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三株黏液型铜绿假单胞菌的生物学特性研究
铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa)是慢性呼吸道感染的重要致病菌.根据其形态和是否大量产生藻酸盐可分为黏液型和非黏液型.黏液型铜绿假单胞菌由于大量产生藻酸盐而更易形成生物被膜,使其逃逸机体免疫清除和增强对抗菌药物的耐药性,给临床治疗带来极大的困难[1-3].研究表明,mucA基因突变是造成铜绿假单胞菌发生黏液型转换的主要机制[4-5].目前已发现的mucA基因突变类型有多种[6],mucA基因突变类型对黏液型铜绿假单胞菌的生物学特性极可能造成较大影响.本课题组从临床分离了3株稳定黏液型铜绿假单胞菌,对mucA基因测序结果显示其mucA基因序列有较大差异,并进一步对其生物学特性进行了研究.
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糖缺失性转铁蛋白的生物学特性及其检测和临床应用
随着物质生活的日益丰富,人类视线已逐渐从解决温饱转移到追求多方面的物质精神享受,出现对多种物质的滥用,其中为突出的问题之一就是酒精滥用.
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EB病毒与人类肿瘤的相关性研究
EB病毒(EBV)是从非洲儿童的恶性淋巴瘤细胞培养中发现的一种嗜人B淋巴细胞的疱疹病毒.该病毒在正常人群中的感染非常普遍,绝大部分感染者为健康携带状况[1-2].但国内外大量研究表明,EBV与Burkitt淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、鼻咽癌等多种肿瘤发生有关.然而,新文献证实,初用于霍奇金淋巴瘤免疫组化检测EBV核抗原(EBNA)抗体2B4与MAGE-4存在交叉反应,因而对基于该抗体免疫组化检出的EBV与某些肿瘤相关的结论产生质疑,提出EBV不是乳腺癌病因的观点.此外,EBV特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)治疗同种异体造血干细胞移植后发生淋巴组织增生性疾病效果明显,而在其他EBV相关肿瘤治疗方法和效果还有待研究.现对EBV的生物学特性、作用机制,EBV与各种肿瘤发生与治疗等方面的研究状况阐述如下.
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耳炎差异球菌分离鉴定及其临床意义
1989年有关文献报道,耳炎差异球菌被从慢性中耳炎患者的中耳渗出液(media ear effusion,MEE)中分离,并对这些细菌的生物学特性进行了描述,认为这些细菌是在低G+C含量革兰阳性球菌中,但未正式命名.1992年,Aguirre等[1]通过16S rRNA序列分析,将其正式命名为差异球菌属(Alloiococcus),耳炎差异球菌(A.otitis).1993年,yon Graevenitz[2]将其修正命名为A.otitidis.该菌DNA的G+Cmol%为44~45,模式株NCFB2890.目前,已知的差异球菌属仅有耳炎差异球菌1个菌种,被认为是健康人外耳道的正常菌群之一,与慢性渗出性中耳炎(otitis media with effusion,OME)有关.
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禽流感病毒的生物学特性及其实验室检测
禽流感病是由甲型禽流感病毒(AIV)某些亚型的毒株感染人引起的急性呼吸道传染病.1997年4月,香港流浮山3个养鸡场发生H5N1禽流感,1个月后,1例3岁患儿高热并死于不明原因的多功能衰竭,后证实为H5N1禽流感病毒感染所致,这是世界上第一例甲型禽流感病毒使人致病的病例.此次香港地区的禽流感中,有18例染病,其中6例死亡[1,2]
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肌肉注射引起偶发分枝杆菌局部感染的细菌学鉴定
1998年8月~1999年3月,福建省南平市樟湖镇,先后发生了59例患者因肌肉注射引起的局部细菌感染,且久治不愈,主要表现为感染部位肿痛,无发烧,局部组织病理学检查表现为脓肿及肉芽肿小结节形成的空泡细胞条带。所有患者感染部位渗出液标本经培养均分离出一种分枝杆菌,经鉴定确定为偶发分枝杆菌(M. Fortuitum)。报道如下。 一、材料和方法 1.标本来源:59例因肌肉注射引起局部感染久治不愈而收治入院的患者。临床根据患者情况不定期抽取炎性渗出液作细菌培养及鉴定,先后送检96份标本(每个患者先后送检1~3份标本)。 2.细菌鉴定仪器及试剂盒:Hemoline双相血培养瓶,细菌生化鉴定卡(ATB和API)和药敏卡(Rapid ATB STAPH和ATB G-),细菌鉴定仪均由生物梅里埃公司提供。菌株的生物学及生化反应特性的鉴定参照有关文献[1-3]。药敏纸片由浙江省军区后勤部卫生检定所生产。 3.标本接种及鉴定:将96份感染部位渗出液标本接种Hemoline双相血培养瓶和改良罗氏结核菌培养基,同时接种麦康凯、SS、普通营养琼脂和血琼脂平板等,置28℃需氧培养。