中国药理学通报杂志
Chinese Pharmacological Bulletin 중국약리학통보
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国药理学会
- 影响因子： 1.54
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1001-1978
- 国内刊号： 34-1086/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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吗啡对原代培养大鼠皮质神经元神经甾体水平的影响
目的 探讨吗啡慢性处理对大鼠大脑皮质神经元合成释放神经甾体水平的影响及其机制.方法 建立原代培养大鼠大脑皮质神经元吗啡依赖样模型,固相萃取结合高效液相色谱-质谱联用法测定细胞培养液中神经甾体水平;免疫印迹法检测神经元中p-CREB水平.结果 与盐水对照组相比,吗啡(1 μmol·L-1)处理使PREG和DS的水平降低(P＜0.01);μ-受体激动剂DAMGO使PREG、DS和PS水平下降,AP水平增高;与吗啡单独处理组相比,μ-阿片受体拮抗剂CTAP与吗啡联合处理使PREG增加(P＜0.01).与盐水对照组相比,吗啡或DAMGO慢性处理均可增加神经元内p-CREB的水平(P＜0.01);与吗啡处理组相比,CTAP抑制吗啡诱导的p-CREB的增加.结论 μ-阿片受体参与了介导吗啡慢性处理对皮质神经元神经甾体合成释放的影响;神经元内p-CREB水平的变化反映了吗啡引起的神经元适应性改变,提示神经甾体水平的变化可能与吗啡依赖有关.
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知母总黄酮对溴酸钾诱导小鼠肾损伤的保护作用
目的 探讨知母总黄酮对溴酸钾诱导小鼠肾损伤的保护作用.方法 200 mg·kg-1溴酸钾腹腔注射诱导小鼠肾损伤模型,采用高效液相色谱仪测定小鼠血清中肌酐含量及肾组织中谷胱甘肽、半胱氨酸和维生素C含量,TBARS法测定小鼠肾组织中丙二醛含量,荧光酶标仪测定知母总黄酮的体外抗氧化活性及小鼠肾组织的抗氧化能力指数.结果 与肾损伤模型组相比,知母总黄酮可以有效降低血清肌酐水平和肾组织中丙二醛含量,提高肾损伤小鼠肾组织的抗氧化能力指数、谷胱甘肽、半胱氨酸及维生索C水平,并在体外显示出较强的抗氧化能力.结论 知母总黄酮对溴酸钾诱导的小鼠肾损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能与知母总黄酮通过消除自由基缓解溴酸钾诱发的肾组织过氧化状态有关.
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GABA及受体拮抗剂对大鼠海马CA3区长时程增强效应的影响
目的 探讨GABA在海马CA3区长时程增强(longterm potentiation,LTP)诱导和形成中的作用.方法 应用在体电生理研究方法,观察局部给予GABA及GABAA受体拮抗剂bicuculline对海马CA3区LTP诱导和维持的影响;应用高效液相色谱荧光检测技术测定LTP诱导90 min后实验侧海马组织GABA含量变化.结果 ①强直刺激PP纤维诱导LTP 90 min后,海马组织GABA水平(119.3±10.8)μmol·g-1 protein较对照组(206.4±24.7)μmol·g-1 protein降低(P＜0.01);谷氨酸含量与对照组比差异无显著性(P＞0.05).②强直刺激前5 min局部给予GABA 200 nmol,LTP诱导明显被抑制,相对PS幅值在各个时间点均低于LTP诱导组(P＜0.01)而与对照组接近(P＞0.05);给予GABAA受体拮抗剂甲基溴化荷包牡丹碱(bicuculline methbromide,BMB)1 nmol 1 min再给予GABA 200 nmol,发现GABA对LTP的抑制作用减弱,PS幅值高于只给予GABA组(P＜0.01).③强直刺激PP纤维诱导LTP形成30 min后,海马CA3区局部给予GABA 200 nmol,LTP效应被翻转,相对PS幅值在各时间点均低于LTP诱导组(P＜0.01)而与对照组接近(P＞0.05);给予BMB 1 nmol 1 min后再给予GABA200 nmol,GABA对LTP效应的抑制作用减弱,PS幅值高于只给予GABA组(P＜0.01)而低于LTP组(P＜0.01).④BMB 1 nmol可使低频测试刺激诱发的场电位PS幅值明显升高,90 min内稳定在基础幅值的194.8%±3.6%水平,与强直刺激诱导的LTP组PS幅值接近(P＞0.05).结论 GABA可抑制大鼠海马CA3区LTP的诱导和形成.
