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压片法显微镜诊断肠内寄生虫的临床意义
肠内寄生虫种类达十余种,如:似蚓蛔线虫、毛首鞭形线虫、蠕形住肠线虫、十二指肠钩口线虫为多见,它们的共同特点是寄生于人体的肠内(盲肠、结直肠),借助口齿吸附于肠黏膜,以血液、组织液、肠黏膜为食,而造成人类机体在不同程度上的损害.我科在内窥镜室的协助下,应用压片法镜下观察诊断毛首鞭形线虫、蠕形住肠线虫各1例,收到了良好的效果,为临床提供了确凿的诊断治疗依据.
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海藻酸钠两性霉素B对杜氏利什曼原虫前鞭毛体作用体外实验研究
目的治疗犬利什曼病,消灭保虫宿主,达到预防黑热病的目的.方法观察海藻酸钠两性霉素B在不同浓度对杜氏利什曼原虫(L.d)江苏株及L.d四川人株前鞭毛体的体外作用.采用显微镜下观察试验.结果实验组3个不同浓度(10 μg/ml、5 μg/ml、l2 μg/m1)的药物作用48 h后,培养基颜色未变(红),虫体活动变慢,虫数减少,抑制率升高(L.d江苏株的抑制率由70%升至93%,L.d四川人株由82%升至96%).染色后见虫体变形,核、动基体不完整,胞质内出现多个空泡,鞭毛脱落.对照组的培养基颜色变黄,虫体运动活跃,大部分呈长梭形,并排成菊花状.染色后虫体呈长梭形,核、动基体、胞膜及鞭毛完整、清晰.结论海藻酸钠两性霉素B对杜氏利什曼原虫有较强的体外抑制作用.
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Authorware制作组织学课件
<组织学是医学教学的基础学科,传统教学是课堂教学与显微镜实验教学相结合,以达到教学目的.随着显微技术及分子生物学技术的发展,计算机技术的迅速发展,医学教育改革的不断深入,各大中专从事组织学教学的教师,为提高教学质量,不断地进行教学创新,改变传统的教学方法,使用不同的软件制作各种组织学课件,把结构复杂、抽象、枯燥的组织学内容,用形象、具体、生动的文字、组织学图片及动画等展现出来,然后通过显微镜下观察,以此来实现教学目的,提高教学效果,满足教学的需要.本人就Authorware制作组织学课件谈谈自己在制作中的几点体会……
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感觉系统在组胚理论教学中的改良
1 学科简介和意义组织学与胚胎学是医学必修基础课之一."组织学"是研究正常人体细微结构及其与功能关系的科学,内容包括细胞、基本组织及器官组织.组织学与人体解剖学一样,研究的是人体的正常结构,解剖学用肉眼观察结构,而组织学在显微镜下观察更为细微的结构.
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中专卫校《组织学》教学的体会
我校护理专业的<正常人体学基础>解剖及组织学总课时为80学时,其中组织学课时为16学时(理论课时8学时、实验8学时).组织学从基本组织到各大章节内容较多,课时安排又很紧凑.学生在理论学习中感到很抽象,不如大体解剖学那么直观,觉得组织学难学、难记,显微镜下观察人体微细结构较难.如何使学生提高学习兴趣,取得好的教学效果.笔者在教学中运用多种教学方法进行了探索,现谈点浅显的体会.
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一种单层扁平上皮标本制作法
以往用银浸润法制作单层扁平上皮时常采用蛙或鼠的肠系膜进行铺片,此方法制成的铺片数量极为有限,满足不了医学生的需求,而且在显微镜下观察的过程中,肠系膜的双层结构会使焦距很难调节清楚.由于观察上皮组织为第一次实验课内容,学生操作不熟练且要观察的内容较多,为节省学生看片时间,故在取材技术上加以改进.
