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正确运用超声诊断思维方法避免漏诊误诊
超声检查是影像检查中应用广泛、方便、经济实用而且易于被患者所接受的一项检查,已越来越多地用于临床各科疾病的诊断中.目前,临床比较依赖于超声检查结果,患者亦信任超声诊断报告.阳性结果常提示临床必要的诊断线索;阴性结果可能使临床医师否定某一诊断.
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Citrin缺陷导致的新生儿肝内胆汁淤积症生化指标动态改变的临床价值
Citrin缺陷导致的新生儿肝内胆汁淤积症(neonatal intrahepatie cholestasis caused by citrin deficiency,NICCD)是近几年来新发现的一种常染色体隐性遗传病,属于Citrin缺陷病(citrin deficiency,CD)的一种临床表型.国内首例NICCD的确诊见于2006年[1].目前,NICCD目前缺乏公认的临床或生化诊断标准,其确诊主要依赖于基因诊断.国内外有关文献报道多侧重于如何通过基因检测突变确诊NICCD,对患者血生化指标改变的报道尚不系统深入,故检测并总结NICCD生化指标的动态变化特征并比较临床症状相似的疾病生化指标有望为本病的病情判断及疗效观察临床诊断提供有价值的线索.本研究根据NICCD患者临床表现及病程,采用分析NICCD患者常见生化指标动态改变及比较分析其与临床相似疾病的方法,为进一步探讨NICCD各实验室指标在诊治前后的变化规律、各指标间的相关性研究提供线索,协助临床治疗及预后判断.
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形态学检查方法的标准化及其在细菌鉴定中的作用
形态学检查在临床微生物学检验工作中更重要体现在标本直接制片染色显微镜下观察,对于感染性疾病病原体的诊断有重要的意义.痰标本涂片中的白细胞数和鳞状上皮细胞数决定了这个标本是否做培养.同时,菌体形态及是否在白细胞内等信息为痰标本培养出的微生物是否为致病菌提供了重要线索.
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蛋白质飞行时间质谱技术及其临床应用进展
随着人类基因组计划的成功实施以及基因组草图的初步完成,人们已经知道了人类基因约有32 000多个.这些信息给我们研究生命活动的奥秘,揭示疾病作用的规律提供了有力的线索.但是如何充分利用基因组测序研究的成果,对生命进行系统、全面的认识,成为一大课题,于是在全球范围内又迅速开展了以功能研究为主的后基因组学研究.
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2003年全球病毒性传染病的防治热点
新传染病总是出其不意地袭击人类,流行疫病有时总让人们难以预料其变化动向.如果我们试图学会当一个事后"诸葛亮",或许在寻找、整理、回顾既往有据可查的事实中,对相关资料进行归纳总结,能从中发现对疫病蜘丝马迹的线索,获得新的启发,甚至有用的防治规律,用来提高识别能力.
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高低转移表型大肠癌细胞株蛋白质表达谱差异初步分析
目的:应用蛋白质组学技术分析高低转移表型大肠癌SW480细胞株和LoVo细胞株间的蛋白质表达谱差异.方法:以双向电泳技术分离两种细胞株总蛋白质,银染显色,进行差异蛋白质分析.结果:SW480和LoVo细胞株双向电泳图谱蛋白质点数分别为1184±47和1124±54,共获得88±5的蛋白质差异点,其中48±3个点仅在SW480细胞株中表达或表达明显增强,41±3个点仅在LoVo细胞中表达或表达明显增强.结论:高低转移表型大肠癌SW480细胞株和LoVo细胞株间的蛋白质表达谱存在一定的差异,对这些差异点进行鉴定将为研究大肠癌转移机制提供一定的线索.
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应用抑制性消减杂交技术筛选rhALR调节基因
目的:筛选与克隆重组人肝再生增强因子激活基因,了解其在体内的调节功能线索及机制.方法:应用大肠杆菌系统,表达、纯化重组人肝再生增强因子蛋白.刺激HepG2细胞,以溶剂PH7.8的磷酸盐缓冲液为平行对照,制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA并逆转录为cDNA,经RsaI酶切后,将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应(PCR),将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析.结果:成功构建重组人肝再生增强因子激活基因差异表达的cDNA消减文库.文库扩增后得到30个阳性克隆,进行菌落PCR分析,均得到200-1000 bp插入片段.对插入片段测序,并通过生物信息学分析获得其全长基因序列,结果共获得19种编码基因,包括15种已知基因和4种未知基因.结论:筛选到的cDNA全长序列,包括一些与细胞生长调节、肿瘤免疫发生及物质代谢密切相关的蛋白编码基因,推测了重组人肝再生增强因子在体内可能存在的调控机制的线索,尚需进一步的实验证明.
