首页 > 文献资料
-
慢性缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道电流的影响
目的:研究慢性缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道(Kv)电流的影响.方法:雄性SD大鼠50只随机分为常氧对照组(10只)和慢性缺氧5d、10 d、20 d及30 d组(各10只).慢性缺氧组大鼠每天在低氧仓中予以缺氧8h,分别取缺氧5d、10 d、20 d及30 d的大鼠进行实验.应用全细胞膜片钳技术记录肺动脉平滑肌细胞电压门控钾通道电流(Iκ).结果:慢性缺氧显著减低大鼠肺动脉平滑肌细胞的Ix峰值及Ⅰ~Ⅴ曲线漂移.慢性缺氧5d后肺动脉平滑肌细胞的Iκ密度及Ⅰ~Ⅴ曲线与常氧组均差异无统计学意义(P>0.05),而慢性缺氧10d后肺动脉平滑肌细胞的Iκ密度及Ⅰ~Ⅴ曲线与常氧组均差异有统计学差异(均P<0.05);随着缺氧时间延长,Iκ密度的峰值进一步降低.结论:慢性缺氧可降低肺动脉平滑肌细胞Kv通道电流密度.
-
β2-肾上腺素能受体基因转染改善慢性缺氧兔心肌细胞收缩功能及细胞保护作用
长期慢性缺氧可刺激交感神经,血中儿茶酚胺(CA)水平持续升高,导致心肌细胞β-AR脱敏及活性改变[1].本研究旨在观察β2-肾上腺素能受体(β2-AR)基因转染对慢性缺氧心肌细胞收缩功能及细胞凋亡的影响.
-
慢性间断缺氧对老年期大鼠脑白质的影响
目的 研究慢性间断缺氧对老年期大鼠脑白质的影响.方法 建立老年期SD大鼠慢性间断缺氧模型,免疫组化检测大鼠脑室旁白质髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)、神经微丝H+L(neurofilament-H+L,NF-H+L)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达并行图像分析;电镜下观察大鼠脑内髓鞘、轴突的超微结构.结果 慢性间断缺氧可使老年期大鼠脑白质MBP、NF-H+L表达减少及GFAP表达增加(P均<0.05),MBP与NF-H+L呈高度正相关(R2=0.908,P<0.01).电镜观察与空白对照组比较,缺氧组大鼠脑内可见较多的髓鞘脱失、轴突受损.结论 慢性间断缺氧可对老年期大鼠脑白质产生不良影响,表现为髓鞘脱失、轴突变性以及神经胶质增生.
-
参麦注射液对慢性缺氧大鼠膈肌细胞凋亡的影响
目的 观察参麦注射液(SMI)对慢性缺氧大鼠膈肌超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondisldehyde,MDA)、一氧化氮(nitric oxide,NO)水平及膈肌细胞凋亡的影响.方法 将健康雄性Wistar大鼠18只随机分为3组各6只,正常对照组正常喂养,以制备慢性缺氧模型;慢性低氧组将大鼠置于有机玻璃低氧箱内喂养;参麦注射液治疗组采用同样方法制作模型,每天缺氧前腹腔注射参麦注射液,2 mL·d<'-1>.7 d后采用分光光度法测定各组大鼠SOD、MDA和NO,TUNEL法检测细胞凋亡情况.结果 慢性缺氧大鼠膈肌SOD水平下降,MDA与NO水平升高;同时慢性缺氧细胞凋亡百分数(凋亡指数)升高.参麦注射液能显著对抗缺氧时SOD水平下降、MDA和NO水平升高;同时可以抑制缺氧引起的凋亡指数增加.结论 参麦注射液可能通过抑制自由基产生而对抗慢性缺氧时的细胞凋亡.
-
慢性缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞形态的影响
目的探讨慢性缺氧引起缺氧性肺血管收缩反应降低的机制.方法采用计算机成像及图像分析系统,观察慢性缺氧培养的大鼠肺内动脉平滑肌细胞形态学变化的情况.结果慢性缺氧后肺动脉平滑肌细胞中缺氧敏感型细胞的比例明显减小,中间混合型细胞比例明显增高,而缺氧不敏感型细胞的比例不变(P<0.05).结论慢性缺氧可直接使肺动脉平滑肌细胞表型转化,由缺氧敏感细胞向中间混合型细胞转化.这可能是慢性缺氧时缺氧性肺血管收缩反应降低的机制之一.