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骨磨片封片技术改良
骨为坚硬的结缔组织.镜下观察骨磨片的骨组织结构,必须使骨小管和骨陷窝内充满空气而成黑色,这样镜下观察时才能清晰可见,因此封片是制作骨磨片技术的难点之一.骨磨片一般不能用液体树胶封片,因为树胶中二甲苯会使骨小管及骨陷窝透明,结构反而不清晰.
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10%福尔马林与中性福尔马林的比较
传统上我们都采用10%福尔马林固定组织.福尔马林系甲醛液的俗称,是由甲醛(Formaldeny de HCHO )气体饱和于水而成.一般市售的福尔马林含甲醛37%~40%.配法:取40%甲醛液10ml与蒸馏水90ml混合,即得4%甲醛,亦即10%福尔马林.由于福尔马林久存则氧化产生甲酸,呈酸性,固定标本不适宜,特别是需长期固定的组织更不适合,故我们主张采用中性福尔马林固定组织标本.其配法如下:40%甲醛100ml酸性磷酸钠(或无水磷酸二氢钾)4.0g磷酸氢二钠6.5g蒸馏水900ml因中性福尔马林中加入了磷酸缓冲液,不易被氧化,能长期保持pH7.0,故对组织标本的固定(特别是长期固定)、染色效果非常有利.为了证实两种固定液对组织标本的固定效果,我们将皮肤组织分成两组,每组五块皮肤组织标本.其固定方法如下:第一组由10%福尔马林固定组织3m.第二组由中性福尔马林固定组织3m结果显示:(1)从肉眼观察:第一组固定后组织标本的收缩程度及变硬度明显大于第二组.(2)镜下观察:第二组的正常组织细胞形态、层次分明、色彩鲜艳,正常组织细胞基本上无萎缩、变形.而第一组的正常组织形态有明显萎缩,较第二组层次模糊、色彩暗淡.综上所述,我们建议日常活体组织检查应采用中性的福尔马林固定.
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彗星试验中磨砂玻片的制作
彗星试验(COMET)又称单细胞凝胶电泳(singlecell gel electrophoresis,SCGE)是一种简便而灵敏的在单细胞水平上检测有核细胞DNA损伤与修复的方法,在国外广泛的用于各类化学诱变剂的检测.该试验是把在培养过程中经诱变剂或有毒物质干预后的细胞放在凝胶中制片,然后经裂解、解旋、电泳和漂洗及染色一系列过程,后在荧光显微镜下观察,求出拖尾细胞的百分率及拖尾细胞的尾长进行统计分析.
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淫羊藿苷防治血管性痴呆的实验研究
目的:观察淫羊藿苷(Icariin,ICA)对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠学习记忆的保护作用,探讨ICA防治VD的作用机制.方法:采用永久性结扎双侧颈总动脉的方法(2-VO法)以及脑缺血再灌注方法(I10-R10-I10)制作VD大鼠模型,利用Morris水迷宫检测ICA对大鼠空间辨别学习记忆能力的影响;用光化学法检测大脑皮层及海马组织中SOD活性、MDA和AChE含量,并检测大鼠血清中AChE的含量;用免疫组化方法检测海马内AChE及ChAT的水平,并通过图象处理软件进行定量分析;HE染色切片光镜下观察海马神经元形态变化;电镜下观察海马神经元超微结构的改变;经原位末端标记法(TUNEL)观察ICA对神经细胞凋亡的影响.
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异鼠李素体外抗肿瘤作用的研究
目的:观察异鼠李素对人细胞株A549、MCF-7、PC3、Caco-2、K562、AD293、Hacat等细胞增殖、分化的影响及相关基因的变化.方法:不同浓度异鼠李素处理上述细胞,光镜电镜下观察细胞形态;进行集落形成实验,3H-TdR掺人实验、生长曲线法、MTT法测细胞生长抑制率;流式细胞仪检测凋亡峰及bax,bcl-2等凋亡相关基因的表达.
