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神经干细胞联合组织工程化桥接物在周围神经长段缺损中的应用
神经干细胞(NSCs)具有低免疫源性,能自我更新、多向分化及迁徙性等生物学特性,是理想移植种子细胞。周围神经长段缺损治疗离不开移植物,包括自体、异体移植物、组织工程材料等。而这些移植物中自体神经是金标准,移植后结构和功能恢复为理想。如何使移植物尽可能接近或达到金标准成为每个科研工作者梦想。将NSCs与组织工程材料联合移植正成为周围神经长段缺损研究领域重要探索方向,并已初步显示出该方向的应用前景。神经干细胞(NSCs)作为一种可分化成多种神经细胞的祖细胞,在周围神经损伤领域正显示出越来越大的种子细胞价值。另一方面,组织工程材料的丰富和发展使周围神经损伤修复具有了更广泛选择。这两方面的研究基础能否在周围神经长段缺损修复中发挥积极的作用?本综述将就该系列问题进行阐述。
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神经套管技术在外周神经修复中的应用
外周神经损伤会导致感觉的缺失和运动功能障碍.当前修复神经损伤的方法,诸如神经移位移植,神经游离移植等"金标准"方案常因供体组织来源不足而受到限制,神经套管桥接技术则因其可避免牺牲自体神经等优越性而逐渐受到学者们的广泛关注,并成为近几十年来外周神经修复中的一个热点.现从套管材料的选择与设计,影响神经再生的因素等方面对此项技术的发展状况、存在的问题及展望做一综述.
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套管法修复面神经术的护理
面神经的吻合在显微外科术中一般是神经断端的直接吻合,或是采用自体神经移植法.对于用套管来修复离断的面神经目前只有理论上的研究.套管法修复面神经就在于改变了神经盲目的生长特性,使之在人为的限制范围内生长,以达到自动吻合目的.本院自1993年以来共收治了32例早期面瘫患者,均行套管法修复,术后6个月随访表明:手术成功率高,效果理想,现将手术前后的护理介绍如下.
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同种异体神经与自体神经瘤联合修复周围神经缺损的组织学观察
周围神经损伤在临床中十分常见,损伤后常造成肢体感觉及运动功能的损害,为了恢复肢体的神经支配,通常需要应用移植物桥接神经缺损.该类移植物的功能是引导神经纤维通过缺损区并长入支配的器官和组织.目前,临床实践中,自体神经一直被公认为是修复神经缺损理想的材料[1].但自体可供移植的神经来源有限,且多为细小的皮神经,同时移植后造成供区的功能障碍,尤其是对长距离或多处神经损伤及神经丛的损伤,往往没有充足的自体神经来源,使其在临床中的应用受到了限制[2].因此,寻求理想的自体神经替代物修复周围神经缺损成为临床外科的研究热点.
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周围神经损伤与组织工程修复的研究进展
近年来,周围神经损伤组织工程修复的研究取得了很大的进展.动物实验与临床研究主要聚焦于寻找理想的人工神经移植替代物、神经导管和种子细胞.神经导管有非降解或可降解两种,神经移植物有自体神经、同种异体神经及异种神经移植物,作为桥接神经缺损的支架有各自的优点与缺点.同时,培养、种植一定数量与高纯化度的具有分泌多种神经营养因子活性的施万细胞也是提高修复神经损伤效果的关键.