-
废弃矿泉水瓶“巧”变肺功能锻炼瓶
多数慢性呼吸系统疾病患者在急性症状缓解后,其肺功能呈进行性下降。指导患者正确地进行肺功能锻炼,有利于预防急性发作,改善日常活动能力,恢复受损的心肺功能,防止或减缓心肺功能的继续减退,预防或减轻慢性缺氧和二氧化碳潴留等。鉴此,本科采用废弃矿泉水瓶指导肺功能减退的患者进行正确的肺功能锻炼,经临床应用,效果满意。
-
慢性缺氧对幼鼠心肌CaM CaMKⅡ及细胞内Ca2+活动的影响
目的 急性缺血缺氧可致心功能受损和心律失常,钙离子在其中起重要作用,慢性缺氧对心功能及心肌细胞内钙离子活动同样产生影响,但机制不同.该研究拟通过慢性缺氧动物模型,研究慢性缺氧对心肌细胞内钙调素(calmodulin,CaM)、钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(calcium/calmodulin-dependent protein kinase Ⅱ,CaMKII)的表达及其对细胞内Ca2+活动的影响,深入了解慢性缺氧对心脏功能及电活动的影响机制.方法 通过吸入低浓度含氧气体(FiO2:10%)建立慢性缺氧大鼠动物模型.在实验1周和3周时,应用RT-PCR,Western Blot方法分别检测对照组和慢性缺氧组动物心肌细胞内CaM和CaMKⅡγ、CaMKⅡδ mRNA和蛋白表达;分离并培养正常心肌细胞和缺氧3周细胞,应用激光共聚焦法分别检测两种心肌细胞内Ca2+活动,同时应用CaMKⅡ特异性抑制剂KN-62,观察CaMKⅡ在慢性缺氧下对心肌细胞内Ca2+活动的影响.结果 实验1周和3周时,慢性缺氧人鼠心肌细胞内CaM和CaMKⅡγ、CaMKⅡδ的mRNA和蛋白表达均较正常动物高(P<0.01);在缺氧1周和3周组动物间CaM和CaMKⅡδ也存在差异(P(0.01),但CaMKⅡγ差异(P>0.05).激光共聚焦研究发现,慢性缺氧心肌细胞内Cam2+活动其钙波振幅虽和正常心肌细胞无差异(P>0.05),但钙波时程延长(P<0.01);应用KN-62后,慢性缺氧动物钙波振幅和时程改变较明显(P<0.01).结论 慢性缺氧可使大鼠心肌细胞内CaM和CaMKⅡ合成代偿性增加,保持大鼠心肌细胞内钙稳态,从而在一定时期内维持心功能稳定.但随缺氧时间延长,心功能町受损并可致心律失常.
关键词: 慢性缺氧 钙调素 钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ钙离子 心律失常 大鼠 -
急、慢性缺氧对大鼠脑线粒体ATP合成酶、mtRNA转录和蛋白翻译活性的影响
目的:线粒体是一种半自主性细胞器,不仅含有自身的遗传信息(mtDNA),而且有一套相对独立的自身RNA转录和蛋白翻译体系.由于线粒体是消耗氧和产生能量(ATP)的主要场所,因此,线粒体能量合成与其半自主性有密切关系.脑组织是对缺氧敏感的组织,缺氧所致中枢神经系统功能障碍又是急性脑型高山病发生的直接原因.本文探讨缺氧时脑功能障碍的机制和线粒体半自主性与ATP合成的关系.方法:雄性Wistar系大鼠随机分为未缺氧(对照)组、急性缺氧组(模拟海拔4 000 m高源连续缺氧72 h)和慢性缺氧组(模拟海拔4 000 m高原连续缺氧40 d).断头处死并分离大鼠脑皮质线粒体,Clark氧电极测定线粒体呼吸功能以鉴定其质量.ATP合成酶(F0F1-ATP酶,即复合体V)活性采用寡霉素抑制-无机磷定量法测定,离体粒体的RNA转录和蛋白翻译活性分别采用[3H]-UTP和[3H]-Leucine掺入法.结果:正常情况下,线粒体体外RNA转录合成活性与ATP合成酶活性呈线形相关(P<0.05, r=0.97);急性缺氧使ATP合成酶活性由对照的22.413±2.964降低至13.237±1.968(P<0.01),慢性缺氧时酶活性则回升至16.133±2.329(P<0.01),但仍低于对照组(P>0.05);同时,急性缺氧使线粒体体外RNA转录合成能力下降40%(P<0.01),蛋白合成能力则降低60%(P<0.01);慢性缺氧时线粒体RNA和蛋白合成能力均有所恢复,分别为对照的72%和76%,但均未达平原对照水平.缺氧时ATP合成酶活性与线粒体转录及翻译活性变化趋势相一致.结论:缺氧对mtDNA编码呼吸链氧化磷酸化蛋白在转录和翻译水平表达的影响与缺氧时线粒体能量合成功能降低有关.