所有分离出的菌株接种API、ATB生化鉴定卡作出初步鉴定,对符合分枝杆菌属的菌株再按上述文献中有关分枝杆菌分类方法作进一步的生物学及生化特性鉴定。对确定为偶发分枝杆菌的菌株再接种上述药敏试验卡,37℃孵育36~48 h后用ATB鉴定仪或手工判读药敏结果,同时有部分药物用药敏纸片扩散法作对照检测。 二、结果 1.生物学特性:从患者感染部位采取的96份标本,均检出分枝杆菌,各菌株的生物学特性基本相同。标本接种Hemoline双相血培养瓶培养48 h后,液体明显混浊,有薄层菌膜形成,半固体斜面生长出灰白色菌落,直径1~2 mm。在改良罗氏培养基和血平板上,28℃培养48 h后,菌落形态及大小与上述相似,继续培养后,菌落表面逐渐干燥和粗糙。在SS和麦康凯平板上,生长缓慢,培养3天后,形成1~1.5 mm大小的菌落,呈紫红色。各菌株在pH 4~11.5培养可生长,但以pH 8.0~10.0佳。涂片革兰染色阳性,菌体呈杆状或球杆状,长约1~3μm;抗酸染色阳性或弱阳性。
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B型钠尿肽的生物学特性及其在心脏病学中的临床应用进展
1981年,De Bold发现心房钠尿肽(Atrial natriuretic pepetide,ANP)后,Maekawa等[1]于1988年首先从猪脑中分离出了钠尿肽家族的第二个成员,称为B型钠尿肽(B-type natriuretic peptide,BNP),又称脑钠素或脑钠肽(brain natriuretic peptide),随后于1989年克隆出了人BNP(hBNP).
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获得性免疫缺陷综合征的细菌继发感染
一、获得性免疫缺陷综合征获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome AIDS)俗称艾滋病,是一种后天性免疫下降的继发性疾病,是由人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus)HIV-1、HIV-2所引起,HIV-1感染是全球性分布,HIV-2感染主要在西非洲,两者生物学特性相似,基因有45%~50%同源性,病毒分类属逆转录病毒亚科(属).HIV病毒模式见图1,基因结构见图2.
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现代分子生物学技术在病原微生物快速诊断中的应用
21世纪是以分子生物学为代表的生命科学的时代.近年来发展起来的分子生物学基因诊断技术在医学、遗传学、法医学、生物学等各个领域广泛应用,推动着现代医学由细胞水平向分子水平、基因水平发展,形成了分子细胞学、分子肿瘤学、分子遗传学、分子微生物学、分子免疫学和分子流行病学等新学科.许多微生物学工作者把微生物的基因分型广泛应用于微生物学的研究:包括分类学、微生物进化的动力、系统发育的相互关系,以及微生物在人群中的传播等各个方面,都可通过基因分型加以鉴别.同时可为传染病的流行病学调查、基因的多样性、微生物的生物学特性、微生物的致病性和药物的耐受性、微生物的生物降解能力,核酸分子的多样性等各个方面提供了基础信息[1].现就分子生物学基因诊断技术在病原微生物快速诊断中应用作一简要概述.
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结核病及其实验技术的现状与展望
结核病是当今全球范围对人类具威胁性的感染性疾病之一,是单病因所致的感染性疾病中死亡率高的疾病,是发展中国家的头号传染性杀手,是一个严重的公共卫生问题。 一、结核病的严峻形势 由于结核病的生物学特性和社会因素,加之近20年来各国对结核病的忽视,造成结核病疫情呈全球性的回升,引起了国际社会的高度重视,世界卫生组织已将结核病作为重点控制的传染病之一。全球三分之一人口(约20亿)已感染了结核分枝杆菌(结核菌),如不采取措施,今后10年内还将有3亿人受结核菌感染。全球现有结核病人2 000万,如不控制今后10年还将有9 000万人发病。结核病的死亡达历史高水平,全球每天有8 000人死于结核病,每年约300万人死于结核病[1]。
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1株新型肠道病毒的生物学特性鉴定
目的从1例急性肝炎患儿粪便标本中分离到1株新型肠道病毒,鉴定其牛物学特性.方法采用细胞培养、动物试验、中和试验、电子显微镜观察和分子牛物学等技术进行鉴定.结果该病毒对乙醚不敏感,在pH 3.0及37℃60 min条件下稳定,56℃30 min可以被灭活;能在A549和RD细胞中稳定传代,并致细胞病变;不能被已有肠道病毒免疫血清中和;小白鼠乳鼠对该病毒不敏感;电子显微镜下可见27~30 nm的肠道病毒样颗粒;部分核苷酸序列分析表明,病毒VP1区核苷酸序列与肠道病毒89型的同源性为87%,与其他病毒无有意义的间源性.结论该病毒的生物学特性与肠道病毒相似,但其抗原性和核苷酸序列等与已知肠道病毒有较大差异,可能属于肠道病毒89型的1个新亚型.