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自体外周血单个核细胞治疗高位桡神经离断伤
背景:近年来神经干细胞、脂肪间充质干细胞、肌源性干细胞、诱导多能干细胞已应用于治疗周围神经损伤,但自体外周血单个核细胞应用于外周神经损伤的治疗鲜有报道.目的:观察自体外周血单个核细胞治疗高位桡神经离断伤的疗效.方法:自2011年4月至2015年9月,共收治上臂中段桡神经离断伤12例,术前动员外周血单个核细胞,手术当日提取外周血单个核细胞悬液15 mL,手术探查吻合桡神经,显微镜下行端端外膜缝合法吻合神经,用浸泡5 mL自体外周血单个核细胞悬液的凝胶海绵包裹神经吻合口,剩余10 mL外周血单个核细胞悬液行局部肌肉多点注射,每点注射0.5 mL,缝合深筋膜,常规缝合伤口.术后给予抗生素预防感染48 h,上肢制动4周,指导患者康复锻炼.随访观察腕关节背伸度数、伸腕伸指肌肌力,进行疗效评价.结果与结论:①术后患者均获随访,随访时间15-36个月,平均17个月;②综合评价:优9例,良2例,可1例,差0例,优良率为92%;③腕关节背伸均能够达到功能需要,拇指背伸、伸指基本满足功能要求;④结果提示,自体外周血单个核细胞移植治疗高位桡神经损伤效果满意.
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聚乳酸-羟基乙酸导管移植修复坐骨神经损伤后的力学特性分析
背景:有关自体神经和聚乳酸-羟基乙酸导管移植修复坐骨神经损伤后的拉伸、应力松弛力学特性测试鲜有报道.目的:对比分析自体神经和聚乳酸-羟基乙酸导管移植修复坐骨神经损伤后的拉伸、应力松弛力学特性.方法:取死后24 h内的新鲜人尸体坐骨神经标本60条,加工成长35 mm试样,分为3组,正常对照组不做任何处理,人工导管移植组、自体神经移植组切断坐骨神经标本,形成20 mm缺损,分别以聚乳酸-羟基乙酸人工导管、自体神经吻接修复,3组均进行拉伸和应力松弛测试.结果与结论:①各组坐骨神经试样应力初600 s下降较快,600 s后下降缓慢,7200 s时应力松弛曲线接近水平,各组坐骨神经试样的应力松弛曲线为对数关系变化趋势;②自体神经移植组、人工导管移植组拉伸弹性限度载荷、弹性限度应力、大载荷、大应力、弹性限度应变、大应变小于正常对照组(P<0.05),人工导管移植组拉伸弹性限度载荷、弹性限度应力、大载荷、大应力、弹性限度应变、大应变大于自体神经移植组(P<0.05);③结果表明,聚乳酸-羟基乙酸人工导管具有很好的拉伸和应力松弛力学特性,符合坐骨神经损伤移植修复生物材料的拉伸力学特性和应力松弛力学特性要求.
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面神经缺损修复的进展
面神经因其解剖结构易受到各种因素影响而缺损.其传统修复方法是以自体神经移植修复,虽然其效果较好,但因其来源而受限.目前,研究者们已经找到一些不同的材料来桥接修复面神经缺损,如同种异体神经、人工神经等,但这些修复方法仍有其自身的局限性,有待进一步研究和探讨.本文是对周围性面神经缺损的各种修复方法的研究进展作一总结.
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桡神经浅支移植修复桡神经缺损
目前,研究异体神经和人工神经者较多,而自体神经仍是修复神经缺损理想的移植材料;但供切取移植的皮神经与修复的神经结构功能存在差异,影响了轴束对合、再生和功能的恢复[1].1990年1月~ 2000年2月,我院选用桡神经浅支作移植神经修复上肢桡神经缺损18例,取得了满意的疗效.
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脱细胞同种异体神经移植的进展
自1870年Philipeaux和Vulpain首次利用游离神经移植术修复舌下神经缺损以来,自体神经移植被认为是周围神经缺损修复的金标准,但自体神经材料存在来源有限,取材将给病人带来新的创伤,取材后可有供区麻木、瘢痕、神经瘤等并发症.
