首页 > 文献资料
-
N40:一种新近发现的由流感病毒PB1节段编码的蛋白
N40蛋白是一种新发现的甲型流感病毒表达产物,该蛋白由流感病毒基因组PBl节段编码,是流感病毒PBl蛋白的变体,同PB1蛋白相比在N末端有40个氨基酸残基的缺失.N40蛋白和PB1节段编码的另外两种产物(PB1蛋白、PB1-F2蛋白)在表达水平上相互关联.2009年甲型H1N1亚型流感病毒的基阗组中存在N40蛋白的开放阅读框.N40蛋白的生物学意义以及同流感病毒毒力的关系尚有待于深入研究.
-
G蛋白耦联的内向整流型钾离子通道基因与其相关性疾病的关系
目前已知G蛋白耦联的内向整流型钾离子通道(GIRK)有5个成员(GIRKl ~5),其中GIRKl ~4已在哺乳动物体内发现,并得到相应的克隆体,分别由KCNJ 3、6/7、9、5所编码.近年研究发现GIRK基因在人体内多种组织器官均有表达,并发现GIRK基因的异常表达与心血管、神经系统、肿瘤、代谢及内分泌、血液等多个系统性疾病的发生密切相关.然而目前GIRK基因及其表达产物在许多脏器疾病中的具体病理生理作用机制尚不十分清楚,许多研究仅处于动物实验阶段.
-
表皮生长因子受体(EGFR)基因多态性与非小细胞肺癌中EGFR蛋白表达及淋巴结转移的关系
区域淋巴结转移是非小细胞肺癌的主要扩散途径,也是判断肿瘤患者预后的重要因素.表皮生长因子受体(EGFR)是原癌基因c-erbB-1的表达产物,其异常表达和活化在非小细胞肺癌的发生发展中起重要作用,并与肿瘤细胞的生长活跃程度和淋巴结转移密切相关[1].
-
肺炎链球菌phpP基因重组表达及其产物PP2C型磷酸酶活性的研究
目的:构建肺炎链球菌StkP/PhpP信号偶联中磷酸酶编码基因phpP原核表达系统,了解表达产物rPhpP磷酸酶活性及类型。方法采用PCR扩增肺炎链球菌ATCC6306株phpP基因并测序。采用常规基因工程技术构建phpP基因原核表达系统。采用SDS-PAGE及凝胶图像分析系统检查rPhpP表达情况及其可溶性,Ni-NTA亲和层析法提纯rPhpP。实时荧光定量RT-PCR检测亚致死量青霉素和头孢噻肟药物作用后phpP基因转录水平变化。采用专业生物信息学软件分析phpP基因序列中磷酸酶功能结构域及其类型。采用丝/苏氨酸磷酸酶检测试剂盒检测rPhpP水解PP2C型磷酸酶活性并测定其酶动力学参数。结果克隆的phpP基因序列与GenBank报道序列完全相同。所构建的phpP基因原核表达系统表达可溶性rPhpP。亚致死量青霉素和头孢噻肟药物作用后phpP-mRNA水平升高。 phpP基因序列中含有PP2Cc磷酸酶结构功能域。提纯的rPhpP能水解PP2C型磷酸酶底物磷酸肽[RRA(pT)VA]且活性随rPhpP浓度增加而升高,其Km 和Kcat值分别为277.35μmol/L和0.71 S-1。结论肺炎链球菌phpP基因表达产物为PP2C型磷酸酶,亚致死量青霉素和头孢噻肟可诱导phpP基因表达上调。
-
胃癌组织中微管解聚蛋白stathmin的表达及临床意义
胃癌是消化道常见的恶性肿瘤,我国是胃癌高发区之一[1].近年来其发病率呈明显下降趋势,但病死率仍很高,早期胃癌的预后要明显好于晚期胃癌,因此寻找新的分子靶点对胃癌的早期诊断及治疗十分重要.微管解聚蛋白stathmin是从淋巴瘤中筛选出的特征性表达产物,定位于人类染色体1p35~ 1p36.1[2].初发现stathmin在细胞有丝分裂期纺锤体的聚合和解聚中发挥重要作用,近年来发现其与肿瘤的发生发展关系密切.本研究拟通过原位杂交和免疫组化法探讨stathmin与胃癌发生发展的关系,为今后以stathmin为靶点的胃癌基因治疗提供理论依据.
-
Livin基因在胆管癌组织中的表达及其临床意义
Livin基因是新近发现的凋亡抑制蛋白(inhibitor ofapoptosis protein,IAP)基因家族的新成员.它的表达产物Livin蛋白是迄今为止抗凋亡作用强的IAP之一[1],在多数肿瘤组织中发现有Livin的异常高表达现象[2].我们采用免疫组化的方法检测Livin基因在肝外胆管癌组织中的表达,分析了其表达与临床病理和预后间的关系.