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双环醇对脂多糖诱导巨噬细胞iNOS蛋白的表达和NF-κB活化的抑制作用
目的 炎症是肝炎病毒或其它因素所致的肝损伤的一个共同特征,该文目的系研究抗肝炎新药双环醇对与炎症反应相关分子的调节作用.方法 以无毒性浓度双环醇预先与巨噬细胞株RAW 264.7和小鼠腹腔巨噬细胞温孵1 h后,加入一定量脂多糖(LPS)共同培养适当时间以诱导上述细胞的活化,培养上清中NO2-的含量和TNF-α的水平分别用Griess试剂及L929细胞株生物法测定,用Western blot方法测定iNOS蛋白的表达和NF-κB的活化.结果 双环醇在0.1～0.5 mmol·L-1剂量依赖性降低1 mg·L-1LPS引起的RAW 264.7和小鼠腹腔巨噬细胞NO的释放以及TNF-α的分泌,双环醇0.5 mmol·L-1能够明显抑制1 mg·L-1LPS引起的iNOS蛋白的表达和NF-κB的活化.结论 双环醇对与炎症相关的调控因子iNOS蛋白的表达和NF-κB的活化有抑制作用,表明该药具有抗炎活性.
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地黄活性成分梓醇对转基因CHO细胞M2受体的调节作用
目的 探讨地黄活性成分梓醇对转染M2受体亚型基因的CHO细胞系(CHOm2细胞)M2受体密度作用.方法 采用衰老CHOm2细胞,常规培养后加入不同浓度梓醇及对照生理盐水,放射配基结合分析测定M2受体密度,Lowry法测定蛋白含量;同时观察了梓醇与M受体结合位点的关系及对乙酰胆碱酯酶的作用.结果 梓醇在终浓度10-5、10-4mol·L-1明显升高衰老CHOm2细胞M2受体密度(P＜0.01),但不占领M受体结合位点,也不抑制乙酰胆碱酯酶活性(P＞0.05).结论 梓醇能上调衰老CHOm2细胞M2受体密度,可能是地黄治疗AD的主要有效成分.
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缓激肽诱导胶质瘤细胞内cAMP反应元件结合蛋白磷酸化的实验研究
目的 观察缓激肽作用下,大鼠C6胶质瘤细胞中转录因子cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)磷酸化的动态变化,并探讨其可能的意义.方法 应用免疫细胞化学和Western blot方法,观察1μmol·L-1缓激肽作用C6胶质瘤细胞在不同时相点(0,5,10,15,20,30 min)CREB磷酸化的动态变化.结果 1 μmol·L-1缓激肽作用C6胶质瘤细胞的5到30 min的各时相点均能检测到CREB的磷酸化(P＜0.01),其中以15 min的磷酸化强(P＜0.01).结论 缓激肽可促进大鼠C6胶质瘤细胞中转录因子CREB的磷酸化,此作用可能与其促进血肿瘤屏障的选择性开放有关.
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甘肃黄芪黄酮对AngⅡ致内皮细胞凋亡的保护作用
目的 探讨甘肃黄芪黄酮化合物芒柄花素与毛蕊异黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)凋亡的影响.方法 将不同浓度上述两种黄酮单体(0.01、0.1、1.0、10 mg·L-1)分别与AngⅡ(10-6mol·L-1)和HUVECs作用24 h后,MTF比色法检测细胞存活率,Hoechst33258荧光染色法观察细胞核形态变化,流式细胞仪及激光共聚焦仪检测细胞凋亡,并观察凋亡基因Fas表达的变化.结果 甘肃黄芪黄酮化合物芒柄花素与毛蕊异黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖呈剂量依赖性地抑制AngⅡ引起的细胞存活率下降(P＜0.05),AngⅡ(10-6mol·L-1)孵育24h后,内皮细胞凋亡率明显多于对照组(P＜0.01);芒柄花素(1.0 mg·L-1)与毛蕊异黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖(1.0 mg·L-1)可抑制AngⅡ(10-6mol·L-1)诱导的内皮细胞凋亡(P＜0.01),并减少Fas的表达(P＜0.05);以上实验芒柄花素与毛蕊异黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖两化合物间比较无差异(P＞0.05).结论 甘肃黄芪黄酮化合物可减轻AngⅡ诱导的HUVECs凋亡,其机制之一可能与其降低Fas的表达有关.