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大鼠脊髓损伤进行自体神经移植后的光镜观察分析
目的 探讨大鼠脊髓损伤后使用自体腓肠神经组织移植修复后的病理变化.方法 将实验动物分为自体腓肠神经移植组和非移植组各18例.两组利用改良Allen撞击方法建立脊髓损伤模型,损伤4周后移植组利用自体腓肠神经移植修复脊髓损伤段,非移植组仅暴露切口不做处理.分别于术后4、6、8周在光镜下观察脊髓损伤段及移植腓肠神经再生状况.结果 非移植组脊髓损伤段退化、变性,可见囊性空腔及瘢痕.移植组术后4周损伤区脊髓与移植物呈非紧密结合;术后6周融合良好;术后8周见再生神经纤维,通过损伤段与远端脊髓有机融合.与非移植组各组相比的差异有统计学意义(P<0.01).结论 自体神经移植修复大鼠脊髓损伤移植物不仅良好存活,而且促进受损脊髓轴突再生.
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大鼠脊髓损伤进行自体神经移植后荧光金逆行示踪观察
目的 探讨大鼠脊髓损伤后使用自体腓肠神经组织移植修复后的荧光金逆行示踪变化.方法 将实验动物分为自体腓肠神经移植组和非移植组两组,每组各18例.利用改良Allen撞击方法建立脊髓损伤模型,损伤4周后,移植组利用自体腓肠神经移植修复脊髓损伤段,非移植组仅暴露切口不做处理.分别于术后4、6、8周,行荧光金(fluoro gold,FG)逆行示踪了解脊髓损伤轴浆运输恢复情况.结果 移植组术后4周,FG阳性标记神经元稀少;移植术后6周,FG阳性细胞逐渐增多;移植术后8周,FG阳性细胞密集.与非移植组各组相比,差异有统计学意义(P<0.01).结论 大鼠脊髓损伤后自体神经移植修复,存活良好并促进脊髓损伤段轴浆运输功能恢复.
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模拟坐骨神经损伤以聚乳酸-羟基乙酸管移植修复后蠕变特性的分析
对比分析以自体神经和聚乳酸-羟基乙酸管吻接修复后的特性,为临床坐骨神经损伤吻接术提供生物力学参数。实验取死后24 h 内的新鲜尸体坐骨神经腰段标本12条,切取20个试样,形成10 mm 缺损,分别以自体神经和聚乳酸-羟基乙酸管吻接修复后进行蠕变实验。聚乳酸-羟基乙酸管移植坐骨神经组7200 s 应变上升量大于以自体神经移植组。聚乳酸-羟基乙酸具有很好的蠕变性特性,其蠕变特性符合坐骨神经损伤移植修复生物材料的要求。
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神经套管技术在修复外周神经中的应用现状及进展
周围神经受到损伤是临床工作中经常遇到的疾病,会导致感觉的丧失和运动功能障碍.由于神经细胞不分裂,其生长没有穿透力,使其在体内的再生非常困难.当前修复神经缺损的诸多方法中,因神经套管技术可避免牺牲自体神经及吻合时造成的神经再损伤而受到学者们的广泛关注,成为近几十年来外周神经修复中的一个热点.本文就套管材料的选择,影响神经再生的因素及临床应用情况等方面进行综述.
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神经延期移植修复损伤的阴茎海绵体神经恢复大鼠勃起功能
阴茎勃起功能障碍(ED)是盆腔根治性手术后常见并发症之一.随着对勃起通路的认识和显微外科技术的发展,重建勃起通路恢复患者自发勃起功能正成为可能.临床中应用自体神经一期移植修复损伤的海绵体神经(CN),可以恢复部分男性患者的勃起功能.而许多情况下,一期手术修复损伤的海绵体神经很困难,需延期修复.本研究旨在应用自体腓肠神经延期移植修复外科损伤的海绵体神经,重建大鼠勃起通路的可行性.
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应用组织工程学修复周围神经损伤的研究进展
长期以来临床上都采取自体神经游离移植修复周围神经缺损,但因受到供体有限、引起副损伤、移植的神经与原有神经相在形态及功能上有所差别等因素的限制,人们一直在寻找有效的替代方法.近年来组织工程学的迅速发展使其在周围神经修复方面有了广阔的发展空间.组织工程的核心是建立细胞与生物材料的三维空间复合体,即具有生命力的活体组织,用以对病损组织进行形态、结构和功能的重建并达到永久性替代.其重点问题包括:(1)导管材料选择和表面形态修饰;(2)导管与细胞外基质及神经营养因子的联合应用;(3)种子细胞的引入.
