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八种血清肿瘤标志物人工神经网络模型在大肠癌诊断中的应用研究
大肠癌是我国的一种常见恶性肿瘤,其发病率呈不断上升趋势[1].近年来,已有多种血清标志物用于大肠癌诊断.但由于敏感性和/或特异度较低,单项标志物诊断准确性不高,因此,如何提高多种标志物联合检测的诊断率就显得非常重要.本研究应用人工神经网络(ANN)建立八种血清标志物诊断模型,以提高大肠癌血清学诊断的效率,并验证其在临床应用的价值.
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传染性非典型肺炎的血清学诊断研究
目的评估传染性非典型肺炎(世界卫生组织又称严重急性呼吸综合征,SARS)血清病毒特异性抗体检测在SARS诊断中的实用价值,了解免疫荧光抗体法(IFA)和酶联免疫吸附法(ELISA)对SARS病毒特异性抗体检测结果的一致性程度.方法用IFA和ELISA检测267例不同病程SARS患者和132例对照组血清SARS病毒特异性抗体,以敏感度、特异度、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)和准确度评价其诊断价值,并以Kappa值评价两种检测方法结果的一致性.结果以IFA检测的血清特异性IgM类和IgG类抗体阳性率在病程第11天明显增高,病程≥11天者,IgM类抗体诊断SARS的敏感度为65.6%,特异度100.0%,PPV 100.0%,NPV 71.0%,准确度81.3%;IgG类抗体则分别为敏感度91.1%,特异度97.0%,PPV 97.3%,NPV 90.1%,准确度93.8%.以ELISA方法所测结果与IFA结果相仿.对IFA和ELISA法检测的一致性检验示Kappa值分别为0.640和0.779.结论血清病毒特异性抗体在SARS发病10天以上者阳性率高,抗体检测有助于确立发病10天以上SARS的血清学诊断.IFA和ELISA检测SARS病毒抗体的一致性较好.
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结核中心结核分支杆菌Ag85A蛋白的克隆、表达及其血清学诊断价值的研究
10多年来国内、外学者一直从结核分支杆菌培养滤液中提纯蛋白质抗原进行多方面的研究,由于该方法制备蛋白抗原较烦琐、费时,因此,近年来许多研究者应用大肠杆菌来表达结核分支杆菌基因,简便地获得了大量结核分支杆菌单一的蛋白抗原.Ag85复合物是结核分支杆菌主要的分泌性蛋白,在结核分支杆菌H37Rv株中占分泌蛋白总量的30%,可从早期培养物中分离,是一种热不稳定的蛋白,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和等电聚焦分析可分为Ag85A、Ag85B和Ag85C三个组分[1].因此本研究通过基因工程技术构建结核分支杆菌Ag85A表达株,获得重组Ag85A(rAg85A)蛋白,研究其免疫学特性,评价其在结核病血清学诊断中的价值,为研制更有效的结核病免疫诊断试剂和新型的结核病疫苗奠定了基础.
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结核分枝杆菌分泌蛋白64抗原模拟表位的筛选研究
MTB分泌蛋白64(MPT64)是MTB重要的保护性抗原,也是结核病血清学诊断的理想抗原之一[1].然而目前报道MPT64抗原对血清标本的直接检出率较低[2].20世纪80年代兴起的噬菌体展示随机肽库(phage display peptide library)技术是一种快捷、高效分析蛋白分子间相互作用的工具[3],尤其适于筛选生物活性大分子的配体.
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结核分枝杆菌分泌蛋白64抗体适体的获得及血清学检测
指数级富集配体的系统进化(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELFEX)技术筛选的适体具有可体外合成、纯度高、稳定性强和易于保存等特点,并已用于检测多种靶物质.目前利用适体检测MTB分泌蛋白64(MFT64)及模拟胸腔积液中γ-干扰素含量已有报道~([1-2]),由于MPI64是结核病血清学诊断的重要抗原之一,本研究旨在利用SELEX技术筛选MPT64抗体高亲和性适体并用于血清学检测,对获得的适体进行初步功能学评价.
