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肌球蛋白与心脏功能
心脏收缩-舒张是一个非常复杂的生理过程,受诸多生理性和/或病理性因素影响而发生变化,因此而影响心功能.
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TGF-β1与肝纤维化的关系再探讨
转化生长因子β(transforming growth factor β,TGF-β)是一簇具有多种功能的蛋白多肽,广泛存在于动物正常组织细胞以及转化细胞中,以骨组织和血小板中含量为丰富.目前至少发现有5种异构体,分别命名为TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、TGF-β4、TGF-β5[1](其中肝脏中含量高并有牛物活性的是TGF-β1).正常情况下,TGF-β1的表达极少,而肝损伤时其表达明显增加,是肝纤维化形成的关键因子.
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新生儿高胆红素血症的光照疗法和护理
光照疗法是一种通过荧光灯照射治疗新生儿高胆红素血症的辅助疗法.主要作用是使4Z、15Z-胆红素转变成4Z、15E-胆红素异构体和光红素异构体,从而易于从胆汁和尿液中排出体外[1].近30年来其光源均采用蓝光,蓝光的波长主峰在420~470 nm,而胆红索对波长为450~460 nm的光线吸收作用强,故一般认为蓝光是光疗的惟一光源[2].
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COX-2、COX-2抑制剂与胃癌
环氧化酶(COX)是前列腺素合成过程中的一个重要的限速酶,有两种异构体:COX-1和COX-2.其抑制剂属于非甾体类抗炎药(NSAIDS),包括COX-1抑制剂和COX-2抑制剂.COX-1对胃黏膜的保护功能以及COX-2的参与炎症机制均通过花生四烯酸转化为前列腺素所介导,前列腺素亦参与介导肿瘤生长.从化学结构上分析,COX-1与COX-2分子结构有所不同,其中主要在于第523位氨基酸,前者为异亮氨酸,后者为缬氨酸.由于缬氨酸可以发生甲基化,使COX-2的"侧袋(side pocket)"形成.研制开发COX-2抑制剂的靶点正是这个"侧袋",由此开发出了celecoxib、rofecoxib和nimesulide等药物,这些药物具有广阔的应用前景,尤其在胃癌防治领域.
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拉米夫定的临床应用
拉米夫定(Lamivudine,简称3TC,商品名为贺普丁)是3噻胸苷的阴性异构体,是一双脱氧核苷酸类似物.化学名为:2',3'双脱氧硫代胞嘧啶[(1)-β-L-2',3'-dideoxy-3'-thiacytidine],分子式为:C 8H11N 3O3S,分子量为229.3.
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8-异前列腺素F2α与心血管疾病
8-异前列腺素F2alpha(8-iso-PGF2α)是近几年发现的前列腺素类代谢产物,是前列腺素F2α的异构体(IsoprostaneF2α),是自由基损伤细胞膜脂质花生四烯酸发生脂质过氧化的产物.它不经过环氧化酶催化,属非酶性产物.8-iso-PGF2α是异前列腺F2α的主要和稳定的成分,具有收缩血管以及促进血小板粘附和聚集等生物活性.11-脱氢-血栓烷B2(11-DH-TXB2)是近年新发现的血小板激活的标志物,8-iso-PGF2α可促进血小板激活,使11-DH-TXB2生成增加.本文旨在将8-iso-PGF2α与心血管疾病的关系做一综述.
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mdm2基因研究进展及其与肺癌的关系
1 mdm2基因及其作用mdm2是一种癌基因,该基因定位在染色体12q13-14.人的mdm2基因编码区为1467bp,该基因在进化上比较保守,在许多动物细胞的染色体都有同源序列,如人和小鼠mdm2基因编码区有80.3%的同源性.mdm2基因表达的调节相当复杂,并且有不同的mRNA剪接形式.研究表明在培养细胞中至少存在p90、p85、p76、p75、p58和p57共6种mdm2异构体,在体内仅有全长的p90-95和p57能与p53结合[1].