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大鼠坐骨神经移植术后BDNF在相应脊髓节段运动神经元中的表达
目的 探讨大鼠坐骨神经移植术后BDNF在相应脊髓节段前角运动神经元内的表达变化.方法 选用健康成年雄性Wister大鼠随机分为对照组(假手术组)和实验组(坐骨神经移植组),分别于术后不同时间点取材,应用RT-PCR及Western-blot方法检测相应脊髓节段前角运动神经元内的BDNF mRNA及其蛋白,所得数据进行统计学分析.结果 BDNF mRNA在对照组脊髓节段运动神经元内有一定的基础表达,实验组术后1周BDNF mRNA表达开始升高,2周时达高峰,6~8周后逐步下降,至8周时仍高于对照组基础表达量.两组中BDNF蛋白与BDNF mRNA的表达规律具有一致性.结论 坐骨神经移植术后BDNF mRNA及蛋白在相应脊髓节段前角运动神经元中的表达增强,BDNF可能参与了神经损伤后保护神经元及促进神经再生的过程.
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PLGA导管修复大鼠坐骨神经缺损的实验研究
目的 观察多孔PLGA[poly(lactide-co-glycolide)]导管修复大鼠坐骨神经缺损的效果.方法 健康成年SD大鼠12只,分为自体神经移植组和PLGA导管组.两组动物分别人工造成右侧10 mm的坐骨神经缺损后,PLGA导管组采用聚乳酸(polylactic acid,PLA)和聚羟基乙酸(polyglycolic acid,PGA)按75:25的比例制成多孔PLGA管修复坐骨神经缺损.自体神经移植组采用坐骨神经进行桥接.术后4、8、12周,分别行坐骨神经功能指数检测,术后12周行快蓝(FastBlue)逆行示踪观察背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)和脊髓神经元数目及行胫前肌湿质量测量;半薄和超薄切片观察再生纤维数目、直径及髓鞘厚度.结果 坐骨神经功能指数比较,术后4周无显著性差异(P>0.05),但8周和12周有显著性差异(P<0.05),自体神经组优于PLGA管组.PLGA组DRG及脊髓中快蓝标记的神经元数目及胫前肌湿质量均不及自体神经组,差异有统计学意义(P<0.05);单位面积再生有髓纤维数目、直径和髓鞘厚度在PLGA管组与自体神经组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 单用PLGA导管对坐骨神经缺损有一定的修复效果,但不及自体神经.
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腓总神经损伤晚期功能重建八例
我们自1997年1月~1999年6月,采用改良的胫后肌前置与(口)/(止) 母长伸肌后置术(Jones手术)联合治疗晚期腓总神经损伤8例,效果满意,报告如下。1 临床资料1.1 一般资料 本组8例,男6例,女2例。年龄6~59岁。均为腓总神经开放性损伤。神经损伤未处理4例,不规范吻合1例,自体神经电缆式移植3例。检查:均有明显跛行及足下垂,足背及小腿外侧感觉障碍。踝关节背伸均小于健侧1/2以上,跖屈小于健侧15°以上。手术时间:伤后2~3年5例,3~4年3例。入院后均行神经探查术,发现腓总神经陈旧损伤变性,不具备再吻合条件。
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组织工程化周围神经种子细胞的研究
周围神经损伤后的再生和功能恢复是神经科学领域的研究热点.由于自体神经和异体神经移植存在的较大缺陷,组织工程化周围神经应用于周围神经再生已逐渐成为研究的焦点.组织工程化周围神经就是将"细胞-生物材料"复合物植入神经损伤处,细胞在生物材料逐渐被机体吸收降解过程中促进、引导轴突再生形成新的具有形态和功能的周围神经组织,达到修复创伤和重建功能的目的.