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补体C3a与基质细胞衍生因子-1对脐血单个核细胞黏附性的影响
目的:探讨基质细胞衍生因子(SDF-1)对脐血单个核细胞黏附性的影响,同时,观察C3a与SDF-1对单个核细胞的黏附是否有协同作用.方法:观察C3a与SDF-1对单个核细胞的黏附性的协同作用.分3组:C3a组,SDF-1组,C3a与SDF-1共同孵育组,2h后收集细胞进行免疫表型分析和检测黏附率.结果:C3a单独对MNC黏附性无明显影响,但C3a与SDF-1共同孵育组MNC黏附功能增强.结论:C3a增强SDF-1对MNC的黏附功能,但单独对MNC黏附率无明显影响.
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埃兹蛋白与肿瘤转移关系的研究进展
转移是恶性肿瘤的主要生物学特征,是导致肿瘤患者死亡的主要原因.关于肿瘤的发生机制的研究忆取得重大突破,但对于肿瘤细胞转移的具体机制仍不甚清楚.这篇综述的目的是提供一个已被证实参与肿瘤发生、转移的分子:埃兹(Ezrin)蛋白,作为埃兹蛋白/根蛋白/膜窘态蛋白(ezrin/radixin/moesin,ERM)蛋白家庭的成员之一,是一种细胞膜与细胞骨架的连接蛋白,是将细胞外信号传递到骨架蛋白的重要联系分子,参与细胞黏附和运动,并参与细胞凋亡和吞噬.
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骨桥蛋白的磷酸化对草酸钙结晶的抑制作用
骨桥蛋白(OPN)是一种分泌性磷睃化糖蛋白,广泛分布于骨、肾、膀胱、内耳、胆囊、胰腺、蜕膜、胎盘等组织,在骨细胞、上皮细胞、巨噬细胞、活化T细胞、平滑肌细胞、内皮细胞均有表达,也存在于血液、尿液、乳汁、胆汁等体液中 [1,2].研究表明OPN可促进细胞黏附、浸润和迁移,参与骨组织矿化与重建、心血管疾病、肿瘤的发生与发展、炎症及损伤修复等病理生理过程.目前OPN在结石形成过程中的作用逐渐受到重视,现就OPN的功能、表达、调控及其与草酸钙结石关系作一简述.
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CCN1与肾脏疾病的研究进展
CCN1又称为富半胱氨酸蛋白61(cysteine-rich 61,Cyr61),是由生长因子诱导产生的富含半胱氨酸的即刻早期基因产物,也是一种分泌性的肝素结合蛋白,它由379个氨基酸组成,表达于细胞表面、细胞外基质和结缔组织.CCN1是CCN蛋白家族成员之一,通过与细胞表面受体整合素等结合,刺激细胞黏附、细胞移行、有丝分裂和分化,并促进人类血管内皮细胞DNA合成[1].
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糖尿病大鼠肾小管上皮细胞整合素连接激酶的表达及氯沙坦钾的干预作用
糖尿病肾病(DN)是糖尿病的常见并发症和终末期肾病(ESRD)的首要原因.大约有1/3的糖尿病患者发展为DN.DN是肾小球和肾小管发生病理改变的一种复杂疾病.整合素连接激酶(ILK)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在基质沉积、细胞黏附、细胞凋亡、细胞迁移、细胞增生以及肿瘤形成发挥重要作用,近年研究发现ILK在肾小管的高表达参与了DN的进展.本实验通过建立糖尿病大鼠模型,观察ILK在糖尿病大鼠肾小管表达及氯沙坦钾的干预作用.
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肾透明细胞癌中Dysadherin的表达及临床病理学意义
Dysadherin是近来被证实的与肿瘤转移有关的一种细胞膜糖蛋白 [1],在细胞间黏附机制中起关键作用,如抗细胞黏附、下调E-cadherin的表达和促进肿瘤转移.
