结缔组织生长因子在大鼠移植心脏急性排斥反应期的表达

目的:检测结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在大鼠移植心脏急性排斥期(acute rejection,AR)的表达,并探讨其与移植心脏心肌纤维化的关系.方法:取Wister大鼠16只作为供体,取SD大鼠16只作为受体,进行腹部异位心脏移植,采用10 mg/(kg·d) 环孢霉素A,40 mg/(kg·d)骁悉和3 mg/(kg·d)甲泼尼龙三联免疫抑制疗法,2周后取其中10例移植心脏标本作为实验组,10例健康Wister大鼠心脏标本作为对照组(normal heart,NH).采用HE及van Gieson染色观察心肌病理形态、心脏血管狭窄程度;并进行纤维化的半定量评分.采用免疫组化半定量方法检测CTGF在心脏组织中的表达,并分析其与心肌纤维化的相关性.结果:移植心脏血管壁及心肌间质组织内有大量粒细胞浸润,呈典型的急性排斥反应期改变;移植心脏血管内膜及大量纤维组织增生,与正常对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);CTGF在移植心脏组织中有明显表达,且主要表达于血管壁及心肌损伤部位,而正常心脏无表达,CTGF灰度值为 (AR vs NH: 103.52±6.42 vs. 182.61±8.72,P<0.05).CTGF灰度值与移植心脏纤维化显著负相关(r=-0.734,P<0.01).结论:CTGF在急性移植心脏组织中有明显表达且可能与移植心脏心肌纤维化相关.

阿托伐他汀对压力负荷心肌肥厚大鼠血管紧张素转换酶2表达的干预研究

目的:探讨血管紧张素转化酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)在压力负荷心肌肥厚大鼠中的表达以及阿托伐他汀干预对其的影响.方法:SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、正常对照加阿托伐他汀组(B组)、假手术组(C组),其余2组通过不完全结扎大鼠腹主动脉构建心肌肥厚模型,并分为阿托伐他汀干预组(D组)[术前l周起灌胃给予5 mg/(kg·d )阿托伐他汀,直至术后4周]和非药物手术组(E组).术后4周检测大鼠左心室质量指数,组织切片染色后光镜检查,并测心肌细胞平均直径及胶原容积百分比,分别用实时RT-PCR法和Western免疫印迹法测定心肌组织中ACE2 mRNA和蛋白水平的表达.结果:E组左心室质量指数、心肌细胞平均直径及胶原容积百分比较A组、B组及C组均显著增加(P<0.01),并且ACE2 mRNA和蛋白表达显著增加(P<0.01).D组上述指标较E组显著下降(P<0.01).结论:心肌肥厚大鼠ACE2 mRNA和蛋白表达显著增加;阿托伐他汀能够有效地延缓压力负荷诱导的心肌肥厚,并能下调ACE2 mRNA和蛋白表达.

女性甲状腺功能亢进症患者的骨密度变化

目的:观察女性甲状腺功能亢进症(甲亢)患者病程及绝经与否对骨密度的影响.方法:采用双能X线骨密度仪测定192例女性甲亢患者腰椎和髋部骨密度,分为绝经前和绝经后两组,按病程长短又分为短程和长程两亚组,并对两组测量结果进行分析.结果:绝经前甲亢病程长者L2及腰椎总体骨密度明显低于病程短者(P<0.05).绝经后甲亢长程组腰椎及髋部各个测量部位的骨密度较短程者显著降低(P<0.05),在L2及髋部其差别尤其显著(P<0.01).结论:病程及绝经与否影响着女性甲亢患者的骨密度.