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异氟烷对离体大鼠心脏缺血后能量代谢的影响及其机制
目的 研究异氟烷对心肌缺血/再灌注期间能量代谢和功能的影响及其可能机制.方法 实验采用离体大鼠心脏Langendorff灌注模型,分为未处理组、异氟烷组、chelerythrine(蛋白激酶C抑制剂)+异氟烷组、chelerythrine组.药物处理(或未处理)后,所有心脏均缺血30 min,复灌60 min.以Maclab生理实验系统记录心脏的血流动力学指标,HPLC方法 测定心肌能量物质含量,免疫印迹方法分析蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)亚型在细胞内的分布和活性.结果 异氟烷明显延缓心肌缺血15 min时心肌ATP的耗竭,改善再灌注后的心肌收缩功能以及能量代谢障碍的恢复,增加PKC-δ和-ε亚型的膜转位.PKC抑制剂chelerythrine减少异氟烷诱导的PKC-δ和-ε亚型的膜转位以及心肌功能和ATP的恢复.结论 异氟烷延缓心肌缺血期间ATP的耗竭及改善复灌后心肌功能和能量代谢,该保护作用是由PKC介导的.
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硫化氢对离体大鼠心脏缺血/再灌注损伤的影响及机制初探
目的 观察内源性CSE/H2S通路的改变以及给予H2S供体对缺血/再灌注心脏的影响,探讨该通路与心脏缺血/再灌注损伤的关系及作用机制.方法 采用Langendorff离体灌流装置、通过停灌30 min/复灌30min方式造成Wistar大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型;采用外源性NaHS(40 μmol·L-1)分别在停灌30 min前(SIR)与停灌30 min后处理(IRS)对缺血/再灌注心脏的影响.记录心脏收缩期左心室内压上升的大变化速率(+dp/dtmax)、舒张期左心室内压下降的大变化速率(-dp/dtmax)及左室内压差(LVP=左室收缩压-左室舒张压).采用比色法检测灌流液中乳酸脱氢酶(LDH)、心肌MDA及SOD;采用比色法检测心肌胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)活性;采用RT-PCR方法测定心肌组织CSE mRNA表达.结果 与缺血/再灌注组(L/R)30 min相比,SIR组及IRS组±dp/dtmax、LVP均增高,LDH降低;I/R组MDA水平高于对照组(CON)、SIR组及IRS组(P＜0.05,P＜0.01);IR组SOD活性低于SIR组及IRS组(P＜0.05),但与CON组差别无显著性;I/R组大鼠心肌CSE活性低于CON组(P＜0.05);而大鼠心肌CSE mRNA的表达与CON组差异无显著性.结论 在缺血前后给予外源性NaHS均可改善因再灌注损伤引起的心肌收缩及舒张功能障碍;其作用机制可能是通过提高心肌SOD活性,增加氧自由基清除而拮抗缺血/再灌注引起的心功能及细胞膜损伤;心肌缺血/再灌注时内源性CSE活性抑制可能与心功能障碍及细胞损伤有关.
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淫羊藿苷对异丙肾上腺素所致乳鼠心肌细胞损伤的保护作用
目的 在异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导原代培养乳鼠心肌细胞损伤的模型上,探讨淫羊藿苷对心肌细胞的保护作用.方法 采用ISO损伤心肌细胞,通过MTT法检测心肌细胞存活率,以荧光染色激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡的发生.结果 ISO处理心肌细胞72 h后降低心肌细胞的存活率,诱导心肌细胞发生凋亡,凋亡率达35%,线粒体的膜电位明显降低.预先给予0.1～10 μmol·L-1淫羊藿苷,可提高心肌细胞的存活率,改善线粒体的膜电位,降低心肌细胞的凋亡率.结论 淫羊藿苷对ISO诱导原代培养心肌细胞损伤具有明显的保护作用.