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Survivin拮抗肽对体内血管生成的影响
肿瘤的侵袭、转移过程是多因素、多步骤的过程,一般涉及肿瘤细胞黏附、运动,细胞外基质降解,肿瘤新生血管生成等多个环节[1].抗肿瘤血管生成是目前抗肿瘤转移药物研究的重要靶环节之一[2].Survivin是近年来分离的一种哺乳动物凋亡抑制蛋白[3],被认为在bcl-2的下游阻断了半胱氨酸蛋白酶caspase-3和caspase-7凋亡调节通路[4,5],与其他家族成员不同,Survivin基因在正常组织中不表达,而在几乎所有被研究的肿瘤组织中呈阳性表达,这一特点为肿瘤的诊断和治疗提供了新的靶点[6,7].文献[8-9]报道,Survivin表达与脑胶质瘤增殖、凋亡及血管生成有密切的关系.Survivin拮抗肽(survivin antagonisticpeptides,SPs)是本课题组筛选噬菌体随机肽库获得的高亲和性12肽[10].本研究采用抗血管生成研究界公认的实验方法研究SPs对于体内血管生成的抑制作用,现报告如下.
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大鼠阿霉素肾病中Podocin Laminin和Fibronectin的表达及意义
大鼠阿霉素肾病(adriamycin-induced nephropathy.AND)是通过阿霉素及其代谢产物诱发肾小球上皮细胞脂质过氧化,破坏肾小球滤过膜结构和功能,终导致滤过屏障的通透性而引起蛋白尿[1].近年来研究证实Podocin是与足细胞裂孔隔膜(slit diaphragm,SD)结构功能相关的重要蛋白分子,对维持正常肾小球功能发挥着重要作用.除了裂孔隔膜之外肾小球基膜(glomerulus basement membrane.GBM)也是选择性滤过的主要屏障.层黏连蛋白(laminin,LN)是基膜(basement membrane,BM)的主要成分,参与基膜的构建及细胞黏附、增殖和分化,对肾脏的正常发育至关重要.
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核心蛋白聚糖和细胞因子的相互作用
核心蛋白聚糖(decorin)为蛋白聚糖(PG)的一种,属分泌型的富含亮氨酸的小分子蛋白聚糖家族,由于其能修饰胶原原纤维因此也称为饰胶蛋白聚糖.decorin由富含亮氨酸的核心蛋白和一条糖胺聚糖链组成,在调节细胞黏附、迁徙、增殖,胶原纤维形成及对转化生长因子(TGF)-β活性调节中起重要作用.近来发现decorin高表达可以使TGF-β和白细胞介素(IL)-1β的水平降低,相反,使IL-4和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平升高,说明decorin在细胞因子产生的调节中起着重要作用[1].细胞因子是由免疫细胞、成纤维细胞和内皮细胞等产生的调节细胞功能的高活性多功能蛋白多肽分子.细胞外基质(decorin其中之一)的形成和改变受各种细胞因子的影响[2].decorin可以与多种细胞因子相互作用,下面就decorin与TNF-ot、干扰素(IFN)-γ、IL-6等细胞因子的相互作用作一简单综述.
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胃癌中基质金属蛋白酶-10和上皮型黏附素表达关系的研究
肿瘤的局部蔓延与远处转移是多因素参与的复杂过程,从分子水平上有黏附、降解和移动等过程,其中细胞的黏附作用与细胞外基质的降解是重要的环节.基质金属蛋白酶-10 (matrix metalloproteinase-10, MMP-10)在降解细胞外基质、维持肿瘤微环境和促进肿瘤生长过程中起重要作用[1,2].而上皮型黏附素(E-cadherin)具有调节细胞间黏附的作用,其可能与基质金属蛋白酶有共同作用[3].本实验应用流式细胞术对56例胃癌中MMP-10及E-cadherin的表达情况进行检测,从细胞黏附与细胞外基质降解角度探讨其在胃癌发生发展中的作用.
