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四环素修饰玻碳电极法测定食品中细菌总数
食品中细菌总数主要用来判断食品被污染程度的一个指标.目前采用的测定方法主要是传统的平板计数法,该法用肉眼进行菌落计数,主观误差大.需48 h培养,测定周期长.已不能满足食品卫生检验快速、准确的要求.为了寻求一种快速简便检测细菌总数的方法,本文用四环素修饰玻碳电极作为工作电极,Ag/AgCl(饱和KCl)电极作为参比电极,铂电极作为辅助电极,组成三电极体系,以抽滤的方式将待测样品富集在细菌滤膜上,然后用塑料网把细菌滤膜固定在四环素修饰玻碳电极上,在磷酸盐缓冲液中,进行伏安测定,峰电流与细菌总数在2~5×104(个/ml)范围内成线性关系,检出下限为:2个/ml,同时与平板计数法(GB4789.2-94)[1]测得食品中细菌总数进行比较.结果表明该法具有快速、灵敏、准确、操作简便等特点.现报告如下.
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不同介质雾化气溶胶粒子大小的测定
细菌气溶胶粒子大小不仅决定了其在空气中的持续时间,也决定其对人体的感染能力.一般而言,直径小于5μm的带菌粒子容易通过呼吸道的粘膜及纤毛组成的屏障而引发感染[1].因此,空气消毒试验中要求雾化后产生的粒子介于1~10μn,但不同介质雾化可影响粒子的大小.作者在相同条件下测定了0.03mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)与1%蛋白胨雾化后产生的粒子大小.现将结果报告如下.
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备皮用具HBsAg污染的调查及建议
目前,临床备皮仍常用剃毛法,对其用具HBsAg污染进行了调查.调查时,对刀片、刀柄与应用中的肥皂,用沾有采样液(0.01 mmol/L磷酸盐缓冲液)的棉签涂抹采样;对毛刷,在盛有采样液的玻璃平皿中揉搓采样,对应用中的滑石粉,取1 g投入盛有采样液的试管中,用ELISA法检测上述采样液中HBsAg抗原性,以样本检测OD值(S)与阴性对照OD值(N)值的比值(S/N)≥2.1为阳性.
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高压氧对一氧化碳中毒昏迷大鼠大脑组织超氧化物歧化酶等的影响
本实验采用动物模型,测定CO中毒致昏迷大鼠高压氧(HBO)治疗前后大脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量,探讨CO中毒昏迷时大脑组织SOD及MDA的变化及HBO对二者的影响。材料和方法 健康雄性Wistar大鼠80只,体重280~320 g由中国医科大学实验动物部提供,随机分成5组,每组16只,正常对照组(C组),CO染毒组(CO组),CO染毒HBO治疗1次组(HBO1组),CO染毒HBO治疗3次组(HBO3组),CO染毒常压氧治疗1次组(NBO1组)。 CO中毒模型建立:参照Ischiropoulos[1]的方法,将大鼠放入自制染毒瓶中,充入CO气体,使鼠吸入浓度3~4 mg/L的CO气体40~60 min至昏迷。 HBO治疗:染毒后20 min将大鼠放入48 cm×48 cm实验动物用高压氧舱内,在0.2 MPa下吸纯氧60 min。HBO1组治疗1次,HBO3组每天在同一时间连续治疗3 d。HBO治疗:染毒后20 min将大鼠置高压氧舱内0.1 MPa吸纯氧60 min。C组不染毒不治疗,随机分入C组后即处死;CO组染毒后10 min处死。断头取脑,分离出大脑组织保存于-70℃待测。 标本测定:大脑样品按20%(重量/体积)比加入pH7.2磷酸盐缓冲液,匀浆离心取上清液。用羟氨氧化法测定SOD含量;硫代巴比妥酸比色法测MDA;用Lowery法测蛋白含量。SOD单位为NU/g protein,MDA单位为μmol/g protein。统计学分析:单因素方差分析,若有意义,则进一步用两两比较的q检验。
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酸性染料比色法测定盐酸麻黄碱滴鼻液的含量
盐酸麻黄碱滴鼻液在临床上已被广泛应用,它对治疗伤风、急性鼻窦炎以及干草热等引起的鼻粘膜充血及鼻阻塞效果显著.应用酸性染料比色法[1-3]对其进行含量测定,方法灵敏、方便、准确、可靠,适用于医院制剂的检查要求,盐酸麻黄碱在pH 5.6的磷酸盐缓冲液中与溴麝香草酚蓝形成稳定的黄色络合物,其氯仿提取物在412nm处大吸收,故可对其进行比色测定.