-
常氧及慢性缺氧的肺动脉内皮细胞急性缺氧后血栓素合酶(TXS)基因及PGI2、TXA2代谢产物的变化
目的:前列环素(PGI2)和血栓素A2(TXA2)均是花生四烯酸经环氧合酶(COX)途径生成的代谢产物,分别由前列环素合酶和血栓素合酶催化产生.本实验动态观察了常氧及慢性缺氧的肺动脉内皮细胞血栓素合酶(TXS)基因表达的变化及培养基上清中PGI2及TXA2的代谢产物6-Keto-PGF1α、TXB2随急性缺氧的变化.方法:采用连代常氧和缺氧培养的肺动脉内皮细胞,分别在2、4、6代给予急性缺氧刺激6 h,分为四组:常氧组(N)、急性缺氧6 h组(NH)、慢性缺氧后复氧12 h组(H)、慢性缺氧后复氧12 h再急性缺氧6 h组(HH).提取各组总RNA.将载有大鼠血栓素合酶基因片段的PBR322质粒,转化大肠杆菌HB101,扩增后提取质粒,经酶切、电泳后回收TXS 0.5 kb的cDNA片段作为探针,地高辛随机引物法标记探针作斑点杂交.以β-actin为对照,目的基因与对照的积分光密度比值作半定量分析.用放免法测定培养基上清中PGI2、TXA2代谢产物6-Keto-PGF1α、TXB2的变化.结果:常氧培养的PAEC急性缺氧后TXS mRNA、6-Keto-PGF1α、TXB2均增加,TXA2/PGI2在2、4代减少,第6代基本不变;慢性缺氧培养的PAEC急性缺氧后,6-Keto-PGF1α在2、4代减少,第6代不变;TXS mRNA、TXB2第4代增加,第6代减少,TXA2/PGI2在2、4代增加,第6代减少.结论:慢性缺氧改变了急性缺氧时肺动脉内皮细胞血栓素合酶(TXS)基因表达及TXA2与PGI2的比例,可能影响了肺动脉高压的发展及机体对慢性缺氧的习服过程.
-
K+通道在正常与慢性缺氧大鼠缺氧性肺血管收缩反应中的作用
目的方法:探讨K+通道在慢性缺氧致缺氧性肺血管收缩反应降低中的作用,采用离体肺灌流方法,探讨了4-AP(4-aminopyridine, 电压依赖性K+通道-Kv阻滞剂)、TEA(tetraethylamonium, Ca2+激活性K+通道-Kca阻滞剂)、GLIB(glibenclaminde, ATP敏感性K+通道-KATP阻滞剂)对正常与慢性缺氧大鼠肺血管缺氧反应的影响.
-
慢性缺氧对大鼠肺内动脉平滑肌细胞Kv1.3, Kv2.1, Kv3.1钾通道基因在急性缺氧时表达变化的影响
我们的研究发现肺动脉平滑肌细胞(PASMC)上某些钾通道基因也是缺氧反应基因,急性缺氧可使其表达发生改变.慢性缺氧对PASMC中Kv1.3、 Kv2.1、 Kv3.1钾通道基因在急性缺氧时基因表达变化的影响,尚无文献报道,本文就此进行研究.