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Caspase与病毒感染关系研究进展
Caspase(cysteinyl aspartate specific proteinase)是一类特异性裂解天门冬氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶大家族,它是各种生理和病理的刺激下引起细胞凋亡进入终末途径的始动子和执行者.本文就Caspase的生物学特性以及与病毒感染的关系作一综述.
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肝干细胞的新研究进展
自从1997年2月22日英国苏格兰罗斯林研究所威尔穆特博士及其同事成功地克隆出名为多利的绵羊以来,全球掀起了一股有关干细胞的热潮.干细胞是一类具有自我更新与增殖分化能力的细胞,能产生表现型与基因型和自己完全相同的子细胞,同时还能分化为祖细胞.本文就有关肝干细胞的生物学特性以及和骨髓、肝癌、胰腺、心脏的关系以及临床应用作一综述.
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CD36在动脉粥样硬化中的研究进展
CD36是巨噬细胞表面的一种清道夫受体,是巨噬细胞吸收氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)的主要受体.OX-LDL是导致动脉粥样硬化(AS)发生的重要物质.AS斑块中,80%的成分来源于摄取脂质的巨噬细胞和由其转化形成的泡沫细胞.巨噬细胞通过CD36摄取大量的OX-LDL形成泡沫细胞.抑制CD36的表达可能与抗AS有关.本文就CD36的生物学特性、CD36在AS中作用和CD36的表达调节作一综述.
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SARS患者肝脾心肺组织中病毒的分离和鉴定
目的:从SARS患者尸检肝、脾、心、肺组织中分离病毒并鉴定及评定中和抗体与SARS病程的关系.方法:取各组织100 g/L匀浆后的上清,接种非洲绿猴肾单层细胞,观察细胞病变;采用RT-PCR及序列分析等技术鉴定病毒并研究其生物学特性;将收集的SARS患者早期和恢复期血清做中和实验.结果:分别从SARS患者尸检肝、脾、心、肺等组织中分离到致细胞病变的病毒,用各组织的病变细胞提取的RNA为模板分别扩增出部分S区和N区的DNA片段,经DNA序列分析表明所有S区和N区的核苷酸序列均与GenBank上的SARS冠状病毒该区域的序列完全一致,中和实验显示所做10份SARS患者双份血清均有中和抗体效价的4倍升高,轻症患者中和抗体产生时间明显早于重症患者.结论:从SARS患者尸检肝、脾、心、肺组织中分离到的均为SARS冠状病毒,证实SARS冠状病毒可直接侵害患者的肝、脾、心、肺脏器.所有SARS患者均可产生中和抗体,中和抗体产生时间与疾病进程有一定关系.
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同种肝细胞脾内移植治疗大鼠肝衰竭的实验研究
目的:探讨经脾内同种异体移植培养的原代肝细胞与肝细胞悬液治疗大鼠药物性肝衰竭的疗效,并观察脾内移植肝细胞的生物学特性.方法:采用D-氨基半乳糖(D-gal)建立大鼠急性肝衰竭模型,24h后随机分为3组进行治疗,Ⅰ组:经脾内移植体外培养3d的肝细胞2×107;Ⅱ组:经脾内移植预孵育8h的肝细胞悬液2×107;Ⅲ组:经脾内注射生理盐水1 mL.观察受体大鼠的存活率、肝脏功能和病理变化及移植肝细胞的生物学特性.结果:Ⅰ组、Ⅱ组大鼠存活率(78%,71%)与Ⅲ组大鼠存活率(23%)相比具有显著性差异(P<0.01,P<0.05),肝功能各项指标均有明显改善,肝组织病理改变较轻.而Ⅰ,Ⅱ组大鼠的存活率、肝功能改变方面,没有统计学差异.经HE和PAS染色证实,移植的肝细胞在受体脾内结构和功能保持较好.结论:经脾内移植的培养肝细胞和肝细胞悬液均能提高大鼠药物性肝衰竭的存活率、改善肝功能及肝脏组织病理变化.而培养肝细胞与细胞悬液相比,统计学上没有明显差异,但结果显示培养肝细胞仍具有一定的优越性.
