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不同来源抗体在HBsAg中和确认试验中的应用
在HBV感染检测中HBsAg是重要的血清学标志物之一.同时血清中检出HBsAg是乙型肝炎的早期诊断指标之一.国外检测HBsAg试剂盒均提出,测定结果有反应性的标本应做中和试验,排除可能的假阳性结果.《全国临床检验操作规程》建议必要时,应采用中和试验进行确认[1].通过以往研究,我们在原有HBsAg检测试剂盒的基础上,加入中和抗体试剂,建立了HBsAg中和确认试验方法[2].为了进一步扩大其应用范围,现对3种不同来源中和抗体进行对比研究,探讨中和抗体在HBsAg中和确认试验中的应用价值.
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尿糖高就是糖尿病吗?
很多人拿着化验单看到尿糖几个加号,参数较高,但不知道如何诊断.那么,尿糖高是糖尿病吗?尿糖阳性并不一定都是糖尿病,很多生理和病理情况均可引起尿糖变化.如:饮食性糖尿、药物性糖尿.长期使用肾上腺皮质激素、脑垂体后叶激素、咖啡因及苯丙胺类药物,会使血糖增高而造成糖尿.此外,水杨酸类、氨基比林等药物,可使尿糖化验出现假阳性结果.
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多重比较与检验水准的调整
在针对医学问题的统计分析中,0.05是公认的检验水准,即当P<0.05时,认为差异有统计学意义.而在涉及多个比较组的情况时,则可能需要对这一检验水准进行调整,以使检验结果更可靠.例如,在针对A、B、C三种降压药物降压效果的研究中,通常需要对三种治疗方法治疗前后血压的下降值进行组间比较.当数据满足参数检验条件时,我们会首先选择方差分析方法完成多组间的差别性检验.当方差分析过程所获得的P值小于0.05时,我们就认为A、B、C三组的降压能力不全相同,差异有统计学意义.对于临床研究而言,仅仅了解以上信息往往是不充分的,我们关心的通常是A、B、C三种药物两两间降压能力是否存在差异.因此在完成针对多组的差别性检验后,完成两两组间的多重比较是必不可少的.但在如上述存在多个比较组的情况下,为了避免获得假阳性结果,两两比较中则有必要对检验水准进行调整.
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常用抗菌药物对血清半乳甘露聚糖检测结果的影响
近年来侵袭性真菌感染(invasive fungal infections,IFI)在临床上的发病率逐年增高.随着抗肿瘤治疗力度加强和器官移植的开展等,侵袭性曲霉病(invasive aspergillosis,IA)的发生率明显增高.国际上ELISA法血清半乳甘露聚糖(GM)检测诊断正日益成为IA的重要辅助诊断手段,该检测方法的假阳性问题也逐渐得到重视,在我们对IA高危患者进行血清GM抗原监测过程中也发现了数例假阳性结果,且与某些抗菌药物的使用有关.为此,特予进一步研究.
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如何做好全基因组及候选基因病例/对照关联研究
基因型与表型关联研究(genotype-phenotype association study)目前采取的策略主要为全基因组关联研究与候选基因关联研究.我们所说的表型是指某种疾病所表现出的症状或人体本身具有的一些特征或生理生化指标等,如身高、体重、血脂、血糖、血压、心肌梗死等.根据"常见病多基因变异"的理论,上述研究策略可能会帮助我们找到多基因复杂疾病(如冠心病,糖尿病)的病因,阐明相同疾病为何l临床表现不同,相同疾病为何对治疗的反应(疗效,副作用)各异的原因,为建立预测、预警、预防的个体化医学体系储备知识.但是,由于目前大多数的关联研究普遍存在实验设计欠严谨,样本选择不当,样本量不足,没有完善的质控措施等原因,导致假阳性结果较多.我们参考了目前国际一流水平的全基因组或候选基因关联研究中普遍遵循的原则并将这些原则介绍给大家,以期引起国内同道的重视.同时,结合国际上有影响力杂志发表的关联研究类的论文,给大家介绍这些杂志对关联研究类论文的发表要求,希望对大家发表论文有所帮助.限于我们的学识及本领域一日千里的发展.不当之处在所难免,我们仅仅是抛砖引玉,欢迎批评.