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吡拉米司特在大鼠急性肺损伤模型中降低PDE4活性与TNF-α/IL-10平衡有关
目的 观察PDE4活性与TNF-α/IL-10平衡在脂多糖(LPS)诱导的大鼠急性肺损伤模型(ALI)中相互关系,探讨选择性磷酸二酯酶4抑制剂吡拉米司特(piclamilast)对ALI的作用及机制.方法 脂多糖(LPS)诱导大鼠ALI模型,设对照组、模型组、吡拉米司特组(1、3、10 mg·kg-1)和地塞米松组(1 mg·kg-1),常规细胞形态学检测肺泡灌洗液(BALF)和肺组织中中性粒细胞的浸润情况,比色法测定BALF中超氧阴离子自由基(O2·-)和中性粒细胞髓过氧化酶(MPO),ELISA法检测肺组织中TNF-α和IL-10含量,高效液相(HPLC)法测定肺组织中PDE4活性.结果 ①吡拉米司特(1、3、10 mg·kg-1)灌胃给予能够抑制BAL中MPO、O2·-的增加,改善LPS诱导的大鼠ALI模型BALF中的炎症细胞聚集和肺水肿程度,②吡拉米司特可抑制LPS诱导的大鼠ALI肺组织TNF-α上升(P＜0.05～0.01),并能明显提高LPS引起的大鼠ALI肺组织IL-10分泌下降,③大鼠ALI模型肺组织中PDE4活性明显上升(P＜0.01),吡拉米司特预处理可抑制PDE4活性的上升,而且其对PDE4活性抑制性变化与TNF-α/IL-10比值的变化基本一致.地塞米松1 mg·kg-1也能降低TNF-α和升高IL-10水平,调节TNF-α/IL-10平衡关系,但DXM不能抑制PDE4活性的升高.结论 TNF-α/IL-10可能是ALI病理生理学的一对重要的平衡性细胞因子.吡拉米司特可能通过抑制PDE4活性,调节TNF-α/IL-10平衡改善LPS诱导的大鼠ALI.
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ROS在奥沙利铂诱导PUMA表达致肠癌细胞凋亡过程中的作用
目的 探讨活性氧分子在奥沙利铂诱导凋亡相关基因PUMA表达致肠癌细胞凋亡过程中的作用及影响.方法 采用过氧化氢做为体外氧化应激的模型,Western Blot检测过氧化氢处理后PUMA蛋白的表达,Hoechst 33258荧光染色法检测过氧化氢处理后肠癌细胞的凋亡,MTF法检测在联合应用奥沙利铂和抗氧化剂后肠癌细胞的增殖率.结果 一定量的过氧化氢可以诱导肠癌细胞的凋亡及PUMA的表达;抑制PUMA的表达可以减小过氧化氢诱导的肠癌细胞的凋亡;抗氧化剂可以减弱奥沙利铂对肠癌细胞中PUMA表达的诱导;抗氧化剂可以增加奥沙利铂处理后肠癌细胞的增殖率.结论 PUMA在氧化应激诱导的肠癌细胞的凋亡过程中具有重要作用;氧化应激在奥沙利铂诱导肠癌细胞凋亡的过程中具有一定作用;奥沙利铂可能部分通过增加活性氧分子的产生而诱导PUMA的表达,从而诱导肠癌细胞发生凋亡.
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离体大鼠肾脏灌流技术在发现和评价促尿酸排泄药物中的初步应用
目的 为建立发现和评价促尿酸排泄药物作用的离体模型,采用离体大鼠肾脏灌流技术,观察尿酸在离体肾脏中排泄特点和丙磺舒对尿酸排泄影响.方法 制备离体大鼠肾脏灌流模型,随机分为对照组和丙磺舒处理组,以含复方氨基酸和65 g·L-1牛血清白蛋白的K-H灌流液循环灌流90 min,定时收集导尿管流出液和灌流液,测定其中菊粉、钠、葡萄糖及尿酸含量,计算肾功能参数和尿酸排泄情况.结果 离体灌流肾脏的肾小球滤过率,尿量,肾小管重吸收水、钠、葡萄糖百分率等肾功能参数在灌流的90 min期间处于稳定的生理范围内;对照组灌流肾脏尿酸排泄分数、尿酸清除率及90 min内总尿酸排泄量分别为30%、0.30 ml·L-1和15 μmol,与对照组比较,丙磺舒使离体肾脏尿酸排泄分别提高36%、54%和99%.结论 离体大鼠肾脏灌流技术可用于发现和评价促尿酸排泄药物作用.