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病原性耶尔森氏菌在磷酸盐缓冲液中的低温生长
目的应用PBS对Yersinia属菌进行低温增菌培养试验.方法用生理盐水分别稀释Yersinia属菌,然后接种在0.5%兔溶血的PBS液体内,进行分离培养.结果Yersinia属菌在20~25 d出现一个峰值.结论PBS低温增菌培养方法简便,可用于Yersinia菌属细菌的增菌培养.
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不同用量卵磷脂中和剂和PB缓冲液在双价肾综合征出血热灭活疫苗(Vero细胞)无菌检查中的应用
目的 研究不同用量卵磷脂中和剂和PB缓冲液,在双价肾综合征出血热灭活疫苗(Vero细胞)无菌检查中的应用.方法 取双价肾综合征出血热灭活疫苗(Vero细胞)转移至卵磷脂中和剂中(摇匀后放置5 min),按薄膜过滤法过滤后,用0.15 mol/LPB缓冲液(30 ~ 35 ℃保温)冲洗滤膜,加入液体培养基培养,进行不同用量卵磷脂中和剂和PB缓冲液适用性试验.用选定的试验条件进行无菌检查方法的适用性试验(薄膜过滤法)及阳性对照验证试验.结果 采用10 ml卵磷脂中和剂中和10瓶供试品(摇匀后放置5 min),用0.15mol/L PB缓冲液(30 ~ 35℃保温)冲洗滤膜,每张滤膜每次冲洗量为100 ml,共冲洗2次(末次冲洗液中含小于100cfu的菌液),该方法过滤速度快,卵磷脂冲洗完全,无残留、不影响结果判定,确定适用.无菌检查方法的适用性试验中,供试品各滤筒中的试验菌与阳性对照比较均生长良好,达到《中国药典》三部(2015版)要求,应用于双价肾综合征出血热灭活疫苗(Vero细胞)的无菌检查中无抑菌作用或其抑菌作用可忽略不计.以金黄葡萄球菌和黑曲霉作为阳性对照菌,0和17d培养到期后加入阳性菌,对比试验显示试验菌均生长良好.结论 该方法适用于双价肾综合征出血热灭活疫苗(Vero细胞)无菌检查.
关键词: 卵磷脂中和剂 磷酸盐缓冲液 双价肾综合征出血热灭活疫苗 抑菌作用 -
尿pH值对尿β_2-微球蛋白检测的影响及其对策
目的 探讨pH值对尿β_2-微球蛋白(β_2-MG)检测的干扰及应对措施.方法 收集32例肾病患者的尿样本,记录pH值,将同一份尿样本分作5份:未处理的新鲜尿、以磷酸盐缓冲液(PBS,pH值7.0)1∶1稀释的新鲜尿(上述2份样本立即冰冻保存)、以PBS 1∶1稀释室温再放置2 h的尿液、室温放置2 h再用PBS 1∶1稀释的尿液、室温放置2 h未作处理的尿液.全部尿样本冰冻保存1周后采用放射免疫法测定β_2-MG的含量.结果 室温放置2 h后用PBS稀释和未处理的 pH值<6的尿样本β_2-MG含量均显著低于新鲜尿,其余组与新鲜尿无差异.结论 使用PBS能够准确校正尿的pH值,且不影响β_2-MG的检测.
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用脱离子水代替磷酸盐缓冲液检测高铁血红蛋白还原率
目的 简化高铁血红蛋白还原率测定的步骤,减少配制试剂,以及探讨影响高铁血红蛋白还原率测定的因素.方法 用脱离子水代替磷酸盐缓冲液测定98例住院及门诊患者全血的高铁血红蛋白还原率.结果 剔除6例无可比性的病例,2种方法所得结果差异无显著性(P>0.05).结论 可以用脱离子水代替磷酸盐缓冲液测定高铁血红蛋白还原率.
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NOD小鼠口服胰岛素诱导免疫耐受机制探讨
已有研究证实,给予NOD小鼠口服小剂量胰岛素可显著降低糖尿病发生率,本研究旨在进一步探讨细胞因子γ干扰素(IFN-γ)、白介素4(IL-4)和一氧化氮(NO)在口服胰岛素诱导免疫耐受过程中的作用.一、材料和方法1.动物分组及口服胰岛素治疗:雌性NOD小鼠120只,同窝别动物按体重配对,采用随机数字法分为胰岛素组和对照组,各60只.自6周龄始分别胃内注入猪胰岛素500 μl(1 mg)和磷酸盐缓冲液500 μl(pH 7.4),每周2次,共4周,以后每周1次至40周龄.定期测定NOD鼠尾静脉血血糖,连续两周≥13.8 mmol/L诊断为糖尿病鼠[1].