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三七总皂甙诱导HL-60细胞凋亡的研究
目的:观察三七总皂甙是否能诱导人白血病细胞株HL-60细胞凋亡及相关基因的关系.方法:取200~1600ug/ml三七总皂甙处理HL-60细胞,光镜下观察细胞形态;MTT法测细胞生长抑制率;流式细胞仪检测细胞周期;免疫组化法检测p53,bcl-2凋亡相关基因的表达,采用真彩色图像分析仪定量分析免疫组化的结果;其结果表明200~1600ug/ml三七总皂甙可抑制HL-60细胞生长,抑制率随着剂量的增加而增加.流式细胞仪检测凋亡峰随药物浓度增大而增加.800,1600ug/毫升三七总皂甙可使p53基因表达上调,bcl-2表达明显下降,这两种基因表达改变有浓度依赖性.结论:三七总皂甙可抑制HL-60细胞生长,诱导其凋亡,其诱导凋亡的作用与凋亡相关基因p53的表达上调,而抗凋亡基因bcl-2表达下调有关.
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一种新的来源于人的穿膜肽通过细胞膜屏障和血脑屏障的研究
目的:观察一种新的人体蛋白结构域(Circadian locomoter output cycles kaput protein's DNA-binding peptide, hCLOCK's DNA-BIND)通过细胞膜屏障和血脑屏障的现象.方法:化学合成hCLOCK's DNA-BIND,N端标记FITC荧光素,与培养的血管内皮细胞株(ECV-304)和原代培养的神经胶质细胞孵化后,荧光显微镜下观察并做荧光强度分析.大鼠颈动脉注射hCLOCK's DNA-BIND,做脑冰冻切片,荧光显微镜下观察.结果:hCLOCK's DNA-BIND能够有效通过细胞膜屏障和血脑屏障,内化的量随时间和肽段浓度的增加而增加.结论:hCLOCK's DNA-BIND具有很强的内化作用,这一发现有希望为药物通过细胞膜屏障和血脑屏障提供新的安全有效的载体.
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心可舒胶囊大鼠长期毒性实验研究
目的:观察大鼠长期接触心可舒胶囊后的毒性反应.方法:80只大鼠(雌雄各半)随机分为心可舒胶囊2.25g/kg、11.25g/kg、0.5625g/kg(相当于成人一日量的50倍、25倍、12.5倍)和生理盐水对照4组,连续灌胃给药8周,停药观察 2周,每2周测一体重,药后8周、停药后2周各测一次血液学和血液生化,药后8周、停药2周每组各处死一半动物,取内脏腔器称重后制成病理切片,光镜下观察其病理变化,并计算脏器重量指数.结果:动物一般行为活动无异常;体重增长值、外周血象、血液生化均未见异常,与对照组比较差异无显著性(P>0.05);病理组织学检查无特殊病理学改变,与对照组比较未见明显不同.大鼠灌服心可舒胶囊50倍、25倍、12.5倍,成人一日量连续用药8周,未显示毒性反应 .
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27例染色体平衡易位携带者产前诊断
对象与方法 患者为到我院遗传优生门诊就诊的27例染色体平衡易位携带者(女20例,其夫核型正常;男7例,其妻核型正常).受检孕妇在B超下定位,经羊膜腔穿刺抽取羊水20mL,经1000 r/min离心,去上清液,留0.5~1mL细胞悬液接种在含羊水培养基的培养瓶内,做细胞培养,于第8 d在显微镜下观察细胞根据生长情况,更换新鲜培养液,第9 d收获细胞,制片,G显带作核型分析.
