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X射线对同步化的HeLaS3细胞Cyclin B1蛋白表达和转录水平的影响
中、高剂量电离辐射对生长的真核细胞的一个普遍效应是导致分裂延迟,这早已被放射生物学界所公认.但有关低剂量电离辐射对细胞周期及其分子调控的影响报道甚少,我室以往实验资料已揭示低剂量辐射可促进细胞的DNA合成与增殖,加速细胞周期的进程[1,2].为了进一步探讨低剂量电离辐射促进细胞周期进程的分子机理以及低、高剂量辐射作用机理的差异,我们运用TdR双阻断法、RNA分子杂交技术和免疫组织化学法观察并探讨X射线作用于同步化的HeLaS3细胞后,其细胞周期相关基因Cyclin B1蛋白表达和转录水平的变化.
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电离辐射对小鼠骨髓基质细胞分泌的干细胞因子mRNA转录的影响
骨髓基质细胞(Bone marrow stromal cell,BMSC)是造血微环境的重要组成成分,也是产生造血活性物质所必需的结构基础,同时也能分泌多种造血因子。BMSC受到辐射损伤后,M-CSF、G-CSF、GM-CSF、IL-1、IL-4、IL-5等造血因子mRNA水平发生了变化[1],但对于其分泌的造血调控的重要细胞因子——干细胞因子(Stem cell factor,SCF)在放射损伤后其mRNA水平有什么变化,以及这些变化与造血功能障碍之间是否有关系,至今尚未见报道。本文作者观察了体外培养的小鼠BMSC在受到不同剂量60Co γ射线照射后,其SCF mRNA转录水平的变化,以期探讨放射损伤后造血功能障碍的机理。 一、材料和方法 1.实验材料:健康雄性昆明小白鼠,体重18~22 g,本校实验动物中心提供。总RNA提取试剂盒(GIBCO BRL),10×SYBR Green PCR buffer(PE Applied Biosystems),Taq酶、m-MLV等均为上海生物工程公司代理产品。 2.引物设计:由Genset Singapore Biotechnology Pte Ltd合成,序列顺序为:上游引物:5′-ATCTGCGGGAATCCTGTGACTG-3′,下游引物:5′-CCATATCTCGTAGCCAACAATGAC-3′。 3.BMSC培养:参照Dexter's介绍的方法[2]进行BMSC培养。每周半量换液,至贴壁细胞长满为止(约3~4周)。
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表达数量性状位点分析在药物基因组学中的应用
在全基因组关联分析(GWAS)时代发现的大量药物应答相关位点位于非编码序列,对其机制解释多关注于这些位点对mRNA表达水平的影响.表达数量性状位点(expression quantitative trait loci,eQTL)分析研究mRNA水平与基因组关联,其对遗传变异与基因表达关系、基因间相互作用和基因调控网络等的阐明为药物基因组学提供了有效研究手段.在药物基因组学中结合GWAS研究与eQTL研究,能够更好地阐明基因多态性对药物应答的影响,发现更多与药物疗效及毒性相关的生物标志物,为临床个体化用药的开展提供依据.
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脑钠肽床旁检测在急性心力衰竭诊治中的应用
脑钠肽(BNP),又称B型利钠肽,是利钠肽(NP)家族成员之一.正常人的BNP以颗粒形式储存于心房肌细胞中,其浓度为心室的100倍,但心室肌细胞是合成BNP的主要部位.BNP的生成在转录水平受室壁张力的调节.当心室容量负荷过重可以引起室壁张力的增高,心室肌细胞合成的前体在内切酶的作用下裂解为N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)和含有32个氨基酸并有活性的B型利钠肽(BNP).所以二者的释放是随着室壁张力的增高而增多的.BNP的生物半衰期为23分钟,NT-proBNP的半衰期较长为120分钟.在心力衰竭时血浆NT-ProBNP的浓度比BNP高2~10倍,而且浓度稳定,所以更利于急性心力衰竭的诊断.当心功能衰竭时,血容量的增加导致心室壁张力增加,NP系统被显著激活.
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子宫巨细胞病毒感染与妊娠结局的相关性研究
人巨细胞病毒(HCMV)宫内感染与出生缺陷的关系早已受到关注[1],但发病机理尚未完全阐明.为此,我们建立了豚鼠巨细胞病毒(GPCMV)胎仔感染模型,并应用敏感、特异的三相寡核苷酸探针原位杂交技术,定性、定量、定位探索GPCMV在亲代子宫中的转录水平与胎仔感染的关系,现报道如下.