胃癌及慢性胃炎幽门螺杆菌的蛋白质组学研究

目的:建立胃炎与胃癌相关幽门螺杆菌的双向凝胶电泳图谱,识别鉴定其差异表达的蛋白质,探讨细菌本身因素在发病过程中的作用.方法:利用固相pH梯度双向凝胶电泳分离胃炎与胃癌相关幽门螺杆菌菌株的总蛋白质,凝胶经蓝银显色后,采用PDQuest图像分析软件比较、分析、识别差异表达的蛋白质,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱得到相应的肽质指纹图谱,然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点.结果:获得分辨率较高、重复性较好的胃炎与胃癌相关幽门螺杆菌双向凝胶电泳图谱,鉴定出14个差异蛋白质,包括抗氧化作用、分子伴侣、解毒和DNA修复相关蛋白质、三大代谢相关酶类、细胞结构相关蛋白质以及信号传导相关蛋白质.结论:建立了分辨率高且重复性较好的胃炎与胃癌相关幽门螺杆菌双向凝胶电泳图谱,并识别鉴定出了两种不同疾病来源幽门螺杆菌差异表达的蛋白质,其蛋白质表达的差异可能在胃癌的发生中起重要作用.

中国人结直肠瘤与维生素D受体基因Fok I多态的相关性

目的:分析中国结直肠肿瘤患者维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)Fok I多态的分布特征,探讨其与中国人结直肠癌发病的相关性. 方法:收集了69例中国结直肠肿瘤病人及218例健康对照者.采用常规方法制备外周血gDNA,应用PCR-RFLP方法检测并分析VDR Fok I多态的分布频率. 结果:F等位基因频率在健康对照者和结直肠肿瘤病人中分别是61.5%和49.3%,健康对照者和结直肠肿瘤病人中的FF,Ff和ff 3种基因型分布频率分别为39.5%,44.0%,16.5% 和29.1%,40.5%,30.4%.F等位基因频率和基因型频率在健康对照者和结直肠肿瘤病人中均存在显著差异(P＜0.05).优势比(odds ratio,OR)分析中,Ff基因型人群中结直肠癌患病风险的OR值为2.00(95%可信区间: 1.01～3.96),ff基因型人群中结直肠癌患病风险的OR值为2.51(95%可信区间: 1.21～5.18) (P＜0.01). 结论:本研究揭示了VDR基因起始密码子区 Fok I多态在中国人群中的广泛分布特征,同时揭示了VDR Fok I变异可能降低个体患结直肠肿瘤的危险性.

皮层脑电图在单发性海绵状血管瘤手术中的运用

目的:探讨术中应用皮层脑电图(ECoG)监测对提高有癫痫史的海绵状血管瘤手术疗效的作用. 方法:对ECoG监测下显微手术治疗的71例有癫痫病史的单发性海绵状血管瘤病例的临床资料进行回顾性分析.结果:71例患者均在ECoG监测下行显微手术,切除病灶及局部癫痫灶;随访58例,其中42例无癫痫发作,13例发作减少90%以上,3例效果不佳. 结论:海绵状血管瘤伴有癫痫发作者药物治疗效果不佳,应早期行外科手术治疗.术中ECoG监测对指导手术切除癫痫灶,减少术后癫痫的发作有较大帮助.

基于CT图像全颈椎三维有限元模型的建立及验证

目的:建立全颈椎三维有限元模型并进行验证.方法:通过CT扫描机对中国人体50百分位健康成年男性志愿者颈椎进行扫描,获取颈椎骨骼坐标数据,利用Mimics软件将图像坐标数据转换成ASCII格式的点云数据,并利用CATIA软件对点云数据进行前处理,通过Geomagic曲面建模功能完成颈椎几何模型重构,并将几何模型导入到有限元前处理软件Hypermesh.采用映射网格划分法分别对颈椎皮质骨、松质骨、椎间盘以及各主要韧带等结构进行了网格划分和模拟.同时,利用现有的颈椎材料参数进行比例和功能缩放来定义稀缺的材料参数,终建立一个解剖结构描述准确、全面的全颈椎有限元模型.结果:整个模型共有22 512个实体单元,14 180个壳/膜单元.利用颈椎离体坠落实验对模型的有效性进行了验证.结论:模型具有良好的生物逼真度,可应用于研究颈椎在汽车碰撞事故中的动态响应和损伤机制.