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受精障碍夫妻双方染色体异常一例
患者女,30岁.因原发性不孕、双侧输卵管梗阻于2001 年8月在我院采用GNRH-а长方案控制性促排卵,待主卵泡直径达18 mm时肌注绒毛膜促性腺激素10 000 U,36 h后超声引导下取得8个成熟卵子,常规洗卵、装卵、CO2培养箱培养.丈夫精液除液化困难外其余指标均正常,Isolate梯度离心法处理精液,取卵后4 h以精子∶卵子约30 000∶1的比例授精,培养14 h后去除颗粒细胞后于倒置显微镜下观察,未发现有受精原核,卵细胞裸露,精子游离于卵细胞周围,确认为受精障碍.夫妻双方外周血染色体检查,患者染色体核型:46,XX,1号次缢痕正位重复偶见1号短臂断裂.丈夫染色体核型为46,XY,inv(9).
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47,XXY,t(6;8)易位一例
患者男,25岁,因结婚3年不育就诊.查体:智力正常,身高181 cm,高度近视,皮肤细嫩,声音尖细,喉结不显,胡须及体毛稀少,乳房发育.外阴男性,睾丸体积3 cm×3 cm×3 cm,质硬.精液检查未见精子.患者系第3胎顺产,母孕时年龄36岁.父母及两个姐姐表型正常.父母非近亲婚配.细胞遗传学检查:外周血淋巴细胞72 h培养,常规制片,镜下观察计数50个中期分裂相,G显带.患者核型为:47,XXY,(6;8)(6qter→6p25∷8q13→8qter;8pter→8q13∷6p25→6pter).其父母及姐姐拒绝检查.
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48,XXXY, t(4;20)伴尿道下裂一例
患儿 男,1岁。因“家长发现其外生殖器异常”就诊。查体:双眼睑下垂,右附耳,智力正常。经泌尿外科检查诊断为“尿道下裂”。患儿系第2胎顺产,母孕时年龄34岁,孕期无服药及放射线接触史。父母及一姐姐表型正常。父母非近亲婚配。细胞遗传学检查:外周血淋巴细胞72 h培养,常规制片,镜下观察计数50个中期分裂相,经G、C显带,患儿核型为:48,XXXY,t(4;20)(4qter→4p14∷20p13→20pter;20qter→20p13∷4p14→4pter)pat。其父核型为:46,XY,t(4;20)(4qter→4p14∷20p13→20pter;20qter→20p13∷4p14→4pter)。其母核型正常。患儿的姐姐拒绝检查。
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眼内寄生虫-结膜吸吮线虫1例
患者黄××,男性,3岁,四川省遂宁市人,患儿父母在家中发现病儿右眼球表面有虫蠕动,立刻取出虫体2条,于2000年3月29日来华西医科大学附一院眼科门诊室就医,眼部检查,右眼球表面未查见异常,随即将2条虫体送华西医科大学寄生虫学教研室鉴定。 虫体肉眼观,乳白色,经卡红、快绿染色显微镜下观察,体长1.20cm,宽0.01-0.03cm(见封3,图1),两条虫体均是雌性。虫体头端钝园,有漏斗形角质口囊(见封3,图2)。表皮折皱形成横纹,边缘锐利呈锯齿形(见封3,图3),阴门开口于食道与肠连接处的前方,子宫内充满虫卵,33.75×20.00μm大小,愈接近阴门段虫卵愈大,其内的胚胎逐渐发育成盘曲的成熟幼虫。鉴定结果是结膜吸吮线虫(Thelaziacallipaeda Railliet & Henry,1910)的成虫。
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接受术前放化疗后仍有剩余癌细胞患者的肿瘤消退程度
对于直肠癌来说,术前放化疗后的病理完全缓解代表了良好的存活率,为了对放疗结果进行评估,病理研究者通常会在显微镜下观察肿瘤的消退程度.但问题是,真的需要对肿瘤的消退程度做一个评估来决定进一步的治疗方案吗?如果肿瘤消退程度真的可以预示直肠系膜淋巴结转移情况,则可以指导医生在术前放化疗后的进一步手术治疗;如果肿瘤消退程度真的可以预示长期治疗结果,则可以帮助医生更好地完成术后治疗.