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小鼠骨髓树突状细胞改良培养及体外生物学特性的比较
目的:探讨小鼠骨髓树突状细胞体外生物学特性及用自体腹膜培养基代替细胞因子刺激树突状细胞体外生长的可能性.方法:无菌取小鼠的骨髓分离、培养DC前体,分别以小鼠腹膜分泌液和重组细胞因子mGM-CSF,mIL-4刺激培养使DC前体转化为DC,再用混合淋巴细胞增生反应(MLR)、细胞免疫组织化学染色及光镜、扫描电镜观察二种DC生物特性及免疫活性的差异.结果:培养6-8 d,二种方法培养的骨髓DC(BM-DC)均有大量细胞从集落中释放,并呈成熟状态,重组mGM-CSF,mIL-4刺激培养的DC得率稍高(6×106)于腹膜培养组(3×106),但无显著性差异;培养7 d BM-DC的B7-2表达较高,呈强阳性,混合淋巴细胞反应(MLR)中均表现出有强烈刺激同种T细胞增生的能力;尤以重组mGM-CSF,mIL-4组明显高于腹膜培养组,未加任何处理的空白对照组中DC前体具有非成熟DC的形态及功能特征,且无刺激同种T细胞增生的能力.结论:实验结果提示用自体腹膜培养基代替细胞因子刺激树突状细胞体外生长可获得一定数量的树突状细胞并具有相应的生物学特性及功能,基本能满足实验研究的需要,为基层单位开展树突状细胞的研究提供了可能性.
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腺病毒介导增强型绿色荧光蛋白基因在大鼠成体肝干细胞中的表达
目的:研究腺病毒感染成体肝干细胞介导外源基因表达的可行性及建立稳定表达EGFP的成体肝干细胞.方法:采用细菌同源重组法构建CMW驱动的EGFP报告基因腺病毒载体pAd-CMV-EGFP,在293细胞中包装制备腺病毒,并用重组腺病毒感染体外培养的成体肝干细胞WB-F344,观察腺病毒携带的外源基因EGFP在WB-F344细胞中的表达,及分析病毒对肝干细胞的感染效率.进一步单克隆培养纯化建立稳定表达EGFP的细胞株(WBEGFP),并采用流式细胞技术、免疫细胞化学技术、诱导分化实验以观察其生物学特性.结果:成功构建腺病毒载体,并包装制备高滴度的重组腺病毒Ad-EGFP.重组腺病毒有效的感染WB-F344细胞,感染率约40-70%.建立WB-EGFP细胞株,持续传代8-9代均较稳定表达EGFP及肝干细胞表面标记,仍保持干细胞样的增生、分化等基本生物学特性.结论:腺病毒可高水平的介导外源基因表达于成体肝干细胞,是有效的基因转移系统.稳定表达EGFP的肝干细胞株观察直观、可连续传代,并保持干细胞的生物学特性,可用于体内外肝细胞研究中的追踪、鉴定.
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Survivin与肿瘤
Survivin是新近发现的结构独特的凋亡抑制蛋白家族成员,具有抑制凋亡和调节细胞分裂的双重功能.他参与细胞的生长和分化,在终末分化成熟的正常成人组织中无表达,又重新表达于多种转化细胞和人类绝大多数常见肿瘤组织中.他与肿瘤的关系密切,此方面的研究是学术界的热点问题,研究包括Survivin在各种肿瘤中的表达,Survivin在肿瘤细胞中的作用机制以及在肿瘤早期诊断和治疗中的应用等.本文介绍Survivin的生物学特性以及与肿瘤相关的研究进展,为肿瘤的诊治带来希望.
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SDF-1/CXCR4轴在肝脏干细胞移植中的应用
基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derivedfactor-1, SDF-1)及其受体CXCR4构成SDF-1/CXCR4轴体系统.近年来随着该领域科研的不断深入, 越来越多的研究发现SDF-1/CXCR4轴体系统在组织损伤及修复中起着重要的作用.本文主要对SDF-1/CXCR4轴体系统的生物学特性及其在肝脏干细胞移植中的作用进行综述.
关键词: 基质细胞衍生因子 干细胞 SDF-1/CXCR4轴体系统 生物学特性