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检测和监测膀胱肿瘤:提高NMP22的应用价值
检测膀胱肿瘤方面,某些肿瘤标记物有比尿细胞学更好的敏感性,但较低的特异性和阳性预测值限制了应用.作者对核基质蛋白22(NMP22 )的假阳性结果进行分类,建立了相关的排除标准,重新计算了特异性和阳性预测值.共有6 08例临床不除外膀胱肿瘤的患者接受了检查,其中镜下血尿226例,肉眼血尿143例,有尿频或排尿困难等慢性症状239例.后确诊为膀胱肿瘤者52例,NMP22的敏感性为88.5%,特异性为83.9%,阳性预测值为34.1%,而尿细胞学的敏感性为30.8%,即使将不典型结果计算为阳性,敏感性仅为61.5%,特异性为99.8%.作者发现,NMP22假阳性结果主要存在于6类疾病中,假阳性率分别为:泌尿系感染43.8%,泌尿系结石83.3%,近期泌尿系统异物(包括留置尿管和肾造瘘管)100.0%,肠膀胱100.0%,其他泌尿系统肿瘤20.7%,泌尿系统器械操作(如膀胱镜)26.5%.排除这6类疾病后,NMP22对膀胱肿瘤的特异性达到 99.2%,阳性预测值达到92.0%.作者认为,了解并正确排除假阳性结果,可以提高 NMP22在检测膀胱肿瘤方面的应用价值.
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快速生物监测假性结果原因分析
生物监测是通过标准化的菌株和合乎要求的抗力来考核整个灭菌负荷是否灭菌合格,监测环氧乙烷(EO)气体灭菌效果的菌株为枯草杆菌黑色变种芽胞,市场上快速的生物指示剂培养仅4 h就可阅读结果,避免了多年来生物培养需2~7 d才能测试出结果的弊病.该生物指示剂为自含式,即培养基底物内含有特殊的荧光物,灭菌后压碎安瓿使培养基与菌片沾在一起(测试管),并取同批号未灭菌的指示剂(对照管)同置于快速生物培养仪中4 h即可阅读结果,阅读灯显示绿色(阴性),表示无活性酶与培养基的荧光物结合释放出荧光,表示芽胞未被杀灭.快速生物监测要求只有在生物测试管阴性、对照管阳性时,表示本锅次灭菌合格.该监测方法较简单方便,但在整个操作环节中需防范干扰因素导致的假性结果:才能确保结果的正确性.笔者在使用及试验中曾遇到因某些因素干扰导致的假性结果,可供同行参考借鉴.
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血清hCG假阳性的问题
绒毛膜促性腺激素(hCG)是滋养细胞分泌的一种糖蛋白激素,早在妊娠后8~10 d血中即可检测到.hCG的分泌与滋养细胞的数量密切相关,因此血清hCG的测定在早期妊娠、异位妊娠、先兆流产和滋养细胞疾病的诊断、治疗及预后中已成为至关重要的指标.随着测定方法的不断改进,其灵敏度和特异度不断提高,但近年来国外仍不断有血清hCG假阳性结果而导致不必要的诊刮、化疗甚至手术的报道[1~4],已提出了"错觉hCG"(phantom hCG)的概念.血清hCG假阳性结果在广义上指血清中本无hCG分子而检测结果阳性,狭义上指妇产科领域内与妊娠及相关疾病无关的血清hCG增高.现就妇产科领域内,这一问题的原因、特点和预防综述如下.
