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衣原体主要外膜蛋白的研究现状
衣原体主要外膜蛋白作为外膜复合物中的主要成分,与衣原体致病密切相关.该蛋白是一种跨膜蛋白,为衣原体引起机体免疫应答的重要免疫原,并为衣原体菌株进化及分类提供相关依据.因此,探讨衣原体主要外膜蛋白的结构与功能将有助于对衣原体致病机制及其诊断和预防等方面的研究.
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肺炎支原体P1蛋白的研究现状
P1蛋白是肺炎支原体的一种与黏附有关的跨膜蛋白,它只有正确定位于肺炎支原体顶端结构才能介导其黏附作用;P1蛋白结构基因的多态性是构成肺炎支原体抗原多态性的基础;P1蛋白本身也是一种重要的免疫原,可刺激机体产生强烈的免疫应答.因此,探讨P1蛋白基因结构与功能将有助于肺炎支原体的致病机制及其感染的诊断和预防等方面的研究.
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人类免疫缺陷病毒疫苗的研究进展
人类免疫缺陷病毒疫苗是控制艾滋病的佳方法.动物模型证实该病毒疫苗是可行的.人类免疫缺陷病毒中和抗体可达到足够高的水平以预防该病毒感染,但有型特异性.人类免疫缺陷病毒特异性细胞毒T淋巴细胞不能单独预防该病毒感染,但能将病毒血症控制在低水平.目前,人们将研究重点集中于病毒特异性抗体和T细胞反应.现有疫苗尚不能诱导对原发性病毒株具有广泛中和能力的抗体.然而,重组痘病毒疫苗和DNA疫苗提示细胞毒T淋巴细胞反应对来自不同进化分支的原发病毒株有广泛的交叉反应力.人们需找到新的免疫原来诱导中和抗体,以取得佳细胞毒T淋巴细胞反应.
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017 以合成HIV CD4/共受体肽免疫原为艾滋病疫苗的研究
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015 以金丝雀痘病毒为载体的HIV-1疫苗单独或联合使用gp120免疫的安全性和免疫原性评价
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一种新的虫卵免疫原成份的鉴定和定性:在评价和控制血吸虫病免疫致病性T细胞反应中的含义
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噬菌体展示技术及其在弓形虫研究中的应用
将病原体的免疫原与λ噬菌体或其他病毒的衣壳蛋白融合后一起展示于病毒表面,这样形成的新的病毒颗粒可用作疫苗.Smith[1]通过基因工程手段将外源基因插入到丝状噬菌体的PⅢ蛋白基因中,成功地使外源多肽展示在噬菌体的表面,而且用抗体检测发现该外源多肽具有同天然产物相同的生物活性.这标志着噬菌体展示技术的诞生.而Geysen等[2]认为含有关键残基的短肽能够模拟蛋白质上的功能位点,而且多数情况下,几个关键残基与其受体所形成的非共价键构成了全部结合的主要部分.这就为噬菌体展示技术奠定了理论基础.
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组蛋白诱导抗核抗体产生及其对肾脏损害
目的寻找系统性红斑狼疮中诱导抗核抗体(ANA)生成的真正的自身核成分免疫原.方法从ConA活化的脾淋巴细胞中提取组蛋白免疫同系BALB/c小鼠,ELISA方法测定IgG类抗组蛋白、抗dsDNA抗体,免疫荧光法检测抗核抗体核型和免疫复合物在肾小球内的沉积,免疫印迹法测定抗可溶性核抗原抗体,考马斯亮蓝法检测尿蛋白含量,光镜下观察肾脏形态变化,电镜下观察肾小球电子致密物.结果活性组蛋白诱导IgG类抗组蛋白、抗dsDNA等多种抗核抗体生成,且诱发同系小鼠产生SLE样肾脏病理变化.结论活性组蛋白是诱发抗核抗体生成、造成肾损害的免疫原之一.[全文刊登于中华微生物学和免疫学杂志2001,21(1):62]
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早期梅毒患者外周血单一核细胞Toll样受体2的表达
Toll样受体(Tnll-like receptors,TLR)是天然免疫受体,它既可以识别各种病原微生物,通过信号传导途径激活免疫细胞,引起天然免疫,又能进一步启动获得性免疫.TLR2可识别梅毒螺旋体的脂蛋白.研究发现,梅毒螺旋体膜脂蛋白既是梅毒螺旋体主要的免疫原,又具有强大的前炎症活性,在激活单核/巨噬细胞、内皮细胞中起着作用[1].为了探讨TLR2在早期梅毒发病机制中的作用,我们检测59例早期梅毒患者外周血CD14+单一核细胞TLR2的表达水平.