冠心病患者PCI术前后循环内皮祖细胞变化

目的:研究冠心病患者经皮冠脉内介入治疗(percutaneous coronary intervention ,PCI)术前和术后外周血中循环内皮祖细胞(endothelial progenitors cells,EPCs)形态、数量的变化.方法:选择冠心病患者65例和对照组30例,分别在PCI手术前、术后即刻和术后4 d用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被培养板,用加入血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的RPMI-1640培养基培养细胞.用激光共聚焦显微镜初步鉴定DiL标记的乙酰化低密度脂蛋白和FITC标记的荆豆凝集素I双染色阳性细胞为EPCs,用流式细胞仪检测细胞表面抗原CD34和KDR;相差显微镜下分析细胞形态数量变化和集落形成单位的数量.结果:冠心病患者PCI术后EPCs数目较术前明显增加,术后4 d开始下降;PCI术后即刻较术前有明显增强,术后4 d 有下降,但仍高于对照组,但PCI术前术后细胞集落形成单位的数量并无变化.结论:冠心病患者PCI手术可刺激EPCs数量的增加,在术后4 d逐渐回到术前状态.

珊瑚羟基磷灰石植入修复良性骨肿瘤缺损

目的: 观察无机材料珊瑚人工骨修复良性骨肿瘤刮除术后骨缺损的临床疗效.方法: 将天然珊瑚经特殊处理加工成羟基磷灰石,作为骨修复的填充材料,植入骨肿瘤刮除术后骨缺损区.共治疗25例患者,均为良性骨肿瘤.缺损范围大10 cm×3.5 cm×2 cm,小0.8 cm×0.5 cm×0.5 cm.结果: 所有病例术后查血生化正常,伤口愈合良好,无异物排出现象.X线显示:1月后管状骨周围有骨痂生长,3月植入的珊瑚骨密度开始逐渐降低,而珊瑚骨之间的空隙密度增高,4月达到临床愈合,18月珊瑚羟基磷灰石基本完全吸收.结论: 天然珊瑚制成羟基磷灰石具有良好的生物相容性和骨传导性,而且生物降解时间延长,基本与骨形成达到同步,是一种较为理想的骨缺损修复材料.

应用激光捕获显微切割和蛋白质组学技术筛选鼻咽癌的差异表达蛋白质

目的:筛选鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的差异表达蛋白质,为寻找NPC的分子标志物提供科学依据. 方法:采用激光捕获显微切割技术(laser capture microdissection,LCM)分别从NPC组织和正常鼻咽上皮组织(normal nasopharyngeal epithelial tissue,NNET)中纯化NPC细胞和正常鼻咽上皮细胞(normal nasopharyngeal epithelial cells,NNEC),应用二维凝胶电泳(2-DE)分离LCM 纯化细胞的蛋白质,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和电喷雾电离串联质谱(ESI-Q-TOF-MS)鉴定差异蛋白质点,Western 印迹和组织芯片(tissue microarray,TMA)免疫组织化学验证差异蛋白鳞状细胞癌抗原1(SCCA1)在两种组织中的表达水平.结果:建立了LCM 纯化的NPC细胞和NNEC的2-DE图谱,质谱鉴定了36个差异蛋白质,其中20个蛋白只在NPC表达或表达上调,16个蛋白在NPC中表达下调或缺失. Western 印迹和组织芯片免疫组织化学结果显示:SCCA1在NPC中的表达水平较NNET明显下调,与比较蛋白质组学结果一致.结论:36个差异蛋白可能与NPC的发病有关,为筛选NPC分子标志物奠定了基础.