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乳腺癌微小转移的检测指标
乳腺癌是妇女常见的恶性肿瘤之一,其发病率占妇女肿瘤的31%,死亡率则仅次于肺癌,居第二位[1]。而几乎所有的死亡原因都是远处转移。就诊时95%的患者在体检,生化,影像检查无远处转移的证据[2]。甚至在手术彻底切除局部病灶且组织学腋窝淋巴结没有受侵的情况下,仍有3 0%的患者在5年内出现复发和转移[3],说明存在常规方法不能检测出的微小转移。 Diel[4]等的大样本乳腺癌多变量分析结果显示,微转移是一个独立的预后指标,其价值优于肿瘤分级和分期等。检测微小转移可筛选出复发和转移的高危人群给予辅助治疗,其意义在于:1.增加了在形成明确转移灶之前作出诊断的可能性。2.肿瘤负荷小所需治疗剂量小。3.可能减少对治疗耐药的肿瘤细胞数量。这使得我们可以对高危复发患者进行辅助治疗,同时避免低危患者接受不必要的治疗。 近几年乳腺癌患者的淋巴结、骨髓、外周血中检测微小转移已经逐渐发展起来,包括连续切片法、免疫组织化学法、PCR法等。由于连续切片法的检出率与切片间隔有很大关系,且费时费力,临床难以推广,故近年来已很少使用。免疫组织化学技术因单抗之间存在交叉反应或宿主免疫细胞表达相关抗原,可产生假阳性结果[5],近年来也很少应用。故目前微小转移的研究多采用PCR法。本文就PCR法检测乳腺癌微小转移的指标作一综述。
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非HIV感染者蛋白印迹试验不确定及假阳性结果的原因
中国常以蛋白印迹试验(WB)作为艾滋病病毒(HIV)抗体确证实验.对于WB试验的判定标准,各个国家/国际组织、各个公司的试剂盒等推荐的判定标准均不同.HIV抗体不确定结果比例在不同研究中具有较大差异.HIV抗体不确定样本出现的特异性条带各不相同,并且不同的条带转归情况也不同.非HIV感染者WB试验不确定及假阳性结果的原因十分复杂,主要与非特异性反应有关,如其他反转录病毒感染、分枝杆菌感染、自身免疫性疾病、血液透析、怀孕、疫苗接种等.
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免疫诊断(主要是ELISA)试验操作的几点体会
免疫诊断(主要是ELISA)试验由具有灵敏度强、特异性强、操作简便、试剂稳定的特点,已经在临床检验中获得了广泛应用.但免疫试验操作中的各个环节对试验的检测效果影响很大,如不注意有可能导致结果不准确,造成假阴性或假阳性结果.现将各个环节的操作体会总结如下.
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尿沉渣检验的重要性及影响因素
尿液常规检查是临床诊断疾病,治疗用药及观察疗效的检测项目之一.为提高工作效率,尿化学分析仪已普及各级医院,且多采用干化学法.干化学法虽然简单,快速,但影响因素甚多,如温度,浸尿时间,反应时间,药物及其它物质影响,都会出现假阴性或假阳性结果.对临床较有参考价值的项目如:亚硝酸盐,尿蛋白,潜血,白细胞,因此尿沉渣检验不容忽视.本文对我院600名患者尿常规检验进行分析.
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运动平板负荷试验对冠心病的诊断价值
运动平板负荷试验(Treadmill Exercise Test,TET)是心内科诊断冠状动脉粥样硬化性心脏病相对重要的一种检查手段。由于其无创、经济、具有相对较高的敏感性和特异性,目前已被广泛地应用于冠状动脉粥样硬化性心脏病的诊断和预后的评价中。本研究对368例可疑冠心病患者行冠脉造影术(coronary angiography,CAG)前均行运动平板负荷试验,评价运动平板负荷试验对冠心病诊断的价值,并分析其假阳性结果出现的原因。
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儿科青霉素药敏试验假阳性反应的分析和护理对策
目的 分析青霉素药敏试验假阳性结果产生的原因,采取相应的护理对策.方法 加强业务学习,操作技术培训及职业道德培训.结果 假阳性结果明显减少.结论 采取积极有效的护理对策,可减少甚至避免假阳性结果的出现.