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CD44粘附分子在人类根尖周损害中的免疫定挝
透明质酸盐受体C1D44是一种介导细胞间以及细胞与组织基质间反应的粘附分子.它是一种细胞表面蛋白,具有多种功能,包括调节免疫,参与炎症反应等.为确定CD44是否在人类根周损害中起作用,作者进行了研究.材料和方法作者选择20个根尖周损害组织(16个根尖周肉芽肿、4个根尖囊肿),经福尔马林固定、石蜡包埋,采用免疫组织化学方法,用单克隆鼠抗CD44H抗血清检测标准的CD44H及其异构体CD44V3在这些组织中是否存在.结果和讨论所有检测组织均存在CD44H和CD44V3.它们主要定位于上皮,内皮和结缔组织细胞中.并且,肉芽肿周围纤维衬里细胞之阳性反应特征与损害大小直接相关.Malassez上皮剩余及囊肿上皮衬里的免疫反应也较强烈.被损害的周围血管,尤其是肉芽肿周围也对CD44表现阳性.本研究首次证实根尖周损害组织中存在CD44及其异构体,表明除表皮生长因子和角质细胞因子等外,CD44在根尖周损害及根尖囊肿形成与发展中对于刺激上皮增生起着重要作用.总之,CD44在根尖周损害中的表现基于细胞种类的不同有不同反应.在上皮细胞中,CD44H与Malassez上皮剩余的迁移和增生有关,进而影响上皮囊肿衬里的形成.在根尖周损害中的内皮和炎性细胞中,这些受体可能调节白细胞与内皮细胞间的反应、迁移和侵入.因此,可以认为CD44与根尖周肉芽肿发展为根尖囊肿,根尖周损害大小变化有关.[王学侠 陈明艳摘 王世文校]
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2D-HPLC同时测定小鼠胸腺中的酸性氨基酸异构体
目的 研究D-酸性氨基酸的代谢组学,建立同时分离和定量体内样品中酸性氨基酸D、L体的离线二维HPLC法.方法 利用硅胶基质ODS整体柱为第一维分离色谱柱,流动相为乙腈-三氟醋酸-水(9∶0.05∶91);Chiralpak QD-1-AX色谱柱为第二维手性分离柱,流动相为含10 mmol·L-1柠檬酸的甲醇-乙腈(50∶50),荧光法检测,离线手性2D-HPLC分析系统.结果 两对对映体能同时得到良好地分离(Rs>2.50);各异构体的定量线性范围均为0.005 ~5 pmol(r>0.9998),检出限和定量限分别为2、5 fmol,回收率均在98% ~ 105%,日内日间精密度的RSD均<5%.应用该法测得SAMP1及SAMR1小鼠胸腺组织中D-天门冬氨酸的浓度分别为212.2、163.4 nnmol·g-1(n=6).结论 所用方法具有较高的选择性、灵敏度和准确性,可用于体内样品中酸性氨基酸异构体的同时测定.
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HPLC测定左氧氟沙星原料中的右旋异构体
目的 采用HPLC法测定左氧氟沙星原料中的右氧氟沙星.方法 色谱柱为C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为L-亮氨酸硫酸铜溶液-甲醇(85:15),检测波长为330 nm,柱温40℃,流速1.0 ml·min-1.结果 检测3批原料,按外标法计算右氧氟沙星的含量分别为0.05%、0.06%、0.05%.结论 所建方法能够检测出左氧氟沙星原料中的右氧氟沙星,可用于左氧氟沙星原料中异构体的检查.
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毛细管电泳法测定富马酸托特罗定S型异构体
目的测定R型富马酸托特罗定中的S型异构体.方法采用68 cmⅹ50 μm的毛细管,以含0.01 mol·L-1羟丙基环糊精的三羟甲基氨基甲烷溶液(磷酸调pH 2.5)为缓冲液,运行电压为30 kV,毛细管温度15℃,检测波长204 nm,压力进样100 mbar·s-1.结果低检出浓度0.012 mol·L-1,平均加样回收率为101.29%,RSD=1.5%(n=6).结论毛细管电泳法用于测定R型富马酸托特罗定中的S型异构体,方法简便快捷,灵敏度高,重复性好.