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磷酸盐缓冲液提高血塞通注射液稳定性的研究
血塞通注射液是以三七总皂苷(1)为原料的中药注射液,用于中风偏瘫、淤血阻络证,动脉粥样硬化性脑梗塞、脑栓塞、视网膜中央静脉阻塞属淤血阻络证者,疗效显著,广泛用于心脑血管疾病的治疗,但临床不良反应时有报道[1-5].1在酸性和强碱性条件下易发生水解脱糖基,生成极性小的苷元[6].文献[7]报道血塞通注射液适宜pH为6~8,但即使在该pH范围,经80℃加热12d,血塞通注射液的含量降低H pH下降.本研究探讨在血塞通注射液中加入pH 7.4磷酸盐缓冲液(PBS),通过维持pH的稳定,防止皂苷水解,提高血塞通注射液的稳定性.
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荷载白介素24的溶瘤腺病毒联合达卡巴嗪对裸鼠黑素瘤的抑制作用
目的 研究荷载白介素24(IL-24)的溶瘤腺病毒ZD55-IL-24联合达卡巴嗪抑制裸鼠黑素瘤的作用.方法 建立裸鼠恶性黑素瘤A375细胞移植瘤模型后,分别给予ZD55-IL-24联合达卡巴嗪、ZD55-IL-24、达卡巴嗪、磷酸盐缓冲液(PBS)干预.Western印迹法检测A375细胞移植瘤组织IL-24、E1A蛋白表达.测量裸鼠肿瘤生长体积.结果 Western印迹结果表明,ZD55-IL-24联合达卡巴嗪作用的裸鼠黑素瘤高效表达IL -24、E1A蛋白.接种30 d后,ZD55-IL-24联合达卡巴嗪组肿瘤平均体积为(2346.5±576.0) mm3,ZD55-IL-24组为(4141.6±1348.2) mm3,达卡巴嗪组为(5230.1±922.8) mm3,PBS组为(7135.1±1002.3)mm3,ZD55-IL-24联合达卡巴嗪组与各组之间差异均有统计学意义(P<0.05).结论 荷载IL-24基因的溶瘤腺病毒ZD55-IL-24联合达卡巴嗪有抑制黑素瘤增殖的作用.
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心脑健治疗高纤维蛋白原血症31例
纤维蛋白原(Fbg)是血液凝固的重要因子,血浆纤维蛋白原升高,促进血小板与红细胞聚集,减慢血流,增加血液粘稠度,是动脉粥样硬化症、冠心病、心绞痛及脑血管意外的独立的危险因子。我们用心脑健胶囊治疗高纤维蛋白原血症31例,取得较好效果。1 资料与方法 本组31例均系多年的冠心病、高脂血症患者,其中男性17例,女性14例;年龄39~69岁,平均55.7±7.5岁。服药前纤维蛋白原均>4.0g/L。均予口服心脑健胶囊(杭州千岛湖中药厂生产),每次2粒,每日3次,1疗程28天。观察期间停用其他抗凝药物。采用自身对照,服药前后空腹抽血检查,纤维蛋白原测定方法采用热沉淀比浊法,肝素抗凝;所用pH6.3 PBS磷酸盐缓冲液,由宁波慈城生化试剂厂生产;56℃水浴恒温15min,所用CR-ⅢAZb1-79型恒温箱由上海医疗器械厂生产。
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可降解高纯镁的溶血性能及其相关影响因素的探讨
目的 研究可降解高纯镁的溶血性能,探讨其相关的影响因素.方法 分别采用生理盐水(SC)和磷酸盐缓冲液(PBS)2种介质,应用ISO和ASTM标准推荐的不同比例,通过直接接触法(90min)和间接接触法(72h),评价高纯镁的溶血性能,并比较pH值变化和镁离子释放量,分析其对溶血性能的影响.结果 在相同比例下,PBS组的溶血率小于SC组(P<0.05);间接接触法72h组的溶血率大于直接接触法90min组(P<0.05);SC组的pH值均大于10,溶血率明显升高;90min内镁离子释放量低于22mg/L.结论 在本实验条件下,pH值、接触比例和接触介质是引起高纯镁高溶血率的主要因素,选择PBS缓冲液作为接触介质可能更适合于可降解高纯镁溶血性能的评价.