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二阶段卵巢癌筛选方法
美国德克萨斯大学安德森癌症中心的研究人员建立了一套二阶段的卵巢癌筛选方法,可以在疾病早期做出诊断。该方法主要是对血液中肿瘤标志蛋白CA125的水平的变化进行测量,从而可以更好地对癌症进行早期诊断。研究人员通过对11年来4000多名绝经后女性每年的CA125血液检测数据进行分析,并使用卵巢癌风险算法将其分为低、中、高危三组。筛查结果显示,平均每年大约5.8%的女性具有中等风险,而其中0.9%需要进行经阴道超声,并到肿瘤医生处就诊。研究显示,对绝经后女性而言,新的筛查策略具有非常高的特异性和极低的假阳性结果,被错误诊断为癌症的病人仅为0.1%。
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远程胎儿监护的应用
1 远程胎儿监护的发展历史20世纪50年代,Hon和Hammachar将胎儿电子监护引入临床,使胎心率的监测进入了一个新时代.但是,胎心监护的诊断准确性不够高,有一定比例的假性结果.假阳性结果造成医师"过度诊断",且导致不必要的产科干预,人为增加手术产、早产等情况.假阴性结果又使医师贻误治疗和抢救的时机.1988年美国提出远程医疗的概念,通过使用远程通讯技术和计算机网络,为患者提供了更加方便、经济、及时的监护手段.
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祖先信息标记在关联研究中的应用
关联分析方法被越来越多的用于疾病相关基因的定位,它的关键是选择合适的正常对照群体,因为存在病例组与对照组两群体间的差异会导致假阳性结果.近来,人们通过分析一些与疾病不相关的遗传标记在两组人群间的分布是否存在显著差异来判定样本间的层化程度,以鉴定疾病关联结果的真实性.祖先信息标记(ancestry informative markers, AIMs),也称人群特异标记,是在不同人群中等位基因存在较大差异的遗传位点 [1].国外一些小组筛选了许多这样的标记,但大多反映了非裔、欧裔和土著美裔人群之间的差异[1,2].我们根据文献选取了5个AIMs,分析它们在家族性热性惊厥组(FC)和正常对照组两组人群之间的分布, 探讨两组人群的匹配性,并与AIMs在其他人群中的分布作比较,了解这些标记是否可以反映中国人群构成的特异性.
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食品中沙门氏菌酶联免疫荧光分析(VIDAS Salmonella[SLM]Assay)筛选方法
本方法为AOAC公布的方法996.08,适用于所有食品中沙门氏菌的检测.可能会遇到一定百分率假阳性结果.所有阳性结果必须通过标准培养方法确证.按967.26B(见17.9.07)从增菌培养基和M肉汤划线于选择性培养基培养,对典型或可疑菌落按967.26C(见12.9.02),967.27(见17.9.03)和967.28(见17.9.07)对培养物加以确证.也可按978.24(见17.9.04),989.12(见17.9.05)和989.13(见17.9.06)使用商品化的生化检验盒对食源性沙门氏菌属鉴定.
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手工ELISA法检测HBsAg注意事项探讨
目前, 大部分基层医院还没有洗板机和酶标仪, 因此用ELISA法检测HBsAg只能手工洗板和目测法判断结果, 如果不注意, 易造成假阳性结果(假阴性少见), 给患者造成不必要的负担. 笔者经过多年的实验操作, 认为只要注意以下几点, 就可大大减少或避免这种情况的发生.
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标本处理对全自动酶标仪检测HBsAg的影响
无偿献血的终目的是保证为临床提供安全、有效的血液及制品.随着无偿献血的大力开展,检测用的血标本就无法满足"必须使用新鲜的、完全凝集的、正确贮存的高质量血标本"的规定,酶联检测自动化仪器的引进,对检验标本的质量又有了更高的要求,若标本处理不当,则会造成假阳性结果.为了保证试验结果的准确性、可靠性,通过对本站全自动酶标仪的使用,笔者对血标本的制备过程总结了一点心得,请同行们指正.