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基因表达谱芯片筛选双环醇作用HepG2细胞后的差异表达基因
目的:应用基因表达谱芯片技术了解双环醇在肝细胞中可能上调或下调的基因,了解其可能的调节功能线索.方法:以双环醇处理HepG2细胞,同时以二甲基硫氧化物(DMSO)处理的相同细胞系作为对照;24h后制备细胞裂解液,提取mRNA.应用基因表达谱芯片技术对差异表达mRNA进行检测和分析.结果:经基因表达谱芯片分析,12种基因的表达水平上调,9种基因的表达水平下调.结论:筛选到的一些与细胞周期、蛋白质的翻译合成、能量代谢、体内免疫调节、细胞凋亡及细胞内的信号传导方面的起重要作用及肿瘤发生相关的基因,推测了双环醇可能存在的调控机制的线索,尚需进一步的实验证明.
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丙型肝炎病毒蛋白结合蛋白
0 引言丙型肝炎病毒(HCV)是1989年Choo et al应用分子生物学技术克隆成功的一个RNA病毒,属黄病毒科.可以引起慢性肝炎、肝硬化及肝癌,目前全世界有1.7亿人感染,干扰素联合利巴韦林是其治疗药物,但是疗效不佳[1-9].目前正在积极研究其发病机制,探索新的治疗方案.HCV的宿主范围较窄,只能在人及黑猩猩中繁殖,为研究带来困难.目前机制的研究限于体外的细胞模型或转基因动物.HCV是怎样与宿主细胞相互作用的,世界上进行了广泛的研究,特别是HCV各蛋白组分(C、E1、E2、P7、NS2、NS3、NS4a、NS4b、NS5a和NS5b)[10 ]与人体蛋白之间的相互作用,为HCV所致疾病的发病机制提供了线索.
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基因表达谱芯片技术筛选丙型肝炎病毒核心蛋白反式调节基因TAHCCP2的调节基因
目的:应用基因表达谱芯片技术了解TAHCCP2在肝细胞中可能上调或下调的基因,了解其可能的调节功能线索.方法:应用抑制性消减杂交(SSH)技术及生物信息学(bioinfo-rmatics)技术筛选并克隆HCV核心蛋白反式激活的新型靶基因TAHCCP2.以TAHCCP2表达质粒pcDNA3.1(-)-TAHCCP2转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照,制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA.应用基因表达谱芯片技术对差异表达mRNA进行检测和分析.结果:TAHCCP2表达载体pcDNA3.1(-)-TAHCCP2经酶切鉴定和DNA测序鉴定正确.经基因表达谱芯片分析,4种基因的表达水平下调.结论:筛选到的一些与体内氧化应激、细胞生长和能量代谢相关的基因,推测了TAHCCP2可能存在的调控机制的线索,尚需进一步的实验证明.
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应用抑制性消减杂交技术筛选TAHCCP2的反式调节基因
目的:筛选与克隆TAHCCP2的反式激活基因,了解其可能存在的调节功能线索.方法:应用抑制性消减杂交(SSH)技术及生物信息学(bioinformatics)技术筛选并克隆TAHCCP2反式激活的新型靶基因.以TAHCCP2表达质粒pcDNA3.1(-)-TAHCCP2转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照,制备转染后的细胞裂解液,提取muRNA并逆转录为cDNA,经RsaI酶切后,将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应(PCR),将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析.结果:成功构建人TAHCCP2反式激活基因差异表达的cDNA消减文库.文库扩增后得到70个阳性克隆,进行菌落PCR分析,均得到200-1000 bp插入片段.对插入片段测序,并通过生物信息学分析获得其全长基因序列,结果共获得15种编码基因.结论:筛选到的cDNA全长序列,包括一些与细胞生长调节、物质代谢、免疫及细胞凋亡密切相关的蛋白编码基因,推测了TAHCCP2可能存在的调控机制的线索,尚需进一步的实验证明.
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应用抑制性消减杂交技术克隆和筛选丙型肝炎病毒NS3蛋白反式激活基因1的反式调节基因
目的:筛选与克隆丙型肝炎病毒(HCV)NS3反式激活基因1的反式激活基因,了解其可能存在的调节功能线索.方法:应用抑制性消减杂交(SSH)技术及生物信息学(bioin-formatics)技术筛选并克隆NS3TP1反式激活的新型靶基因.以NS3TP1表达质粒pcDNA3.1(-)-NS3TP1转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照,制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA并逆转录为cDNA,经RsaI酶切后,将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应(PCR),将产物与pGEM-Teasy载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析.结果:成功构建人NS3TP1反式激活基因差异表达的cDNA消减文库.文库扩增后得到68个阳性克隆,进行菌落PCR分析,均得到200-1000 bp插入片段.随机挑选其中36个插入片段测序,并通过生物信息学分析获得其全长基因序列,结果共获得23种编码基因,其中3个为未知功能的新基因.结论:筛选到的cDNA全长序列,包括一些与细胞生长调节、物质代谢、免疫及细胞凋亡密切相关的蛋白编码基因,推测了NS3TP1可能存在的调控机制的线索.