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盐酸左氧氟沙星注射剂异构体的测定
目的:对盐酸左氧氟沙星注射剂中右旋体进行手性分离.方法:采用手性流动相HPLC法,用ODS柱,检测波长300 nm,流动相为甲醇∶手性溶液Ⅱ(15∶85,pH3.0).结果:右旋体低检测限5 ng,制剂辅料无干扰,重现性好.结论:该法可用于盐酸左氧氟沙星注射剂纯度检查.
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HPLC法测定西他沙星片异构体的方法研究
目的 建立采用HPLC法测定西他沙星片异构体的方法.方法 色谱柱为十八烷基键合硅胶柱(4.6mm×100mm,2.7μm),流动相为(L-苯丙氨酸1.32 g、硫酸铜1g,加水溶解并定容至1000mL,用氢氧化钠试液调节pH值至3.5)-甲醇(75:25),检测波长为295nm,流速1.0mL/min,柱温35℃.结果 非对映异构体SSR在0.0004536~0.002268mg/mL范围内线性关系良好(r=0.9998).非对映异构体RRS在0.0004512~0.002256mg/mL范围内线性关系良好(r=0.9996).对映异构体RSR在0.0004536~0.002268mg/mL范围内线性关系良好(r=0.9996).SSR、RRS和RSR的平均回收率(n=9)分别为101.62%(RSD为4.09%),103.43%(RSD为4.00%),102.09%(RSD为2.31%),检测限分别为1.04、1.05和1.04ng.结论 该方法操作简便、准确,重现性好,灵敏度高,可有效控制西他沙星片中的异构体.
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HPLC法测定西他沙星异构体
目的 研究西他沙星中异构体的检测方法.方法 采用HPLC法,以十八烷基键合硅胶柱(2.1mm×50mm,2.7μm)为色谱柱,(CuSO4 1g、D-苯丙氨酸1.32g、加水溶解并定容至1000mL,用氢氧化钠调节pH至3.5)-甲醇(80∶20)混匀为流动相,流速0.5mL/min,检测波长295nm,柱温:40℃.结果 异构体A浓度在0.004136~0.02068mg/mL范围内呈良好线性关系,r=0.9999;异构体B浓度在0.00404~0.0202mg/mL范围内呈良好线性关系,r=0.9996.西他沙星浓度在0.004096~0.02048mg/mL范围内呈良好线性关系,r=0.9997.结论 所建立方法简便、快速、准确度高、专属性强、重现性良好,适宜于西他沙星异构体检测.
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HPLC法测定磺苄西林钠中的有关物质
目的 采用反相高效液相色谱法测定磺苄西林钠的有关物质.方法 用Diamonsil(TM)C18(250mm×4.6mm,5μm)柱为分析柱,甲醇:0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲液(加入0.5%的三乙胺,10%磷酸调pH4.0)(68:32)为流动相;检测波长为220nm;温度30℃.结果 低检出限为1.8ng;线性范围2.75~110mg/L(r=0.9999);重复性实验RSD为3.67%;有关物质回收率RSD为7.34%.结论 本方法准确、简便,可用于测定磺苄西林钠中的有关物质.
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儿茶酚胺类药物手性拆分研究进展
手性是自然界的本质属性之一,临床应用的多数药物就是由手性分子构成.现代药理学研究证明,药物的手性与药效密切相关,往往两种异构体药物中仅有一种有效,另一种无效甚至有害.