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上皮钙黏附素和连环素复合物在肿瘤转移中的研究进展
细胞黏附包括细胞-细胞黏附和细胞-基质(包括基础膜)黏附.细胞黏附分子基础是多种蛋白质结成的分子链式复合物.其组成可概括分为两组蛋白质[1]:①细胞黏合分子受体(或黏着受体)介导细胞外表面之间及细胞与外基质配体间相互识别和专一性结合过程.黏着受体是细胞膜上的跨膜糖蛋白,分为整合蛋白、钙黏蛋白、免疫球蛋白、选择素和蛋白多糖5类,其中以钙黏蛋白和整合蛋白的分布为广泛,受到深入研究.②膜黏着斑(胞质斑块)在黏合分子受体连接处的质膜内面有多种黏附蛋白或连接蛋白连锁形成的斑块,对外连接黏合受体分子的胞质内末端,对内锚着细胞骨架纤维.E-钙黏附素黏附系统[2]是上皮钙黏附素[亦称上皮型钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)]为黏着受体,与质膜内面的黏着斑分子α、β、γ,连环素(catenin,cat)和P120ctn等结合形成钙黏和素-连环素复合体(cadherin-catenin complex,CCC),并与肌动蛋白细胞骨架相连,通过介导细胞黏附和信号转导,参与调节组织发生和形态分化,对细胞识别、迁移、归类等行为及细胞命运发挥重要作用.
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白细胞滤除前后血浆多种成分变化观察
白细胞可引起非溶血性发热反应、同种免疫反应、血小板输注无效、输血相关性移植物抗宿主病及病毒感染等输血反应.用白细胞滤器滤除白细胞可以有效避免或降低这些输血反应的发生.白细胞滤器滤除白细胞的机制主要是阻滞和细胞黏附.滤除效果较好的材料为棉花纤维滤器、醋酸纤维滤器、聚酯滤器[1].随着科学技术的不断发展,白细胞滤器对白细胞滤除效果在不断提高.为探讨白细胞滤过前后血浆质量的变化,对血浆中多种血液成分进行了检测,并对白细胞过滤前后结果进行统计学分析比较.
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化瘀解毒方提取物抑制作用胃癌细胞增殖和黏附及对PI3K/Akt通路影响的实验研究
目的:研究化瘀解毒方提取物抗胃癌细胞增殖和黏附方面的作用及机制.方法:采用高效液相色谱法(HPLC)分析化瘀解毒方提取物稳定性,化瘀解毒方提取物作用于人胃癌SGC-7901细胞株,利用MTT分析细胞增殖抑制实验,检测红细胞毒性实验,MTT快速测定法测定活性峰与Matrigel的黏附作用的影响.Western blot法检测人胃癌SGC-7901细胞中PI3K,PDK1和Akt总蛋白及其磷酸化水平的影响.结果:化瘀解毒方提取物可浓度依赖性抑制体外人胃癌SGC-7901细胞增殖、黏附,免疫印迹结果显示,化瘀解毒方提取物抑制Akt蛋白磷酸化,然而对于上游蛋白PDK1和PI3K的磷酸化无作用.结论:化瘀解毒方提取物抑制其增殖和黏附,其作用机制可能与抑制PI3 K/Akt通路有关.
关键词: 化瘀解毒方提取物 胃癌 PI3K/Akt通路 细胞增殖 细胞黏附 -
天然生物材料支架的应用
天然生物材料支架具有与细胞外基质结构相似,生物相容性好等特点,在组织工程中作为细胞培养的支架材料具有明显的优势.羊膜取材容易,易于加工处理,无毒无刺激性,具有抗微生物的特性和促进组织修复的生物学作用;小肠粘膜下层无免疫性,含有多种生长因子,具有促进细胞黏附、增殖和分化等作用.血管、膀胱、软骨等脱细胞基质分别用于相应的组织缺损修补,易达到结构再生和功能的恢复.本文就上述支架材料在组织上程中的应用进行综述.