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肿瘤转移抑制基因KAI1对MHCC97-H肝癌细胞粘弹性的影响
目的:探讨肿瘤转移抑制基因KAI1对高转移潜能肝癌细胞MHCC97-H粘弹性的影响.方法:采用微管吸吮技术研究我们前已转染人类KAIl全长正或反义结构基因的人肝癌MHCC97-H细胞粘弹特性.结果:MHCC97-H肝癌细胞的粘弹性系数K1,K2,μ在转染KAI1正义基因后明显增加(P=0.007),在转染KAI1反义基因后明显降低(P=0.000),而转染空载体后则无明显变化(P=0.444).结论:KAI1基因对肝癌细胞的粘弹性有明显影响,这为肝癌侵袭和转移机制的研究提供了重要线索.
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1型和2型之外:诊断不同类型的糖尿病
本文将探讨一些罕见原因引起的糖尿病的诊断,以求概述一些重要的可提示在典型1型和2型糖尿病之外其他类型的糖尿病的诊断线索.由于诊断的可能很多,本文将重点讨论治疗与正确的诊断密切相关的那部分类型的糖尿病.对所有的糖尿病患者,我们都要高度注意这些特殊类型糖尿病的诊断有没有被遗漏.
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1型糖尿病患者更易发生心脏病后死亡
患有1型糖尿病的人群是没有糖尿病的人群发生心脏病后过早死亡率的13倍.一个小型研究已经发现了解释这个原因的一条线索.研究者发现了一种对抗心脏的免疫标记物一心脏自身抗体,18名患有1型糖尿病的心脏病幸存者中83%发现了心脏自身抗体,20名患有2型糖尿病的幸存者中仅有15%发现了此抗体.实质上在没有糖尿病或没有心脏病史的人身上是不存在自身抗体的.
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一种利用支持向量机预测蛋白-蛋白结合位点的改进算法
结构基因组计划已开始产生功能未知的蛋白质结构,因此,要在有限的时间内正确的注解这些蛋白质结构,需要精确、自动预测的方法.确定两个相互作用蛋白的界面,能够提供蛋白质功能的重要线索,也能够缩小用于确定预测复合体结构算法的搜索范围.
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脑卒中132例危险因素临床观察
目的:观察脑卒中患者的危险因素以强化对脑卒中的预防为主观念提供线索和依据。
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后华法林时代口服抗凝新秀:达比加群、利伐沙班、阿哌沙班
华法林做为口服抗凝药物已有50余年的历史,其抗凝疗效肯定,至今在临床上仍然被广泛应用.但其易与多种药物或食物相互作用、治疗窗口狭窄、个体差异性大、需要通过频繁监测国际标准化比率(INR)来调整剂量等不足,造成其临床应用不便及患者依从性较差.近年来研发的新型口服抗凝药物,其靶点主要是凝血瀑布链中的Ⅱa因子(凝血酶)或Ⅹa因子,已经上市的有勃林格殷格翰公司的直接凝血酶抑制剂达比加群(dabigatran)、拜耳公司的Ⅹa因子直接抑制剂利伐沙班(rivaroxaban)、百时美施贵宝/辉瑞公司的Ⅹa因子直接抑制剂阿哌沙班(apixaban),此三种药物已经进行了大量的临床试验,并且取得了较好的临床疗较,我们对这三种药物的大规模的临床研究进行了盘点,以期能为临床工作者提供一些线索.
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类胰岛素生长因子对人肺成纤维细胞糖代谢及功能的影响
研究类胰岛素生长因子(IGF-1)对肺成纤维细胞(LF)糖代谢及其分泌细胞外基质蛋白的调控作用,为从LF环节干预肺纤维化提供线索.
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胃食管反流病的食管外表现和并发症
就现在所知,胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease,GERD)是一种颇为常见的疾病,且因本病与食管腺癌等疾病的发生相关而日益受到人们的关注.对GERD的认识始于食管炎,当时认为由于胃内容物的反流,只造成食管下端黏膜的化学性炎症而命之为反流性食管炎(reflux esophagitis),而将已经发现的其他系统-器官的症状视之为反流性食管炎的并发症.然而,随着研究的深入,已意识到本病的临床谱甚广,反流性食管炎本身所产生的典型症状如烧心、反流,以及非特征性症状如嗳气、吞咽困难、胸-背痛等只是疾病表现的一部分,具有相当的诊断价值,但食管外症状亦常为GERD的诊断提供重要线索,因此,认识这些症状对由此而及早诊断、治疗GERD有相当重要的意义.