠、大鼠;雄性大鼠纹状体摄取125I-β-CIT高于同龄雄性大鼠。提示小鼠、大鼠脑纹状体内DAT水平随年龄的增长可能减低。[全文刊登于中华核医学杂志2000,20(6):263]
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Turcot综合征伴甲状腺癌一例
患者女,24岁.1991年12月因"反复头痛"于外院头颅CT诊断"第四脑室髓母细胞瘤",并予手术治疗,术后病理证实.后于我院行60Co加10 mV X线局部加全脑及全脊髓放疗后治愈.
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CT 灌注成像能提高急性后循环卒中的诊断准确率
CT 灌注成像(computed tomography perfusion, CTP)在前循环急性缺血性卒中的检测中具有很高的诊断价值,但对疑似后循环卒中的诊断价值尚不确定,而且全脑容积灌注成像尚未得到广泛使用。因此,德国明斯特大学医院临床放射科的Sporns 等进行了一项回顾性研究,在非增强 CT 扫描( non-contrast CT, NCCT)和 CT 血管造影源图像(CT angiography source images, CTA-SI)的基础上进行全脑容积灌注成像,探讨其在疑似后循环急性缺血性卒中患者中检测梗死灶的额外价值。
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脑缺血预处理与脑缺血耐受的研究进展
1990年Kitagawa等[1]发现全脑1次短暂缺血即缺血预处理后并未引起明显的脑神经损伤,但对再次致死性缺血损伤产生了明显的保护作用,这种保护作用即为脑缺血耐受.这一现象立即引起了广泛关注,随着研究的进展,发现通过其他方法也可以诱导脑缺血耐受,弱的损伤如轻度低氧、低温、高压氧、扩散性抑制等刺激均可引发神经细胞对缺血产生耐受.现对缺血预处理诱导脑缺血耐受的研究进展综述如下.
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中脑周围非动脉瘤性蛛网膜下腔出血5例临床分析
蛛网膜下腔出血(SAH)的常见原因是囊状动脉瘤或动静脉畸形破裂.研究[1]发现,部分首次全脑数字减影血管造影(DSA)检查阴性的SAH患者的出血主要位于中脑周围的脑池中,具有特殊的临床及影像特征,称为中脑周围非动脉瘤性SAH (PNSH).现将本院确诊的5例PNSH患者分析如下.
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高血压患者脑血流量测定与血浆ET和CGRP的相关研究
测定原发性高血压患者全脑和局部脑血流量(CBF、rCBF),以探讨其变化特点及与血浆内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)水平的关系。 一、资料与方法 正常对照者9例,男5例,女4例,年龄(50.4±14.0)岁。高血压患者42例,男31例,女11例,年龄(50.8±8.8)岁,其中高血压Ⅰ期10例,Ⅱ期18例,Ⅲ期14例。受检者一侧手臂建立肝素化静脉通道并加热10 min,从对侧手臂注射99Tcm-双半胱乙酯(ECD)925~1 110 MBq后,立即由肝素化静脉抽血1 mL,用井型计数器测血样计数Ax,10 min后用GE Starcam SPECT仪行rCBF显像(探头旋转360°,共64帧,15 s/帧),以56%阈值对所有横断面勾边取全脑计数Cx,固定ROI,取连续3层横断面各脑区局部脑计数rCx均值,以上各值代入血样计数-活度、脑组织计数-活度归一方程及脑血流方程(模型实验获得),计算CBF和rCBF。血浆ET和CGRP水平按放免试剂盒说明书测定。
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急性颅内破裂动脉瘤早期血管内栓塞治疗
随着介入栓塞材料的不断发展和血管内栓塞技术的不断进步,血管内微弹簧圈栓塞已被越来越多地应用于颅内动脉瘤的治疗.我院近年来应用微弹簧圈早期栓塞治疗急性颅内破裂动脉瘤,取得较为满意的疗效.资料与方法1.一般资料 18例患者,男8例,女10例,年龄41 ~78岁.均经头部CT证实有蛛网膜下腔出血(SAH),并在2~7 d内进行全脑血管造影诊断及栓塞治疗.