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精氨酸甘氨酸天冬氨酸多肽表面修饰促进生物支架材料对骨髓来源种子细胞的黏附
背景:精氨酸甘氨酸天冬氨酸多肽具有较强的黏附性和生物支架材料可接枝结合,且不会改变材料的表面理化性质.目的:观察应用精氨酸甘氨酸天冬氨酸多肽表面修饰猪主动脉瓣去细胞支架材料对骨髓干细胞黏附性的影响.方法:采用胰蛋白酶+TritonX-100 法制备猪主动脉瓣去细胞支架材料,用YGRGDSP多肽(酪氨酸-甘氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸-脯氨酸)进行处理,按照精氨酸甘氨酸天冬氨酸多肽的质量浓度(0.5,1.0,1.5,2.0 g/L)、反应时间(4,8,12,24 h)、反应pH值(7.0,7.4,8.0)分为不同实验组.结果与结论:茚三酮显示精氨酸甘氨酸天冬氨酸多肽可很好的交联到猪主动脉瓣去细胞支架材料,佳反应条件为:室温、1.5 g/L精氨酸甘氨酸天冬氨酸、pH 7.4、持续振荡12 h.提示利用YGRGDSP多肽对猪主动脉瓣去细胞支架材料进行表面修饰可显著改善骨髓来源种子细胞的黏附性.
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神经细胞黏附分子L1促进神经细胞突起和功能性突触的形成
背景:神经细胞黏附分子L1对神经细胞的发生、发育和神经-神经黏附发挥重要作用,然而L1对细胞突起和功能性突触形成的影响是不清楚的.目的:探讨神经细胞黏附分子L1在神经细胞突起生长和功能性突触形成中的作用.设计:完全随机对照实验研究.地点和材料:地点为广西中医学院神经科学研究所.材料为NG108-15神经细胞株、L1 eDNA、抗L1抗体:由日本金泽大学神经物性部门提供.方法:在体外细胞培养,用脂质转染剂将黏附分子L1cDNA表达到NG108-15细胞,用光学显微镜观察细胞形态和电生理学检查技术测定细胞-肌突触的突触后膜电位变化.主要观察指标:细胞突起指数、突触形成率、微小终板电位的频率.结果:以分化剂cAMP处理4 d后,L1-转染组有突起分叉的细胞占细胞总数的百分数为(31±8)%,明显高于非转染组的(13±2)%或Mock-转染组的(15±5)%(P<0.001).L1-转染组的细胞突起平均长度为(142.5±12.3)μm,明显高于非转染组的(94.2±12.3)μm或Mock-转染组的(86.8±6.7)μm(P<0.05).L1转染组功能性突触的形成率为(58.0±11.5)%,也高于非转染组的(36.7±0.83)%或Mock-转染组的(39.2±0.84)%(P<0.001).但突触后膜电位的频率在3组之间差异无显著性意义(P>0.05).结论:L1在NG108-15细胞的高度表达提高cAMP诱发的神经细胞突起和功能性突触的形成,功能性突触形成率的增加是通过增加神经细胞突起分叉和突起的长度,从而增加神经-肌连接数量来实现,而不是通过增加递质的释放量.