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自发性高血压大鼠(SHR)心肌纤维化和巨噬细胞关系的研究——苯那普利干预试验
目的 探讨巨噬细胞在自发性高血压大鼠(SHR)心肌纤维化中的作用以及苯那普利对其影响及其机制.方法 12wk ♂ SHR分为高血压组(SHR,n=10)、苯那普利治疗组(BenL、BenH亚组,分别予苯那普利1.7、17 mg·kg-1·d-1灌胃;n=10),另设年龄、性别配对的WKY大鼠为对照(WKY,n=10).干预18 wk后,测量和计算各组大鼠收缩压(SBP)、左室重量(LVM)、左室重量指数(LVMI)、左室心肌胶原含量和巨噬细胞数目;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定各组大鼠心肌转化生长因子-β1(1(TGF-β1)和白介素-6(IL-6)的转录水平.结果 SHR组SBP较WKY大鼠升高(P＜0.01),BenH组的SBP明显低于SHR组(P＜0.01),BenL组SBP无明显变化;SHR组较WKY心肌中巨噬细胞数目明显增多,TGF-β1和IL-6的信使核糖核酸(mRNA)水平也明显升高(P＜0.01);而BenL和BenH组SHR心肌中巨噬细胞数目和TGF-β1及IL-6的mRNA水平均较SHR组降低(P＜0.05);大鼠心肌中巨噬细胞数目分别与心肌胶原容积分数(CVF)、心肌内血管周围胶原面积(PVCA)含量呈正相关(P＜0.01).结论 巨噬细胞在SHR大鼠心肌纤维化中具有重要作用,苯那普利可减轻SHR心肌纤维化和巨噬细胞浸润,且可下调TGF-β1和IL-6的mRNA表达.
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钙蛋白酶抑制剂calpeptin对大鼠海马脑片缺氧无糖损伤的保护作用
目的 通过观察电生理学和神经元凋亡的变化,研究钙蛋白酶抑制剂calpeptin对大鼠离体海马脑片缺氧无糖损伤的保护作用.方法 40片SD大鼠海马脑片随机分为两组:对照组和calpeptin组.根据人工脑脊液中calpeptin的浓度,再细分为1 μmol·L-1组、10 μmol·L-1组、100 μmol·L-1组和200 μmol·L-1组,每组8片脑片.采用细胞外记录技术观察calpeptin对大鼠离体海马脑片在缺氧无糖条件下顺向群峰电位(orthodromic population spikes,OPS)及缺氧损伤电位(hypoxic injury potential,HIP)变化的影响,采用TUNEL法观察缺氧无糖损伤后海马脑片CA1区锥体细胞凋亡情况及calpeptin对它的影响.结果 10μmol·L-1组、100μmol·L-1组和200 μmol·L-1组HIP出现率及海马CA1区锥体细胞层凋亡细胞数减少,OPS恢复率和OPS恢复程度与对照组比较提高.而10 μmol·L-1组、100 μmol·L-1组和200 μmol·L-1组之间各项指标差异无显著性.结论 (10～200)μmol·L-1calpeptin可以减轻大鼠海马脑片的缺氧无糖损伤,其机制可能与calpeptin减少海马CA1区神经元凋亡有关.