-
慢性缺氧对肺动脉内皮细胞Ⅲ型一氧化氮合酶mRNA表达的影响
目的:世居高原的人、动物或肺动脉高压的大鼠,常出现HPV钝化现象,即急性缺氧时肺血管收缩反应下降.这有助于防止肺动脉高压进一步升高及高原性心脏病的发生,有一定的代偿意义.由于NO是一种重要的血管舒张因子,那么慢性缺氧后肺血管对急性缺氧的收缩反应减弱是否与NO的调节作用增强有关呢?为验证这个推测,本实验动态观察了连代缺氧培养的肺动脉内皮细胞在急性缺氧时NOS Ⅲ mRNA表达的变化.方法:采用胰蛋白酶消化法培养猪肺动脉内皮细胞,分别在常氧(PO2 21.3 kPa)和缺氧(PO2 5.3±0.7 kPa)条件下培养并传代,在2、4、6代给予急性缺氧刺激12 h,分为常氧组(N)、急性缺氧12 h组(NH)、慢性缺氧后复氧12 h组(H)、慢性缺氧后复氧12 h再急性缺氧12 h组(HH).4%多聚甲醛固定后,用针对人或鼠NOS Ⅲ cDNA的多相寡核苷酸探针进行原位杂交.结合图像分析,半定量检测NOS Ⅲ mRNA的表达.结果:在2、4、6代,常氧培养的肺动脉内皮细胞急性缺氧12 h,NOS Ⅲ mRNA表达明显增加(分别比缺氧前增加48%、125%、119%, P<0.05);从第4代起,慢性缺氧组eNOS mRNA在复氧12 h后仍高于常氧组(P<0.01);慢性缺氧培养的肺动脉内皮细胞复氧后再急性缺氧12 h,eNOS mRNA表达亦明显增加(分别比缺氧前增加92%、245%、565%,P<0.01),其增加的幅度,在HH组均大于同代NH组,随缺氧时间的延长更为显著.结论:慢性缺氧增强了急性缺氧时肺动脉内皮细胞Ⅲ型一氧化氮合酶mRNA的表达,NO调节作用增强,可能是慢性缺氧所致HPV钝化的一个因素.
-
缺氧大鼠脑线粒体能量代谢的研究
目的:观察急、慢性缺氧时大鼠脑线粒体能量代谢的特点,并初步探讨其分子机制.方法:将雄性Wistar大鼠随机分为3组:急性缺氧组(AH)、慢性缺氧组(CH)和对照组(C).急、慢性缺氧组大鼠分别连续置模拟海拔4000 m高原3 d(AH)和40 d(CH),23 h/d,对照组在平原同时喂养.急、慢性缺氧组在模拟海拔4000 m高原、对照组在平原分离脑线粒体,用Clark氧电极法测定线粒体呼吸功能,高压液相法测定线粒体内腺苷酸池含量和ATP生成能力,寡酶素抑制法测定F0F1-ATP酶活性,并用[3H]-UTP掺入法测定线粒体体外转录活性.结果:急性缺氧大鼠IV态呼吸(ST4)显著高于对照组,而呼吸控制率(RCR)、线粒体内ATP含量、ATP生成率和F0F1-ATP酶活性均显著低于对照组;慢性缺氧大鼠ST4显著低于急性缺氧组,而RCR、线粒体ATP含量和F0F1-ATP酶活性则显著高于急性缺氧组,而线粒体ATP含量和F0F1-ATP酶活性显著低于对照组;急性缺氧大鼠脑线粒体体外转录活性显著低于对照组,慢性缺氧组线粒体体外转录活性显著高于急性组,低于对照组;F0F1-ATP酶活性与线粒体体外转录活性呈线性相关.结论:急性缺氧可抑制脑线粒体呼吸功能和F0F1-ATP酶活性,使电子传递受阻,发生氧化磷酸化解偶联,线粒体ATP含量降低;慢性缺氧虽有所恢复,但仍未达到平原对照水平.急、慢性缺氧时大鼠脑线粒体体外转录活性的改变与F0F1-ATP酶活性的改变相一致,两者呈线性相关,提示mtDNA编码氧化磷酸化基因表达的改变可能参与了缺氧所致线粒体氧化磷酸化障碍的机制.
-
氯化钴积聚缺氧诱导因子对5/6肾切除大鼠肾小管间质纤维化的影响
进展性肾脏疾病存在慢性缺氧和肾小管周围毛细血管(PTC)的丧失,缺氧诱导因子(HIF)是缺氧适应时恢复细胞内环境稳定的一个核心调节因子,其转录激活靶基因后具有刺激血管新生、红细胞生成和无氧代谢等诸多作用[1].