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用pIII及pVIII噬菌体展示系统展示抗原和抗原表位的免疫原性的研究
目的:探索用pIII和pVIII噬菌体展示系统展示抗原和抗原表位的免疫源性以及用噬菌体展示颗粒为免疫原制备抗体的可能性.方法:从人心肌组织中获得cTnI基因,突变后克隆入pMDT-18载体及pFD5 pIII型噬菌体展示载体.合成两条互补寡聚核苷酸单链,退火后变成编码cTnI 95~108位氨基酸的双链,与 PC89 pVIII型噬菌体展示载体连接.含有cTnI及其抗原表位基因的重组质粒转化辅助噬菌体敏感的XL1-Blue细胞,用VCSM13超感染获得展示有cTnI及其抗原表位的噬菌体颗粒,测定其表达量.并以此为免疫源免疫新西兰白兔获得抗体,用ELISA方法测定抗体滴度.结果:cTnI及其抗原表位在噬菌体颗粒表面得到成功展示,展示量分别为5 ng/ml和96 ng/ml.免疫后得到的抗体滴度为1∶300和1∶1?800.结论:制备具有一定空间结构的大分子蛋白的抗体时,可用pIII噬菌体展示系统,制备小分子肽线性表位的抗体时,pVIII展示系统具有独特的优势.
关键词: pIII噬菌体展示 pVIII噬菌体展示 免疫原 -
血浆置换在神经系统免疫原性疾病中的置换量及个体化
血浆置换(PE)对免疫原性疾病疗效肯定.我院8年来对50例神经系统免疫性疾病进行PE,并对PE量、疗程及个体化进行探索.总PE量为国外的1/4~1/8,不需胶体液扩容,副作用明显减少,同样获得良好疗效.
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人完整p53凋亡刺激蛋白家族抑制成员多克隆抗体的制备及鉴定
目的:p53凋亡刺激蛋白(ASPP)家族可调节p53抑癌功能,其抑制成员(iASPP)具有特异性抑制p53诱导细胞凋亡的能力.为了对iASPP进行系统研究,文中报道制备完整的iASPP分子多克隆抗体的方法.方法:在完整iASPP独有的N端选择3个免疫原肽段,制备了3个多克隆抗体.用ELISA检测抗体效价,Western blot比较3个抗体检测内源性抗原的效果,并用体外转录翻译系统制备的完整iASPP蛋白作为对照标准.结果:1号抗体效价>1:32 000,2号和3号抗体效价>1:16 000.Western blot确定100 000为完整iASPP蛋白的条带位置.结论:成功地制备了iASPP的多克隆抗体,为深入研究完整iASPP提供了有用的工具.
关键词: p53凋亡刺激蛋白家族抑制成员 多克隆抗体 免疫原 免疫印迹 -
肺炎支原体的粘附分子与肺炎支原体感染
肺炎支原体(Mycoplasma pneumomae,MP)引起的肺炎支原体肺炎(Myciplasmalpneumomae pneumoma,MPP)占各类肺炎总数的10~30%,好发于5~15岁的儿童和青少年,全年均可发病以秋冬季多见.其基本病理变化是一种化脓性细支气管炎和间质性肺炎.一般认为MPP的发病机制与以下三方面的因素有关:MP的粘附;上皮细胞的毒性变化;机体免疫调节机制的异常[1].在这三个因素中MP粘附分子的作用贯穿始终.首先是MP借助其粘附分子(亦称粘附素)吸附于呼吸道上皮细胞完成感染定殖的第一步;而后才能引起上皮细胞的各种毒性改变;同时,这些粘附分子还是MP重要的免疫原可以诱导机体产生强烈的免疫应答,导致免疫调节机制的异常,终引起机体肺部和肺外多系统的病变.近年来国内外学者对MP粘附分子作了深入的研究,主要体现在以下几个方面.