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缓激肽开放血瘤屏障过程中诱发快速耐受性的机制探讨
目的 探讨缓激肽(bradykinin,BK)开放血瘤屏障过程中,HSF1和HSP70对BK诱发快速耐受性的影响.方法 首先通过立体定向法接种C6细胞制备恶性胶质瘤大鼠模型.模型制备成功后,经颈内动脉缓慢小剂量给予缓激肽(或生理盐水)10 μg·kg-1·min-1,动态观察肿瘤组织内热休克因子1(heat shock factor 1,HSF1)蛋白单体和三聚体的活性及热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)的表达(Western blot法).免疫组织化学技术检测血瘤屏障上紧密连接蛋白occludin的变化.利用伊文思蓝连续监测缓激肽处理后的C6恶性胶质瘤大鼠血瘤屏障的通透性,同时电镜观察血瘤屏障的病理学改变.结果 缓激肽作用于C6大鼠后,紧密连接增宽,血瘤屏障通透性增加,伊文思蓝渗出量分别较对照组增加了5.19 μg·g-1(0 min),5.06 μg·g-1(5min),11.35 μg·g-1(10 min,P＜0.05),21.54 μg·g-1(15min,P＜0.01),12.81 μg·g-1(30 min,P＜0.05),7.28 μg·g-1(60 min).肿瘤组织内HSF1蛋白三聚体活性和HSP70蛋白的表达逐渐增加,且分别于处理后的5 min和30min时达高峰(P＜0.01),与对照组相比),大值为对照组的2～3倍.免疫组化检测结果 发现,处理后的C6动物,其血瘤屏障的紧密连接蛋白occludin表达减少,15 min后逐渐增加.结论 缓激肽作用于血瘤屏障后,激活了HSF1并促进了hsp70蛋白的表达.增加的hsp70可能通过发挥分子伴侣作用来修复紧密连接蛋白,进而诱发快速耐受性.
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β淀粉样蛋白亚单位疫苗免疫反应的量效关系
目的 探讨Aβ亚单位疫苗诱发体液免疫反应的量效关系和时程.方法 采用C57BL小鼠,依据滴入Aβ15的量将其分为50、25、12.5μg 3个组,每周1次经鼻粘膜滴入Aβ15亚单位疫苗,观察1年之中鼠血清中抗Aβ抗体水平的变化;取脾细胞培养,加入不同浓度的Aβ15,用MTT法观察脾细胞增殖情况.结果 3组小鼠的外周血内均有抗Aβ抗体产生.25 μg组和12.5 μg组产生抗体较50 μg组早,3组峰浓度抗体水平分别为1∶6720、1∶6222和1∶3565.脾细胞增殖实验表明0.5μg和5 μg的Aβ15具有较强的刺激脾细胞增殖的作用,而50μg的Aβ15对脾细胞增殖的刺激作用反而下降(P=0.042;P=0.021).结论 Aβ15亚单位疫苗诱导体液免疫反应的能力因接种的剂量不同而异.高浓度的Aβ15可以引起免疫耐受,使抗Aβ抗体产生减少.
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甘肃猫儿眼不饱和脂肪酸对人BEL-7402细胞毒性作用的机制研究
目的 探讨甘肃猫儿眼不饱和脂肪酸对人BEL-7402细胞的毒性作用机制.方法 采用色-质联用仪对甘肃猫儿眼不饱和脂肪酸进行分析;采用流式细胞仪、MTT法和扫描电镜法检测其毒性作用.结果 分别给予BEL-7402细胞0.2、0.8、3.2 mg·L-1甘肃猫儿眼不饱和脂肪酸培养48 h,测定结果 显示,甘肃猫儿眼不饱和脂肪酸对人BEL-7402细胞增殖抑制率分别为34.0%、44.8%和70.7%,半数抑制浓度(IC50)为0.812 mg·L-1;凋亡率分别为18.6%、22.7%和24.2%;细胞膜微绒毛断裂,细胞破裂.结论 甘肃猫儿眼不饱和脂肪酸对人BEL-7402细胞具有毒性作用,其机制可能与破坏细胞膜结构,抑制细胞分裂,损伤线粒体结构有关.