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聚L-乳酸/聚L-乳酸接枝纳米羟基磷灰石复合材料对成骨细胞黏附和增殖能力的影响
背景:聚乳酸类高分子聚合物与羟基磷灰石复合材料的研究是目前骨修复材料的研究热点.聚L-乳酸/聚L-乳酸接枝的纳米羟基磷灰石(PLLA/PLLA-gHAP)为具有独立知识产权的新型骨修复材料,具有较好的力学强度,其与骨修复的功能细胞成骨细胞间的相互作用尚无相关报道.目的:观察新型骨修复材料PLLA/PLLA-gHAP对成骨细胞黏附、增殖功能的影响.设计、时间及地点:细胞学体外实验,于2006-03/2007-03在东北师范大学细胞与遗传研究所完成.材料:①将骨修复材料PLLA/PLLA-gHAP及PLLA制备成2 cm×2 cm×0.5 mm的板,浸泡、冲洗、消毒灭菌后备用.②将PLLA/PLLA-gHAP、PLLA两种板剪成0.5 cm×0.5 cm×0.5 mm的小块,加入DMEM培养液,配成10,100 g/L两种质量浓度的浸提液,于37℃孵箱中浸提72 h,4℃保存备用.方法:取孕19~20 d的Wistar大鼠胎鼠的颅骨进行成骨细胞体外培养.①光镜下观察成骨细胞形态,应用碱性磷酸酶染色、钙结节染色对其进行鉴定.②将成骨细胞分别接种在PLLA/PLLA-gHAP和PLLA材料板上,24 h后应用细胞技术器检测细胞黏附数量,扫描电镜观察细胞形态.③MTT法测定成骨细胞在不同质量浓度(10,100 g/L)PLLA,PLLA-gHAP材料浸提液中的增殖情况,并与PLLA材料进行对比.主要观察指标:①成骨细胞在PLLA/PLLA-gHAP和PLLA材料上的黏附数量和形态.②成骨细胞在PLLA/PLLA-gHAP和PLLA材料浸提液中的增殖情况.结果:①在PLLA/PLLA-gHAP表面黏附的细胞数略多于PLLA材料,且黏附于PLLA/PLLA-gHAP材料表面的成骨细胞直径较大,伸出的伪足与材料间形成一种牢固的锚状结构.而在PLLA表面的细胞细胞直径较小,多为球形,很少伸出伪足.②10 g/L PLLA/PLLA-gHAP浸提液组的细胞活性明显高于10 g/LPLLA浸提液组和空白对照组;两种材料100 g/L质量浓度组的细胞活性均低于空白对照组,但PLLA/PLLA-gHAP组的细胞活性仍高于PLLA组.结论:①成骨细胞在PLLA/PLLA-gHAP材料表面较PLLA材料表面显示更好的黏附能力.②成骨细胞在PLA/PLLA-gHAP材料浸提液中较在PLLA材料浸提掖中显示更好的增殖能力.③新型PLLA/PLLA-gHAP材料具有较好的成骨细胞相容性,可能作为骨修复材料使用.
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层层静电自组装多聚电解质共混膜与组织工程心脏瓣膜细胞的黏附
背景:组织工程心脏瓣膜研究中的核心和难点是种子细胞在支架材料上的黏附.层层静电自组装技术能够将多聚阴阳离子组装成多层膜状结构增加材料表面的生物相容性.目的:拟对猪去细胞瓣膜在体外进行层层静电自组装成多聚电解质共混膜,并且检测共混膜列种子细胞黏附的效果.设计时间及地点:细胞学体外观察性实验,于2008-09/2009 02在解放军第二军医大学长海医院胸心外科实验室和复旦大学高分子科学系实验室完成.材料:新鲜猪心脏瓣膜取自上海五丰上食肉联厂,采用酶消化法将猪主动脉瓣叶行脱细胞处理.密度梯度离心法从骨髓中获取骨髓单个核细胞,体外扩增培养后鉴定.方法:通过层层静电自组装技术构建20,10,5,0层的壳聚糖,透明质酸共混膜履盖在猪去细胞瓣膜支架上.将骨髓基质干细胞在涂膜支架上种植培养并检测支架对种子细胞的黏附效果.主要观察指标:扫描电镜观察、细胞计数、MTT检测组织工程心脏瓣膜上种子细胞的形态和细胞黏附效果.结果:扫描电镜观察20层壳聚糖,透明质酸多层膜样品上细胞生长情况比较好,样品上可以铺满细胞.而在组装层数为5层和10层的样品上,细胞生长的比较少.构建层数为20层的瓣叶,其细胞计数及吸光值高于10层和5层构建的瓣叶(P<0.01).构建层数为10层和5层的瓣叶与0层比较差异无显著性意义(P>0.05).结论:通过层层静电自组装技术构建的共混膜能够促进种子细胞的黏附,而且有一定的量效关系.