-
卵巢上皮性癌组织中激肽释放酶14、15基因的表达及其意义
激肽释放酶(kallikrein,KLK)基因为一组高度保守的基因簇,在体内许多肿瘤组织中均有表达,KLK基因的生物学功能主要通过其表达产物发挥作用.目前,KLK基因已知的部分生物学功能有:释放激肽,降解胰岛素原与低密度脂蛋白、血管紧张素等,还可裂解精索原[1].KLK14、KLK15基因是KLK基因家族的新成员,参与体内许多生化过程,可能通过作用于细胞外基质,参与肿瘤细胞的生长、转移和浸润[2].本研究采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)连接法检测KLK14和KLK15蛋白在卵巢上皮性癌(卵巢癌)组织中的表达情况,并探讨其临床意义.
-
拉莫三嗪对癫癎幼鼠海马中多药耐药基因表达的影响
癫癎是一种常见的神经系统疾病,约有25%的癫癎患者对大部分抗癫癎药物耐药,从而发展为难治性癫癎[1].越来越多的学者认为难治性癫癎的耐药机制可能与多种药物运输蛋白的过表达、抗癫癎药物不能有效地进入脑细胞有关,其中多药耐药基因(multidrug resistance gene,MDR)及其表达产物P-gp备受关注.
-
钙稳态调节蛋白1基因与阿尔茨海默病的相关性
虽已明确载脂蛋白E (ApoE) ε4等位基因是晚发性阿尔茨海默病(LOAD)的主要危险因素之一,但流行病学研究显示有42% - 68%的LOAD不携带ApoE ε4等位基因,提示还有其他因素在LOAD的发病中发挥作用。2008年,Philippe Marambaud的研究小组在距离LOAD标志区域D10S1671 1.6 Mb处发现了一个与AD发病有关的新基因,即钙稳态调节蛋白1基因(CALHM1),其表达产物CALHM1是一个多重跨膜糖蛋白。研究显示CALHM1能促进钙离子进入胞质,其突变体CALHMl-P86L会引起质膜对钙离子的通透性改变,使胞质内钙离子浓度降低,伴有β淀粉样蛋白(Aβ)水平上升及分泌型淀粉样前体蛋白α(sAPPα)下降。
-
候选可塑性相关基因15在大鼠脑弥漫性轴索损伤中的表达
侯选可塑性相关基因15(CPG15),其表达产物能促进神经轴突生长和分支,以及突触的发生和成熟,并可调节突触回路的形成.它也是神经活动和神经营养素生物学效应的共同下游作用因子.CPG15对弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAI)后神经轴索的修复有无影响?是否在DAI后神经元网络的重建中起重要作用?
-
真核细胞表达基因工程抗体的研究进展
大肠杆菌E.coli表达系统是非常常用、有效和方便的表达系统,可以进行许多异源蛋白的高效表达.然而原核细胞系统表达蛋白时,存在多种缺陷:真核基因通常含有内含子,原核细胞不能对其进行正确的剪切和拼接;缺乏真核生物的蛋白翻译后修饰和加工;表达产物多以包涵体形式存在,复性困难且效率很低;背景杂蛋白多、不易于纯化等,因此不可避免地对利用原核细胞表达基因工程抗体造成一定影响.
-
人肝细胞生长因子基因表达质粒的构建及其活性研究
目的:构建一种携带人肝细胞生长因子(HGF)基因的表达质粒(pUDKH),并对其体外活性进行研究,为其体内应用提供依据.方法:从人胎盘cDNA文库用PCR方法克隆人HGF基因,并将其克隆至自行构建的真核表达载体pUDK上,获得表达质粒pUDKH.将pUDKH体外转染原代培养的骨骼肌细胞,分析其转染效率及表达上清中HGF、血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平,并采用MTT法分析不同剂量HGF表达产物对人脐静脉内皮细胞的作用.结果:所克隆构建的携带人HGF基因的质粒pUDKH可有效转染原代培养的骨骼肌细胞(0.057%),并表达HGF(16~18 ng/4×105 cells)和VEGF,其表达产物对人脐静脉内皮细胞具有明显的增殖刺激活性(P<0.05),而且有剂量效应关系.结论:初步证实本研究构建的质粒pUDKH具有体内治疗缺血性疾病的应用潜力.
关键词: 人肝细胞生长因子基因 质粒载体 构建 表达产物 活性 -
海马齿状回星形胶质细胞的ARG3.1/ARC表达
伴随长时程增强(LTP)和记忆巩固的突触效能与早期快反应基因(IEGs)表达的改变有关.这些改变通常伴随着神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)表达的增加.当早期快反应基因的大多数蛋白产物被限制于胞体,Arg3.1/Arc的表达产物便快速地释放到了树突,并积聚到突触附近.初认为Arg3.1/Arc蛋白是神经元特有的,然而,近来发现了Arg3.1/Arc在胶质细胞内的免疫反应性(Arg3.1/Arc的免疫反应阳性),并且证实了在海马的齿状回部位,其在LTP后表达增加.