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血站工作内环境的肝炎病毒污染状况分析
为了解本站工作内环境肝炎病毒污染的情况,进一步消除工作内环境肝炎病毒污染而危及输血安全和工作人员健康的各种隐患,于1998年11月应用ELISA法对本站工作内环境与相关物体和工作人员手指等做HBsAg、抗-HCV检测,报告如下.材料与方法1标本来源和采集方法用浸以含Tween 20磷酸盐缓冲液(pH 7.2)[1]的无菌棉签在采血和实验工作台面、离心机内壁、分浆夹等表面反复涂抹,采样面积约为100 cm2,工作人员和献血者采集双手掌或肘部,卡片、水龙头采集整个物表.
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硫酸阿托品滴眼剂分析方法探讨
硫酸阿托品等生物碱类滴眼剂的分析,一般均可直接采用中和法测定其阴离子部分,对不含磷酸盐缓冲液的处方,采用中和法[1]进行快速分析是为简便的方法,而对于含有磷酸盐缓冲剂,用中和法测定结果有干扰,但采用提取法[2]又不合医院药房的快检要求.文献[3]报道用碘量法进行测定,但操作时间较长(必须放置15~20 min),为此我们用碘量法测定进行探讨,供参考.
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137份痰标本结核MPB64抗原检测结果分析
目的 为研究结核分枝杆菌MPB64抗原检测结果敏感性、特异性以及早检测时限,以寻找新型更好更快结核病病原检验方法,为结核病早诊断、早治疗提供科学依据.方法 痰标本经4%氢氧化钠恰当处理后,用PH6.8磷酸盐缓冲液中和,再接种快速变色培养基培养6-8天,吸取培养匀液滴加结核MPB64抗原胶体金免疫层析板;以痰厚涂片抗酸染色镜检找抗酸杆菌和改良酸性罗氏培养基培养结核杆菌作对照.结果 痰涂片阳性率为11.68%;酸性罗氏培养基培养结核杆菌阳性率为24.82%;结核MPB64抗原检测阳性率为35.77%.酸性罗氏培养基培养结核杆菌检出时限平均35天,而结核MPB64抗原检测平均为7天.结论 结核MPB64抗原检测具有敏感、特异和快速等特点,是对目前结核病病原学检验方法的有力补充,适合基层结防机构开展.
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胰岛素注射液和硫酸庆大霉素注射液配伍研究
1 仪器与试药uv-2401(pc)紫外分光光度计,日本岛津;PHS-2型酸度计,上海雷磁仪器厂;中性胰岛素注射液(10ml:400单位,徐州生物化学制药厂,批号000623);硫酸庆大霉素注射液(2ml:8万单位,安徽皖北药业公司,批号0010171);硫酸庆大霉素标准品(效价636u/mg,中国药品生物制品检定所,批号为0326-9713);培养基为抗生素检定1号;菌种:短小芽孢杆菌[CMCC(B)63501]缓冲液:磷酸盐缓冲液(7:8);5%葡萄糖注射液(安徽省蚌埠第一制药厂,批号000529).
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氯唑沙宗片溶出度测定方法研究
氯唑沙宗片为中枢性肌肉松弛剂,临床上用于各种急、慢性软组织扭伤、挫伤,运动后肌肉酸痛,肌肉劳损所引起的疼痛,由中枢神经病变引起的肌肉痉挛以及慢性筋膜炎等.氯唑沙宗为难溶性药物,有报导片剂的崩解时限与溶出度不相关,而溶出度与体内生物利用度具有相关性,本文建立了以磷酸盐缓冲液作溶剂,测定氯唑沙宗片溶出度的方法,该法简便可行,结果满意.
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Nacl溶液、平衡盐溶液和磷酸盐缓冲液的细胞毒性研究
药物进入临床前在进行毒理学研究时需要通过细胞实验和动物实验找到药物低有效浓度和药物高安全浓度,因此,需要一种液体对药物进行浓度梯度稀释,而稀释液的成分将直接影响实验结果.同时,针对用药方式和用药部位的不同应选取不同的稀释液,当研究一种用于眼部直接给药的新药时,需要根据眼部特殊的生理需求进行实验设计,只有这样才能得到切实有效的结果.