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剪接因子SRSF7新mRNA剪接异构体在顺铂处理细胞中的变化
目的:探讨不同梯度浓度顺铂(CDDP)处理不同肺癌细胞后新发现的剪接因子SRSF7 mRNA异构体在同浓度CDDP处理后不同的细胞中的水平变化.方法:采用梯度浓度的CDDP处理肺癌细胞A549(8、18、24、32、40、48及56 μmol/L)和H1299(12、24、36、48、60、72及84 μmol/L),处理24 h后提取总RNA,进行RT-PCR检测SRSF7 mRNA剪接异构体,并选取NCBI中未确定的异构体进行TA克隆后测序并分析鉴定异构体类型;用56 μmol/L的CDDP处理人胚肾细胞293FT,宫颈癌细胞CaSki、SiHa、C33A细胞24 h,提取总RNA后验证新发现的SRSF7 mRNA剪切异构体是否存在这些细胞中.结果:发现3种新的SRSF7mRNA剪接异构体(分别标记为New1、New2及New3),在肺癌细胞A549、H1299,人胚肾细胞293FT,宫颈癌细胞CaSki、SiHa、C33A细胞等多种肿瘤细胞中均存在,根据NCBI的预测New1,New2,New3异构体均为非编码蛋白的mRNA异构体,随着处理CDDP浓度的增加,其比例明显上升;而编码蛋白的mRNA异构体a和(或)b所占比例明显下降;同时SRSF7的总mRNA水平逐渐降低.结论:新发现的3种非编码的mRNA异构体的变化揭示细胞可能通过SRSF7自身的mRNA 选择性剪接来应对DNA损伤.
关键词: 顺铂 富含精氨酸丝氨酸的剪接因子7 选择性剪接 异构体 细胞凋亡 -
顺铂处理后肺癌细胞剪接因子SRSF1 mRNA异构体的变化
目的: 观察不同浓度顺铂处理后肺癌细胞中剪接因子(SRSF1)mRNA异构体的变化,并寻找其中发挥主要抗凋亡作用的异构体.方法:使用不同浓度的顺铂处理肺癌细胞系A549和H1299后提取总RNA,设计SRSF1基因不同的引物(F1∶R1、F1∶F2及F2∶R1)进行RT-PCR以检测其mRNA剪接异构体的变化.结果:在A549和H1299细胞中检测到了5种异构体(Isoform-a、Isoform-b、Isoform-d、Isoform-e、Isoform-f),且主要表现为随着顺铂浓度的升高,非编码蛋白的mRNA异构体的比例明显上升,主要是Isoform-d的上升;而编码蛋白的mRNA异构体所占比例明显下降,主要是Isoform-a下降;同时SRSF1的总mRNA水平也是逐渐降低的.结论:在顺铂处理下,肺癌A549和H1299细胞中的SRSF1的转录水平被下调,其mRNA选择性剪接向下调编码蛋白的mRNA异构体的方向转变,造成编码蛋白的mRNA异构体降低的主要原因为Isoform-a, 该异构体可能是SRSF1基因发挥抗细胞凋亡作用的主要异构体.
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激素替代治疗对乳腺密度和组化标记的影响
绝经后妇女用不同的药物以缓解围绝经期症状和预防骨质疏松,而连续应用雌孕激素(E+P)则是过去常选择的激素治疗(HT)方法.现今改变这一传统型治疗方法的药物是利维爱(tibolone)--一个独特的具有组织特异性的化合物.经口服后,它可迅速被小肠和肝脏转化为两种E代谢产物(3α和3βOH代谢产物)发挥E的影响,作用于骨骼、阴道并改善更年期有关症状.其第3代谢产物为△4异构体,具有P及T(雄激素)的活性,在肝、小肠和子宫内膜合成,因此可防止子宫内膜受刺激.
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Basigin(CD147)剪接异构体3抑制食管癌细胞的增殖及侵袭和迁移
目的 研究basigin(BSG,CD147)剪接异构体3(BSG3)在食管癌组织中的表达水平,及其对食管癌细胞功能的影响.方法 免疫组织化学染色检测食管癌组织及正常食管组织BSG3的表达;实时定量PCR分析BSG1、BSG3在食管癌组织及正常食管组织中转录水平的差异;通过真核表达载体转染的方法在Eca109食管癌细胞中过表达BSG3,MTT法检测Eca109食管癌细胞的增殖活性,TranswellTM侵袭小室实验检测Eca109细胞的侵袭能力,划痕实验检测Eca109细胞的迁移能力.结果 与正常食管组织相比,食管癌组织中BSG1和BSG3均高表达,过表达BSG3能够有效抑制Eca109细胞的增殖、侵袭和迁移能力.结论 BSG3在食管癌组织高表达,且能够拮抗BSG1的功能,抑制食管癌细胞增殖、侵袭和迁移能力.