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急性白血病端粒酶亚单位的表达与端粒酶活性的相关性研究
人端粒酶由人端粒酶RNA(hTR)、端粒酶相关蛋白质(TP1/TLP1)和人端粒酶催化亚单位(hTERT/hEST2)三部分组成[1],研究表明,TP1 mRNA在不同组织的表达无显著差异,hTR的转录水平对端粒酶活性的影响尚存争议,而hTERT 转录水平的表达在端粒酶活性高的癌组织中明显升高.我们通过检测成人急性白血病患者和正常人的端粒酶亚单位在转录水平和蛋白水平的表达及端粒酶的活性,探讨急性白血病的端粒酶活性的调节因子,为进一步寻找急性白血病的治疗靶点提供理论依据.
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游离线粒体DNA拷贝数与疾病的研究进展
线粒体作为真核细胞内的重要细胞器,除了维持细胞正常的生理功能外还参与细胞凋亡及死亡过程。游离DNA包括游离核 DNA(nDNA)和游离线粒体 DNA(mtDNA),与nDNA相比mtDNA有更多的拷贝数。另外,由于mtDNA缺乏有效的损伤修复系统,更容易造成复制转录水平及拷贝数的变化。 mtDNA性状和数量的改变与人类多种疾病密切相关。本研究就近年来mtDNA拷贝数与疾病的相关研究作简单综述。
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大青叶对CYP1A1酶活性及转录水平影响
细胞色素P450(CYP450)酶系由一群基因超家族编码的酶蛋白所组成,人类的CYP450基因有18个家族和42个亚家族,调控180多个人类CYP450亚型蛋白质[1].
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低氧刺激与机体适应性应激蛋白研究进展
低氧环境外界刺激可引起机体产生一系列生理、病理反应,包括机体产生一系列独特的应激蛋白以适应低氧造成的不利状况.有关低氧环境下应激蛋白的报道,包括应激蛋白的控制基因及转录水平,在组织细胞内的特异表达,在机体内的病生机制等国内外均有较深入的研究[1].现对低氧刺激与机体适应性应激蛋白研究进展作一综述.
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Ⅳ型胶原酶的基因结构及表达调控
Ⅳ型胶原酶是与肿瘤的侵袭和转移密切相关的一种蛋白水解酶。本文首先叙述了两种类型Ⅳ型胶原酶的基因结构、功能区域及二者的区别,然后以92kDaⅣ型胶原酶为重点从ras的作用、JNK与ERK依赖性信号传导途径及Ca2+的作用三个方面就目前对此酶在转录水平的表达调控的研究现状作一全面的阐述。
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牙龈卟啉单胞菌蛋白酶及疫苗的研究进展
牙龈卟啉单胞菌(P.g),革兰阴性厌氧菌,是人类牙周炎的主要致病菌[1].动物实验表明它在小鼠、大鼠和灵长类动物的龈下定植与牙周炎的发生和进展相关.P.g可以调整真核细胞信号转导途径,为了满足新陈代谢的需要,P.g基因表达的调节可以控制在转录水平.证据表明,P.g的感染会导致严重的全身系统疾病如心血管疾病和分娩早产儿.
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RNA干扰技术及其临床应用与进展
基因沉默是广泛存在于生物界的古老现象,是生物体抵御病毒或其它外来核酸入侵以及保持自身遗传稳定的保护性机制,广泛存在于真核生物细胞中.通常基因沉默发生在两种水平上:①由于DNA甲基化、异染色质化以及位置效应引起转录水平上的基因沉默(Transcriptional gene silencing,TGS);2在基因转录后水平上通过对目的RNA特异性降解而使基因失活的转录后基因沉默(Post transcriptional gene silencing,PTGS).RNA干扰 (RNA interference,RNAi)即属于转录后水平的基因沉默.随着近年来对RNA干扰机制和功能的深入研究,RNA干扰技术在人类多种疾病的治疗方面显示出了良好的应用前景.本文就RNA干扰技术及其临床应用现状和进展做一综述.