-
单核细胞趋化蛋白和CD40L在胃癌中的表达差异及相互关系
研究表明,胃癌的侵袭转移程度是影响其预后的主要因素.侵袭转移是多基因及其蛋白表达产物协调作用的结果,如能在早期找到其浸润转移的指标,对于判断预后及指导治疗,提高手术生存率有十分重要的意义.我们对单核细胞趋化蛋白(MCP)-1和CD40配体(CD40L)在人胃癌中的表达及它们之间的相互作用进行研究分析,以了解它们在人胃癌中的临床意义.
-
KLOTHO基因表达产物的研究进展
Klotho基因是一种主要在肾脏和脑组织表达的基因,其表达产物有膜型和分泌型2种蛋白,二者分别是膜结合受体和体液因子,能通过如影响细胞结构,调节维生素D和钙、磷代谢,保护心血管系统,影响机体免疫功能等多种途径对衰老及衰老相关性疾病进行相应的调节.Klotho基因敲除后的小鼠过早出现和人类衰老相似的多种行为和病理生理改变,如寿命缩短、运动失调、肺气肿、动脉粥样硬化、骨质疏松和血管内皮功能障碍等.用Klotho基因进行遗传补救治疗后,这些症状得到缓解.因此Klotho基因的表达产物有望成为防治老年性疾病的有效药物,对其在血清中的含量进行检测还有望作为诊断衰老性疾病的指标.
-
基因治疗类产品安全性评价的研究进展
基因治疗作为一种全新的疾病治疗手段,日益受到人们的关注.而作为一种新型药物,基因治疗类产品的安全性已成为基因治疗评价的首要内容.本文仅从载体和基因表达产物两方面对基因治疗类产品的安全性及其评价的研究进展作一综述.
-
leptin RIA在肝病中的研究进展(文献综述)
1994年Zhang等[1]应用定向克隆法首次从肥胖和糖耐量异常的动物ob/ob小鼠中成功克隆出肥胖基因(obese gene,ob基因)和人类的同源序列,人与小鼠问0b基因的编码序列同源性高达84%,基因leptin的高同源性提示ob基因及其表达产物功能的高度保守性.1995年Halaas等[2]应用DNA重组技术,由大肠杆菌合成了人和小鼠ob基因的表达产物,因其基本作用能使动物体重降低而变瘦,故被命名为leptin.1998年Potter[3]在活化的肝星状细胞(HSC)中发现leptin的mRNA和蛋白后,人们开始注意leptin与肝脏疾病的关系.研究发现leptin对脂肪肝、肝炎、肝纤维化、肝硬化等慢性肝病的发生、发展有一定的作用.本文就leptin与慢性肝病的相关研究进展作一综述.
-
Klotho基因与肾脏衰老关系的基础研究进展
21世纪已进入老龄化阶段,随着年龄的增长,人体的各个器官都出现衰老性表现,肾脏是受影响明显的器官之一.Klotho(KL)基因是新近发现的主要表达于肾脏的抗衰老基因,但KL基因及表达产物对肾脏衰老的保护作用仍不十分明了,因此从基础着手研究其抗衰老机制日益受到重视,而且取得了一定的进展.
-
分化抑制因子在神经系统肿瘤中的调控作用
分化抑制因子(inhibitor of DNA binding and/or differentiation,Id)是1990 年Robert Benezra 等人首先从鼠红白血病(murine erythro leukemia,MEL)细胞cDNA 文库中克隆出来[1]的一种基因,其表达产物Id 蛋白属于螺旋-环-螺旋(helix-loop-helix,HLH)转录因子家族成员.大部分HLH 蛋白有一个与之相邻的强碱性区域,为HLH 蛋白与DNA 结合所必需,能与E2 框基序(CANNTG)或相关N2 框基序(CACNAG)结合,含有此区的HLH 蛋白称为碱性HLH (basic helix-loop-helix,bHLH)蛋白,大部分bHLH 蛋白参与细胞命运和细胞分化过程的基因调控.Id 蛋白因缺乏与DNA 结合的碱性结构域,故Id 蛋白与bHLH 结合形成的异二聚体不能与DNA 结合,对bHLH 转录因子活性起负调节,从而抑制细胞分化,被称为分化抑制因子.
-
恶性疟原虫FCCL/HN株CSP基因表达产物免疫鼠体内抗原定位研究
目的:用恶性疟原虫FCC1/HN株CSP基因表达产物免疫小鼠,观察其在宿主体内各组织的抗原分布情况.方法:提取目的基因PfCSP在HeLa细胞中的表达产物,免疫注射BALB/c小鼠.取免疫后4周及7周小鼠心脏、肝脏、脑、脾及肌肉,通过免疫酶组织化学法及间接免疫荧光法检测组织内的抗原.结果:免疫7周后的BALB/c小鼠肝脏组织枯否氏细胞内及肝细胞膜上可见棕黄色特异性抗原-抗体反应,而免疫鼠心、脑、肌肉未出现明显的阳性反应.结论:恶性疟原虫FCC1/HN株CSP基因表达蛋白能被肝实质细胞特异性识别,其免疫后的抗原分布主要在肝脏.