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整合素和E-钙黏素在诱导多能干细胞重编程及干性维持中的作用
背景:诱导多能干细胞在疾病模型和再生医学领域具有广阔的应用前景,能够利用安全高效的方法进行体细胞重编程是诱导多能干细胞广泛应用于临床的前提.近年来研究者们发现细胞黏附分子整合素和E-钙黏素对诱导多能干细胞重编程和干性维持有重要影响,对其分子机制的研究将帮助研究者设计更加安全有效的重编程方法和深入全面的理解重编程过程.目的:从机制层面对整合素和E-钙黏素在诱导多能干细胞重编程及干性维持中的作用进行归纳总结.方法:由第一作者检索Web of Science数据库2006年至今有关细胞黏附影响诱导多能干细胞重编程及干性维持的文献,从中挑选63篇与研究目的相关性较强,质量较高的文章进行总结.结果与结论:整合素介导的细胞-基质间黏附与E-钙黏素介导的细胞-细胞间黏附可分别激活下游信号通路调控多能性基因表达,还可以作用于细胞骨架与核膜直接连接,通过多种机制产生基因水平、蛋白质水平和表观遗传学水平上的变化,终影响诱导多能干细胞重编程及干性维持.
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兔晶体上皮细胞在不同材料人工晶状体表面黏附与增殖状况
目的:观察不同材料人工晶状体表面对体外培养的兔晶体上皮细胞黏附、增殖与移行的影响.方法:实验于1999-08/2002-03在辽宁省人民医院中心实验室完成.选取健康家兔10只,双眼正常.按人工晶状体材料的不同分为5组:聚甲基丙烯酸甲酯人工晶状体组14枚,肝素表面处理后聚甲基丙烯酸甲酯人工晶状体组、聚丙烯酸甲酯人工晶状体组、硅凝胶人工晶状体组、水凝胶人工晶状体组各12枚.将体外培养至第3代的兔晶体上皮细胞用质量浓度为1.25g/L的胰蛋白酶消化为单个细胞,用培养液配置细胞密度为1x109L-1的细胞悬液体外接种到各组人工晶状体表面,流式细胞仪检测培养12 h时细胞附壁的细胞数,相差显微镜下观察细胞生长情况,并定量分析细胞增殖移行速度.结果:实验纳入聚甲基丙烯酸甲酯人工晶状体14枚,肝素表面处理后聚甲基丙烯酸甲酯人工晶状体、聚丙烯酸甲酯人工晶状体、硅凝胶人工晶状体、水凝胶人工晶状体各12枚,全部进入结果分析.①培养12 h各组人工晶状体表面黏附的兔晶体上皮细胞密度比较:聚甲基丙烯酸甲酯人工晶状体组、聚丙烯酸甲酯人工晶状体组均明显高于水凝胶人工晶状体组、肝素表面处理后聚甲基丙烯酸甲酯人工晶状体组、硅凝胶人工晶状体组[(284.75±30.40),(205.00t21.47),(149,17t6.40),(144.33±8.96),(136.17±8.89)个/mm2,P均<0.01].②兔晶体上皮细胞在不同人工晶状体表面的生长形态观察:各组人工晶状体表面生长的细胞都具有典型的上皮细胞特征,且可见分裂增殖的细胞.③兔晶体上皮细胞在不同人工晶状体表面的增殖移行情况:制造无细胞区后第1天即可看到细胞向心性移行生长,不同材料人工晶状体表面的兔晶体上皮细胞移行速度不同,以硅凝胶人工晶状体组快,聚甲基丙烯酸甲酯人工晶状体组次之,剩余3组较慢.各组无细胞区内的无细胞面积分别为(3.78±0.21),(3.95±0.19),(5.13±0.22),(5.40±0.16),(5.59±0.17)mm2.结论:聚甲基丙烯酸甲酯人工晶状体、聚丙烯酸甲酯人工晶状体的表面易于兔晶体上皮细胞黏附,硅凝胶人工晶状体和聚甲基丙烯酸甲酯人工晶状体则易于诱发其表面的兔晶体上皮细胞增殖、纤维化及移行,而经肝素表面处理后的聚甲基丙烯酸甲酯人工晶状体对兔晶体上皮细胞的黏附、增殖及移行均无明显影响.