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慢性肝炎患者血清纤维化指标的检测及其意义
目的探讨慢性肝炎患者血清纤维化指标[血清透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、层黏蛋白(LN)]的临床实用价值.方法对2 600例慢性肝炎轻、中、重度患者,用放免法检测血清HA、PCⅢ、Ⅳ-C、LN,并对其中的280例进行肝穿刺标本病理组织学检查,作肝脏炎症活动度分级、肝纤维化程度分期及慢性肝炎病理组织学分度,探讨它们与纤维化指标之间关系.结果 2 600例轻、中、重度慢性肝炎患者,4项指标之间均有明显差异(P<0.01).这4项指标均与肝脏炎症活动度分级、肝纤维化程度分期及慢性肝炎的分度有关.相关系数HA分别为0.544、0.548和0.468;PCⅢ为0.495、0.42和0.335;Ⅳ-C为0.406、0.404和0.412;LN为0.214、0.204和0.184.结论血清学检测对慢性肝炎的诊断有较大的临床指导作用,但对某一患者评价这些指标的意义时,应结合肝功能检查、B超检查及临床表现,作全面分析.
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非恶性肿瘤患者胆汁CA19-9含量检测临床意义分析
目的:检测非恶性肿瘤患者胆汁中CA19-9含量并分析其临床意义.方法:选取2008-1 1-01-2011-10-31首都医科大学附属北京世纪坛医院肿瘤中心非恶性肿瘤患者61例,其中6例胃溃疡,22例结直肠腺瘤或息肉,17例胆囊结石,16例胆囊腺瘤或息肉.手术前采取外周静脉血液标本5 mL,手术中胆汁胆囊采集胆汁标本10 mL.采用微球酶联免疫分析法进行检测.所有病例随访1~4年.结果:61例患者外周血清中CA19-9含量为(5.93±4.06) U/mL,属于正常水平,其中胃溃疡组为(7.13±6.37) U/mL,结直肠腺瘤或息肉组为(5.56±3.52) U/mL,胆囊结石组为(5.46±4.27) U/mL,胆囊腺瘤或息肉组为(6.48±3.79) U/mL.各组间比较差异无统计学意义,P=0.2.胆囊胆汁中CA19-9含量为(290 174.96±389 985.78) U/mL,其中胃溃疡组为(219 334.77±213 246.13) U/mL,结直肠腺瘤或息肉组为(327 754.85±489 632.47) U/mL,胆囊结石组为(263 567.54±268 466.28) U/mL,胆囊腺瘤或息肉组为(293 338.07±419 274.36) U/mL.各组间差异无统计学意义,P=0.3.胆囊胆汁中CA19-9含量明显高于外周血清中CA19-9含量,P=0.005.有7例患者胆囊胆汁中CA19-9含量较低,为(4.21±2.34) U/mL;另外54例患者胆囊胆汁中CA19-9含量极高,为(327 789.69±399 517.12) U/mL.两组间差异有统计学意义,P=0.002.随访期间,没有肿瘤发生,目前生存59例,1例死于心肌梗死,1例死于脑卒中.结论:部分非恶性肿瘤患者胆汁中CA19-9含量极高,可能原因是患者胆管和胰管上皮细胞合成和分泌CA19-9.单独胆汁中CA19 9含量升高并不能作为恶性肿瘤的诊断依据.
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应用TP-IgM-WB法诊断早期先天梅毒
目的研究新生儿中胎传梅毒感染的血清梅毒螺旋体蛋白印迹试验(TP-IgM-WB)水平,探讨其临床意义.方法对58例梅毒孕妇所产60例(2例双胞胎)新生儿血清,应用梅毒螺旋体蛋白印迹试验(TP-IgM-WB)检测,并与TRUST、明胶颗粒凝集试验(TPPA)方法平行测定.结果60例新生儿TP-IgM-WB法检出阳性27例,占45%(27/60),TRUST和TTPA阳性各59例.结论确诊27例新生儿为早期先天梅毒婴儿,为临床提供了明确的诊治依据,对防治梅毒有重要意义.
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HIV实验室检测概况
目前,HIV血清学诊断仍然是艾滋病早期诊断的主要依据[1],随着分子生物学技术的飞速发展,HIV检测技术也正发生着日新月异的变化.从聚合酶链反应(PCR)技术应用于HIV的检测,到荧光实时定量PCR的应用,再到生物芯片的应用,每一步变化都给人们带来惊喜,都使人们对未来检测HIV的前景充满信心.现就近年来HIV检测概况作一综述.
