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骨髓CD34+造血干/祖细胞的分离、纯化及鉴定
造血干细胞(HSC)工程是利用HSC的生物学特征,通过细胞工程的技术,在体外模拟或部分模拟体内的造血过程,对分离纯化的造血干/祖细胞(HSC/HPC)进行体外扩增、定向诱导分化、功能激活与调控、目的基因转染等,终将造血细胞治疗更广泛有效地应用于干细胞移植、生物免疫治疗、造血支持治疗和基因治疗等领域.可见,从骨髓、脐血和外周血中分选纯化HSC/HPC对造血细胞增殖分化的基础研究及临床应用至关重要.CD34抗原是常用来分选纯化HSC/HPC的表面标志[1].我们采用免疫磁珠阴性分选策略,从骨髓细胞中纯化CD34+HSC/HPC,经流式细胞术与免疫组织化学检测CD34+细胞的富集程度,并对分选细胞进行造血祖细胞集落鉴定.本研究旨在为研究造血干/祖细胞增殖分化的调控奠定实验基础.
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体外不同张应力对人牙周膜成纤维细胞增殖活性的影响
人牙周膜组织也包含有细胞和细胞外基质,人牙周膜成纤维细胞(Human periodntal ligamentfibroblast,HPDLF)是其主要细胞成份.人牙周膜成纤维细胞不仅合成了人牙周膜细胞外基质中大多数的各型胶元纤维和蛋白多糖,而且还通过分泌和合成多种多样的细胞因子与酶共同参与调节牙周组织的代谢和改建.细胞应力实验研究是目前国内外正在兴起的一个研究的热点,广泛应用于多种组织细胞在生理或病理状况下发生形变后,其增殖分化及功能状态的研究.关于正畸力作用下人牙周膜成纤维细胞的生物学行为变化及其机制目前尚不清楚.故研究多种应力条件下人牙周膜成纤维细胞的增殖对于深入了解正畸牙移动机理有重要的意义.
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高山红景天对大白鼠肝星状细胞增殖分化的影响
高山红景天是中药制剂,主要有效成分为红景天甙、甙元酪醇、蛋白质、黄酮、有机酸、酚性化合物、甾类及微量元素等.本文观察红景天水煎剂对大鼠肝星状细胞(HSC)增殖和Ⅰ型胶原合成的影响,研究其防治肝纤维化的作用和机制.
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溃疡性结肠炎患者肠黏膜内过氧化物酶体增殖物激活受体γ和环氧合酶-2的表达及意义
溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的病因和发病机制目前尚不清楚,可能是由多种因素(如遗传、环境,尤其是肠道菌群)之间相互作用,在遗传易感宿主通过异常的黏膜免疫反应引起肠道炎性反应.过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator activated receptor,PPAR)-γ属于核受体超家族成员,其在脂代谢、糖代谢、细胞增殖分化等方面发挥重要作用.
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皮肤创伤修复中Wnt信号途径对皮肤干细胞增殖分化的调控机制
当前我国正处于工业、交通持续快速发展时期,每年各种烧伤病人达数百万之多,交通事故所致创伤数以十万计.烧伤、创伤所致的皮肤缺损畸形以及功能障碍已成为危害人民群众健康的多发常见病.皮源的严重缺乏,已成为整形修复重建外科医生面临的难题之一.这一问题的终解决将有赖于组织工程化皮肤的研制与开发.近年来,组织工程化皮肤构建的研究备受重视,以皮肤干细胞作为种子细胞的研究,包括其定位、鉴定及其增殖分化的生物信号调控机制等成为近年的研究热点.
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罕见婴儿会阴疝1例报告
铅暴露儿童发生RRI可能与下列因素有关:①血铅升高引起血红蛋白合成障碍,抵抗力降低.②铅-钙拮抗、铅-锌拮抗、铅-铁拮抗,使体内钙、锌、铁元素缺乏,T、B细胞增殖分化障碍,IgG亚类缺陷,引起RRI发生[6].③铅升高引起胃肠功能紊乱,维生素吸收减少,维生素A、E和β胡萝卜素缺乏,影响免疫功能[7].④由呼吸道吸收的铅会对呼吸道局部产生慢性不良刺激,降低其局部防卫机能.
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活性氧自由基通过活化p38MAPK通路限制造血干细胞的寿命
早在上世纪50年代就有学者提出了"自由基能导致衰老"的假说,该假说认为随着年龄的增长,体内聚积的活性氧自由基(ROS)会作用于人体内的DNA、蛋白质和细胞膜等,导致人体衰老,终缩短寿命.对于该假说仍存在着大量的争议.如果ROS确实能够导致衰老,那么有可能受影响的应该是具有自我更新和分化能力的各种前体细胞,尤其是人体内活跃的干细胞--造血干细胞(HSCs).作者通过实验证实了积聚的ROS通过激活p38MAPK通路导致HSCs过度增殖分化,终衰竭.