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microRNA-155的研究进展
microRNAs是新发现的一类内源性短链非编码RNA分子,成熟的microRNAs规范针对30,50 UTR区,通过与靶基因的特异性相互作用来降解mRNA或者抑制靶基因的翻译,也可以在特定条件下上调靶基因的翻译和转录水平[1].自从1993年首个microRNA在动物中发现以来,作为基因表达调节机制中极其重要的成员,人们发现约30%的动物基因可以预测为microRNA的靶基因,被其直接调控[2],并参与发育调控、器官形成、肿瘤生成、细胞增殖与凋亡等生物学过程.近一些关于microRNAs家族的实验表明,多种microRNA参与免疫细胞的产生和分化、天然免疫和获得性免疫应答反应,在维持免疫系统稳态,制止免疫系统疾病的发生,发挥着重要的作用[3,4].
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MicroRNA-155在免疫调控中的作用
microRNAs ( miRNAs )是一种具有高度保守序列的非编码微小RNA分子,能在转录后通过与靶基因的特异性相互作用来降解mRNA或者抑制靶基因的翻译,也可以在特定条件下上调靶基因的翻译和转录水平、microRNA-155与micRNA家族中的一员,介导多种生理病理过程,在炎症反应、免疫反应、肿瘤的发生和发展中发挥重要作用。现就miRNA-155的主要特点及其功能的研究进展予以综述。
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Maspin在胃癌中的作用
Maspin属于丝氨酸家族的一种新型丝氨酸蛋白酶抑制剂,在胃癌中表现出抑瘤活性.Maspin是1994年Zon等采用杂交消减技术于正常乳腺上皮组织中发现的,其功能相当于抑癌基因.Maspin在恶性肿瘤低表达及其在肿瘤转移细胞中的缺失由转录水平进行调节.
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反义封闭胶质瘤端粒酶后c-myc活性研究
本实验探讨了端粒酶有效封闭后,在转录水平是否致使癌基因c-myc的活性下降.1 材料与方法1.1 主要材料阳离子脂质体Dosper(罗氏公司);ELISA端粒酶检验试剂盒(罗氏公司);端粒酶RNA反义硫代磷酸寡脱氧核甘酸(ASODN)(其序列为5'-CTCAGTTAGGGTTAGACA-3'互补于人端粒酶RNA第43号~60号核甘酸序列,上海生工生物工程公司合成);两步法RT-PCR试剂盒(Promega);Trizal(华舜生物);U251胶质瘤细胞系(购自中科院上海细胞生物研究所).
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铜绿假单胞菌外毒素A的调控基因
铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)外毒素A(PEA)为该菌主要的致病物质,由toxA基因编码.本文综述PEA的调控基因,包括正调控基因regA、regB、lasR、ptxR、vfr和负调控基因fur、ptxS.regA是影响toxA转录的主要基因.除lasR外,其余其因均在转录水平上通过regA调控PEA的产量.
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细菌基因的转录调控系统
细菌可通过不同的系统感应自然界的多重复杂环境条件的变化,并对环境因素改变的压力产生应激应答,表达不同的生物学特性.细菌如何整合多重环境的刺激信号产生适当的应答,是研究细菌转录调控的关键点.虽然目前人们对细菌基因表达调控的认识还大多基于严格控制的单个实验条件改变的研究结果,但研究细菌不同转录调控因子及其在转录水平和转录后水平调节相关基因的转录和表达将有助于阐明细菌适应多种环境及致病性表型改变的分子机制.由于细菌的转录调控因子及其机制非常复杂,本文仅简单介绍数个研究较为深入的细菌转录调控系统.
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微管在细胞可变形性中的作用--抗拒微丝产生的张力
细胞的形态和力学性质或者说细胞的可变形性,决定了细胞对载荷的敏感程度.例如,剪应力持久作用可导致血管内皮细胞长轴沿流场方向排列,同时伴随细胞弹性模量的显著增高以及作用在细胞表面的剪应力梯度的显著降低.与此相对应,同一剪应力条件不再能诱导重排后的血管内皮细胞产生相应的生物学效应,如细胞膜上牵拉敏感离子通道的开放、胞内Ca2+浓度和血小板衍生生长因子(PDGF)B链mRNA的转录水平的增高等.这些证据表明,细胞的可变形性是细胞得以分辨其已经适应的和未适应的载荷的一种机制.
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肝细胞核因子4在肝细胞分化和肝细胞癌中的作用
肝细胞核因子(HNFs)是肝脏优势表达的转录因子.HNFs家族不同成员之间互相网络调控,在转录水平调控肝脏重要功能基因表达,对肝脏发育,肝脏结构和功能维持起核心作用.其中肝细胞核因子4a(HNF4a)是细胞核激素受体家族的转录因子,处于转录因子"网络调控"上游,是肝细胞分化和功能维持为关键的转录因子[1].