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关键词:
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SARS临床排除病例血清学诊断结果分析
1材料和方法1 血清标本按常规留取临床上已排除SARS的患者静脉血,2 h 内离心分离血清,-20 ℃保存,1 周内检测抗SARS病毒特异性抗体.
关键词: 严重急性呼吸综合征(SARS) 血清学诊断 临床排除病例 -
类风湿因子与快速血浆反应素环状卡片试验假阳性的关系
梅毒是由苍白梅毒螺旋体引起的一种慢性性传播疾病,梅毒螺旋体感染的血清学诊断方法常用的有快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)、酶联免疫吸附试验(EUSA)和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA).临床多以RPR作为梅毒筛查及疗效评价试验,以11PPA作为梅毒的确证试验.我们于2006年3月至2009年10月对我院疑诊为梅毒患者的1793份血清样本同时进行RPR、TPPA和类风湿因子(RF)检测,了解RF对RPR检测结果的影响,报告如下.
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异源双链泳动分析技术的建立及其在HIV-1基因变异和临床中的应用研究
获得性免疫缺陷综合征(AIDS,艾滋病)是近20年来发现的一种严重危及人体健康的传染病,至今全球艾滋病毒感染者已超过6000万.我国目前HIV感染人数已达100万.艾滋病毒的一个显著生物学特征是其基因具有高度变异性,对HIV基因变异的研究是HIV分子流行病学、血清学诊断、致病机理、药理治疗以及HIV疫苗研制等领域所关心的课题.因此,在HIV研究中占有极为重要的位置.用于研究HIV变异的方法很多且各有优点,比较而言,由华盛顿大学mullins教授在HIV基因变异研究中建立起来的异源双链泳动分析(Heteroduplex Mobility assay,HMA),是一种简便、快速、可靠的方法.目前已在全球HIV分离鉴定网上广泛使用.但我国尚未建立起适合中国HIV流行株分型的HMA.本研究首次在国内系统,建立了这项技术并将其用于HIV基因分型、变异分析以及临床追踪等相关方面的研究.
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联合检测血清胃蛋白酶原Ⅰ和糖类抗原19-9及癌胚抗原对胃癌诊断的临床价值
目的 探讨血清胃蛋白酶原Ⅰ (PGⅠ)、糖类抗原19-9(CA19-9)、癌胚抗原(CEA)对胃癌诊断和预后评估的价值.方法 选择2010年1月至2011年11月内蒙古医科大学附属医院收治的经临床手术及病理确诊的胃癌患者30例作为胃癌组,同期选择健康体检者30例为对照组,采用放射免疫分析法检测两组受试者的血清PGⅠ、CA19-9、CEA,并进行两组对照分析.结果 胃癌组血清PGⅠ水平显著低于对照组、CA19-9和CEA水平均显著高于对照组(P<0.01).不同TNM分期胃癌患者PGⅠ、CA19-9水平比较差异有统计学意义(P<0.05);不同分化类型胃癌患者血清PGⅠ和CEA水平比较差异有统计学意义(P<0.05);淋巴转移的胃癌患者PGⅠ水平低于无转移组,CA19-9水平高于无转移组(P<0.01).单一检测血清PGⅠ、CA19-9和CEA的阳性率低于联合检测的阳性率(P<0.05).结论 联合检测血清PGⅠ、CA19-9和CEA对胃癌的诊断和预后评估有较高的价值,对制订胃癌患者个体化治疗方案有指导意义.
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利用血清肿瘤标志物提高胃癌的诊断
胃癌为胃内常见的恶性肿瘤,可以通过纤维胃镜做出正确的早期诊断,但有个别病例因取材过小、过少,或病变小取材有限而造成诊断困难,这就需要利用检测血清肿瘤标志物来进行辅助诊断.