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维生素A代谢对眼表上皮的影响及其作用机制的研究进展
维生素A是人体必需的营养物质,维生素A缺乏症对于发达国家和发展中国家都仍是重要的健康问题.维生素A代谢过程涉及多种衍生物,对角结膜上皮的增殖分化有重要作用.本文就维生素A在眼表的代谢过程,对眼表上皮的影响及可能的机制进行综述.
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促毛细胞再生激发因素的研究进展
两栖类和鸟类的听器支持细胞能够重新进入细胞周期增殖分化或直接转分化为新生毛细胞,并有不同程度功能的恢复,哺乳类内耳的前庭毛细胞也见到这种现象.在这个过程中,某些激发因素在刺激支持细胞发生表型转化中,发挥了重要的功能.本文就这些激发因素的作用做一综述,为哺乳类内耳的耳蜗毛细胞的再生研究提供参考.
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嗅感觉神经元的凋亡
与其它神经元不同,成年哺乳动物的嗅感觉神经元(Olfactory Receptor Neuron,ORN)有自发、持续更新的能力[1].1996年Murrell等报道成年人的嗅上皮仍保持神经再生和分化能力[2].ORN这种神经再生和更新的特殊性引起了神经科学和耳鼻喉科学者的广泛关注,他们通过各种方式研究ORN死亡和再生规律,并从不同水平探索再生机制.目前认为,ORN的生长周期为30天左右,位于上皮深层的球基细胞(Globose Basal Cell)作为神经元前体细胞增殖、分化而成ORN[3,4].ORN这种自我更新能力与通过凋亡(Apoptosis)机制来维持机体细胞数量自身稳定的特性极其相似,而且ORN的死亡与神经元前体细胞的增殖分化存在反馈调节作用[5],由此学者们开展了对ORN凋亡的研究,试图从另一侧面探索ORN自我更新机制.
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富血小板纤维蛋白对人牙槽骨成骨细胞增殖和分化的影响
目的:研究富血小板纤维蛋白(plate-rich fibrin, PRF)体外对人牙槽骨成骨细胞(human alveolar osteoblasts, HAOB)增殖分化的影响,探讨HAOB与PRF构建临床组织工程骨的可能性。方法:收集临床拔牙过程中的牙槽骨,采用改良酶消化法体外分离培养HAOB,根据成骨细胞形态学特征及成骨特性对所培养出的细胞进行鉴定,后加入志愿者的PRF分组培养;而后在不同的实验时间点进行细胞增殖CCK-8检测、碱性磷酸酶(ALP)定性检测、钙结节茜素红染色以及成骨相关基因RT-PCR检测。结果:HAOB具有典型的成骨细胞的形态;随时间的延长,细胞数目明显增加(P<0.05),实验组(PRF组)细胞数量明显高于对照组。实验组ALP染色较对照组颜色更深,ALP活性相对较高。经茜素红染色,实验组镜下观察形成的钙结节数量较对照组多。在第7和11天发现实验组成骨相关基因的表达量均高于对照组。结论:采用改良酶消化法分离培养的HAOB具有典型的成骨细胞生物学特性,且成分较为单一;PRF体外具有促进HAOB增殖分化的能力。
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骨髓间充质干细胞及其临床应用前景
干细胞是近年来生物学上具挑战性、也有吸引力的领域之一.其中造血干细胞(HSC)已经应用于临床,在治疗血液系统恶性疾病、遗传性免疫缺陷等方面取得了显著的成就.除了造血干细胞以外,在机体成熟组织中还存在非造血干细胞(如肌肉干细胞、神经元干细胞、表皮层干细胞等),在机体受到外伤、老化、疾病等损伤时,这些细胞就增殖分化,产生新的组织来替代它们,以保持机体的稳态平衡.骨髓间充质干细胞(MSC)位于骨髓的基质细胞系中,在体外可以通过贴壁培养加以分离,分裂增殖能力强,可以分化为多种结缔组织细胞(纤维、骨、软骨、腱、肌肉、脂肪),并易于被外源基因转染且稳定表达,被认为是组织工程、细胞及基因治疗理想的靶细胞.因此,骨髓MSC已成为该领域研究的热点之一.
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神经干细胞的增殖分化及在癫痫治疗中的应用
神经干细胞是中枢神经系统中一类具有自我更新能力、高增殖潜能以及分化潜能的细胞,它来源于室管膜细胞,存在于胚胎和成年哺乳动物中枢神经系统脑室系统周围的广泛区域.