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FKBP52在重组腺相关病毒载体胞内转运中的作用研究
目的 探讨细胞质中FKBP52对重组腺相关病毒(AAV)介导的基因转导效率的作用.方法 测定AAV在FKBP52-野生型(WT)、FKBP52-杂合型(HE)及FKBP52-基因敲除(KO)鼠胚纤维母细胞(MEFs)中的基因转导效率,观察羟基脲(HU)对不同基因型MEFs中AAV转导效率的影响.采用流式细胞术、EMSA、Southern blot、免疫沉淀、Western blot等方法分析FKBP52对AAV在细胞内转运的作用.结果 传统的单链AAV不能有效地转导FKBP52-WTMEFs,在FKBP52-HE及FKBP52-KO MEFs中的转导效率也未见明显增加.在这些细胞中,AAV不能有效地转运至细胞核.HU处理后能使AAV在WT MEFs中的转导效率提高25倍,但是在KO MEFs中AAV转导效率仅提高4倍.为避免AAV第二链合成的影响,进一步采用自身互补的AAV(scAAV)载体进行研究,结果 发现,HU能使WT MEFsscAAV基因转导效率增强23倍,但在KO MEFs中转导效率仅增加4倍.提示,HU处理后KO MEFs中转导效率未增加的原因并非由于AAV第二链的合成障碍所致.HU处理后,59%的AAV基因组DNA出现在WT MEFs细胞核,KOMEFs细胞核中为28%,提示HU介导的AAV转运通路在KO MEFs中存在缺陷.转染FKBP52表达质粒的KO MEFs经HU处理后,AAV所介导的基因转导效率恢复至WTMEFs的水平,且直接与其转运至细胞核的转运功能改善相吻合.结论 作为一种细胞分子伴侣蛋白,FKBP52能促进AAV在细胞内转运,有益于重组AAV载体在人类基因治疗中的应用.
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肝星状细胞信号转导机制及可能的抗肝纤维化药物作用新靶点
肝纤维化是肝脏对一系列慢性刺激的损伤修复反应,以细胞外基质的过度沉积为主要特征.近年来,肝星状细胞(hepatie stellate cells,HSC)的激活以及由此产生的一系列复杂生物学效应在肝纤维化发生、发展过程中所处的重要地位已得到普遍共识.各种损伤刺激通过不同或相同的HSC信号转导途径介导了HSC的激活,并使其转化为肌成纤维细胞,合成大量细胞外基质成分.作用于这些信号或其转导过程的药物正成为防治肝纤维化的策略之一.
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三烃基锡化合物诱导肿瘤细胞内信号转导的凋亡机制研究进展
有机锡化合物是近年来研究较活跃的一类金属有机化合物,研究发现三烃基锡化合物有强大的抗肿瘤作用,对多种肿瘤细胞具有明显的抗癌活性,可诱导肿瘤细胞凋亡.其中研究深入的是三丁基锡、三苯基锡和三甲基锡化合物,它们可通过Fas受体、线粒体、Ca2+、MAPKs,p53、NF-κB以及Caspase/p38/ROS等细胞内信号转导途径诱导肿瘤细胞凋亡,该文综述了这方面的研究进展.
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MAPKs信号转导在类风湿性关节炎滑膜细胞中作用
丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-actived protein kinase,MAPK)是真核生物信号传递网络中的重要途径之一,在基因表达调控和细胞质功能活动中发挥关键作用.在哺乳动物机体中,5种不同的MAPK信号转导通路中ERK1/2信号转导通路调控细胞生长和分化,JNK和p38 MAPK信号转导通路在炎症与细胞凋亡等应激反应中发挥重要作用.信号转导途径的活化是类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)慢性滑膜炎的典型特征,通过这一途径诱导滑膜细胞胞质蛋白磷酸化,使转录因子和核蛋白如c-Fos、c-Jun、AP-1和NF-κB等磷酸化,从而促进细胞增殖和活化.上述机制研究对于RA发病机制的深入了解以及研制开发治疗RA的新型药物具有重要的意义.
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细胞色素P450(CYP450)遗传多态性研究进展
近年来对CYP450基因型和表型相关性的研究越来越受到重视,从临床合理用药方面来说,人们希望利用基因型分析来了解个体中药物代谢酶的活性,期望既能提高药物治疗水平同时又降低不良反应的发生;从新药研发角度来说,研究药物的代谢酶CYP450的功能能够指导新药的设计、筛选及优化.该文通过查阅国内外相关文献综述了近年来关于CYP450遗传多态性研究的进展,分别介绍了CYP2C19、CYP2C9、CYP3A4、CYP2D6、CYP1A2和CYP2E1这6种主要的药物代谢酶.研究CYP450对新药设计、筛选、评价及优化有重要意义.