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日本血吸虫不同免疫原对小鼠Th1/Th2免疫偏移的影响
目的观察单、双性日本血吸虫感染小鼠后Th1/Th2细胞因子水平的动态变化,探讨日本血吸虫不同免疫原对Th1/Th2免疫偏移的影响及与虫卵肉芽肿形成的相关性.方法用ELISA夹心法检测单、双性日本血吸虫感染小鼠及单性感染8w双性再感染0~12w,小鼠脾淋巴细胞培养上清Th1细胞因子IL-2、IFN-γ和Th2细胞因子IL-4表达水平.结果单性感染小鼠6~12w在脾淋巴细胞培养上清中可测出一定量的IL-2和IFN-γ,但无明显动态变化,而IL-4未能测出;双性感染小鼠IL-2和IFN-γ在感染后4~6w开始上升,8w达高峰,随后下降,IL-4则在感染后8w时迅速上升且随着感染时间延长而明显升高,单性感染8w双性再感染4w时,小鼠脾淋巴细胞培养上清IL-2、IFN-γ和IL-4表达水平即迅速升高且在双性再感染8~12w逐渐增强.结论日本血吸虫不同免疫原对Th1/Th2免疫偏移的影响作用不同,Th1优势应答可能主要由虫体抗原诱导,Th2优势应答可能主要由虫卵抗原(SEA)所诱导,后者是诱导宿主产生免疫病理反应的主要因素.
关键词: 日本血吸虫 免疫原 Th1/Th2细胞因子 -
幽门螺杆菌疫苗保护性抗原的研究进展
Warren 和Marshall于1983年首次发现幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)以来,经过近20年全球性的研究,世界卫生组织已将其列为一类致癌因子 [1].目前全球近50%的人口感染了Hp,在发展中国家,其感染率可高达70%以上.然而,对于Hp的抗感染治疗尚存在较大问题.使用单剂药物根除率低,使用多联药物又造成费用太高,有效率也不太高,而且不能有效阻止 Hp的再次感染和复发.此外,耐药菌株的增加也使抗Hp治疗面临越来越复杂的难题.因而,Hp疫苗已成为防治Hp感染有效的途径.美国已将Hp疫苗列为21世纪疫苗发展的重点项目之一[ 2].经过近几年的研究,Hp疫苗取得了较大的进展,包括动物模型的建立、粘膜佐剂和免疫原的筛选、抗原投递方式的比较等工作.由于Hp的致病机理目前尚未研究清楚,不同地区不同菌株间又存在较大差异,因此,在Hp[ WTBZ 疫苗研究中筛选高效及特异的Hp保护性抗原也就面临更艰巨的任务 .本文拟就Hp疫苗研究中保护性抗原的新研究与开发动态作一综述.
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ctxAB融合基因真核表达的初步研究
霍乱是由霍乱弧菌引起的一种烈性肠道传染病.霍乱肠毒素(Cholera enterotoxin,CT)是引起霍乱的主要致病因子,是一种很强的免疫原和粘膜免疫佐剂,可用于研制粘膜免疫.
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4种免疫原对棘球绦虫继发性感染的预防效果
由于猪带绦虫和细粒棘球绦虫间存在大量的共同抗原[1~3],为寻找可能的免疫原制备细粒棘球绦虫疫苗,我们将4种猪带绦虫和细粒棘球绦虫抗原进行了初步免疫预防的动物实验,现将结果报告如下1 材料与方法1.1 免疫原制备 E.gCF免疫原:细粒棘球蚴囊液采绵羊肝脏,离心上清液浓缩20倍透析即E.gCF免疫原.E.gPS免疫原:离心沉淀洗涤数次,超声粉碎20min,离心收集上清液即E.gPS免疫原.C.cCF免疫原:猪囊蚴囊液离心收集上清液即C.cCF免疫原.C.cSW免疫原:猪囊尾蚴的头节和囊壁,洗涤数次后匀浆超声粉碎20min,离心收集上清液即C.cSW.分光光度法测定蛋白含量(751G).
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抗蚊阻断疫苗候选抗原研究中四种免疫原免疫效果分析
蚊是一些重要的寄生虫传染病如:疟疾、登革热、丝虫病等的重要传播媒介,对蚊进行有效综合防治成为人类面临的一个重大课题.抗蚊阻断疫苗因其具有很多优点而成为当前蚊综合治理研究中的热点.
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MIB-1单克隆抗体用于膀胱移行细胞癌增殖活性研究的初步报告
Ki-67是一种敏感而特异的增殖期细胞标记物,过去因只能用于冰冻切片,在应用上受到限制.近,Cattoretti等(1)以Ki-67抗原的重组部分,作用免疫原设计出的MIB-1单克隆抗体,经抗原修复后,可应用于石蜡切片的研究.我们回顾性检测了64例膀胱移行细胞癌的病理组织切片,旨在了解Ki-67与膀胱肿瘤的病理分级、临床分期和复发的关系.
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永生化树突状细胞与肿瘤研究进展
树突状细胞(Dendritic Cell,DC)是生物体内免疫系统中抗原递呈细胞(Antigen Presenting Cell, APC),是机体对免疫原产生免疫应答的重要功能细胞之一.