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糖捕获技术在IgA肾病血清学诊断中的初步应用
目的:采用糖捕获法检测IgA 肾病糖链异常IgA1,分析其在IgA 肾病中的诊断价值。方法病理确诊为IgA肾病36例设为IgA肾病病,41例病理确诊的其他肾病患者设为非IgA肾病组。定量检测两组糖链异常IgA含量。结果 IgA 肾病组血清中糖链IgA 含量异常升高率明显高于非IgA 肾病组,差异有统计学意义。血清糖链IgA 检测的灵敏度为69.4%,特异度90.2%,符合率80.5%。结论应用糖捕获技术检测IgA 肾病患者中糖链异常IgA,灵敏度与特异度高,操作方法简单,成本较低。
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实验诊断学(1)
实验诊断亦称检验诊断,属于检验医学范畴.检验医学是一门由多学科多专业组成的繁复而庞杂的综合学科,它涵盖了生物化学、血液学及细胞遗传学、医学微生物学、寄生虫学、血清免疫学及临床细胞学等多学科多专业,统称实验医学,是临床医学和预防医学的重要组成部分.检验医学是在实验室内通过对人体各种标本进行观察、检测、分析判断,从而获得临床诊断信息或依据的科学,故称之为实验诊断学,包括:病原学诊断、血清学诊断、细胞学诊断等.
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幽门螺杆菌感染患者血清可溶性幽门螺杆菌抗原及其 IgG,IgA型免疫复合物测定
目的 测定血清可溶性幽门螺杆菌抗原(S-Hp)和其特异性免疫复合物(Hp-IC)并评价它们对幽门螺杆菌感染诊断的意义.方法 采用双抗体夹心式酶免疫测定法.结果 66例Hp感染患者血清S-Hp阳性率90.91%,显著高于28例阴性对照组阳性率0%,P<0.001.S-Hp含量与Hp感染菌量呈成比,但43例Hp阳性患者治疗前后S-Hp 含量无显著改变(P>0.05).血清 S-Hp抗原均以IgG和/或IgA型特异性免疫复合物形式存在,Hp-IC对Hp感染诊断特异性85.71%,敏感性77.23%. 结论 S-Hp和Hp-IC测定可用于临床Hp感染诊断,对阐明Hp致病机理有重要意义.
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卡介苗缺失免疫显性抗原在结核病血清学检测中的作用
目的 探讨卡介苗( BCG)缺失免疫显性抗原在结核病血清学检测中的作用.方法 选取主流结核病血清学检测抗原的4种不同组合试剂A(结核分枝杆菌抗体IgG检测试剂)、B(结核分枝杆菌抗体检测试剂)、C(结核杆菌特异性抗体检测试剂)、D(活动性结核抗体检测ELISA系统),通过免疫印迹、胶体金和酶联免疫吸附等免疫学方法检测109例活动性结核患者和97名健康人群[分为结核菌素纯蛋白衍生物试验(PPD)阳性和阴性组]的结核抗体,应用贝叶斯概率统计学方法,综合分析不同抗原组合对结核病检测准确率的影响.结果 试剂A、B、C、D对活动性结核病IgG检出率分别是80.0%、66.7%、80.7%、56.0%,明显高于健康人群的23.9%、8.9%、6.6%、1.0%,差异均有统计学意义(x2值分别为47.53,51.59,90.48,69.68,均P<0.01).其中试剂A、B对健康人群结核抗体检出率随PPD阳性反应强度而增高(x2值分别为2.124,2.220,均P<0.05),试剂C、D对健康人群结核抗体检出率与PPD反应强度无相关性(x2值分别为0.122,0.479,均P>0.05),试剂D的准确率高,其对活动性肺结核患者IgM检出率为2.1%.结论 IgG检出的敏感性与抗原的选择及组合数量呈正相关,高的检测敏感性常伴随特异性的损失,选择BCG缺失抗原可显著提高检测特异性.
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幽门螺杆菌感染患者血清可溶性幽门螺杆菌抗原及其 IgG,IgA型免疫复合物测定
目的 测定血清可溶性幽门螺杆菌抗原(S-Hp)和其特异性免疫复合物(Hp-IC)并评价它们对幽门螺杆菌感染诊断的意义.方法 采用双抗体夹心式酶免疫测定法.结果 66例Hp感染患者血清S-Hp阳性率90.91%,显著高于28例阴性对照组阳性率0%,P<0.001.S-Hp含量与Hp感染菌量呈成比,但43例Hp阳性患者治疗前后S-Hp 含量无显著改变(P>0.05).血清 S-Hp抗原均以IgG和/或IgA型特异性免疫复合物形式存在,Hp-IC对Hp感染诊断特异性85.71%,敏感性77.23%. 结论 S-Hp和Hp-IC测定可用于临床Hp感染诊断,对阐明Hp致病机理有重要意义.