高脂血症大鼠血浆vWF,PAI-1和t-PA变化及意义

目的:通过建立大鼠高脂血症模型以动态观察其在不同时间点上所致大鼠血管内皮细胞损伤后血浆抗血管性假性血友病因子(von Willebrand's factor,vWF)、纤溶酶原活化抑制物-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)和组织型纤溶酶原激活物(tissue-type plasminogen activator,t-PA)分子标志物的表达.方法:取体质量为(200±20)g健康雄性SD大鼠60只,随机分为6组(10只/组),即高脂合剂灌胃7周组(A7组)、高脂合剂灌胃8周组(A8组)、高脂合剂灌胃9周组(A9组);普通饲料喂养7周组(C7组)、普通饲料喂养8周组(C8组)、普通饲料喂养9周组(C9组).实验结束时处死各组动物,取血标本,分离血清立即测定血脂;取大鼠主动脉制成病理切片,光镜下观察内皮的病理改变,并另取血浆以酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆vWF,PAI-1和t-PA的含量.结果:⑴7,8,9周高脂合剂灌胃组大鼠血脂TG,TC和LDL均高于其相应对照组,而HDL则先随灌胃时间的增加而升高,后随着灌胃时间的延长再次降低.⑵光镜下检查发现对照组大鼠主动脉内皮细胞形态正常,而各模型组大鼠主动脉内皮细胞有不同程度的损伤.⑶在3个模型组中,血浆中vWF和PAI-1含量随着高脂血症持续时间的延长而增加;t-PA的含量随着高脂血症持续时间的延长而降低;⑷在A7和A8组vWF的表达比较无明显差别,它不随内皮病变的改变而变化;在模型组中,PAI-1随内皮细胞损伤的加重而逐渐增高;在模型组中,t-PA随内皮细胞损伤的加重而逐渐递减.结论:⑴大鼠主动脉内皮细胞随高脂血症持续时间的延长,病理损伤逐渐加重.⑵血浆中vWF,PAI-1和t-PA的改变可作为判断高脂血症大鼠血管内皮细胞损伤的分子标志物.⑶在高脂血症大鼠血管内皮细胞损伤中,反映血管内皮细胞早期的病变PAI-1和t-PA比vWF更敏感.

平肝潜阳药物对甲亢肝阳上亢证大鼠下丘脑蛋白质表达的影响

目的:观察平肝潜阳药物对甲亢肝阳上亢证大鼠下丘脑蛋白质表达的影响,为进一步探讨平肝潜阳药物治疗甲亢肝阳上亢证作用机制提供依据.方法:左旋甲状腺素(L-T4)腹腔注射和附子汤灌胃以建立甲亢肝阳上亢证模型,应用蛋白质组学技术比较正常组、甲亢肝阳上亢证组及平肝潜阳药物治疗组中下丘脑的差异蛋白质.结果:3组蛋白质斑点总体分布相似,主要分布在等电点pI 3～10,分子质量为13.8～98.8 kD.与正常组比较,甲亢肝阳上亢证模型组中蛋白质点表达上调的有6个点,下调的有10个点;在模型组中上调的6个点在治疗后均较治疗前有下降;而模型组中下调的10个点在治疗后均较治疗前有上调.结合生物信息学进行质谱鉴定,发现其中9个蛋白质分别为prohibitin,硫氧还蛋白过氧化物酶6,组氨酸三聚体核苷结合蛋白1,蛋白酪氨酸磷酸酶,假定蛋白,肌动蛋白抑制蛋白2,硫氧还蛋白过氧化物酶-Ⅱ,热休克蛋白-27,膜联蛋白-A1.结论:平肝潜阳药物治疗后的甲亢肝阳上亢证大鼠下丘脑蛋白质的表达具有差异,所鉴定的这9个蛋白质可能与平肝潜阳药物的作用机制有关.