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1α,25-二羟维生素D3对成骨细胞增殖分化、Ⅰ型胶原及核心结合因子α-1基因表达的影响
目的 研究1α,25-二羟维生素D3[1α,25-(OH)2D3]对体外培育SD大鼠成骨细胞(OB)增殖分化以及核心结合因子α-1(Cbfa-1)、Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)mRNA表达的影响. 方法 采用胰蛋白酶和胶原酶消化法从24 h内新生SD乳鼠颅盖骨分离得到OB,设置0、1、10、100 nmol/L 1α,25-(OH)2D3干预组,干预24、48、72 h后分别采用噻唑蓝比色法(MTT)检测OB增殖率,采用PNPP法测定碱性磷酸酶(ALP)活性,采用逆转录-聚合酶链反应法检测细胞Cbfa-1和Col Ⅰ mRNA表达. 结果 在1α,25-(OH)2O3干预24、48 h和72 h后,与0 nmol/L组比较,1 nmol/L组吸光度(A值)均显著增加(P<0.05);1α,25-(OH)2D3干预细胞ALP活性、Col Ⅰ和Cbfa-1基因mRNA表达呈时间依赖性和剂量依赖性增高,且在24 h、48 h和72 h,100nmol/L组与0 nmoL/L组比较,以上指标差异均显著性增高(P<0.05). 结论 低浓度1α,25-(OH)2D3可促进OB增殖和分化;高剂量对OB增殖无明显作用,但可促进OB分化,提高其ALP活性,增强Col Ⅰ及Cbfa-1基因mRNA表达而影响骨代谢.
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肿瘤干细胞与肿瘤微环境的相互作用
Reya等于2001年提出了“肿瘤干细胞学说”,认为肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)是在肿瘤组织中存在的小部分有正常干细胞样的特点,能自我更新(self-renewal)、增殖分化(differentiation)的细胞亚群,其通过不均匀分裂(asymmetric division,ASD)方式形成两个细胞,一个维持未分化的状态,作为肿瘤干细胞保留下来;另一个分化成不同表型的肿瘤细胞.2002年,Clarke等应用荧光活化细胞分离技术(Fluorescence Activated Cell Sorting,FACS)首次从乳腺癌中分离出CSCs.随着研究的不断深入,目前已经在多种高级别原发脑肿瘤(胶质瘤、髓母细胞瘤和室管膜瘤)和神经母细胞瘤中也分离出CSCs.CSCs具有自我更新性,在无血清培养基中成球生长,表达干细胞标记物和具有多谱系分化潜能等特点.
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黄芩甙对成纤维细胞iNOS表达的影响
表皮的组织结构和功能有赖于角质形成细胞增殖分化平衡,失衡是许多皮肤病如银屑病等的特征.研究表明成纤维细胞源性多种因子可调节角质形成细胞增殖分化平衡,银屑病成纤维细胞表型和功能改变参与银屑病的发病机制[1,2].
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寻常型银屑病受累表皮细胞在增殖与终末分化中DNA量的变化
我们已应用吖啶橙标记组织切片细胞DNA通过粘附式细胞仪(ACAS570)测试了正常人表皮细胞DNA在各层中的变化[1],现采用同样的方法对银屑病受累表皮各层细胞DNA含量、浓度、分布范围等作了初步的测试,试图揭示银屑病表皮细胞在增殖分化各阶段中DNA的异常变化规律.
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从中医学角度认识脑缺血损伤后内源性神经干细胞的增殖分化
通过对脑缺血损伤后内源性神经干细胞增殖分化研究的回顾与分析,从中医学角度对此现象进行了思考,认为肝肾精血盛衰是神经干细胞(NSCs)增殖分化的物质基础,先天之精、肾精、督脉、脑髓、神经干细胞增殖分化有密切联系;提出了毒邪害络损髓是抑制脑缺血后内源性神经干细胞增殖分化的病理机制,脑缺血急性期,痰瘀热毒混杂脑内,损伤脑髓、督脉、督络,是抑制NSCs分化增殖主要因素,清热化痰、祛瘀解毒通络是治疗大法;恢复期肝肾精血亏虚,毒邪留恋,NSCs增殖乏源是主要病理因素,治疗当以补益肝肾为主,解毒通络为辅.
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双黄补对牙周病中牙周膜细胞的增殖分化的调控
目的:探讨中药双黄补对体外培养的人牙周膜细胞(PDLC)增殖和分化的影响.方法:通过体外培养人PDLC,应用双黄补提取液作为辅助因子分成8组:A.黄连;B.黄芩;C.骨碎补;D.黄连加黄岑;E.黄连加骨碎补;F.黄岑加骨碎补;G.黄连、黄芩、骨碎补;H.对照组.采用MTT比色法测定细胞增殖情况,羟脯氨酸法测定胶原蛋白比值.结果:各组药物提取液均有促进PDLC增殖和提高胶原蛋白比值的作用,与对照组比较,差异有显著性,其中以双黄补组的效果明显.不同孵育时间培养中以第5天的作用强.结论:双黄补水提液可明显促进人PDLC增殖,明显提高胶原蛋白在总蛋白中的比值,可作为PDLC增殖的理想的辅助因子.
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骨骼肌卫星细胞研究进展
文章从骨骼肌卫星细胞的生长发育过程到自我更新再到衰老缺失、以及与生长因子的关系进行了综述,讨论了骨骼肌卫星细胞在细胞和分子水平的调节机制.为骨骼肌损伤修复提供了深入的理论依据.