-
慢性缺氧对大鼠肺静脉平滑肌细胞内钙离子浓度的影响
目的::探索原代培养肺动脉高压模型大鼠肺静脉平滑肌细胞( PVSMCs)是否具有血管平滑肌功能及L型电压依赖性钙通道( VDCC)阻断剂硝苯地平对其细胞内钙离子浓度([ Ca2+] i )的影响,为慢性缺氧性肺动脉高压发病机制的研究提供理论依据。方法:用显微镜操作和胶原酶消化法分离、培养肺动脉高压模型大鼠肺静脉平滑肌细胞,鉴定培养的细胞及计算纯度,利用细胞内钙离子浓度检测系统观察慢性缺氧对PVSMCs静息[ Ca2+] i 的影响及硝苯地平的干预作用。结果:该方法培养的肺动脉高压模型造模的PVSMCs呈典型的平滑肌特性,表现为“峰-谷”状生长,免疫化学α-Actin鉴定显色,而且培养纯度达到98%;慢性缺氧能使PVSMCs的静息[Ca2+]i 从(104.3±7.9) nmol/L提高到(197.9±11.8) nmol/L(P<0.05);5 mmol/L的硝苯地平能完全阻断慢性缺氧PVSMCs的[ Ca2+] i 对高钾溶液的反应。结论:慢性缺氧可使PVSMCs的静息[ Ca2+] i 升高,其机制可能与激活PVSMCs的VDCC导致细胞外Ca2+内流有关。
-
银杏达莫注射液治疗肺心病疗效观察(附38例分析)
肺原性心脏病急性发作期因通气/血流比例失调致慢性缺氧、代偿性红细胞增多、血液黏滞度增高和血容量增加,促使肺动脉压渐进增高,导致肺心病加重.本文采用银杏达莫注射液辅助治疗,观察治疗前后的动脉血气、血液流变学变化及临床疗效,现报道如下.
-
气管内清吸及灌洗防治胎粪吸入综合征
宫内急、慢性缺氧可致胎粪的排出,而在缺氧的情况下胎儿或刚出生婴儿由于大呼吸(喘气)可吸入被胎粪污染的羊水,胎粪吸入可引起气道阻塞、影响气体交换,导致严重的呼吸困难.如羊水有胎粪污染,约一半患儿气道可见胎粪:气道胎粪的吸引处理可防止多数胎粪吸入综合征的发生,而对于宫内已有胎粪吸入者无效.
-
心肌细胞慢性缺氧适应性反应的研究进展
慢性缺氧型心脏疾病在临床上十分常见,主要包括紫绀型先心病、冠状动脉狭窄型心脏病及高原型心脏病.慢性缺氧是这类疾病的共同病理生理过程,心肌细胞在慢性缺氧应激条件下,可发生一系列适应性变化,促进心肌细胞的存活和生长.本文就心肌慢性缺氧适应性反应的研究现状做一综述,以供基础及临床参阅和借鉴.
-
中医药防治慢性缺氧性肺动脉高压研究进展
肺动脉高压是慢性肺源性心脏病 (CCP)的病理基础.慢性阻塞性肺疾病 (COPD)患者由于慢性缺氧等原因导致肺动脉高压形成,进而使右心室肥厚、扩大,发生 CCP.近年来,中医药防治缺氧性肺动脉高压的研究取得了较大进展,现就有关报道综述如下.
-
Wnt/β-catenin通路激活促进慢性缺氧H9c2细胞中抗凋亡因子bcl-2及survivin表达
目的:探讨Wnt/[β-catenin信号转导通路在H9c2心肌细胞慢性缺氧适应中的作用及可能机制.方法:将37℃、5%O2、5%CO2、90%N2条件下培养的H9c2细胞作为实验组,低氧培养6、12、24、36、48、72 h时收集细胞;将37℃、21%O2、5%CO2条件下培养的细胞作为对照组.采用Western blot和real-time PCR技术检测[β-catenin、抗凋亡因子bcl-2和survivin在不同培养时间点的表达变化.结果:5%O2培养的H9c2细胞与对照组相比,[β-catenin蛋白在缺氧6、12、24、36 h时表达明显增加(P=0.000,P=0.018,P=0.001,P=0.000),bcl-2及survivin表达较对照组明显增加(P=0.000,P=0.000).结论:Wnt/β-catenin信号通路激活可能是H9c2心肌细胞慢性缺氧的适应机制之一,其部分可能通过上调抗凋亡因子bcl-2及survivin表达起作用.
关键词: H9c2细胞 慢性缺氧 Wnt/β-catenin Bcl-2 survivin