鞘内泵入曲马多对甲醛炎性疼痛大鼠免疫功能的影响

目的:观察鞘内泵入不同剂量的曲马多对甲醛炎性疼痛大鼠免疫功能的影响.方法:将32只成年雄性SD大鼠随机分为生理盐水组(NS组)和曲马多组(T组),其中T组分为50 μg/h(T1),25 μg/h(T2)和12.5 μg/h(T3)3种剂量组,每组8只.采用改良Yaksh法进行鞘内置管,Alzet泵持续泵入曲马多或生理盐水.复制甲醛炎性疼痛模型,7 d后采用疼痛加权评分(PIS)评价曲马多的镇痛效应;分离脾脏单个核细胞进行原代培养,检测脾脏T淋巴细胞增殖水平、NK细胞活性;流式细胞仪检测脾脏T淋巴细胞亚群和NK细胞表型变化.结果:与NS组比较,T1,T2,T3组在甲醛炎性疼痛第一时相和第二时相的PIS差异有统计学意义 (P<0.01),且有量效关系,但3组间比较差异无统计学意义 (P>0.05).与NS组比较,T1组降低T淋巴细胞增殖水平(P<0.05),T2和T3组 T淋巴细胞增殖水平无统计学意义(P>0.05);T1,T2,T3组NK细胞活性均无统计学意义(P>0.05); T1组CD3+,CD3+CD4+数量及百分率降低,CD4+/ CD8+降低(P<0.01),而T2和T3组则没有变化(P>0.05).结论:鞘内泵入较大镇痛剂量的曲马多(50 μg/h )降低大鼠T淋巴细胞增殖转化水平,改变T淋巴细胞亚群表型,对NK细胞活性和表型没有影响;一般镇痛剂量曲马多(25 μg/h和12.5 μg/h)对机体免疫功能没有影响.

电视胸腔镜辅助NUSS手术微创治疗漏斗胸

目的:总结18例电视胸腔镜辅助NUSS手术的处理经验,探讨NUSS术后近期疗效和并发症的预防和治疗.方法:2006年12月至2007年9月共施行了18例电视胸腔镜下NUSS手术治疗漏斗胸,其中传统手术后复发5例.结果:18例患者手术时间30～70 min,平均45 min,均于术后5～7 d出院.患者胸廓畸形明显改善.其中1例术中损伤心包,1例术后出现伤口液化以及部分肺不张,经治疗后均痊愈.结论:NUSS手术具有微创、美观、手术时间短、操作简单等优点,近期效果满意,远期效果还需进一步观察.围术期正确的处理可减少并发症.

复方一枝蒿-壳聚糖纳米药物的制备及其体外抗菌作用的研究

目的:制备复方一枝蒿-壳聚糖纳米药物并研究其体外抗菌作用.方法: 通过乳化交联法合成复方一枝蒿-壳聚糖纳米药物.分别用激光粒度分析仪(Malvern Zetasizer 1000-HAS)和原子力显微镜(AFM)检测该种纳米药物的粒径分布以及表面电位.通过体外抗菌实验检测此种纳米药物的体外抗菌能力,并与传统复方一支蒿颗粒的抗菌能力作比较.结果: 该种纳米药物粒径分布均一,为(137.00±14.28) nm;表面携带正电荷,Zeta电位值为(16.90±1.32)mV.其对金黄色葡萄球菌、肺炎球菌、乙型溶血性链球菌和大肠杆菌的小抑菌浓度分别为1:32,1:32,1:16 和 1:2,小杀菌浓度分别为1:16,1:16,1:8和1:2.与传统复方一支蒿颗粒相比,该纳米药物对金黄色葡萄球菌、肺炎球菌及乙型溶血性链球菌的抗菌能力均有所改进(P<0.05).结论:复方一枝蒿-壳聚糖纳米药物对金黄色葡萄球菌、肺炎球菌、乙型溶血性链球菌均具有明显的体外抗菌作用,为我国传统中药新剂型的开发奠定了实验学基础.

细胞色素氧化酶CYP1A2的研究进展

CYP1A2是一种重要的细胞色素P450酶,可代谢多种临床常用药物,并参与活化许多前毒物和前致癌物.CYP1A2酶活性可受到基因多态性、药物、饮食等因素的影响,其中基因多态性是导致CYP1A2活性及可诱导性产生个体差异的基础,对CYP1A2基因多态性的鉴定分型在个体化用药中具有重要的指导意义.

《中南大学学报(医学版)》征稿启事