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促红细胞生成素抗神经元凋亡的信号传导通路
凋亡是许多神经系统疾病中神经元损伤的主要死亡形式,促红细胞生成素(erythropoietin,Epo)可促进造血前体细胞的增殖和分化,调节红细胞的生成.近来研究发现,Epo及其功能受体(erythropoietin receptor,Epo-R)在中枢神经系统中也有表达,且对神经元的凋亡有保护作用,该文就Epo抗神经元凋亡的信号传导通路方面略做一综述.
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CYP2A6酶活性调节机制的研究进展
CYP2A6是一个在药理和毒理学上均占有重要地位的代谢酶,香豆素和尼古丁主要由它介导转换,并与吸烟疾病密切相关;而核不均一核糖核蛋白A1(hnRNP A1)是一个在转录后水平上发挥重要调节作用的蛋白,对于某些特异基因,转录后调节影响占有重要的地位.CYP2A6酶活性与hnRNP A1关系的研究是近几年来受到学者关注的,该文试图阐述转录后水平上hnRNP A1对CYP2A6活性的调节影响,更好地掌握CYP2A6活性变化规律,对于指导临床用药及烟瘾戒断治疗有重要的意义.
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Adiponutrin mRNA 在分化成熟的3T3-L1脂肪细胞中的表达
随着研究的深入,现已发现脂肪组织是全身较为重要的内分泌器官.脂肪产生的因子包括瘦素、脂联素、TNF-αt、IL-6和Perilipin等.已经证实许多脂肪产生的蛋白在能量平衡方面有着重要的作用.Adiponutrin是新近发现的一种非分泌蛋白[1],它主要表达在脂肪组织中,包括白色脂肪组织如腹股沟、附睾脂肪和棕色脂肪组织中.本实验拟通过TNF-α、吡格列酮干预小鼠3T3-L1细胞株,以观察不同干预条件下细胞Adiponutrin mRNA表达的变化.
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生物转化法从金盏菊提取物中制备叶黄素的研究
目的 研究用生物转化法从金盏菊提取物中制备叶黄素.方法 采用平板诱导培养基考察了糙皮侧耳、黑曲酶、青霉对金盏菊提取物中叶黄素酯进行降解反应.用青霉摇瓶发酵转化叶黄素酯法制备叶黄素,考察了pH值为6.0、接种量和发酵时间对转化效果的影响.结果 表明在酸性条件有利于转化;接种量的增加会加快转化速度;叶黄素的浓度在发酵时间为12～24 h间出现大值.结论 可以采用生物转化法从金盏菊提取物中制备叶黄素.
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基于抗氧化反应元件的药物筛选模型的建立
目的 建立基于抗氧化反应元件(antioxident response element,ARE)和SEAP报告基因的细胞筛选模型,用此模型对金雀异黄素、芹菜苷配基、儿茶素、茨非醇4种化合物进行活性比较,观察上述化合物拮抗过氧化氢损伤的作用,寻找具有强抗氧化活性作用的黄酮类化合物.方法 构建重组报告基因表达载体pARE-TAL-SEAP与对照载体分别转染HEK-293细胞,检测上述黄酮类化合物作用后对SEAP的活性和抗氧化作用的影响.结果 在加入25 μmol·L-1 H2O2进行氧化损伤的HEK-293细胞中,加入100 μmol·L-1的4种化合物进行比较时金雀异黄素的抗氧化作用强,金雀异黄素诱导SEAP的大表达水平较对照孔升高1.3倍;加入25 μmol·L-14种化合物的抗氧化作用时茨非醇的抗氧化作用强,茨非醇诱导SEAP的大表达水平较对照孔升高1.5倍.结论 利用此模型可以检测H2O2的氧化应激反应并可筛选到抗氧化活性强的黄酮类化合物.
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Ⅱ型胶原诱导的小鼠关节炎动物模型的建立及影响因素
类风湿性关节炎(RA)是一种顽固性、致畸性自身免疫性疾病.Ⅱ型胶原诱导的小鼠关节炎(CIA)表现为严重的多关节性炎,并能引起慢性、破坏性关节损伤,与RA有很多相似之处,目前国际上广泛用于RA发病机制的研究以及创新药物的研发.该文就CIA实验动物模型的建立以及CIA发生病变的主要影响因素进行综述.
| 年 | 期数 |
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| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
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| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
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| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 11 12 |
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| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 |
